FOTOSÍNTESIS

FOTOSINTESIS
Material elaborado por: J. Monza,S. Signorelli, O. Borsani y M.Sainz.

Las plantas, algas y cianofíceas (bacterias verde-azules), sintetizan materia orgánica a partir de moléculas
inorgánica: son autótrofos. La fotosíntesis requiere de energía lumínica y H20 para sintetizar ATP y NADPH.H,
moléculas usadas posteriormente para producir glúcidos a partir de CO), conliberación simultánea de O,a la
atmósfera. Los organismos heterótrofos, animales, bacterias y hongos, dependen de estas conversiones de
materia y energía para su subsistencia.
La fotosíntesis en eucariotas tiene lugar en los cloroplastos
+ Enlas hojas y enlostallos verdes de las plantas se encuentra el parénquimaclorofiliano, tejido que
presenta en sus células cloroplastos en número variable.
+ Los cloroplastos están rodeados por dos membranas que delimitan por un lado el espacio
intermembranay por otro el estroma.Enelinterior se encuentran vesículas llamadastilacoides, que
apiladas forman agrupamientos denominadosgranas(figura 1), relacionadas entre sí por las láminas
intergrana.
+ Enel estroma hay moléculas de ADN y ribosomas, de manera que los cloroplatos puedensintetizar
proteínas requeridas para algunas de sus funciones: son organelos semiautónomos.
+ Enlas cianobacterias, que no tienen compartimentos membranosos como núcleo, mitocondrias y
plastos, la fotosíntesis tiene una etapa asociada a la membranacelular, la fase luminosa, y otra al
citoplasma,la fijación de CO».

A
Idmine
estroma Intergrana

espacio tilacoide
Intermembrana

Figura 1. Estructura del cloroplasto. A. Esquema de un cloroplasto (tomado de biología.edu.ar) y B.

Fotomicrografía electrónica de un cloroplasto (tomadodebiologia.arizona.edu).

El intercambio de gases serealiza a través de los estomas

+ Enla epidermis de las hojas se encuentran estomas, orificios limitados por células oclusivas que
pueden aumentar o disminuir su tamaño (figura 2) y definir así la magnitud del intercambio de gases:
oxígeno,dióxido de carbono y vaporde agua.

AS

Figura 2. Estomas de hojas de Lotus (130 X). Se indican las células oclusivas y el orificio o estoma.
Izquierda estomaabierto, derecha estomas cerrados. Laboratorio de Bioquímica, Facultad de Agronomía.

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Enla fotosíntesis se distinguen dosfases,la luminosay la defijación de CO,

Como cualquier proceso bioquímicola fotosíntesis se puede representar por una ecuación global, que en
este caso resume una reacción de óxido-reducción en la que el H20 cede electrones (en forma de
hidrógeno)parala reducción del CO,a glúcidos (CH20)n,conliberación de O,.

CO,+H20. —1> 0,+ (CH20)n

Fase luminosa
En esta etapa, también llamada fotodependiente, porque se da sólo en presencia de luz, ocurren dos
procesos bioquímicos necesarios para la síntesis de glucosa: la reducción de NADP a NADPH.H conlos
hidrógenosdela molécula de aguay la síntesis de ATP.
+ Enla fase luminosa los pigmentos comolas clorofilas a y b (figura 3), carotenos,xantofilas, ficoeritrinas
y ficocianinas, que se encuentran asociados a la membranatilacoidal, captan fotones y se excitan.

Clorofila a Q - —omo
a
* curas Y A,

LY

Figura 3. Modelo de una molécula de clorofila. La región inferior de la molécula

corresponde a una cadenahidrofóbica. En la parte superior se observaelanillo
con dobles enlaces, y asociado a un Mg. Modificado de efn.uncor.edu

+ Los fotones, o cuantos de luz, son cantidades discretas de energía que se propagan como ondas. La
luz visible corresponde a la región del espectro electromagnético comprendida entre 400 y 700 nm,
región en la que absorben los pigmentos presentesen las plantas y cianobacterias.

+ Según su longitud de onda(A),los fotonestienen diferente cantidad de energía, de manera que cuanto
menoresA, mayor esla energía, que decrece desde la región violeta la roja (figura 4).

