BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

TALLER DE MICROSCOPIA

LYDA CENOBIA CABALLERO MENDEZ

SERGIO ALEJANDRO OCAMPO

ANDREY MONSALVE
ANA SOFIA

PRIMER SEMETSRE
MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
UNIVERSIDAD TECNOLÓGICA DE PEREIRA
2019
1. ¿Cómo se calcula el aumento de la imagen observada con el
microscopio?

El aumento de un microscopio es una de sus características esenciales

que define su calidad y el tipo de muestras que se podrán observar. El aumento
total de un microscopio indica en qué medida este puede aumentar la imagen de
la muestra observada. En el caso del microscopio óptico compuesto, el aumento
de la muestra se produce en dos etapas, primero en las lentes del ocular, de este
modo es necesario conocer el aumento de estas dos partes del microscopio para
conocer el aumento total que se obtiene. El aumento total del microscopio se
puede calcular fácilmente multiplicando el aumento del objetivo por el aumento
del ocular, este proceso de aumento se puede explicar en base a la naturaleza
de las lentes, que no son más que cuerpos con la capacidad de desviar los
convergentes, los rayos que inciden de forma paralela son desviados de modo
que convergen en un punto llamado foco.

2. ¿Qué aumentos produce el microscopio compuesto que está usando?

Los microscopios compuestos suelen venir equipados con tres o

cuatro objetivos que se pueden seleccionar mediante el revolver.
En nuestro caso el microscopio contaba con 4 aumentos, los cuales
eran 4x, 10x, 40x y 100x.
3.

Microscopia Óptica Microscopia de barrido Microscopia de transmisión

Microscopia de campo Proporciona contraste Proporciona contraste

luminoso: La luz pasa mediante los mediante los electrones
a través de la célula. electrones dispersos. dispersos, estos chocan
con un ion metálico
pesado que al pasar en
la muestra se reflejan y
se enfoca para formar
una imagen.

Microscopia de campo Se pueden preparar Se pueden preparar con

oscuro: Solo la Luz con tintes positivos o tintes positivos o
difractada desde el negativos negativos
espécimen se usa
para formar la imagen.

Microscopia de Se utiliza para obtener Permite la observación

fluorescencia: Marca una imagen de muestras en cortes
las moléculas fijadas o tridimensional de las ultra finos.
vivas. células

Microscopia de Los electrones

contraste de fases: aislados o emitidos
Aumenta el contraste por la superficie de la
entre las partes claras muestra se recogen
 y oscuras de la célula para generar una
sin colorear. imagen tridimensional.

Microscopia con focal:

Combina microscopia
de fluorescencia con
el análisis electrónico
de la imagen.

Formación de la imagen

Microscopia óptica: La imagen en un microscopio se forma por la

transmisión de los rayos provenientes de una fuente luminosa a través del objeto.
Los rayos luminosos atraviesan el diafragma que, a manera de iris, delimita el
diámetro del haz lumínico que penetra por el condensador. Este último, está
formado por un sistema de lentes convergentes que concentra y proyecta el haz
lumínico sobre el objeto a examinar, a través de la abertura de la platina. El
objetivo recoge la luz que atravesó el objeto examinado y proyecta una imagen
real, invertida y aumentada que se forma dentro del tubo y que es recogida por
el ocular que es la segunda lente, la cual forma una imagen virtual, invertida y
aumentada del objeto examinado.

Microscopia de barrido: el equipo cuenta con un dispositivo que genera

un haz de electrones para iluminar la muestra y con diferentes detectores se
recogen después los electrones generados de la interacción con la superficie de
la misma para crear una imagen que refleja las características superficiales de la
misma, pudiendo proporcionar información de las formas, texturas y composición
química de sus constituyentes.

