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EJERCICIOS DE ESPECTROFOTOMETRIA

1) Se obtuvieron los siguientes datos de transmitancia para disoluciones


acuosas de oxihemoglobina (M: 66 500 g/mol) de Ph=7, en λ = 575 nm,
utilizando una cubeta de 1, 00 cm:
C/ (g/ 100 mL) 0,030 0,005 0,071
0,102
%T 53, 5 31,1 22,5
12,3

Comprobar si cumple la ley de Beer y, en su caso, determinar la


absortividad.
Los valores de absorbancia, A= - log T, son los siguientes:

C/ (g/ 100 mL) 0,030 0,005 0,071


0,102

%T 0,271 0,455 0,648


0,910

La representación gráfica de estos valores en la fig, 1, pone de


manifiesto una notable linealidad. El ajuste de estos datos mediante un
procedimiento de mínimos cuadrados proporciona para la pendiente un
valor de 8,87 (Dl/ g). Conocido el paso óptico de la cubeta, L= 1, 00 cm,
fácilmente se determina:

¿Cuál es el valor de la absortividad molar?


2) Espectros de absorción vis-vv de hemoglobina (Hb) y Oxihemoglobina (Hb
O2), es disolución acuosa, y ley de Beer para disoluciones de HbO2a 575
nm, según los datos de ejercicio.
Determinar la transmitancia de una disolución cuya concentración es 0,15 g/ L.
Con el resultado anterior, se obtiene:

Calcular el error relativo en concentración porcentual para mediciones con


absorbancias de: 0, 125: 0, 334 y 0, 900 suponiendo que existe una
incertidumbre fotométrica instrumental de un 1%

A = 0, 125= 74, 9 % T

0, 434= 36, 8 % T

0, 900= 12, 5 % T

∆C/C= 0,4343.0,01/0,749 log 0,749=-0,046= 4,6 %


∆C/C= 0,4343.0,01/0,368log0,368= -0,027 ; = 2,7 %
∆C/C= 0,4343.0,01/0,125log0,125= -0, 038 ; = 3, 8 %
GRÁFICO:

Se elegirá un rango de concentraciones de trabajo tal que la transmitancia se


mantenga en el rango 20 % T- 70 % T. (0,7 A-0, 15 A)

3) Calcular la masa atómica promedio

Masa atómica= (masaa) (abundanciaa) + (masab)(abundanciab)


Masa atómica= (34.97)(0.7576) + (36.96) (0.2424)
Masa atómica= (26.49) + (8.96)
Masa atómica= 35.45
GRÁFICO:
4) Una solución de kMnO44 Tiene una absorbancia de 0.539 cuando se mide
a 54nm en una celda de 1.0-cm. ¿Cuál es la concentración de KMnO4?
Antes de terminar la absorbancia de la solución desconocida, se
obtuvieron los siguientes datos de callibraación para el espectrofotómetro.
Concentración de KMnO4 (M) Absorbancia
0.0300 0.162
0.0600 0.330
0.0900 0.499
0.120 0.670
0.150 0.840

A= E. l. c l= 1 cm

0.162 = E. 1. 0. 0300
0.0300 0.0300
E= 5.40
A= 5.4 L/cm.mol x 1 cm. C
0.539/5.4 L.mol = 5.4 L/com.mol x 1 cm. Lcl
54 L/mol
C= 0.0998 mol/ L
GRÁFICA:
5) Determinar la concentración de zinc (Z) e una muestra de agua que ha
sido cuantificada con una curva de calibración que va de 0.5, 1.0, 2.0, 3.0,
4.0 ppm; al ser leída en el equipo de una absorbancia e 0.025, 0.051,
0.103, 0.152, 0.204. Calcular los valores de la pendiente (m), intersección
(b) y coeficiente de correlación (r) mediante_
A) Método manual
B) Método de Exel y gráfico
El valor de absorvancia otenido de la lectura de la muestra de 0.078

X- concentración Y- Absorbancia
(ppm)
0,5 0,025
1,0 0,051
2,0 0,103
3,4 0,152
4,0 0,204

Cálculo del punto de intersección


b = (Ʃ yi) – m( Ʃ Xi) /n

b= (0.535) – (0.0509756) (10.5)/5


GRÁFICA:
6) Suponga que el ∈ de una especie es 4500 a la longitud de onda de
trabajo. Si tuviera que preparar una curva de calibración con 5 puntos, ¿
entre qué concentraciones prepararía las soluciones para obtener la curva
de calibración?

