TRABAJO PRÁCTICO Nº 9

MEMBRANAS INTERNAS 1
2019

OBJETIVOS

- Comprender que los procesos biomoleculares de la célula ocurren en

compartimientos especializados que se interrelacionan e interconectan directa e
indirectamente generando en la célula un sistema interno de continuidad estructural y
funcional.
- Analizar las relaciones topológicas y el movimiento de macromoléculas/moléculas
entre los distintos compartimentos.

UNIDAD DE CONOCIMIENTO

TEMARIO
- Compartimiento citosólico: Organización. Relaciones topológicas entre los distintos
compartimentos.
- Movimiento de proteínas entre los distintos compartimentos vía citoplasmática y vía
retículo endoplasmático (RE). Señalización del destino de las proteínas. Transporte
regulado, transmembrana y vesicular.
- Transporte de macromoléculas a través de la membrana nuclear: poros nucleares,
transporte activo de proteínas hacia el núcleo y de ácidos ribonucleicos fuera del
mismo.
- Transporte de proteínas a través de las membranas mitocondriales: transporte hacia
los distintos compartimentos mitocondriales.
- Peroxisomas: Funciones. Transporte de proteínas a través de su membrana.
- Retículo endoplasmático liso (REL) y rugoso (RER). Unión de ribosomas al RE.
Péptidos señalizadores/secuencias señales. Procesamiento postraduccional de las
proteínas sintetizadas en el RER: glicosilación, formación de puentes disulfuro.
Funciones del REL.

VOCABULARIO ESPECÍFICO DEL TEMA

Compartimentación - dolicol - glicosilación - detoxificación - lumen - secuencia
señal - peroxidasas - proteínas chaperonas - proteosomas - región señal -
síntesis de novo - translocaciones.

BIBLIOGRAFÍA
- Alberts, B. y otros. Biología molecular de la célula. Ed. Omega. Barcelona, (la edición
más actual que consiga, la última edición disponible es la 6ta).
- De Robertis, E.; Hib, J. y Ponzio, R. Fundamentos de Biología celular y molecular.
Editorial El Ateneo. 2004.

MATERIAL MULTIMEDIA SUGERIDO:

https://www.youtube.com/watch?v=gWxEzfLf0VA
https://www.youtube.com/watch?v=2BwhpNcxLwE
https://www.youtube.com/watch?v=6_i58faa08Y
https://www.youtube.com/watch?v=98q7146_5_k
https://www.youtube.com/watch?v=G-bGxXVCnaU&t=25s
https://www.youtube.com/watch?v=Ajkl3QEJ3-U
https://www.youtube.com/watch?v=NHjT6SMR8E4

1
 UNIDAD DE ACCION

En su casa: el estudiante deberá investigar usando como base el temario

propuesto y contestar el cuestionario guía de estudio a los efectos de
autoevaluar si ha adquirido los conceptos fundamentales requeridos para el
abordaje del trabajo práctico. Utilizando los conocimientos teóricos adquiridos
intentará plantear una solución de los ejercicios de aplicación.
Podrá además ejercitarse luego de la clase resolviendo los problemas
adicionales.

En clase: el estudiante deberá participar en la discusión del temario y resolver

con la ayuda del docente los problemas de aplicación, con el fin de reafirmar
los conceptos teóricos estudiados en su casa y evacuar las posibles dudas.

CUESTIONARIO GUIA DE ESTUDIO

1- a) ¿Cuáles son los principales compartimentos intracelulares en las células

eucariotas?
b) ¿Cuál es el significado biológico de la existencia de compartimentos
celulares?
c) ¿Cuál es la diferencia entre citosol y citoplasma? Describa dónde se
sintetizan, cuáles son las modificaciones post-traduccionales y cómo se
produce la degradación de las proteínas citosólicas.
d) ¿Cuál es el destino de las proteínas sintetizadas en ribosomas libres en el
citosol?

2- a) ¿A qué se denomina sistema de endomembranas? ¿Qué orgánulos

forman parte de la vía biosintética-secretora y endocítica?
b) Explique cómo se interrelacionan los componentes del sistema de
endomembranas.
c) ¿A qué espacio es topológicamente equivalente el interior del RE, del Golgi y
de los lisosomas?

