Escuela de Medicina. Biología celular y molecular.

Laboratorio sobre separación e identificación de poblaciones celulares

INFORME DE LABORATORIO No 1

Nombre del estudiante: Códigos:

Forero Vargas Cristhian Martín 2131314
Hernández Herrera Erika Milena 2151795
Hernández Mejía Karen Andrea 2110569
Sánchez Méndez Lizeth Daniela 2190876
Fecha de entrega del informe: 09/07/19

1. Procedimiento para separar e identificar células en un frotis de sangre periférica

teñido con colorante de Wright
Introducción
A uno de los integrantes del grupo se le tomó una muestra de sangre periférica, en un tubo de
tapa verde (contiene anticoagulante heparina). Posteriormente, con ayuda de una micropipeta se
tomaron 5 microlitros de la muestra para ponerla sobre un portaobjetos y poder realizar un frotis
de esta, y luego, se dejó secar por unos minutos. Con el frotis ya seco, se procedió a realizar la
tinción de Wright siguiendo las indicaciones dadas por la docente. Al realizar la observación
con el microscopio, y gracias al teñido con el colorante, se pudieron visualizar las diferentes
células que componen la sangre periférica y se permitió diferenciarlas por su morfología y color
adquirido.
En medicina, el análisis de las células de la sangre periférica es de gran importancia, dado que
este permite la identificación de diversas enfermedades o patologías, lo que facilita la
implementación de un tratamiento adecuado y oportuno para la persona o el mismo
seguimiento de este.

Resultados

Figura 1. Observación en el microscopio 100x; extendido de

una gota de sangre periférica teñida con colorante de Wright.

Figura 1. Observación en el microscopio 100x; extendido

En la Figura No 1 se de una gota4 de
observan sangre periférica
neutrófilos, teñida aisladas
2 plaquetas con colorante
y un de
cúmulo de plaquetas. Se
Wright.
observan glóbulos rojos normocíticos y normocrómicos
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Tabla 1. Componente celular en un extendido de sangre periférica teñido con el colorante de Wright

Nombre de Propiedades observadas Número/campo % del total

la célula

1 2 3 4 5 TOTAL

Neutrófilos Núcleo dividido en varios lóbulos 1 4 1 1 0 7 53,8

(2-5) unidos mediante finos
puentes cromatínicos. Citoplasma
de tinte rosado claro, con gránulos
regularmente distribuidos de color
rosa claro
Linfocitos Núcleo redondo con la cromatina 1 0 0 2 1 4 30,8
aglomerada, que toma color
violáceo. Gran cantidad de núcleo
con relación a la cantidad de
citoplasma, que toma un color
celeste
Monocitos No se observaron. Sin embargo, 0 0 0 0 0 0 0,0
estos se caracterizan por tener un
núcleo de forma ariñonada, pero
puede ser reducido u ovalado sin
depresiones y en ocasiones
segmentado. En la cromatina
puede tener gránulos más finos y
elongados a comparación de los
linfocitos y neutrófilos.
En algunas, el borde del
citoplasma se encuentra ondulado
y con pseudópodos. Toma un
color azul grisáceo, azul o neutro.
Posee gránulos muy finos, a veces
densos
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Eosinófilos Se les observó con un núcleo 0 0 2 0 0 2 15,4

bilobulado.
Citoplasma repleto de gránulos
bien individualizados, redondos y
de gran tamaño que casi nunca
cubren el núcleo y tomaron un
color naranja-rojizo
Basófilos No se observaron. Sin embargo se 0 0 0 0 0 0 0,0
caracterizan por tener una gran
cantidad de gránulos que toman
un color azul intenso
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2. Procedimiento para separar células de sangre periférica por