𝜖 = 4. 5000 cm—1 M-1

A= 𝜖 x b x c
¡
7) Para analizar una muestra hemoglobinna es sangre se prepararon 5
soluciones patrón de cianmetamoglobina a partir del patrón de HiCN, cuya
concentración era 600 mg/ Ly de reactivo de Drabkin, según se indica en la
siguiente tabla. Los valores de absorbancia obtenidoos a 54º n, para cada
patrón se muestran en la misma tabla:
A) Identifique el método de calibración utilizado
B) Teniendo en cuenta el pocedimiento indicado, complete la tabla anterior
C) Calcular pendiente y ordenada

Tub Patró Reactivo Volume Dilució Oncentració ABSORBANCI


o n de de n final n n de Hb A
Hi CN Drabkia(m (g/L)
(mL) L)
3,0 - 3 0,600 0,403
1,5 1,5 3 2,0 0,300 0,213
1,0 2,0 3 3 0,200 0,167
0.5 2,5 3 6 0,100 0,082
3,0 3 0,000 0,000

Concentración Absorbancia
de Hb (g/L)
0,600 0,403
0,300 0,213
0,200 0,200
0,100 0,100
0,000 0,000

C Hb(g/L) Absorbancia
0,000 0,000
0.100 0.082
0.200 0.167
0.300 0.213
0.600 0.403
8) El método desarrollado en el problema anterior, se aplicó para la
determinación rutinaria de hemoglobina en una muestra de sangre, Las
alicuotas de sannngre fueron 20 µL, a las cuales se agregó 5,0 mL de
reactivo de Drabki. La muestra se leyó 3 veces en el mismo
espectrofotómetro y las lecturas fueron 0, 316; 0, 317 y 0, 315
Promedio absorbancias de las muestras problema
Función = y = 0,659 x + 0,0148

0.316= 0.659 x + 0.01488

x= (y-b)/a

x= (0. 316.0.0148)/0.659

conc sol dil = 0.457 g/ L

Conc Hb sangre = 0.457 x 250


Conc Hb sgre 114 g/L
Dilución: 0, 02 mL/VF mL
FACTOR 250

9) Una muestra de orina de 24 horas de un paciente dió un volumen de 1, 122


mL. Una alícuota de 1, 00 mal de la muestra se trató con Mo(VI) y ácido
ascorbico y se diluyó hasta un volumen de 50,00 mL. Se preparó una curva
de calibrado con Alícuotas 1,00 mL de disoluciones patrón de fosfato
tratadas de igual modo que la muestra de orina. A partir de los datos
obtenidos, Calculé los miligramos de fosfato que eliminó el paciente en el
día y la concentración mM de P en orina.

{P}\ppm 1,000 2,000 3,000 4, 000 Muestra


Abs( 650 0,230 0,436 0, 638 0, 848 0, 518
NM)
De la representación gráfica y del ajuste lineal de los puntos experimentales del
calibrado. Se deduce que, para una absorbancia de 0, 518 la concentración es
de 2, 40 ppm. Téngase en cuenta que la orina y las disoluciones estándar
(cuyas concentraciones figuran en la tabla) fueron tratadas de igual modo.
1.122 mal orina 240 ugP/mL. 1gP/103 ugP= 2, 69-10-3
g. P= 2, 69 mg P/día
2,4 ug P/mL. mmolP/30,97mgP= 7,75- 10-5
M= 7,75.10-2 nm.
Los milímetros que eliminó el paciente en un día fueron 2,69 mgP/día y la
concentración fue 7,75.10-3.
10) Los datos que aparecen en la tabla corresponden a una volumetría
complexometría de una muestra de 0,8 mmol de un analito A.
Con un reactivo R 1,0-10-1 M con indicación fotométrica a 400 nm

A+ nR = ARn
A partir de esa información:
Razones que especies (s) absorbe (n) a esa longitud de onda
Determine el índice de coordinación de complejo
Vol de 0,0 1,0 2,10 3,0 4,0 8,0 9,10 10,0 0,45 11,0 0,55
R(mL)
Abs 1,10 0,90 0,70 0,5 0,30 0,25 0,35 10,0 0,45 11,0 0,55

La representación gráfica da lugar a la siguiente curva de valoración:


A partir de esta curva se deduce fácilmente que la equivalencia se alcanza para
un volumen 5,5 mal
5,5 mL = 0, 1 nmol/ mL = 0,55 mmol R consumidor
0,55/0,18 ≈ 3. Indica que la coordinación es 3.
Las especificaciones absorbidas son A y B.

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