Rayos Rayos X uv
pa paa

10 00? 10816 1 10% 10

Liz vebk Longitud de onda (m)

m0 500 500 700

Ñ Longitud de onda (nm) Ps

Alta Baja
energía energía

Figura 4. Espectro electromagnético. Se representan las regiones del espectro y sus longitudes de
onda. La longitud de ondaestá relacionada inversamenteconla energía. Modificado de a-diba.net

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 FOTOSÍNTESIS

La diversidad de pigmentos permite absorber fotones en todo el rangodel espectrovisible

+ Los pigmentos, con máximos de absorción en longitudes de onda características (figura 5), se agrupan
en la membrana tilacoidal en estructuras llamadas antenas, formadas por unas 200 — 300 moléculas.
Los distintos pigmentos absorben fotones con diferentes longitudes de onda, de manera que su
diversidad le da a la planta la posibilidad de aprovechartodo el espectro visible (figura 5).

Abs
Clorofila b . Ficoeritrina
Ficoctanina

Clorofila a

Y IN
230 300 350 200 850 50 550 600 650
Longitud de onda(nm)

Figura 5. Espectros de absorción de pigmentosfotosintéticos. El conjunto

de pigmentos absorbe fotones en todoel rangovisible del espectro. Estos
pigmentos forman las antenas, mientras que el centro de reacción está
formado sólo por clorofila. Tomado de monografías.com

Los pigmentosdela antena se excitan conla energía de los fotones

+ Los pigmentos contienen electrones fácilmente excitables. Los electrones más externos pueden
absorberla energía de un fotón y pasar a un estado excitado de mayor energía, y por lo tanto más
inestable. Los electrones excitados se estabilizan al volver al estado basal, liberando la energía
absorbida(figura 6).

27
HZ HH AH
Estado Basal Estado excitado Estado Basal

Orbital desocupado
Orbital de valecia
Orbital virtual

Figura 6. Esquema de la excitación de un electrón. Un electrón perteneciente a un

orbital molecular puede ser excitado y pasar a otro orbital molecular de mayor energía,
porel aporte externo de energía. En el ejemplo usado la energía proviene de un fotón
(h.v). El mismoelectrón al volver al estado basal libera la energía absorbida (se).

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De esta forma, la energía se transmite entre moléculas adyacentes en la antena, hasta alcanzar el
centro de reacción (figura 7). Comola transmisión de la excitación electrónica acompaña la pendiente
de energía, esta pasa de un pigmento cuyo pico de máxima absorción es menor que el del pigmento
siguiente, es decir, con menor requerimiento de energía para excitarse.

Pigmentos de la
antena

Par de moléculas Centro de Membrana

de clorofila a reacción tilacoidal

Figura 7. Representación de la antena y centro de reacción de un fotosistema. Un fotón excita un

electrón de un pigmento que funciona como captador de energía, que se transfiere de una molécula de
pigmento a otra, hasta llegar al centro de reacción. Cuando se excita la molécula de clorofila del centro
dereacción se oxida: pierde un electrón. Modificado de recursos. cnice.mec.esm

La transferencia de energía desde la antena al centro de reacción se realiza con una pérdida mínima,
en 1019 seg. En este proceso de transferencia es determinante el ordenamiento preciso en la
membranadelostilacoides de los componentesdela antenay del centro de reacción.

La clorofila del centro de reacción se oxida: pierde un electrón

Lasantenas, centros de reacción y transportadoresde electrones(figura 8) conformanlos fotosistemas:
el fotosistema | (PSI) o P700 (cuyo centro de reacción tiene el máximo de absorción a 700 nm)y el
fotosistema|! (PSI!) o P680 (cuyo centro de reacción tiene un máximode absorción a 680 nm).
Cuandoun fotón excita a un pigmento antena del PSII, un electrón se eleva a un potencial másalto, y
cuando vuelvealnivel basalla energía estransferida a otro pigmento antenay así sucesivamente hasta
que se excita el centro de reacción P680, que pierde un electrón. El electrón que pierde el P680 es
captado porla feofitina, una clorofila sin Mg. A partir de la feofitina una cadena de transporte electrónico
lleva al electrón al centro de reacción del PSI(figura 8). El PSII sin el electrón queda como unradical
catiónico (con carga +).
El PSII requiere de un electrón parallenar el hueco electrónico que se generó. En esto es clave el papel
del agua, que mediantela fotólisis se descompone en 2H*y 2 e(figura 8). Estosúltimosllegan, de a
uno, al P680 oxidado(figura 8), mientras el oxígenoselibera a la atmósfera como O.
Cuandoun fotón excita a un pigmento antena del PSI, ocurre lo mismo que enla antena del PSII. Un
electrón se eleva a un potencial más alto y comienza una transferencia de excitación entre pigmentos
de la antena, de manera que la energía estransferida al centro de reacción P700. Este se oxida, y el
electrón perdido es captado por un aceptor primario diferente al del PSII (figura 8).

