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tomate
Asignatura: Biología
Número de palabras:
Septiembre 2018
ÍNDICE
Asignatura: Biología ................................................................................................................ 1
Número de palabras: ............................................................................................................... 1
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................... 3
CAPÍTULO I ............................................................................................................................ 5
1 Marco Teórico .................................................................................................................. 5
1.1 Tomate (Solanum lycopersicum) ......................................................................................... 5
1.2 Oídio (Oidium neolycopersici) ............................................................................................. 6
1.3 Lecanicillium lecanii ............................................................................................................ 8
1.4 Cola de caballo (Equisetum arvense) .................................................................................. 8
1.5 Azufre ................................................................................................................................... 9
CAPÍTULO II ........................................................................................................................ 11
2 Diseño de estudio ............................................................................................................ 11
2.1 Hipótesis ............................................................................................................................. 11
2.2 Ojetivos ............................................................................................................................... 11
2.3 Elección de variables ......................................................................................................... 12
2.4 Materiales ........................................................................................................................... 12
3 Procedimiento ................................................................................................................. 14
3.1 Cultivo de planta de tomate .............................................................................................. 14
3.2 Preparación de fungicidas................................................................................................. 16
CAPÍTULO III ....................................................................................................................... 18
4 Resultados ....................................................................................................................... 18
5 Análisis y discusión ........................................................................................................ 21
6 Evaluación ...................................................................................................................... 24
CONCLUSIONES.................................................................................................................. 26
REFERENCIAS ELECTRÓNICAS .................................................................................... 29
BIBLIOGRAFÍA ELECTRÓNICA ..................................................................................... 30
2
INTRODUCCIÓN
El tema central de esta monografía, es el uso de distintos fungicidas ecológicos que puedan
El tomate es una planta originaria del Perú, sin embargo, en los últimos años, su producción
en dicho país ha ido decayendo por diversos motivos, entre los que se encuentran las diversas
plagas que lo atacan, siendo estas de diversos agentes biológicos. Esto ocaciona que sea
fumigada con elementos nocivos para el ser humano, por lo que, según la lista de
Environmental Working Group (EWG) (2017)1 es una de las plantas con mayor contenido de
residuo de pesticidas.
Esta monografía se centrará en la enfermedad del oídio en la planta del tomate, causada por
dicho hongo utilizando tres fungicidas de diferente origen: dos de origen biológico y uno de
origen químico, para esto, se utilizará un fungicida a base del hongo Lecanicillum lecanii, otro
a base de una infusión de cola de caballo (Equisetum arvense) y el químico estará compuesto
3
a base de azufre en polvo, estos fungicidas fueron elegidos debido a las propiedades
eficiencia en el control de la población del oídio en el tomate para proponer una alternativa
ecológica ante el control de dicha plaga y saber también en este investigación, cuál de las dos
se adentrará en la actividad química de cada fungicida, pues el fin de este trabajo será evaluar
4
CAPÍTULO I
Para ello se dará a conocer primero algunos conocimientos previos sobre los elementos que
1 Marco Teórico
La planta del tomate pertenece a la división de las angiospermas siendo una dicotiledónea,
de esta manera algunas características principales de esta planta son una raíz principal y muchas
raíces secundarias, hojas compuestas e imparipinnadas, con foliolos peciolados, tallo de grosor
5
mediano con tricomas, una flor de 5 pétalos de color amarillo en la inflorescencia y el fruto
rojo conocido como tomate. (Alvarado, P., Escalona, V., Martin, A., Monardes, H. & Urbina,
Esta planta necesita de cuidados muy estrictos pues requiere ciertas condiciones
del ambiente debe ser entre 18 C° a 25 C°, con una humedad relativa entre un 60% a 80%. El
suelo debe ser permeable, debe tener una ligera acidez (5,5 – 6,8 PH) y sobretodo debe ser
El riego también tiene sus requisitos pues, “un buen riego es el que se aplica cuando la
planta lo requiera, de acuerdo con el período en días que se deja entre dos riegos sucesivos y
el agotamiento del agua del suelo” pues “las plantas consumen agua debido al efecto de las
6
raramente se le puede encontrar en cadenas de 2 a 6 conidios. Se disemina en el ambiente de
forma aérea y es un patógeno muy común en invernaderos. Una humedad relativa entre 80% y
temperaturas entre 15-28 °C favorecen su crecimiento y proliferación. (Gurr, S., Jones, H. &
El patógeno se disemina dentro de las plantas mediante filamentos, que “originan por
tabicación unas cadenas de conidios o gérmenes reproductores que sirven para propagar la
enfermedad…” (Manzano, J & Meoro, P., s.f., p.286), penetrando en las hojas de la planta
A simple vista, la población de este hongo se caracteriza por formar pequeñas manchas
circulares blanquecinas polvosas en las partes infectadas. (Manzano,J & Meoro, P., s.f.) En las
planta sobrevive, una baja calidad de fruto. (Gurr et al, 2001, p.303).
