Tinción de Gram

La tinción de Gram es una técnica de laboratorio que permite identificar distintos tipos de bacterias según se coloree su
superficie, aportando información muy útil para orientar el tratamiento antibiótico.

Después te realizarán la toma de muestra sobre la que se realizará la tinción de Gram. Según el lugar de recogida de la
toma se recomiendan unas u otras medidas. Por ejemplo, si es uretral no debes orinar las dos horas previas, si es un
esputo mejor que sea a primera hora de la mañana, y si es de sangre mejor que coincida con un pico de fiebre. Pero esos
detalles te los hará saber el médico antes de realizarte la prueba, así que no debes preocuparte.

La tinción de Gram se realiza en el laboratorio, y tú no serás consciente de ninguno de los pasos de la técnica. Para que
los conozcas los resumimos a continuación:

Se extiende la muestra recogida (que suele ser líquida o viscosa) en un porta de cristal, y se deja secar al aire.

Se aplica metanol al porta; así, las bacterias quedan pegadas en la superficie.

Se añade violeta de genciana, un colorante que tiñe todas las bacterias de color púrpura. Se debe dejar durante un
minuto para que haga efecto.

Se lava la muestra coloreada con agua y se añade alcohol-acetona para desteñir las bacterias que se deben teñir con el
violeta de genciana. Es la parte más importante de la prueba, ya que si se deja demasiado tiempo se desteñirían todas
las bacterias. Después se lava de nuevo con agua para eliminar el alcohol.

Se añade fucsina, otro colorante que tiñe de rosa las bacterias que no se han teñido de color púrpura. Así se pueden
observar al microscopio, aunque serán gramnegativas.

El microbiólogo estudia la muestra con un microscopio e identifica bacterias teñidas.

Complicaciones de la tinción de Gram

Las complicaciones de la tinción de Gram son inexistentes. Es una prueba segura que no entraña riesgos para las
personas que se someten a ella. El único riesgo es aceptar resultados falsos como positivos o negativos, y tomar medidas
equivocadas al respecto, como sucede cuando en la tinción no se observan bacterias porque se ha tomado un
antibiótico previamente. La toma de la muestra no suele entrañar riesgos, excepto los propios de la punción lumbar en
el caso de las meningitis.

que son los reticulositos

Los reticulocitos son hematíes relativamente inmaduros y de producción reciente. El recuento de reticulocitos
determina el número y/o el porcentaje de reticulocitos en la sangre, y constituye un reflejo de la actividad o función
reciente de la médula ósea.

Los reticulocitos se producen en la médula ósea cuando las células madre formadoras de la sangre (hematopoyéticas) se
diferencian formando reticulocitos y finalmente a hematíes...

Gota gruesa.

1. El diagnostico microscópico de Parásitos está basado en la identificación de los parásitos coloreados libres (gota
gruesa) o intracelulares en el eritrocito (extendido fino). Los parásitos se identifican por su forma y por la coloración
diferencial de sus componentes, es decir, citoplasma, cromatina y pigmento, y se deben distinguir de los elementos de la
sangre, de otros microorganismos sanguíneos y de microorganismos o artefactos que puedan estar presentes en la
lámina o en el colorante.

2. Las coloraciones de Giemsa y de Wright tienen colorantes ácidos (eosina) y básicos (azul de metileno) que colorean los
componentes celulares acidofilicos y basofilicos, respectivamente. Así tenemos, que la gota gruesa es más sensible y el
extendido fino es más específico. En el laboratorio clínico se recomienda la utilización de ambas muestras en una sola
lámina.
3. Gradilla de Tinción 4 Portaobjetos de 25x75 mm Lancetas Aceite de Inmersión Colorante Wright Colorante
Giemsa Muestra Biológica con EDTA (opcional).

4. Realizar la punción capilar (se puede realizar también venosa, aunque no se requiere de mucha sangre). Colocar una
gota en un portaobjetos y con el ancho de otro hacer el extendido de sangre. En otro portaobjetos, colocar una gota
gruesa y hacer un cuadrado de 1.5 mm. Dejar secar las 2 muestras

5. Colocamos la gota gruesa en la gradilla de tinción, en posición horizontal. Para fijar la muestra cubrimos el porta con
metanol durante 3 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al aire. Se cubre el portaobjetos con el colorante Giemsa,
dejándolo actuar de 10-15 minutos. Escurrimos y lavamos con agua destilada y se deja secar. Posteriormente se le
coloca una gota de aceite de inmersión y se observa al microscopio.

6. Teñir el frotis con 2.5 ml de colorante Wright por 5 minutos Sin tirar el colorante, añadir 2ml de Solución de Buffer con
pH de 6.8 y dejarlo reposar por 6 minutos Homogeneizar soplando con una pipeta en forma de zigzag Enjuagar con
abundante agua destilada y observar al microscopio.