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El electrón cedido por el P700 pasa por una secuencia de transportadores y después de una serie de
reacciones redox, reduce al NADP a NADPH.H (figura 8). El NADPH.H aporta enla fase defijación de
CO¿el poderreductor necesario para reducir el CO» a glucosa(figura 10).
Observar que ocurre un continuo flujo de electrones desde el agua hasta el NADPH.H, según se
observa en el diagrama Z representado enla figura 8. En este flujo no cíclico de electrones ocurren
reacciones redox, donde pierden gradualmente energía que es usada para generar un gradiente
protónicoy sintetizar ATP.
Cuando no esnecesario el poder reductor ocurre el flujo cíclico de electrones. En este, los electrones
del P700llegana la ferredoxina, y en lugar de derivar al NADP vuelven nuevamente al P680(figura 8):
el flujo cíclico permite producir ATP sin reducir al NADP.

Flujo cíclico de electrones

Fotosistema Il Cadena m transporte

Energía de las moléculas

Fotón
Flujo acíclico de electrones

Figura 8. Diagrama Z: una representación delflujo de electronesa través delos fotosistemas. En el mismo diagrama
se puede observartanto el flujo cíclico de electrones comoelnocíclico. Los electrones son excitados porla luz y
pasan por una cadena transportadora de electrones a favor de un gradiente de energía hasta llegar al PSI, donde se
había generado un hueco electrónico. Desde el centro de reacción del PSI sale un electrón por vez, que reduce al
NADP, previo pasaje por una cadena detransportadores. Modificado de ecogenesis.com.ar

La energía de los fotones genera un gradiente protónico que permite la producción de ATP
La energía liberada por los electrones entre el PSII y el PSI es utilizada para bombear protones contra
gradiente electroquímico, a través de una membrana impermeable a H*, desde el estroma hacia el
interior delostilacoides(figura 9).
Este bombeo de protones desde el estroma produce alcalinización en este compartimento (pH 8) y
acidificación del espacio intratilacoidal (pH 5). El potencial electroquímico que se genera a amboslados
de la membrana tilacoidal hace que los H* pasen al estroma, a través de los canales protónicos CFo
(figura 9). La energía liberada es usada para la conversión de ADP + P¡ en ATP, proceso conocido
comofotofosforilación.
La disposición delos transportadoresde electrones y de la ATPasa en la membranatilacoidal(figura 9),
hace que el ATP y el NADPH.H se sinteticen del lado del estroma, donde serán consumidos en la
fijación de CO».
En mitocondrias y cloroplastos el mecanismo desíntesis de ATP se explica a través de la generación
de un gradiente protónico. Una diferencia entre ambos es en la orientación del gradiente: en la
mitocondria se establece desde el espacio intermembranaa la matriz (de afuera a adentro), con la

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ATPasa dirigida hacia la matriz, mientras que en los cloroplastos es desde el espacio intratilacoidal
hacia el estroma (de adentro hacia afuera), con la ATPasadirigida hacia el estroma(figura 9).

Anterior del tilacoide o

Complejo
citocromo
Fatosistema ll

Estroma
Fotosistema 1 a

Figura 9. Esquema del proceso defotofosforilación. La energía liberada por los electrones es usada para bombear
protones desdeel estroma al espacio tilacoidal. Esto crea un gradiente electroquímico cuya energía permite que los
protones se muevana favor del gradiente a través del complejo de CFo, y enla ATP sintetasa (CF1) se fosforila el
ADP. Modificado deeuita.upv.es

