Propiedades generales de enzimas

1. Mayores velocidades de reacción. Son típicamente

106 a 1012 veces más altas que aquellas de la
reacción no catalizada

2. Condiciones de reacción más suaves. Ocurren

bajo condiciones relativamente suaves:
temperaturas bajo 100ºC
100ºC,, presión atmosférica y pH
cercano a neutro

Propiedades generales de enzimas

3. Mayor especificidad de reacción. Muestran un alto

grado de especificidad respecto de sus sustratos y
sus productos; raramente se generan productos
laterales

4. Capacidad de ser reguladas. Su actividad varía en

respuesta a la concentración de sustancias
distintas a los sustratos

1
Las enzimas tienen un enorme poder catalítico

moles Sustrato
Actividad molecular =
moles Enzima × seg

Enzima T (ºC) Actividad

molecular (seg-1)

Citocromo c reductasa 25 400

Amino oxidasa 38 2.000
Alcohol deshidrogenasa 20 20.000
Fenol oxidasa 20 70.000
Catalasa 0 2.500.000

Especificidad y sitio activo

2
Clasificación de enzimas de acuerdo al tipo de
reacción catalizada

Clasificación Tipo de reacción

1. Oxidorreductasas Reacciones de oxidación-

oxidación-reducción

2. Transferasas Transferencia de grupos funcionales

3. Hidrolasas Reacciones de hidrólisis

Eliminación de grupos para formar enlaces

4. Liasas
dobles

5. Isomerasas Isomerización

Formación de enlaces acopladas con

6. Ligasas
hidrólisis de ATP

Enzimas. Nomenclatura

Nombre Común: Fructosa-

Fructosa-1,6-
1,6-bisfosfatasa

Codigo: EC 3.1.3.11

Fru − 1,6 − P2 → Fru − 6 − P + Pi

Clase:
Hidrolasa Sub-subclase:
Subclase: Fosfatos
Esteres

Nombre sistemático

Fructosa-
Fructosa-1,6-
1,6-bisfosfato: 1-
1-fosfohidrolasa

3
 Diagrama de estado de transición

Efecto de un catalizador sobre diagrama de

estado de transición de una reacción

4
 Mecanismos catalíticos

Las serina-
serina-proteasas

Mecanismo catalítico de las serina-proteasas

5
 Cinética química

Velocidad ~ [reactantes], pH, T

Para la reacción: A → B

d [P] d [A]
v= =− = k[A]
dt dt

Orden cinético

Orden 0 Orden 1
1
v = k[A]0 v = k[A]
velocidad
velocidad

[A] [A]

6
 Progreso de la reacción

concentración
A

Tiempo

Inicio Equilibrio

k k
E + S YZZ
ZZZ
1
k Z
X ES YZZZ
ZZZ
k
2
XP+E
−1 −2

Velocidad inicial

⇒La concentració
concentración de sustrato es mucho mayor
que la de enzima

ensayos a tiempos cortos (<5% A consumido)

E + S YZZ
k1
ZZZX
Z ES 
k
→P+ E 2
k −1

v = k2 [ ES ]

7
Curva hiperbólica y ecuación de
Michaelis-Menten

Vmax [S]
v=
K M + [S]

Gráfico de dobles recíprocos

(Lineweaver-Burk)

1  KM  1 1
=  +
v  Vmax  [S] Vmax

8
9
 Regulación de actividad enzimática

• Muchas sustancias alteran la actividad de una

enzima al unírsele reversiblemente,
reversiblemente, en una
manera que afecta la unión del sustrato o su
eficiencia catalítica
• Compuestos que reducen la actividad enzimática
de esta manera son conocidos como inhibidores
• Un compuesto que compite directamente con un
sustrato normal por el sitio activo de una enzima
se conoce como un inhibidor competitivo

Esquema de reacción para un

inhibidor competitivo

k1 k2
E + S ES P + E
k-1
+
I
[E][I]
ΚΙ KI =
[EI]
EI

10
 Inhibición competitiva

Vmax [S] [I]

v= , α = 1+
α K M + [S] KI

Esquema de reacción para un

inhibidor mixto

k1 k2
E + S ES P + E
k-1
+ +
I I [E][I]
KI =
[EI]
KI K’I

ESI [ES][I]
EI K I' =
[ESI]

11
 Inhibición mixta

Efectos de inhibidores sobre curvas de

saturación

Tipo de inhibición Efecto del inhibidor

Competitiva Aumenta KM

Disminuye Vmax;
Mixta KM puede aumentar o
disminuir

No competitiva Disminuye Vmax

12
Efecto del pH sobre la actividad de una
enzima

La curva de actividad en función del pH para muchas

enzimas tiene forma de campana

El pH afecta:
1. La unión de sustrato a la
enzima
2. El estado de ionización de los
residuos del sitio activo
3. El estado de ionización del
sustrato
4. La estructura de la proteína

Mecanismos de regulación de enzimas.

Disociación de subunidades

13
Mecanismos de regulación de enzimas.
Modificación covalente

Mecanismos de regulación de enzimas.

Modificación proteolítica

14
 Enzimas cooperativas

• Aquellas que muestran respuesta

cooperativa en la unión de su sustrato
• Se caracterizan por mostrar curvas de
saturación sigmoides

Enzimas cooperativas

Vmax

Vmax [ S ]n
Velocidad

v= n
K 50 + [ S ]n

0 5 10 15 20 25 100

[S]

15
 Gráfico de Hill.
Evaluación del índice de cooperatividad
Log(v/Vmax-v)

0
0 1 2
Log [S]

v
Log ( ) = n × Log [ S ] − n × Log K 50
Vmax − v

Interacciones alostéricas

Unión de un ligando a un sitio específico

afecta la unión de otro ligando (efector o
modulador) en un sitio diferente
(alostérico) de la enzima.

16
 Ejemplo de regulación alostérica de enzimas.
La aspartato transcarbamilasa

La transición
conformacional de la
aspartato
transcarbamilasa

17