UNIVERSIDAD NACIONAL DE

TUMBES

FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS

ESCUELA DE AGROINDUSTRIAS

“PRACTICA N°2: DETERMINACIÓN DE NITRATOS Y NITRITOS”

TRABAJO DE INVESTIGACIÓN
PRESENTADO POR:

NEYRA ORTIZ, Jeydi

FLORES SANDOVAL, Adriana
CABRERA MIRANDA, Daniela
DIOSES TRIPUL, Belinda

En cumplimiento del trabajo encargado en

la asignatura de Ingeniería Ambiental

TUMBES – PERÚ
2019
 INTRODUCCIÓN

La determinación de los niveles de nitratos y nitritos en aguas, son un indicador

importante de la calidad del agua. Ambos se encuentran relacionados con el
ciclo del nitrógeno de suelo y plantas superiores, aunque los nitratos son
añadidos por medio de fertilizantes que puede ocasionar que los niveles de
estos aumenten. Los nitritos también se forman durante la biodegradación de
nitratos, nitrógeno amoniacal u otros compuestos orgánicos nitrogenados y se
utiliza como indicador de contaminación fecal en aguas naturales.
Los nitratos no se consideran en sí tóxicos, pero la ingesta de grandes
cantidades produce un efecto diurético, estos pueden producir compuestos
cancerígenos.
Se han desarrollado una gran cantidad de métodos para la cuantificación de
estos analitos en aguas y en otro tipo de muestras como alimentos y fluidos
biológicos. Estos están basados en la reducción de nitratos a nitritos con
detección colorimétrica posterior. Se han utilizado varios agentes reductores
como zinc, cadmio o cadmio cuperizado que se han acoplado como columnas
reductoras a configuraciones de flujo continuo no segmentado para la
cuantificación simultánea de nitratos y nitritos, (Kojlo, et al., 1995).
La medición de nitratos en aguas residuales se hace en mg/L. El método es
conocido usualmente con el nombre de Reducción de Cadmio, que es donde
los iones de nitrito reaccionan en un medio ácido con ácido sulfánilico para
formar una sal diazonium intermedia. La pareja de sal con ácido gentisíco
forma una solución de coloración ámbar. Los resultados de las pruebas son
medidos en 430nm y 500nm, (Torres, 2005).
La determinación de nitratos y nitritos utilizando una columna de cadmio
cuperizado para la reducción de nitratos y la formación de un azo compuesto,
estos métodos incluyen un método automático de flujo segmentado, (ASTM,
1991).

1. OBJETIVOS

 Determinar la concentración de nitritos y nitratos presentes en el agua a

analizar.
 Conocer la metodología para la determinación de nitratos y nitritos en
agua.
 2. MARCO TEÓRICO

2.1. Nitratos y nitritos

Nitrato y nitrito son compuestos solubles que contienen nitrógeno y oxígeno. En
el ambiente nitrito (NO2) generalmente se convierte a nitrato (NO3), lo que
significa que nitrito ocurre raramente en aguas subterráneas. Nitrato es
esencial en el crecimiento de las plantas y está presente en todos los vegetales
y granos. De acuerdo a la Organización Mundial de la Salud, el hombre
americano promedio consume 9-22 miligramos de nitrato-N por día
principalmente en verduras de hoja verde y vegetales de raíz como zanahorias,
remolacha, y rábanos. El consumo promedio de nitrito-N es más bajo a 0.1-0.8
mg por día, principalmente en carnes curadas. El consumo a estos niveles no
es considerado un riesgo a la salud, (Adam, et al., 2012).

2.2. Método de reducción de cadmio

El nitrato (NO3)- es casi completamente reducido en forma cuantitativa a nitrito
NO2- en presencia de cadmio (Cd). Este método usa gránulos de Cd
disponibles en el comercio, tratados con sulfato de cobre (CuSO4) e
introducidos en una columna de vidrio.
El NO2- producido de esta manera es determinado por diazotización con
sulfanilamida y acomplejamiento con N-(1-naphthyl)-ethylenediamine
dihydrochloride para formar un compuesto fuertemente coloreado que es
medido colorimétricamente. Se debe hacer una corrección para cualquier NO 2-
presente en la muestra, para analizarlo no se considera el paso de reducción.
El rango aplicable de este método es 0,01 a 10 mg N-NO3/L. El método es
recomendado especialmente para niveles de NO3- debajo de 0,1 mg N/L,
donde otros métodos carecen de una sensibilidad adecuada.
La materia suspendida en la columna restringirá el flujo de la muestra. Para
muestras turbias filtrar por una membrana de 0,45 μ. Concentraciones de fierro,
cobre u otros metales sobre varios milígramos por litro, disminuyen la eficiencia
de reducción. Agregar EDTA a las muestras para eliminar esta interferencia.
Aceite y grasa van a cubrir la superficie de cadmio. Remover mediante pre-
extracción con un solvente orgánico). Cloro residual puede interferir mediante
la oxidación de la columna de cadmio, reduciendo su eficiencia. Controlar las
muestras para cloro residual. Remover cloro residual agregando solución de
tiosulfato de sodio (Na2S2O3), (APHA, et al., 2005).
 2.2.1. Fundamento de la reacción
Los nitratos se reducen cuantitativamente a nitritos de acuerdo al siguiente
equilibrio químico:

El cobre se encuentra en su forma reducida en la columna de cadmio. El nitrito

formado reacciona con la sulfanilamida para formar la sal de diazonio que
reacciona con el clorhidrato de N-1- naftiletilendiamina para formar el azo
compuesto cuya absorbancia se mide a 540 nm, (Cabrera, et al., 2003).

2.3. Método colorimétrico

El método colorimétrico con DPD es uno de los sistemas más comunes para
este método, se basa en la adición de un reactivo (normalmente DPD) en una
muestra de agua. Esta muestra contiene cloro, dióxido de cloro, bromo, yodo u
ozono. De esta manera, se desarrolla una coloración púrpura cuya intensidad
está relacionada con la concentración de cloro libre, por lo tanto determinará la
concentración de cloro.
El método colorimétrico con DPD es, desde hace muchos años, el más simple,
rápido, preciso y práctico. Se basa en la intensidad de color de una solución
obtenida mediante la reacción de cloro libre de la muestra con el DPD.
El procedimiento se realiza de forma automática. Un conjunto de tubos,
válvulas y bombas peristálticas conducen cantidades definidas de agua,
reactivo DPD y una solución tampón a la célula de medición. En ese punto es
donde se da lugar al cambio de color.
La radiación entre 515 y 530 nm producidas por emisor del espectrofotómetro
atraviesa la capa de la solución. Además, esta es captada por el detector. El
logaritmo decimal de la relación entre radiación incidente y radiación emergente
es proporcional a la concentración de cloro (ONE DROP, 2017)

2.3.1. DPD
Los reactivos DPD son un método colorimétrico a base de N-
Dietilpfenilendiaminaque al entrar en contacto con la muestra de agua,
reaccionarán tornándose color magenta proporcionalmente a la concentración
de cloro que haya en el agua. Los reactivos en tableta DPD son de color blanco
y poseen una apariencia cristalina (JUPER, 2013)
3. MATERIALES Y EQUIPOS

3.1. MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS

 Probetas
 Pipetas
 Matraz Erlenmeyer
 Papel filtro
 Columnas de reducción
 Cubetas para espectrofotómetro
 Soporte universal
 Fiola
 Embudo
 Muestras de agua (Puyango. Canal Corrales, Quebrada Cabuyal,
Universidad)

3.2. REACTIVOS

 Cadmio granular (edta)

 Sulfanilamida
 Ácido fosfórico
 Cloruro diatónico

3.3. EQUIPOS
 Balanza analítica
 Espectrofotómetro

4. METODOLOGÍA

4.1. DETERMINACIÓN DE NITRATOS

4.1.1. Método de reducción de cadmio

1. Preparación de la columna de reducción

  Colocar en la base de la columna algodón de fibra de vidrio seguido
de filamentos de cobre y finalmente rellenar hasta una altura de 18.5
cm de cadmio granular (edta)

2. Activación de la columna de reducción

 Preparar una solución combinando 25 ml de una ppm de nitratos y 75

ml de la solución cloruro de amonio (edta).
 Hacer pasar esta solución por la columna de reducción a una
velocidad de 10 ml/min.

3. Tratamiento de la muestra

 Se mido 25 ml de cada una de las muestras y agregar 75 ml de la

solución cloruro amonio (edta), homogenizar ligeramente y hacer
pasar por la columna de reducción descartando los primeros 25 ml
de la muestra tratada.
 Recolectar 50 ml de la muestra tratada y agregar 2 ml de reactivo de
color. Dejar en reposo por 10 a 20 min y hacer la lectura en el
espectrofotómetro a 443 nm de longitud de onda.

4.2. DETERMINACIÓN DE NITRITOS

4.2.1. Método colorimétrico

 Medir 20 ml de cada una de las muestras y agregar 2 ml de reactivo

de color, homogenizar y dejar en reposo de 10 a 20 min y finalmente
hacer a lectura en el espectrofotómetro a 443 nm de longitud de
onda.

