Biotechnology Research International

Volume 2011, Article ID 941810, 13 pages

http://dx.doi.org/10.4061/2011/941810
Review Article
Microbial Degradation of Petroleum Hydrocarbon Contaminants: An Overview
Nilanjana Das and Preethy Chandran
Environmental Biotechnology Division, School of Biosciences and Technology, VIT University, Vellore,
Tamil Nadu 632014, India
Received 24 May 2010; Revised 28 June 2010; Accepted 7 July 2010
Academic Editor: Igor Kovalchuk
Copyright © 2011 Nilanjana Das and Preethy Chandran. This is an open access article distributed under
the Creative Commons Attribution License, which permits unrestricted use, distribution, and
reproduction in any medium, provided the original work is properly cite

Internacional de Investigación en Biotecnología

Volumen 2011, artículo ID 941810, 13 páginas
http://dx.doi.org/10.4061/2011/941810
Artículo de revisión
Degradación microbiana de los contaminantes de hidrocarburos del petróleo: una visión general
Nilanjana Das y Preethy Chandran
División de Biotecnología Ambiental, Escuela de Biociencias y Tecnología, Universidad VIT, Vellore,
Tamil Nadu 632014, India

Recibido el 24 de mayo de 2010; Revisado el 28 de junio de 2010; Aceptado el 7 de julio de 2010

Editor académico: Igor Kovalchuk

Copyright © 2011 Nilanjana Das y Preethy Chandran. Este es un artículo de acceso abierto distribuido
bajo la Licencia de Atribución de Creative Commons, que permite el uso, la distribución y la
reproducción sin restricciones en cualquier medio, siempre que el trabajo original se cite
correctamente.
Abstract
resumen
Uno de los principales problemas ambientales de hoy en día es la contaminación por hidrocarburos
resultante de las actividades relacionadas con la industria petroquímica. Las liberaciones accidentales
de productos derivados del petróleo son especialmente preocupantes en el medio ambiente. Se sabe
que los componentes de hidrocarburos pertenecen a la familia de los carcinógenos y los contaminantes
orgánicos neurotóxicos. Los métodos de eliminación actualmente aceptados de incineración o
enterramiento en vertederos inseguros pueden llegar a ser prohibitivamente caros cuando las
cantidades de contaminantes son grandes. Los métodos mecánicos y químicos generalmente
utilizados para eliminar hidrocarburos de sitios contaminados tienen una efectividad limitada y pueden
ser costosos. La biorremediación es la tecnología prometedora para el tratamiento de estos sitios
contaminados, ya que es rentable y conducirá a una completa mineralización. La biorremediación
funciona básicamente en la biodegradación, que puede referirse a la completa mineralización de
contaminantes orgánicos en dióxido de carbono, agua, compuestos inorgánicos y proteínas celulares
o transformación de contaminantes orgánicos complejos en otros compuestos orgánicos más simples
mediante agentes biológicos como microorganismos. Muchos microorganismos indígenas en el agua
y el suelo son capaces de degradar los contaminantes de hidrocarburos. Este documento presenta
una descripción actualizada de la degradación de hidrocarburos del petróleo por microorganismos en
diferentes ecosistemas.
1. introduccion
Los productos derivados del petróleo son la principal fuente de energía para la industria y la vida diaria.
Las fugas y derrames accidentales ocurren regularmente durante la exploración, producción,
refinación, transporte y almacenamiento de petróleo y productos derivados del petróleo. La cantidad
de filtraciones naturales de petróleo crudo se estimó en 600,000 toneladas métricas por año con un
rango de incertidumbre de 200,000 toneladas métricas por año [1]. La liberación de hidrocarburos al
medio ambiente, ya sea accidentalmente o debido a actividades humanas, es una de las principales
causas de la contaminación del agua y del suelo [2]. La contaminación del suelo con hidrocarburos
causa un daño extenso del sistema local ya que la acumulación de contaminantes en animales y tejidos
de plantas puede causar la muerte o mutaciones [3]. La tecnología comúnmente utilizada para la
remediación de suelos incluye mecánica, entierro, evaporación, dispersión y lavado. Sin embargo,
estas tecnologías son caras y pueden llevar a una descomposición incompleta de los contaminantes.