Los autores citados anteriormente proponen como alternativa para controlar a este patógeno
7
1.3 Lecanicillium lecanii
propiedades como insecticida para controlar plagas de áfidos. Sin embargo, diversos estudios
han demostrado que posee la habilidad de ser micoparásito de algunos hongos. Akiyama et al.
(2004) en su investigación, demostraron que usando la cepa del hongo directamente tenía
mejores resultados y necesitaban 40%-60% de humedad relativa para controlar el oídio que
ataca a las plantas del pepino y del melón, que usando el hongo como producto industrial que
necesitaba 97% de humedad relativa tanto en un ambiente de invernadero como uno al aire
libre. Así mismo, Askary, H., Benhamou, N. & Brodeur, J. (1997), demostraron que el modo
de acción de este hongo contra el oídio de la planta del pepino era mediante la liberación de la
enzima quitinasa cuya función es degradar la quitina presente en las paredes celulares de los
hongos.
Es una planta originaria de América, Santana, R. (2014) indica que “es una hierba perenne,
rizomatosa, robusta y áspera al tacto, debido a la presencia de incrustaciones de sílice.” (p. 18)
Esta planta además tiene un alto contenido en minerales como el sílice, y saponinas tóxicas
como la Equisetonina y el ácido silícico (Santana, 2014, p.19) ambas tóxicas para los hongos,
lo que las hace eficaces para el control de diversos tipos de hongos que infectan a la planta. Así
mismo, Santana, R. (2014) reconoce que “posee flavonoides como Isoquercitósido, galuteolina
8
o equisetrina, … determinados ácidos orgánicos como nicotina, palustrina o dimetilsulfona”
(p.18). “Todos estos componentes hacen que la cola de caballo sea uno de los fungicidas más
Debido a estas propiedades es que se la utiliza como un fungicida ecológico, pues “favorece
El mismo autor comprobó en su investigación que el método más efectivo para el control
del hongo fitopatógeno de la roya, en la planta de cebolla, fue el de maceración, por lo que se
1.5 Azufre
completamente conocido. Ferreira, M., Lavres, J. & Sabino, H. (2007), resumen las principales
(Williams y Cooper, 2004), Las células de los hongos son permeables al S 0 (las esporas
9
fenómeno, puede producir una modificación del estado de oxidación complejo
10
CAPÍTULO II
2 Diseño de estudio
2.1 Hipótesis
Mi hipótesis es que el biofungicida a base de Lecanicillium lecanii, será más efectivo que
los otros 2 al estar conformada por seres vivos
2.2 Ojetivos
otro a base del hongo Lecanicillium lecanii) y un fungicida químico a base de azufre en el
del fitopatógeno.
cualitativos y cuantitativos.
11
2.3 Elección de variables
Las variables que se tomaron en cuenta para este experimento fueron las siguientes:
Variable independiente
Variable dependiente
cada planta por el hongo patógeno, por cada día de toma de datos.
Variables controladas
Cantidad de agua regada a las plantas de tomate (agua requerida por cada planta)
2.4 Materiales
Se elaboró este cuadro para mostrar de manera más legible los materiales, equipos y
12
MATERIALES
Cultivo de plantas de tomate Fungicida a base Fungicida a base de Fungicida a base de
de Lecanicillium Cola de caballo azufre
lecanii (Equisetum arvense)
2
Se obtuvo la cepa de la Universidad Nacional Agraria La Molina (UNALM), esta fue dada en un medio de
cultivo a base de arroz, el cual fue esterilizado 2 veces antes de que se le inoculara una población de
Lecanicillium lecanii procedente de una placa de agar. Se dejó que crecieran las colonias en el arroz durante 20
días y después se mantuvieron en refrigeración a 5 C° hasta su uso.