5. RESULTADOS

5.1. RESULTADOS DE LECTURA EN EL ESPECTROFOTÓMETRO

Muestra de Nitratos Nitritos Longitud Tiempo

agua mg/L mg/L de onda (min)
Código Código
1002: NO3 1003: NO2
Universidad 0.03 0.027 443 10
(U1)
Canal de 0.24 0.0217 443 10
Corrales
 (CC1)
Puyango 0.17 0.152 443 10
(P1)
Agua 0.05 0.04 443 10
residual
Quebrada 0.17 0.01 443 10
Cabuyal

5.2. RESULTADOS DE LOS PESOS ANTES Y DESPUÉS DE

COLOCAR EN LA ESTUFA LAS MUESTRAS DE SOLIDOS A
103°C X 24HORAS

Muestras de agua
Lugar de Sólidos (g) peso inicial Papel Solidos (g) peso final
origen del filtro
agua ST1 (totales) SD2 (g) ST1 (totales) SD2 (disueltos)
(disueltos)
Universidad 113.6106 143.8393 1.0736 113.6241 143.74
(U1)
Canal de 54.0673 52.5970 1.0592 54.0885 52.6050
Corrales
(CC1)
Puyango 105.3065 53.5893 1.0713 105.3684 53.6147
(P1)
Agua 51.6561 48.0997 1.0749 51.7121 53.2379
residual
Quebrada 53.1934 53.0752 1.0481 53.5466 48.1275
Cabuyal

6. DISCUSIONES
Los niveles de nitratos y nitritos en aguas naturales son un indicador importante
de la calidad del agua. Ambos se encuentran relacionados con el ciclo del
nitrógeno de suelo y plantas superiores aunque los nitratos son añadidos por
medio de fertilizantes que puede ocasionar que los niveles de estos aumenten,
los nitritos también se forman durante la biodegradación de nitratos, nitrógeno
amoniacal u otros compuestos orgánicos nitrogenados y se utiliza como
indicador de contaminación fecal en aguas naturales. Los nitratos no se
consideran en sí tóxicos, pero la ingesta de grandes cantidades produce un
efecto diurético. Se utilizó para analizar diferentes tipos de agua residual,
potable y de río, de diferentes zonas de México y estos son los resultados:
En comparación a nuestras muestras analizadas nos podemos dar cuenta que
tanto el nivel de nitritos y nitratos según la tabla son parecidos a los nuestros a
pesar de que se han realizado en otro país.

7. CONCLUSIONES

 El conocer el adecuado uso del espectrofotómetro permitió obtener

en el laboratorio resultados con alta calidad analítica en las
mediciones que son emitidas por éste.

 Se determinó la longitud de onda óptima a las tres soluciones

coloreadas y se obtuvo los siguientes resultados, en el agua de la
Universidad 300 nm, agua del Canal de Corrales 240 nm y por último
en el agua de Puyango 170 nm, estando dentro del rango óptimo
para el contenido de nitratos.

 Las metodologías de flujo continuo aportan grandes ventajas a los

análisis de rutina ya que además de ser metodologías precisas y
rápidas, el ahorro de reactivos, así como de muestras, es siempre
superior debido a que se utiliza menos cantidad de estos, lo que
también implica que la producción de desechos sea menor siendo
éste un factor indispensable en un laboratorio ambiental o de
análisis.

8. RECOMENDACIONES

 Tener mucho cuidado al momento de manipular el espectrofotómetro y

evitar manipular el equipo sin la orientación del docente de práctica a
cargo.
9. BIBLIOGRAFÍA

 Kojlo, A.; Gorogkiewicz, E. Anal, 1995, Chim. Acta.

 25. ASTM, D 3867-90, 1991, Standard Test Methods for Nitrite-Nitrate in
Water, Vol. 14.01, 508-515, Philadelphia, PA..
 Erika Cabrera M., Lucía H., Humberto G., Ma. del Pilar C., 2003,
Determinación de nitratos y nitritos en agua. Comparación de costos
entre un método de flujo continuo y un método estándar.
 W. Adam Sigler and Jim Bauder, 2012, Programa de Extención en
Calidad del Agua Departmento de Recursos de la Tierra y Ciencias
Ambientales.
 American Public Health Association (APHA), American Water Works
Association (AWWA), Pollution Control Federation (WPCF). 2005.
 ANEXOS

Foto3: Columna de
Foto 1: Muestra de Foto2:
reducción
sólidos totales, agua Espectrofotómetro
procedente de la
Universidad

Foto4: Aplicación Foto5: Medición de

del método muestras de agua Foto6: Recolección
colorimétrico por medio una de la muestra
probeta tratada

Foto8: Medida dada

por el
Foto7: Medida dada
espectrofotómetro
por el
agua Puyango
espectrofotómetro
agua Universidad