centrifugación
Introducción
Se sometió a centrifugación la muestra de sangre en el tubo a 1300 g/ min, para
observar las diferentes capas que se forman. La propiedad de las células que
permiten separarlas es la densidad, que es específica para cada célula. Las más
densas se aglomeran en el fondo (eritrocitos o glóbulos rojos) por lo tanto se va a
observar de un denso color rojo, y los componentes menos densos en la capa
superior. En la mitad se ubican los glóbulos blancos con las plaquetas, en un tono
blanco/amarillo, y en la primera capa se ubica el plasma sanguíneo compuesto por
Figura 2. Muestra de
proteínas, factores de coagulación, agua, etc., esta es más transparente.
sangre centrifugada
Posteriormente, con ayuda de una micropipeta se tomaron 5 microlitros de la
muestra para ponerla sobre un portaobjetos y poder realizar un frotis de esta, y luego, se dejó
secar por unos minutos. Con el frotis ya seco, se procedió a realizar la tinción de Wright
siguiendo las indicaciones dadas por la docente.
En la medicina, se utiliza una técnica conocida como Velocidad de sedimentación globular para
detectar la presencia de inflamación debida a causas como infecciones, tumores o enfermedades
autoinmunes, que conllevan a su aumento, permitiendo también, monitorizar trastornos
específicos como arteritis de la temporal, vasculitis sistémicas, polimialgia reumática o artritis
reumatoide, ya que la velocidad de sedimentación aumentará. Al disminuir, también puede ser
indicativo de enfermedades como la policitemia vera, deshidratación, entre otras.

Resultados
Al realizar la observación con el microscopio, se
pudieron evidenciar algunos glóbulos rojos, lo
cual indica que se pasó una parte de la capa
inferior a la superior a la hora de tomar lo
muestra. A diferencia de la figura 1, donde se
esperaba ver todas las células que normalmente
deben estar en sangre periférica, en la figura 3 no
debería encontrarse material celular, ya que
como se mencionó anteriormente, en la capa
menos densa solo debe encontrarse plasma,
conteniendo diferentes tipos de moléculas como
iones, factores de coagulación, agua entre otras.
Por otra parte, las plaquetas se diferencian de las
células, en si porque NO son células, sino
Figura 3. Extendido de una gota de muestra de sangre fragmentos de una célula más grande que se
periférica de la fase celular superior con colorante de encuentra en la médula ósea conocida como
Wright megacariocito. Al no ser células, no poseen un
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núcleo y una gran diferencia es su tamaño muy pequeño (2-4 uM) a comparación de las células
(6-16 uM)

3. Procedimiento para identificar eritrocitos

Introducción
En una lámina portaobjetos colocamos 3 gotas de la sangre extraída de nuestra compañera,
posterior a ello se agregó una gota de suero Anti-A a una de las gotas; suero Anti-B a la
segunda gota de sangre y suero Anti-D a la tercera gota. Se mezcló y se comenzó a visualizar la
reacción. Los sueros Anti-A, Anti-B, Anti-D contienen anticuerpos contra los antígenos que
expresan los glóbulos rojos en su membrana y por ello es posible su clasificación.
En medicina es de gran importancia la tipificación de los eritrocitos en base al sistema ABO, y
el sistema Rh para evitar reacciones adversas en transfusiones sanguíneas pues al transfundir
sangre de distinto tipo a un paciente, se le podría ocasionar una hemólisis generalizada por la
reacción antígeno-anticuerpo.

Resultados

Figura 4.3.Tipificación
Figura Tipificacióndede
eritrocitos humanos
eritrocitos con base
humanos antígenos
con base de superficie
antígenos A, B, D.
de superficie
A, B, D.

La propiedad de antigenicidad permitió establecer que el tipo de sangre de la paciente es O Rh

Positivo ya que no se observó aglutinación entre la sangre con el suero Anti-A, ni tampoco con el
suero Anti-B; esto denota la ausencia de los antígenos membranales acetil galactosamina (Grupo A)
y Galactosa (Grupo B) pero la presencia de antígenos propios del sistema Rh para los cuales si hubo
reacción Antígeno-Anticuerpo al observarse aglutinación con el suero Anti-D.