13
3 Procedimiento
Se utilizaron 4 cajas de plástico como macetas para el cultivo de las plantas de tomate. Se
realizó la siguiente distribución para obtener un mínimo de 10 plantas por maceta y cada planta
A A A A A A A A
12.5 cm 12.5 cm 12.5 cm 12.5 cm
B B B B B B B B
12.5 cm 12.5 cm 12.5 cm 12.5 cm
C C C C 75cm C C C C
75cm 75cm 75cm
12.5 cm 12.5 cm
12.5 cm 12.5 cm
D D D D
D D D D
12.5 cm E E
12.5 cm 12.5 cm 12.5 cm E E
E E E E
46 cm
46 cm 46 cm 46 cm
Para la plantación en cada caja plástica se vertieron una bolsa de tierra de chacra de 30kg,
una bolsa de tierra preparada de 20 kg y una bolsa de tierra universal de 18kg (todas de la marca
ViveroEstaciones) y se pasó a mezclar las tres tierras con una pala. Luego, se crearon 4 huecos
de ½” de diámetro en la parte inferior de las cajas para que desfogara el agua. Se utilizaron 5
tomates a los cuales se los cortó en ocho pedazos, se extrajeron solamente las venas que
cada hueco de la misma hilera y un espacio de 23 cm entre las dos columnas. Se pasó a regar
con agua según los requerimientos de la planta en un rango de 10 a 15 segundos a una misma
14
presión cada día. Se dieron los cuidados respectivos para las plantas como remoción de otras
plagas o malas hierbas y abonado y se esperó a que se infectara con el oídio. Cuando se
encontró la primera mancha blanca en una planta, se pegó una cinta adhesiva en una hoja
Después de la infección, los cajones fueron aislados con planchas de cartón para evitar que
Se trató de esperar a que las plantas estuvieran en un estado de infección similar el que se
calculó mediante el conteo de hojas infectadas y el área total infestada en cada planta con una
regla.
Solo se llegaron a infectar 5 plantas similarmente por cada cajón en el tiempo establecido y
cada una de ellas se le roció con 40 splash de un fungicida quedando un cajón a modo de
control.
15
3.2 Preparación de fungicidas
Para la preparación del fungicida a base del hongo Lecanicillium lecanii se tuvo como
uso de una gota de emulsificante Tween por 1ml de aceite de canola (tomado de Urquhart) y
la forma en como se calcula la concentración de 107 esporas/ml del fungicida al no contar con
arroz, se agitó moderadamente, y luego con una pipeta milimetrada se absorbió 1ml del
añadió con una pipeta de plástico 1 gota de azul de lactofenol para la tinción del hongo, para
una mejor observación de este en el microscopio óptico a un aumento de 400x, esto, con el
3 En su investigación Urquhart utiliza 20ml aceite de canola por 100 ml de fungicida para comprobar si podía
sustituir a un emulsificante industrial para la conservación de humedad durante la preparación de su fungicida a
base de la levadura Tilletiopsis pallescens, obteniendo resultados positivos. Sin embargo, se tuvieron que hacer
pruebas para hallar el volumen de aceite requerido por el Lecanicillium lecanni al usar cada estudio un
volumen diferente de emulsificantes para sus respectivos fungicidas.
4Este método consiste en la elección de un determinado número de campos al azar dentro
de 1cm2 establecido en el portaobjetos, “se multiplicará por el promedio del número de
células por campo y después por 100 (si se vierte 0.01 mL) el resultado será igual al número de
células por mililitro”
16
Para el fungicida a base de Equisetum arvense se usó un ramo de 50 g. Este fue cortado
en trozos más pequeños con una tijera y se dejaron macerar en un recipiente con 500 (±5) ml
Para el fungicida a base de azufre, se mezclaron 2.5g del polvo con 500 (±5) ml de
agua destilada.