Fasedefijación de CO,
La fijación de CO»y su reducción a moléculas glucídicas (CH20)n se da enelestromadel cloroplasto a través de
reacciones reductivas, fuertemente endergónicas: el poder reductor (NADPH.H) y la energía (ATP) son
producidosenla fase luminosa.
Según el mecanismo de fijación de CO,se establecen tres modelosfotosintéticos, el de las plantas Cz, el de las
Cay el de las CAM (Crassulacean Acid Metabolism). Las más abundantes son las plantas C3, es decir, las que
sólo presentan ciclo C3, porque tanto las plantas C4 como CAM presentan además un ciclo C3.
Ciclo C3 o ciclo de Calvin: permite la conversión del CO; en glúcidos
+ La energía y poder reductor generadosenlas reacciones fotoquímicas se usan para la conversión del
CO,en glúcidos enelCiclo de Calvin(figura 10). Este ciclo ocurre en el estromadel cloroplasto, donde
se encuentran las enzimas que catalizan la conversión de dióxido de carbono (CO) en glúcidos(triosas
y glucosa).
+ El CO,ingresa a través de los estomas (figura 2) y se une al aceptor, la ribulosa 1,5 bifosfato, por
acción de la enzima rubisco (ribulosa bifosfato carboxilasa oxigenasa). La rubisco constituye
aproximadamente el 50% de las proteínas del cloroplasto y es la proteína más abundante en la
naturaleza.
+ El primer producto estable después de la carboxilación es el ácido 3 fosfoglicérico (3PGA), un
compuesto de 3 carbonos, al que se debe la denominación de ciclo C3. En “un ciclo” sefijan 6 moles de
COza 6 molesde ribulosa 1,5 bifosfato, y se forman 12 moles de 1,3PGA con un consumode 12 moles
de ATP(figura 10).
+ Para llegar a moléculas de glúcidos es necesaria la reducción del 1,3PGA a GA3P,lo que se logra con
12 moles de NADPH.H (figura 10): observar quela dirección de las reacciones son las mismas que las
ocurridas en la glucogénesis.
+ El ciclo se cierra con la regeneración del aceptor, ribulosa 1,5P a partir de 10 moles de GA3P y el
consumo de 10 moles de ATP: 10 GA3Px 3C = 30C(6 ribulosa 1,5P x 5C = 30C).

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 FOTOSÍNTESIS

+ Por otro lado los 2 moles de GA3Prestantes puedensintetizar glucosa en el cloroplasto y acumular
almidón, o pueden ser transportado al citosol y ser usado en la glucólisis, o sintetizar glucosa y
sacarosa, entre otros compuestos carbonados.

+ En períodos de oscuridad las células fotosintéticas se comportan como heterótrofas, y las células de
tallos no fotosintéticos y raíces siempre se comportan como heterótrofas, de manera que dependen
para su nutrición de moléculas glucídicas como la sacarosa, quellegan desdelostejidos fotosintéticos
vía floema.

6 (Ribulosa 1,5 bifosfato)

clip (5C) 6.C0,(1C)

SATP

6 (Ribulosa 5 fosfato) ;
(5) CICLO 12 (Ácido 3 fosfoglicérico)
DE CALVIN 60)

12 ATP
10GA3P

12 ADP
' (Glicealdehido 3 ES12 (Ácido 1,3 bifosfo-glicerico)
(30) (3C)
P
Ñ qu 12 SS12 NADPH
GLUCOSA
(60)

Figura 10. Esquemadel ciclo de Calvin. Se indica el número de moléculas que participan para sintetizar una
molécula de glucosa: 6 CO», 12 NADH.H y 12 ATP. Tomado de kambry.es

La rubisco puede carboxilar u oxigenara la ribulosa 1,5 P

La enzima rubisco está formada por 16 subunidades, 8 mayorescodificadas en el ADN del cloroplasto, y 8
menorescodificadas en el ADN nuclear.
+ Larubiscotiene la propiedad de unir en el mismo centro catalítico al CO, o al O,, es decir tiene dos
sustratos, y cataliza la carboxilación o la oxigenación: de ahí su nombreribulosa 1,5 bifosfato
carboxilasa oxigenasa.
+ Cuandola enzima actúa como carboxilasafija CO,a la ribulosa 1,5P dando comienzoelciclo C3: se
asimila el carbono. Cuando la enzima actúa como oxigenasa, y oxigenaa la ribulosa 1,5P, comienza un
proceso conocido comofotorrespiración figura 11.
+ Si bien enla atmósfera hay un 21% de O» y un 0.03% de CO,la ku dela rubisco por el COzes 12 uM,
mientras que la ku porel O, es 250 uM. Esto hace quela asimilación del CO, sea mayora al
incorporación de O,a la ribulosa 1,5P, es decir, a la fotorrespiración.