3- a) ¿Cómo se define el destino de las proteínas sintetizadas en los ribosomas

libres y adheridos al RER?
b) Defina y diferencie secuencia y región señal. Describa las características
particulares de las mismas.

4- Explique el mecanismo de transporte de proteínas desde el citosol al núcleo.

¿Se trata de un proceso co o post-traduccional? ¿Se trata de un proceso activo
o pasivo?

5- ¿Cómo se originan las mitocondrias y los peroxisomas? ¿Qué elementos

avalan el origen endosimbiótico de las mitocondrias?

6- Explique el mecanismo de translocación de proteínas al interior de las

mitocondrias. ¿Se trata de un proceso co o post-traduccional?

2
7- ¿Cómo se define el destino final de las proteínas mitocondriales?

8- Caracterice las enzimas peroxisomales indicando su función. ¿Qué función

cumple el oxígeno en los procesos que se llevan a cabo en los peroxisomas?

9- ¿Qué son las partículas de reconocimiento de señal (SRP) y los receptores

de SRP? Describa la localización y los mecanismos de acción de cada uno.

10- a) Explique el mecanismo de translocación de proteínas al interior del RER.

¿Se trata de un proceso co o post-traduccional?, ¿es un mecanismo
endergónico o exergónico?
b) ¿Qué mecanismos utilizan las proteínas para insertarse en las membranas
del RE?
c) ¿Cuáles son y cómo están determinados los posibles destinos de una
proteína cuya síntesis finaliza en el interior del RER?
d) Describa el proceso de glicosilación de las proteínas en el RE indicando la
función del dolicol, glicosil transferasas y oligosacárido tranferasas.
e) ¿Qué relación existe entre la glicosilación y el plegamiento de las proteínas?
¿Qué ocurre con las proteínas que nunca llegan a plegarse correctamente?

11- a) ¿Cuáles son las funciones del RE liso?

b) ¿Qué es y qué función cumple la Citocromo P-450?
c) ¿Qué son los microsomas?, ¿cómo pueden obtenerse y cuál es su utilidad
práctica?

12- a) Explique la localización y el proceso de síntesis de los lípidos y de las

proteínas que forman las membranas celulares. En el Trabajo Práctico
dedicado a la membrana plasmática Ud. vio que el movimiento de flip-flop de
los fosfolípidos es poco frecuente. ¿Cómo justifica entonces, la asimetría
observada en tales membranas respecto a la localización de los fosfolípidos?

EJERCICIOS DE APLICACIÓN

En esta sección, hemos incluido problemas que relacionan los temas

estudiados en este TP con problemáticas de importancia médica,
identificados con el símbolo:
Al final de algunos de estos problemas encontrará un texto breve
identificado como “Lectura complementaria” que brinda una breve
explicación sobre el tema biomédico que se desarrolla en el mismo. Su
lectura no resulta indispensable para la resolución del problema, pero brinda
información útil para su futura formación como médico tanto generalista
como especialista.

3
1- Observe el siguiente esquema.

a) Complete las referencias, indicando cuáles considera que son las

estructuras intracelulares señaladas.
b) Establezca cuáles de esos compartimentos están relacionados entre sí y
cuáles no lo están.

2- Por ingeniería genética se diseñaron una serie de genes. Cada uno de ellos
codifica para una proteína con señales de localización intracelular
contradictorias. ¿En qué compartimiento esperaría encontrar a cada una de las
siguientes combinaciones? ¿Por qué?
a) Señales de importación a núcleo e importación a RE
b) Señales de importación a peroxisomas e importación a RE
c) Señales de importación a mitocondria y retención a RE (considerar que la
secuencia de importación a RE no está presente)
d) Señales de importación a núcleo y exportación de núcleo

3- Lea el siguiente listado de proteínas:

Fosfofructoquinasa* Fosfatasa ácida

Catalasa ARN polimerasa III
ADN polimerasa Histonas
ATPasa Na+ - K+ Disulfuro isomerasa**
Aminoacil ARNt sintetasa Citocromo C

* La fosfofructoquinasa es la enzima que cataliza la transferencia de un grupo fosfato desde el

ATP a la fructosa 6-fosfato en la glucólisis.
**La proteína disulfuro isomerasa es una enzima que cataliza la formación y ruptura de puentes
disulfuro entre cisteínas dentro de una proteína catalizando el plegamiento proteico.