Los fungicidas fueron colocados en tres pulverizadores y se calibró cada uno con una pipeta
17
CAPÍTULO III
4 Resultados
Para el cálculo de área total afectada, primero se tuvo que calcular el área infectada en cada
hoja y después se sumó las áreas infectadas de cada hoja no se podía sumar todos los diámetros
18
C1 14 3864.39 21 3528.45 24 4621.77 17 2933.13
C2 26 4985.39 8 258.28 24 204.76 10 544.76
C3 20 743.29 25 810.36 30 1683.28 38 2947.23
C4 15 830.24 18 1240.76 30 1839.96 44 2368.02
C5 12 530.29 15 648.42 17 1075.94 20 1632.28
Cuadro 2 Resultados por cada planta
H0 = NO hay Efecto
H1= Sí es efectivo (no hay cambios,
45
40
35
30
25
20
15
10
0
ANTES DE LA 1 DÍA DESPÚES 3 DÍAS DESPUÉS 7 DÍAS
APLICACIÓN
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ÁREA TOTAL INFECTADA EN 𝑚𝑚^2 POR
PLANTA
Verticillium 1 Verticillium 2 Cola de caballo 1 Cola de caballo 2
Azufre 1 Azufre 2 Planta Control 1 Planta Control 2
16000
14000
12000
10000
8000
6000
4000
2000
0
ANTES DE LA 1 DÍA DESPUÉS 3 DÍAS DESPUÉS 7 DÍAS DESPUÉS
APLICACIÓN
Suma de cuadrados
SC Total 884402721
SC Intra 161612198.7
SC Entre 722790522.2
Cuadrados medios:
5 Consultar anexos 2
20
CM( Entre) 65708229.29
CM (Intra) 4753299.963
13.8237077 por consiguiente si habrán diferencias notorias entre la eficacia de los fungicidas
5 Análisis y discusión
Mediante los datos cuantitativos presentes en el cuadro y los datos cualitativos de cada
aplicación. Las plantas que mejor resultado obtuvieron tras el primer día fueron las fumigadas
con el fungicida a base de Cola de Caballo, la CC1 mejoró tanto en la disminución de hojas
infectadas como la de área total infectada pues los círculos de oídio de dicha planta eran menos
nítidos que los anteriores. Le siguieron en mejoría la planta CC2, que disminuyó el área
infectada, aunque el número de hojas infectadas se mantuvo igual, aunque con una menor
nitidez en las colonias de oídio y la planta A1 pues aunque no hubo una mejoría cuantitativa,
cualitativamente se apreció una menor nitidez en las colonias también. Las plantas que no
mostraron mejoría fueron A2, L1,L2, C1 y C2 que tuvieron un aumento tanto en el número de
hojas infectadas como área total infectada, inclusive aunque se aprecie una disminución de
hojas infestadas y/o área total afectada esto es debido a las hojas necrosadas que murieron
durante la experimentación, puesto que en las plantas más infectadas, la infección del patógeno
llegó a un punto máximo (evidenciado en el gráfico 2) que estas plantas no pudieron soportar
6 Consultar anexo 1
21
y trajo como consecuencia la aparición de hojas necrosadas, lo cual demuestra también el grado
El hecho de que en las plantas donde se aplicó el macerado de Cola de Caballo obtuvieran
una mejoría el primer día confirma las propiedades fungicidas de esta planta y además su rápida
Así mismo, dicha planta demuestra su efectividad tanto en una infección leve (Cc1) como
fuerte (Cc2) aunque en este caso fue en menor medida y corrobora que puede ser aplicada
Por otro lado, el azufre demuestra su propiedad fungicida aunque no tan rápidamente como
la de la Cola de caballo, puesto que en la planta donde hubo una mejoría al igual que en la
CC1, fue la planta infectada con menor magnitud. Pues la A2 tuvo algunas hojas necrosadas
Sin embargo no se debe descartar el efecto del clima frío que se presentó durante la
experimentación (16°C), que también pudo afectar al oídio puesto que era una temperatura por
debajo del mínimo que podía soportar lo cual pudo haber generado que dicho organismo no
esté en las mejores condiciones para soportar la acción de los fungicidas a base de azufre y
Cola de caballo.
22
El fungicida a base de Lecanicillium lecanii no demostró ser eficaz para controlar la
proliferación de área infectada tanto en V1 como en V2 pues los círculos presentaban la misma
nitidez, y las hojas infectadas aumentaban, salvo por la V1 que disminuyó por que las hojas
de que que el hongo tendría el mejor efecto al ser un organismo vivo y tener eficacia con otras
De hojas escogidas al azar de cada planta se sacaron muestras de poblaciones de oídio para
observarlas a nivel microscópico. Sin embargo, en todas las muestras se observa que los
conidios o hifas están en perfecto estado debido a que son los que sobrevivieron, salvo un
conidio con forma irregular en una muestra después de 3 días de aplicación de A2 que
Por otro lado, en las muestras obtenidas de las plantas L, no se identificó al hongo fungicida,
por lo que podría significar que una gran parte de la población de Lecanicillium lecanii no
sobrevivió en la superficie de las hojas, posiblemente porque la cantidad de aceite que se añadió
al fungicida no fue suficiente para mantener la humedad que necesitaba el hongo o porque no
se pudo estimar con una exactitud confiable la concentración en esporas que contenía el
fungicida, por lo que la concentración pudo no ser tan efectiva para controlar al hongo
parasitario o también cabe la posibilidad de que el clima frío haya sido menos favorable para
Lecanicillium lecanii, que para el hongo parasitario, por lo que, sumado a una baja humedad,
posiblemente llevó a una disminución con el tiempo de la supuesta población esparcida por el
fungicida.