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 FOTOSÍNTESIS

Rubisco
Fotorrespiración Fijación de CO»

O. xi C02
2_ Ribulosa 1-5P

CO, Glucosa

Figura 11. Fotorrespiración y asimilación de carbono. La rubisco puede actuar como

carboxilasa dando origen a la fijación de CO», es decir a la asimilación de C, o como
oxigenasa dando origena la fotorrespiración.

La función de la fotorrespiración es más evidente en plantas en condiciones de estrés

La capacidad oxigenasadela rubisco tiende a ser vista como un mecanismoinútil para la planta, porque desde
el punto de vista de la eficiencia, no se aprecia una funciónútil para la planta: la fotorrespiración no conducea la
fijación sino a la pérdida de CO, con gasto de ATP.
+ En condiciones normalesde presión parcial de O, y CO, en atmósfera, hasta el 50% del carbonofijado
por la fotosíntesis puede perderse por fotorrespiración. Así, este proceso reduce la eficiencia
fotosintética en algunasplantas.
+ La importancia de este proceso es más comprensible en plantas en condiciones de estrés. A partir de
resultados observados en plantas de tabaco, en las que se logró disminuir la velocidad de la
fotorrespiración mediante ingeniería genética, se encontró que las plantas con niveles normales de
fotorrespiración toleraron másla alta intensidad lumínica, respecto a las plantas con fotorrespiración
disminuida.
Ciclo C4: las plantas con esta estrategia minimizanla fotorrespiración

+ Plantas como Paspalum, maíz y caña de azúcar,entre otras, tienen una vía de captación de CO»
conocida comociclo C4 que minimiza el proceso defotorrespiración. Este ciclo ocurre enel citosol
de las células del mesófilo, mientras que el ciclo C3, que ocurre seguidamenteal ciclo C4, lo hace
enlos cloroplastos de las células dela vaina (figura 12).

Célula
del mesófilo

Célula de
la vaina

Figura 12. Corte trasversal de una hoja de Paspanum, una gramínea C4. Laboratorio de
Botánica, Facultad de Agronomía.

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 FOTOSÍNTESIS

Enlas plantas C4 la PEP carboxilasa incorpora el CO, a una molécula de fosfoenolpiruvado (PEP),
de 3 carbonos, que se transforma en oxalacetato (OAA), de 4 carbonos (figura 13). El OAA se
transforma en malato (o en aspartato), que pasaa la célula de la vaina donde hay cloroplastos con
rubisco. Enla célula de la vaina el malato es decarboxilado y rinde CO» y una molécula de 3C
(figura 13).
Mientras la molécula de 3C vuelvea la célula del mesófilo y regenera el PEP, con gasto de ATP,el
CO» es usadoporla rubisco para carboxilar a la ribulosa 1,5P y dar comienzoalciclo C3 (figura
13).
Enlas células de la vaina la concentración CO, puede ser tres o cuatro veces mayor que su
concentración en la atmósfera. De esta forma se evita buena parte dela actividad de oxigenasa de
la rubisco,y la fotorrespiración no es evidente:las plantas C4 minimizanla fotorrespiración.
Esta estrategia hace a las plantas C4 máseficientes que las plantas C3, si se relaciona fotón
absorbido con CO»fijado, ambas en su condición óptima. Enlas plantas C4 la condición óptima se
caracteriza por requerimientosdealta cantidad de luz, y elevada humedady temperatura.

Figura 13. Esquema general dela fijación de carbono porlas plantas C4. En las
células del mesófilo el CO2 se une al PEP poracción de la enzima PEPcarboxilasa
(PEPc). El producto de esa reacción, de 4C, pasaa la célula de la vaina y abastece
de CO2alciclo de Calvin (o ciclo C3) y permite la regeneración de PEP a partir del
ácido piruvato(de 3C). Tomadode fisicanet.com.ar

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 FOTOSÍNTESIS

Plantas CAM

Comovimoshaytrestipos de plantas según el mecanismofotosintético que presenten: las Cz, las C4 y las CAM
(Crassulacean Acid Metabolism). Ahora que están todos los mecanismosfotosintéticos descritos es importante
hacer énfasis que, mientras que las plantas C3 sólo presentan el ciclo C3 para fijar CO,, las plantas C4 y las
CAMpresentanotro ciclo previo al C3, pero todas cuentan conun ciclo C3.