4
a) Indique cuáles de estas moléculas presentan secuencias señales y cuáles
carecen de ellas. Establezca los motivos de estas diferencias.
b) ¿Qué características presentarán las secuencias señales en aquellas
proteínas que las presentan? (tipo de aminoácidos, lugar de la cadena
polipeptídica donde se encuentran, etc)
c) Analizando el mapa de carreteras que figura a continuación, indique el
camino seguido por las siguientes proteínas, desde su sitio de síntesis hasta su
destino final mencionando el tipo de transporte involucrado en cada caso y las
modificaciones que sufren

Fosfofructoquinasa – disulfuro isomerasa – fosfatasa ácida –ADN polimerasa–

catalasa – Citocromo C - ATPasa Na+ - K+

Transporte regulado
Transporte transmembrana
Transporte vesicular

4- Al sintetizar in vitro moléculas de inmunoglobulinas (1) empleando ribosomas

libres y el ARNm que las codifica, se vio que presentaban una secuencia
terminal adicional de unos 20 aminoácidos que no aparecía en las
inmunoglobulinas naturales. El péptido extra tampoco aparecía en las
inmunoglobulinas sintetizadas in vitro por los ribosomas ligados al retículo
endoplásmico rugoso fraccionado a partir de un homogenado celular. ¿Qué
conclusiones se pueden sacar de estas observaciones?
(1) Las inmunoglobulinas son proteínas globulares circulantes, altamente específicas,
sintetizadas por los linfocitos B.

5- En el curso de muchas reacciones metabólicas que ocurren en las células se

generan productos tóxicos que pueden producir mutaciones génicas y

5
alteraciones en las membranas celulares, este último hecho vinculado con
algunos aspectos del proceso de envejecimiento celular.
Entre esos productos se cuentan el peróxido de hidrógeno (H202).
Respecto a esta sustancia:
a) ¿Qué organela está relacionada con su producción?
b) ¿De qué forma se degrada este producto tóxico? Escriba las reacciones de
oxidación que ocurren dentro de la organela.
c) Explique las funciones del H202 en las células hepáticas y renales.

6- Un cultivo de levaduras se repicó en tres tubos de ensayo, los cuales a su

vez fueron incubados en presencia de grandes cantidades de metanol para un
tubo, ibuprofeno en un segundo tubo y finalmente glucosa para el tercer tubo.
¿Cuál de estos tres tubos cree Usted que es el tubo control? ¿Espera Ud.
encontrar diferencias significativas respecto al desarrollo de algún orgánulo en
las levaduras de alguno de los tubos de reacción respecto a dicho control?
Justifique su respuesta.

Metanol

7- Un individuo consume regularmente altas dosis de fenobarbital, una droga

liposoluble perteneciente al grupo de los hipnóticos que produce alteraciones
sobre el sistema nervioso central.
a) ¿Qué orgánulo de las células hepáticas aumenta su superficie?
b) ¿Por qué se activan los ribosomas de las células hepáticas?
c) Si este individuo deja de consumir fenobarbital, ¿qué cambios ocurrirán en
sus células hepáticas?
d) Explique brevemente en qué consiste la detoxificación mediada por el
orgánulo mencionado en el primer inciso.

8- Maria G. es una joven paciente suya que actualmente se encuentra en

tratamiento por tuberculosis. Hace algo más de dos meses toma las dosis que
usted le recomendó de rifampicina, un antibiótico y potente inductor de la
citocromo p450 hepática.
María se siente paulatinamente mejor de su enfermedad y así se lo hace
saber, pero ahora el motivo de su consulta es otro. Ella toma también
anticonceptivos orales, método que le había sido siempre eficaz.
Ahora está muy preocupada, tiene fuertes sospechas de que está embarazada.
Entonces usted le toma una muestra de sangre, la envía al laboratorio y
confirma la sospecha de su paciente.
a) ¿Qué tipo de metabolización le parece que puede tener el anticonceptivo
oral que estaba tomando María (teniendo en cuenta que se trata de un
compuesto esteroideo)? Describa brevemente este proceso.

