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TEORÍA
1. Cultivos y sus tipos
Según la proporción de agar, existen tres tipos:
Líquidos (caldos). No contiene ningún agente gelificante, por lo que los microorganismos
crecen por todo el medio. El crecimiento en este tipo de medios es más rápido puesto que
la movilidad permite acceder de una forma más fácil a los nutrientes. (Cuevas, 2010)
Sólidos. Tienen una proporción de agar de, aproximadamente, el 1,5%. El crecimiento se
desarrolla en la superficie del medio. Estos medios pueden depositarse en placas de Petri
o en tubos de ensayo. (Cuevas, 2010)
Semisólidos. Son aquellos que contienen una proporción de agar inferior al 0,5%. Se
utilizan para pruebas bioquímicas y de movilidad. (Cuevas, 2010)
2. Formulación de los medios de cultivo
Preparación de inóculos. Se parte de un cultivo puro de Lactobacillus sembrado en caja Petri
con agar MRS por la técnica de estría masiva con aplicador de algodón estéril (césped). Se
recolecta todo el contenido de la caja Petri y se vertió en un matraz Erlenmeyer de 250 mL con
tapón de algodón con 100 mL de caldo modificado MRS; el cual consta de las sales y
micronutrientes del Cultivo MRS. El cultivo se incubó con pH inicial de 6.4 ± 0.2, 29°C ± 1 por
48 h sin agitación. Se determinó la concentración microbiana del inóculo por medio del método
de peso seco celular (Prit, 1975). En esterilidad, se tomaron 5 mL de muestra por duplicado cada
2 horas durante un periodo de 34 horas. Las muestras son centrifugadas a 2000 rpm durante 8
minutos en una centrífuga. El paquete celular se filtra al vacío, se lava con agua destilada y se
pone a secar a 45°C en estufa por 24 h o hasta que se registre peso constante. (Dante Israel León-
de la O, 2013)
Fig.1. Componentes que forman parte de las sales (micronutrientes) del medio de cultivo MRS
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA
LABORATORIO DE BIOQUIMICA