Las crasuláceas, cactáceas, bromeliáceas, y orquídeas son plantas con CAM.

La mayoría de las plantas son Cz, de todas formas las plantas Ca, y las CAM están presentes en la
mayoría de los ecosistemas,si bien las plantas CAM (Figura 14) están adaptadas a condiciones
extremas de temperatura y sequía, como ocurre en zonas desérticas.

Figura 14. A la izquierda especies del género Crassula y Kalanchloe, a la derecha una cactácea.
Prof. E. Marchesi, Laboratorio de Botánica Facultad de Agronomía.

En las plantas CAM ocurren dos carboxilaciones en la misma célula, en diferente momento

Durante la noche, cuando los estomas están abiertos porque la temperatura desciende y la pérdida de
agua por evapotranspiración es mínima, el CO, ingresa a la planta y por acción de la enzima PEP
carboxilasa se carboxila el PEP (Figura 15). Durante el día, en presencia de ATP y NADPH.H
generadosenla fase luminosa, ocurrela fijación de CO,porla rubisco a través delciclo C3:el ciclo C3
es comúna todoslos modelosfotosintéticos.
Las plantas CAMfijan el CO» al PEP en la primera carboxilación y sintetizan oxalacetato, que se
transforma en malato durante la noche. El malato que se almacena en las vacuolas de las células del
parénquima es responsable del descenso del pH enlas hojas durante la noche. El pH aumenta durante
el día a medida que se consume el malato.
La descarboxilación del malato suministra CO,a la rubisco, que cataliza la segunda carboxilación con la
puesta en marcha del ciclo C3, que ocurre durante el día (Figura 15). El piruvato generado por
decarboxilación del malatocierra el ciclo.
En las plantas CAMla fijación de CO,está separada temporalmente en eldía y la noche, mientras que
en las plantas C4 la separación es espacial, es decir, en dostipos de células, las del mesófilo y las de la
vaina.
Las plantas CAM en general son facultativas, es decir tienen metabolismo CAM en determinadas
condiciones ambientales y metabolismo Cz en otras. Si bien las plantas con esta modalidad defijación
de CO,son características de regiones con climas extremos,su distribución geográfica es extensa,lo
que probablemente logren porla flexibilidad metabólica que tienen para cambiar entre la modalidad C3
y CAM. Es más, es común quelas plantas CAM funcionen como C3 en determinados momentos del
día.

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 FOTOSÍNTESIS

NOCHE DÍA

a E
k =
ATP

Q
NADPH.H

Figura 15. Esquema del proceso de fijación de CO» por una planta CAM. Los estomasabiertos
durante la noche permiten el ingreso de CO», que se acumula como grupo carboxilo del oxalacetato.
Duranteeldía la actividad de la fase luminosa genera ATP y NADPH.H, que permiten la reducción
del CO» aportadoporel malato a través delciclo C3.

+ Comola PEP carboxilasa y el CO» liberado de la decarboxilación del malato están en el mismo
compartimiento, si la enzima no estuviera regulada se generaría un ciclo fútil de carboxilación -
decarboxilación. Por esto es necesario que la PEP carboxilasa esté regulada de tal manera que se evite
que el CO,liberado de la descarboxilación del malato sea nuevamente captado por el PEP para volver
a para formar malato. Durante el día se evita esta situación porque la PEP carboxilasa está inhibida por
malato, y durante la noche la PEP carboxilasa se activa, incluso en presencia de malato, por
modificación covalente de la enzima:se fosforlila un residuo serina.

Bibliografía
Nelson y Cox, Lenhinger principios de bioquímica. Editorial Omega. Ediciones varias.
Karp, C. Biología Celular y Molecular. Editorial McGraw-Hill Intermericana. 1996.
http://www.alaquairum.net/fotosintesis.htm
Links - Videos
http:/www.youtube.com/watch?v=BYWJHwF_yok8;hl=es
http://www.youtube.com/watch?v=HU03xpcPTVc8feature=related
http://www.youtube.com/watch?v=a8vFp_3vFEk8feature=related
http://www.youtube.com/watch?v=mHU27qYJNUO

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