23
Tras el primer día resulta más eficiente la cola de caballo y solo 2 fungicidas presentan al
menos una planta mejor que las plantas control, sin embargo con el paso del tiempo la
de hojas infestadas, aumento o aparición de hojas necrosadas o en todo caso, el aumento del
área infectada.
Esto significaría que el efecto de la cola de caballo tiene un efecto inmediato más no tan
prolongado como el azufre, por lo que posiblemente como dice Santana (2014) se necesite
La planta de A2, al 3 día, tuvo todas las hojas infestadas, de color verde opaco, por lo que
el azufre no podría ser efectivo ante tal grado de infección , pues la planta A1 tiene la menor
cantidad de hojas infectadas y presenta una disminución de área total infectada a diferencia de
las demás plantas cuya infección creció, esto demuestra que el fungicida con mejor efecto con
el paso del tiempo ante una infección leve y/o temprana es el azufre. Sin embargo, si se busca
un efecto rápido la Cola de caballo sería la mejor opción aunque necesita ser aplicada con
mayor frecuencia y no por ello significaría que es menos efectivo que el azufre, se podría decir
que entre los dos sus formas de actuar son diferentes, sin embargo ambos son los que mejor
efecto tienen durante un clima frío en contraste con el fungicida a base de Lacanicillium lecanii.
6 Evaluación
24
Tal vez para mejorar la prolongación de la acción del fungicida a base de cola de caballo se
debe aumentar la concentración al aplicar una mayor masa de cola de caballo o dejar más
tiempo el macerado.
En el caso del fungicida a base Lacanicillium lecanii, si se hubiera contado con una cámara
fungicida.
Así mismo, se debe encontrar un volumen adecuado de aceite de canola que pueda prolongar
Por otro lado, se debería realizar este experimento en un ambiente más cálido que beneficie
la proliferación de este hongo, todas estas mejoras en otra experimentación podrían generar
una mejor apreciación de la propiedad fungicida de este hongo que se evidencia contra otros
hongos patógenos.
25
CONCLUSIONES
26
ANEXOS
Anexo 2
27
Cc1 1591.12 632915.7135
Cc2 5791.83 8386323.688
Cc3 3977.05 3954231.675
A1 1663.34 691674.989
A2 4179.38 4366804.295
A3 7813.38 15262226.76
C1 14947.74 55858732.78
C2 5993.19 8979581.595
C3 6184.16 9560958.728
TOTAL 132196.28 722793396.1
28
REFERENCIAS ELECTRÓNICAS
Akiyama, K., Higashio, T., Kishimoto, N., Koike, M., Komori, A., Kuramoti, K., Masuda, E.,
Nagao, H., Sasaki, M., Sugimoti, M., Tani, M. & Yoshida, S. (2004). Verticillium lecanii
(Lecanicillium spp.) as epiphyte and its application to biological control of arthropod pests
and diseases. Recuperado el 18 de mayo de 2018 de,
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wprs_bulletin_2004_27_08/links/545127b60cf2bf864cba8caa/iobc-wprs-bulletin-2004-27-
08.pdf?origin=publication_list
Alvarado, P., Escalona, V., Martin, A., Monardes, H. & Urbina, C. (2009). MANUAL DE
CULTIVO DE TOMATE (Lycopersicon esculentum Mill.). (F. d. Chile, Ed.) Recuperado el
18 de mayo de 2018 de, http://www.cepoc.uchile.cl/pdf/Manua_Cultivo_tomate.pdf
Environmental Working Group (EWG). (2017). Full List EWG's 2018 Shopper's Guide to
Pesticides in Produce™. Recuperado el 28 de marzo de 2018 de,
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f
Gurr, S., Jones, H. & Whipps, J. (2001). Pathogen profile: The tomato powdery mildew
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29
BIBLIOGRAFÍA ELECTRÓNICA
30