7. Es identificar parásitos sanguíneos. Principalmente podemos encontrar Plasmodium spp, Leishmania spp,
Tripanozoma cruzi, Toxoplasma Gondii y las Micro filarias. El resultado debería ser negativo. Cuando no lo es, se vuelve a
realizar la prueba y/o realizar otro tipo de examen para comprobar si es positivo o fue un error del técnico.

8. Leishmania spp. Microfilarie. Plasmodieum spp.

9. Toxoplasma gondii Trypanosoma cruzi

Código de Tipo de
Exámenes realizables
color muestra

Aluminio Sangre Laboratorio de microbiología.

Azúl Plasma Pruebas regulares de tiempos de coagulación.

Amarillo Suero Determinaciones en suero y química clínica.

Rojo Suero, Determinaciones de serologías y química clínica. La FDA lo recomienda para

coágulo. pruebas de inmuno-hematología como: agrupación ABO, grupo RH, anticuerpos,
fenotipos de glóbulos rojos y pruebas DAT.

Verde Plasma Determinaciones de químicas clínicas.

Morado Sangre
Total
Sin duda que son bastantes y probablemente no llegues a utilizarlos todos durante tu práctica de pregrado. Por esto, debes

familiarizarte con los principales que son el de tapón rojo, de tapón azul, de tapón morado y el frasco/botella para

hemocultivo.

Azul

Este tubo, como ya vimos anteriormente, es el que se usa para realizar pruebas regulares de pruebas de coagulación, que

son las siguientes:

 Tiempo de protrombina TP

 Tiempo de tromboplastina TPT

Rojo

Este tubo se utiliza para infinidad de estudios de determinaciones de químicas clínicas, pruebas de inmunología y algunas

pruebas especiales, como son:

 Química sanguínea:

o Glucosa.

o Test O’Sullivan.

o Nitrógeno ureico.

o Creatinina.

o Colesterol (total, HDL, LDL y VLDL).

o Bilirrubina (total, directa e indirecta).

o Transaminasa TGO.

o Transaminasa TGP.

o Fosfatasa alcalina.
 o Proteínas.

o Albúmina.

o Globulina.

o Triglicéridos.

o Ácido úrico.

o Troponina.

o CPK.

o Electrolitos.

 Pruebas de inmunología:

o Hormona gonadotropina coriónica humana.

o Serologías.

o Proteína C.

o Eosinófilos en moco nasal.

 Exámenes especiales:

o T3, T4 y TSH.

o Prolactina.

o Antígeno prostático.

Morado

 Exámenes de sangre total:

o Grupo sanguíneo.

o Hemoglobina.

o Hematocrito.

o Recuento plaquetario.
 o Coombs directo.

o Coombs indirecto.

o Hemoparásitos.

o Velocidad de sedimentación globular (VSG).

 Exámenes de hematología:

o Extendido de sangre periférico.

o Recuento de reticulocitos.

Después de este épico repaso, tanto tú como el interno que inició esta mañana con desgracias, tendrán las

herramientas suficientes para conservar sus cabezas y tener una guardia memorable (o cuando menos sin castigos

medievales).

Examen de Inmunología

sistema inmunitario.

Prueba de embarazo

RA test

P.C.R.

V.D.R.L.

Antiestreptolisinas

Anticuerpos antinucleares

F.T.A.- A.B.S.

Hepatitis A (Anti HAV IgM)

Hepatitis B (Anti AgHBs)

Hepatitis C (anti HCV)

PSA (antígeno prostático específico)

HIV

Inmunoglobina E

Rubeola IgC

Rubeola IgM

Hematología
 Nombre Técnica Condiciones Generales

Prueba utilizada para el diagnóstico de Lupus eritematoso

sistémico (LES) y para vigilar su tratamiento. Los pacientes
Celulas LE Microscopía
con lupus eritematoso pueden mostrar anticuerpos contra
componentes del núcleo dentro de sus propias células.

Señala la presencia de anticuerpos, de complemento o de

inmunoglobulinas en la superficie del eritrocito. Los
Coombs Directo, Prueba
Hemaglutinación anticuerpos detectados por la prueba de Coombs son
Cualitativa
difíciles de identificar de otra manera, ya que son sobrantes
de reacciones antígeno-anticuerpo.

Detecta anticuerpos circulantes inesperados y reacciones a

ciertos antígenos (Kell,Duffy, Rh); útil en el estudio de la
Coombs Indirecto, Prueba Técnica en gel
sangre antes de transfusión y para detección de leucocitos,
Cuantitativa automatizada
plaquetas o anticuerpos raros y la detección prenatal de
incompatibilidad m

Son anticuerpos que causan agregados o aglutinación de

células de la sangre grupo "O" en temperaturas frías. La
Crioaglutininas Hemaglutinación presencia de títulos > 1:32 en combinación con síntomas
respiratorios agudos, sugieren infección por Mycoplasma
pneumoniae, neumonía viral o ne

Son proteínas séricas anormales que precipitan a bajas

temperaturas. Su presencia causa trastornos vasculares en
Crioglobulinas - extremidades y generalmente se asocia con enfermedades
inmunoproliferativas, enfermedades del colágeno,
enfermedad autoinmune idiopática.