6
b) ¿Le parece que hay alguna relación entre el tratamiento antituberculoso y el
embarazo de María? De contestar afirmativamente intente explicar dicha
relación.
c) ¿Cómo le parece que podría haberse evitado este inconveniente?
9- Empleando el siguiente esquema:

a) Complete los espacios en blanco seleccionando del siguiente listado sólo los
términos correctos:
Peptidiltransferasa- colesterol- citosol- dolicol fosfato- espacio extracelular-
oligosacárido transferasa- cadena lateral de lisina- oligosacárido- luz del RER-
cadena lateral de asparagina- translocación

b) Responda seleccionando la opción correcta:

El proceso de glicosilación en el RER implica:

a) la activación de monosacáridos en el citosol con GDP o UDP
b) la participación de moléculas de dolicol en la membrana del RER
c) la unión de un oligosacárido al grupo amino de la cadena lateral de un
residuo de Asparagina
d) la actividad de una oligosacárido transferasa
e) Todas son correctas

10- Usted es un experimentado científico que desea desentrañar los

mecanismos de una curiosa enfermedad hereditaria que cursa con retraso
mental, hepatoesplenomegalia (agrandamiento del bazo y el hígado) y muerte
a una corta edad. Realiza una biopsia de hígado a un paciente y la envía a
analizar. El informe del patólogo detalla la presencia de “hepatocitos con
acúmulos eosinófilos amorfos rodeados por membrana y no se evidencia el
RER. El resto del sistema de endomembrana no presenta alteraciones”.

Información adicional.

7
Acúmulos eosinófilos: estructuras de carácter básico afines a la eosina. Eosina: colorante ácido
tonalidad rosada utilizado para realizar tinciones histológicas

Considerando este resultado decide enviar las muestras para la realización de

una técnica de inmunofluorescencia que detecta una glicoproteína de
membrana (el receptor de LDL) y proteínas del citosol.
En el primer caso, donde se realiza la detección del receptor de LDL, se
observa fluorescencia en los acúmulos eosinófilos, pero ésta resulta muy
escasa en la membrana; en el segundo caso (detección de proteínas del
citosol) el resultado es normal, marcándose homogéneamente el citoplasma.

Basándose en estos datos responda indicando la opción correcta

1) Los acúmulos eosinófilos presentes en la biopsia del tejido representan en

las células:
a) las gotas lipídicas
b) glicoproteínas con predominio de aminoácidos lisina, histidina y arginina
acumuladas en estructuras membranosas
c) ácidos nucleicos acumulados en estructuras membranosas
d) acúmulos de almidón
e) ninguna es correcta

2) El defecto metabólico podría estar involucrado en:

a) la síntesis de proteínas
b) las modificaciones post-traduccionales
c) el transporte de las proteínas a su destino final
d) la degradación de las proteínas
e) b y c son correctas

3) La organela involucrada en esta enfermedad sería:

a) Mitocondria
b) RER
c) REL
d) Lisosomas
e) Núcleo

4) Las proteínas citosólicas no se ven afectadas porque:

a) son proteínas cuya síntesis ocurre exclusivamente en el citosol
b) son proteínas que no presentan una secuencia señal
c) son degradadas a través de los proteosomas
d) se glicosilan en el citosol
e) a y b son correctas

5) Las proteínas permanecen como acúmulos en el RER debido a que:

a) las proteínas presentan un defecto en la O-glicosilación
b) el proteosoma se encuentra en el citosol
c) están ausentes las peptidil transferasas
d) disminuye la proteólisis en la luz del RER
e) ninguna es correcta

8
Asímismo se halló que en este paciente los niveles de GDP-Manosa se
encontraban aumentados y los de Dolicol-P-Manosa estaban disminuidos
mientras que los niveles de Dolicol-P eran normales. Teniendo en cuenta esta
información, ¿en qué paso enzimático se encontraría el defecto?.