Microscopia de transmisión: Aprovecha los fenómenos físico-atómicos

que se producen cuando un haz de electrones suficientemente acelerado
colisiona con una muestra delgada convenientemente preparada. Cuando los
electrones colisionan con la muestra, en función de su grosor y del tipo de átomos
que la forman, parte de ellos son dispersados selectivamente, es decir, hay una
gradación entre los electrones que la atraviesan directamente y los que son
totalmente desviados. Todos ellos son conducidos y modulados por unas lentes
para formar una imagen final sobre una CCD que puede tener miles de aumentos
con una definición inalcanzable para cualquier otro instrumento. La información
que se obtiene es una imagen con distintas intensidades de gris que se
corresponden al grado de dispersión de los electrones incidentes.

4. Explique cómo funciona el sistema de coordenadas de un microscopio,

en donde se ubica y cuál es su aplicación.

Al observar una muestra, es frecuente que se desee apuntar o fijar la

situación de un punto o estructura concreta de la muestra para poder volver
sobre ella con precisión después de explorar otras zonas. Por ello los
microscopios están dotados de un sistema de coordenadas. Los sistemas
van asociados a los sistemas de arrastre de la platina (escuadra y pinza) y
están dotados de regletas milimetradas en las que los números de las
abscisas y ordenadas no son coincidentes para evitar equivocaciones. Los
puntos los marca el cero o inicio de una reglilla secundaria (nonius o vernier)
que además permite afinar hasta la décima de milímetro. Cada punto de la
preparación queda así definido por dos números sobre los que se puede
volver cuando se desee. Para que la toma de coordenadas sea efectiva
deben seguirse los siguientes pasos:
 Verificar que la muestra está perfectamente encajada en los sistemas de
arrastre.
 Verificar y apuntar si es necesario la orientación de la preparación
(identificador de la preparación a la derecha o a la izquierda).
 Centrar en lo posible en el campo el punto de interés con el objetivo de mayor
aumento posible.
 Apuntar las coordenadas cuando se desee volver a observar el unto de
interés del que se han tomado las coordenadas deben seguirse los siguientes
pasos:
o Si se ha cambiado de preparación, verificar que la muestra está
perfectamente encajada en los sistemas de arrastre y que su
orientación es la misma que tenía cuando se tomaron las
coordenadas.
o Colocar un objetivo de menor aumento a aquel con el que se tomaron
las coordenadas (se trata de superar los desfases debidos a pequeños
errores que se pueden cometer en el proceso).
o Mover los sistemas de arrastre hasta colocarlos en las coordenadas
apuntadas.
o Observar e identificar la estructura.

5. ¿Qué utilidad tiene el aceite de inmersión y que índice de refracción

maneja? ¿Puede usarse otro tipo de aceite para las observaciones?

Los aceites de inmersión son líquidos claros y viscosos con excelentes

propiedades de refracción, es decir, con un índice de refracción (RI) similar
al vidrio: RI = 1,5. Estos aceites se gotean sobre el preparado teñido y
montado, o no montado, de origen humano o animal formándose una película
clara entre el preparado y el objetivo del microscopio. El preparado puede ser
examinado bajo el microscopio sin perturbación alguna ya que los aceites de
inmersión eliminan casi completamente la desviación de los rayos de luz, y
al mismo tiempo aumenta considerablemente la eficacia de los objetivos de
los microscopios. Mediante el práctico frasco gotero de 100ml, el aceite de
inmersión puede ser puesto en el portaobjetos de forma sencilla y segura sin
que haya lugar a refregones. Gracias al cierre del manguito, la viscosidad no
cambia, por lo que el aceite de inmersión puede ser usado siempre y de forma
inmediata.
Art. 104699 Aceite de inmersión para microscopia índice de refracción
(20°C) 1,515 – 1,517 Densidad (20°C / 4°C) 1,0245 -1,0265 g/cm3 viscosidad
(20°C) 100 – 120 mPa*s Fluorescencia < 1500 ppb 1 I = 1,02kg
 Referencias
Microscopio, M. (2019). Mundo Microscopio. Obtenido de
www.mundoicroscopio.com/microscopio-compuesto/

Microscopio, M. (2019). Mundo Microscopio. Obtenido de

www.mundomicroscopio.com/aumento-del-microscopio/

Healey, P. 1980). Microscopios y vida microscópica (No. 57.082 HEA)