AISLAMIENTO Y SELECCIÓN DE MICROORGANISMOS

LABORATORIO DE MICROBIOLOGÍA

UNIVERSIDAD DEL VALLE

SEDE TULUA
TECNOLOGÍA EN ALIMENTOS
TULUÁ
10 - 02 - 2015

RESUMEN
Esta práctica se realizó con el objetivo de aprender a crear un medio de
cultivo, para esto se debe esterilizar el lugar donde se realizó la práctica para
evitar el crecimiento de algunos microorganismos que están presentes en el
ambiente.

Después de realizar el cultivo y dejarlo a temperatura ambiente durante 48

horas, se observó que crecieron algunas colonias de levaduras, y otros
microorganismos que se reproducen a temperatura ambiente( mesófilos).
 INTRODUCCIÓN

La microbiología es el estudio de los organismos microscópicos y de sus

actividades. Su estudio es de gran importancia en el sector agroindustrial, por las
aplicaciones que tienen dentro de los alimentos y por las alteraciones que estos
pueden causar.

La elección del del método de esterilización va a depender de su naturaleza y del

material con el que va a ser tratado en nuestro caso utilizamos la esterilización por
autoclave, que es un instrumentos para hervir el agua bajo presión.

MARCO TEÓRICO
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el
crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la
especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían
considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien
en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que
necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial

debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y
presión de oxígeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez o
alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de
crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo
contaminante.

Por otro lado se puede decir que la microbiología empieza su verdadero desarrollo
como ciencia en el momento en que se descubre el microscopio y comienza la
observación de los primeros microorganismos, pero es indudable que la puesta a
punto de los medios de cultivo y la utilización del agar como solidificante, marcan
dos importantes puntos de inflexión en su evolución.
La primera noticia de la utilización de medios de cultivo nos llega del micólogo
Brefeld, que consiguió aislar y cultivar esporas de hongos en medios sólidos
realizados a base de gelatina.
Sin embargo este sistema no era adecuado para las bacterias (por su menor
tamaño) y no fue hasta el año 1878 cuando Lister popularizó un método enfocado
al cultivo puro basado en diluciones seriadas en un medio líquido.

En el año 1882 tiene lugar uno de los grandes avances de la microbiología en

relación con los medios de cultivo: el médico alemán Walter Hesse introduce el
agar-agar (polisacárido extraído de algas rojas) como solidificante.
En 1887 un ayudante de Koch llamado Petri, comienza a utilizar placas de cristal
planas, que se llaman desde entonces placas de Petri, para sustituir a las clásicas
bandejas de vidrio cubiertas con campanas que se usaban hasta entonces.
 DIAGRAMA DE FLUJO

AISLAMIENTO Y SELECCIÓN DE
MICROORGANISMOS

Se esteriliza el lugar donde se va

prepara el medio de cultivo
Se dejan las tres cajas de
Pesar petri a temperatura
ambiente por 48 horas

2,82 g de PCA

Adicionar

Erlenmeyer Agregar 120 mL de agua

homogenizador de chorro

Papel Envolver Cajas de Petri con PCA

vinilpell
Se deja durante 40 minutos en el solidificado
autocalve

Rotular
Se dejan las cajas de Petri
Agregar con un pequeño agujero
cajas de Petri
durante 20 minutos para que
se solidifique el PCA
 RESULTADOS

CARGA MICROBIANA
CLASIFIQUE ( 30-300; >
CAJA Nº CONTEO IMAGEN
300; < 30; Inc)

1 entre 30-300 50 UFC/gr

2 entre 30-300 53 UFC /gr

3 entre 30-300 42 UFC/gr

OBSERVACIONES: Como se observa en las imágenes crecieron distintos tipos de

colonias, entre ellas estuvieron algunas bacterias, levaduras y mohos, cuyas
características físicas varían; por ejemplo los mohos tienen una estructura con
algunas vellosidades blancas parecidas a un copo de nieve, las levaduras y
bacterias presentan color amarillo o negro

El medio de cultivo AGAR del laboratorio de la universidad del valle curso de

microbiología grupo # 3, enviado para análisis en la fecha 11 febrero de 2015,
presenta un conteo de CE 30-300 ufc/g, para el indicador mesófilos
 CONCLUSIONES

 Se esterilizó todo el material utilizado que haya tenido contacto con

microorganismos.
 Se Manejó en todo momento un ambiente de esterilidad para evitar
contaminación.
 Se prepararon tres medios de cultivo para el crecimiento de
microorganismos presentes en el ambiente
 Se determinó que para que hayan excelentes resultados en los medios de
cultivo debe haber una completa esterilización de todo el lugar, además de
no hablar, o hacer cualquier acción que pueda afectar los cultivos, pues
todo lugar está lleno microorganismo.
 El medio de cultivo trabajado en el laboratorio corresponde a un medio
sólido.
 WEBGRAFÍA

MEDIOS DE CULTIVO
● https://sites.google.com/a/goumh.umh.es/practicas-de-
microbiologia/indice/preparacion-de-medios-de-cultivo
● http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioMedios.htm