El presente proyecto no está dirigido a estudiar a una población qué tiene infecciones por las

bacterias helicobacter pylori o estreptococo pyógenes más bien estudiará o se estudiará a la

población microbiana de estas dos bacterias para ello podemos considerar a la población
como el número de unidades formadoras de colonias que hay en una placa petri o que se
observa en un medio de cultivo y de esta caja bastará con tomar dos colonias como muestra
para realizar la siembra en los medios de cultivo respectivos esto se explica gracias al
crecimiento exponencial cuando las condiciones son favorables para las bacterias Por lo cual
no es necesario determinar una población microbiana ya que simplemente al tomar una o dos
colonias de la caja petri donde se ven colonias de los patógenos ya mencionados al
someterlos a un ambiente adecuado para su crecimiento se tendrá información suficiente de
las nuevas colonias que se formaran en el medio o los medios de cultivo otra forma de
explicar que no se necesita una población de estudio se debe a que las colonias son
agrupaciones de millones de bacterias en general Por lo cual no es menester tomar una
muestra significativa de una placa petri puesto que tomando sólo una colonia ya se tendrá
información suficiente para el estudio de las bacterias del proyecto

Las muestras como ya se indicó en la parte de la factibilidad serán brindadas por el

laboratorio de microbiología de la universidad donde ya se tienen sembradas algunas cajas
petri de la bacteria estreptococo diógenes , para la obtención de la muestra de helicobacter
pylori la doctora de microbiología de laboratorio de la universidad facilitará la obtención de
la misma al momento en el cual se realiza la solicitud del material de laboratorio

Bajo está premisa podemos definir a nuestra población o nuestro universo como las colonias
que se encuentran presentes o el número total de colonias presentes en una caja petri y la
muestra que se sacará de estas cajas petri será de un máximo de 3 colonias.

Para la parte donde se emplearán las infusiones sobre los medios de cultivo de las bacterias se
emplearán muestras que variarán entre dos y 5 ML de solución

En el capítulo número 2 en la parte de factibilidad económica se observó el presupuesto y las

cantidades que se requieren para realizar la experimentación considerando esto se definirá la
población como la cantidad total de los alimentos que se va a comprar y posteriormente se
utilizará la técnica del muestreo aleatorio simple para determinar las cantidades o las
muestras que se emplearán para el análisis de los alimentos

En la presente investigación se manejará un nivel de confianza del 95% Por lo cual el valor
de Z en Tablas de distribución normal es de 1.96 como no se tienen estudios previos similares
la probabilidad de éxito será del 50% y la probabilidad de fracaso también será del 50% el
margen de error con el cual se trabajará será del 5%

Procedimiento (Análisis de los alimentos y extracción)

 para la primera parte de la experimentación se realizará el análisis de los alimentos
empleados en la práctica analizando factores como la humedad la actividad de agua y el pH
para esto se tomarán muestras empleando el muestreo aleatorio qué le explicó con detalle en
el capítulo 3 en la parte de población y muestra para el análisis de humedad se empleará la
balanza de humedad el peachimetro será empleado conjuntamente con el refractómetro digital
para medir el pH y el porcentaje de acidez de los mismos realmente se determinará la
actividad de agua empleando una relación de humedad en función a tablas y a las unidades
obtenidas previamente a todo esto los alimentos deben ser pesados deben anotarse
características como el tamaño la forma y la especie

después de realizar el análisis de los alimentos se procederá a extraer los principios activos
del jengibre tales como ser el honor o el gingerol para esto se empleará el método de
destilación por arrastre de vapor donde se montará el equipo de destilación que consiste en
una manta calefactora la transferencia de calor se da por medio de una hornilla eléctrica un
balón esférico donde se colocará el jengibre este estará conectado a un cabezal de destilación
que su vez estará conectado un condensador el condensador estará conectado a una manguera
por la cual se le suministrará agua fría posteriormente a este proceso se realizará la
extracción de la cáscara de limón cuyo principal componente a extraer s-limoneno prestó se
emplea nuevamente la destilación de arrastre de vapor Donde se montará un sistema cerrado
para este tipo de extracción se empleará un solvente como lo es el benceno el principio de
funcionamiento fue explicado con detalle en la parte del marco teórico , se
Procederá a anotar las observaciones de los extractos a su vez por medio de volumetria se
determinar la cantidad extraida y se determinar el rendimiento del mismo

una vez extraído los aceites esenciales del jengibre y de limón se procederá a mezclarlos con
diferentes combinaciones de canela ajo y Ulupica en diferentes proporciones Para
homogeneizar las mezclas empleará el agitador vortex en el caso de presentar insolubilidad
de las muestras de las infusiones a preparar se utilizarán estabilizantes o agentes tensoactivos
que permitirán mezclar todos los componentes de la infusión

Parte 2 Preparacion de medio de cultivo

En esta parte se esterilizan los materiales de vidrio que deben estar cubiertos con papel
madera algodón y Lana dicha esterilización esterilización se llevará a cabo en el autoclave a
una presión de una atmósfera durante 15 minutos después de la esterilización se procederá a
calibrar los equipos necesarios como ser balanza analítica peachimetro entre otros

Posteriormente se preparan los medios de cultivo con los requerimientos nutricionales de las
bacterias se emplearán los agares necesarios para dichos medios de cultivo para esto se deben
pesar según las cantidades a preparar del fabricante dichas cantidades vienen en las
indicaciones de los frascos de los diferentes agarres que se emplearán en la práctica
previamente a esto se deberán conseguir muestras y posteriormente analizar mediante la
tinción de gram para la especie estreptococo Beta hemolítico Y helicobacter pylori se
anotaran Las observaciones En cuanto a morfología Y si existe la presencia de exosporas o
endosporas.

después de haber realizado el análisis de la tinción de gram y el análisis de la morfología en

el microscopio se se realizará la siembra microbiológica por el método de cuadrantes y por el
método de pentágono utilizando el asa microbiológica y el Asa de vidrio drigalsky
Posteriormente se realizarán procesos de medición del número de células viables o número de
células vegetativas con la ayuda del espectrofotómetro de masas de las siembras preparadas el
80% las colocara en la estufa de cultivo a una temperatura de 35 a 37 grados y el otro 20%
será empleado continuamente para determinar la biomasa mediante la espectrofotometría una
vez sembrada las colonias se anotaran características de las mismas tales como la morfología
si son homogéneas o son heterogéneas la concavidad y convexidad de las mismas y algunas
otras observaciones como la motilidad ruptura de lagar o desprendimiento de gas

Procedimiento (Tratamiento con las infusiones preparadas)

Para esta parte Se añadirán las infusiones tomando una alícuota en ML de 2 a 5 de las
muestras preparadas en las placas petri donde se sembraron las bacterias patógenas
posteriormente a esto se se dejará una muestra testigo donde no se empleará ninguna
infusión hice las volverá a colocar en la estufa de cultivo Posteriormente se observará
cualitativamente sí ha existido inhibición del número de unidades formadoras de Colonia esto
se puede observar sí existe un anillo alrededor de un lugar de la caja petri donde antes habían
colonias posteriormente en el caso de existir inhibición o seguir existiendo número de
colonias se realizará el conteo de las mismas

Procedimiento (Tratamiento con Antibioticos )

para esta prueba el tratamiento a realizar será con anillos de antibiótico que de las cajas petri
de las bacterias patógenas sembradas en los agares se realizará un antibiograma colocando los
antibióticos que generalmente pueden exterminar a estos patógenos después de esta prueba se
notarán Las observaciones y se las compara con Las observaciones descriptivas del
procedimiento anterior