Prueba no especifica que evidencia la presencia de

Eritrosedimentacion situaciones de inflamación, infección o procesos
(Velocidad Sedimentacion Westergreen neoplásicos. Se utiliza como ayuda en el control del
Globular - VSG) tratamiento de algunas enfermedades. Pierde sensibilidad en
pacientes anémicos.

Extendido de Sangre
Microscopía/Citometría Identificación de anormalidades en la morfologia de las
Periférica, Estudio de
de flujo células sanguíneas (eritrocitos, leucocitos y plaquetas).
Morfología

Mide la proporción de glóbulos rojos contenidos en el

Microscopía/Citometría plasma de una muestra de sangre total. Se utiliza para tener
Hematocrito
de flujo una aproximación de la pérdida de sangre en una persona,
ya que ésta se refleja en la disminución del hematocrito.

Detección del grupo sanguíneo según la clasificación ABO

Hemoclasificacion Grupo y el factor Rh de un paciente. Es de gran utilidad en la
Técnica en gel
Abo, Inversa o Sérica en medicina transfusional para minimizar el riesgo de
automatizada
tubo reacciones a los componentes sanguíneos y en las pacientes
embarazadas para evitar complic

Permite conocer la capacidad de la sangre de transportar

Microscopía/Citometría
Hemoglobina oxígeno. Util para diagnosticar anemia y policitemia, así
de flujo
como la respuesta a tratamiento para cada caso.

Prueba utilizada en el diagnóstico y la vigilancia del

Hemograma IV (Método
Citometría de Flujo tratamiento de infecciones, reacciones inflamatorias,
Automático)
leucemias, cuadros anémicos, enfermedades hemolíticas y
 desórdenes mieloproliferativos. Incluye el análisis
cuantitativo y morfológico de eritro

Investigación de malaria. El propósito de la técnica es lograr

concentrar las formas parasitarias de Plasmodium para
Hemoparasitos, Extendido Tinción de Giemsa
poder encontrarlas más fácil que en un extendido de sangre
de Gota Gruesa Microscopía
periférica. Se recomienda tomar la muestra en el momento
que el paciente presen

Hemoparasitos, Extendido Tinción de Giemsa Investigación de malaria. Se recomienda tomar la muestra

de Sangre Periférica Microscopía en el momento que el paciente presente un pico febril.

Util en el diagnóstico y la vigilancia del tratamiento de

infecciones, reacciones inflamatorias, leucemias y
Leucograma (Recuento
Citometría de Flujo desórdenes mieloproliferativos. Incluye el análisis
Total y Diferencial)
cuantitativo y morfológico de los leucocitos presentes en
una muestra de sangre total.

Prueba de tamizaje utilizada para detectar hemoglobina S

Prueba de Ciclaje (Células anormal. Consiste en la captura del oxígeno de la molécula
Falciformes O - de hierro de la hemoglobina por parte del metabisulfito de
Drepanocitos) sodio, lo que genera un cambio en la estructura de la
hemoglobina alterada que

Determinación de la presencia del antígeno D de débil

Prueba para Determinar D
expresión en la membrana de los glóbulos rojos de un
W O Variante Du (Rh -
paciente cuyo Rh en la prueba de aglutinacion en placa ha
Debil) en Tubo
sido negativo.

Recuento de Eosinofilo en
Ayuda en el diagnóstico de rinitis alérgica asociada a un
Moco Nasal por Microscopía
cuadro de asma.
Coloración de Han

Las plaquetas juegan un papel fundamental en los procesos

de coagulación y hemostasia del organismo. Esta prueba se
Recuento de Plaquetas,
Citometría de Flujo realiza para evaluar la cantidad de plaquetas presentes en la
Método Automático
sangre, con lo cual se obtiene una aproximación del estado
de la producción d

Permite valorar la producción de glóbulos rojos en una

persona. Se puede ver aumentada en hemorragias, cuadros
Recuento de Reticulocitos,
Microscopía hemolíticos, anemia drepanocítica o en el tratamiento
Método Manual
adecuado de una anemia. Su disminución se observa en
mielodisplasia, cirrosis, deficiencia

Util en el diagnóstico de alergias, etapas iniciales del

Recuento de Eosinofilos en
Microscopía sindrome de Cushing, el sindrome hipereosinofílico agudo y
sangre
parasitosis.

Examen de Microbiología

Muestra

Secreción

B.K.

KOH

Citología vaginal