El proceso de biorremediación, definido como el uso de microorganismos para desintoxicar o eliminar

contaminantes debido a sus diversas capacidades metabólicas, es un método evolutivo para la
eliminación y degradación de muchos contaminantes ambientales, incluidos los productos de la
industria petrolera [4]. Además, se cree que la tecnología de biorremediación no es invasiva y es
relativamente rentable [5]. La biodegradación por las poblaciones naturales de microorganismos
representa uno de los principales mecanismos por los cuales el petróleo y otros hidrocarburos
contaminantes pueden eliminarse del medio ambiente [6] y es más barato que otras tecnologías de
remediación [7].
El éxito de la biorremediación de derrames de petróleo depende de la capacidad de uno para
establecer y mantener las condiciones que favorecen las tasas mejoradas de biodegradación de
petróleo en el medio ambiente contaminado. Numerosos artículos de revisión científica han cubierto
diversos factores que influyen en la tasa de biodegradación del petróleo [7–12]. Un requisito importante
es la presencia de microorganismos con las capacidades metabólicas apropiadas. Si estos
microorganismos están presentes, entonces se pueden mantener tasas óptimas de crecimiento y
biodegradación de hidrocarburos asegurando que estén presentes concentraciones adecuadas de
nutrientes y oxígeno y que el pH esté entre 6 y 9. Las características físicas y químicas del área de
petróleo y aceite. También son determinantes importantes del éxito de la biorremediación. Existen dos
enfoques principales para la biorremediación de derrames de hidrocarburos: (a) bioaumentación, en la
que se agregan bacterias degradadoras del petróleo conocidas para complementar la población
microbiana existente, y (b) la bioestimulación, en la cual el crecimiento de degradadores de petróleo
indígenas es estimulado por Adición de nutrientes u otros cosustrados limitantes del crecimiento.

El éxito de los esfuerzos de biorremediación en la limpieza del derrame de petróleo del petrolero Exxon
Valdez de 1989 [13] en Prince William Sound y el Golfo de Alaska generó un gran interés en el potencial
de la tecnología de biodegradación y biorremediación. La mayoría de los estudios existentes se han
concentrado en evaluar los factores que afectan la biorremediación del aceite o probar productos y
métodos preferidos a través de estudios de laboratorio [14]. Solo un número limitado de ensayos piloto
y de escala piloto han proporcionado las demostraciones más convincentes de esta tecnología, que se
han publicado en la literatura revisada por pares [15-18]. El alcance de la comprensión actual de la
biorremediación de petróleo también es limitado porque el énfasis de la mayoría de estos estudios de
campo y revisiones se ha dado en la evaluación de la tecnología de biorremediación para tratar los
derrames de petróleo a gran escala en las costas marinas.

Este documento proporciona información actualizada sobre la degradación microbiana de los

contaminantes de hidrocarburos del petróleo hacia una mejor comprensión en los desafíos de
biorremediación.

2. Degradación microbiana de hidrocarburos de petróleo

La biodegradación de los hidrocarburos del petróleo es un proceso complejo que depende de la

naturaleza y de la cantidad de hidrocarburos presentes. Los hidrocarburos del petróleo se pueden
dividir en cuatro clases: los saturados, los aromáticos, los asfaltenos (fenoles, ácidos grasos, cetonas,
ésteres y porfirinas) y las resinas (piridinas, quinolinas, carbazoles, sulfóxidos y amidas) [19]. Cooney
et al. Han informado diferentes factores que influyen en la degradación de los hidrocarburos. [20]. Uno
de los factores importantes que limitan la biodegradación de los contaminantes del aceite en el medio
ambiente es su limitada disponibilidad de microorganismos. Los compuestos de hidrocarburos del
petróleo se unen a los componentes del suelo, y son difíciles de eliminar o degradar [21]. Los
hidrocarburos difieren en su susceptibilidad al ataque microbiano. La susceptibilidad de los
hidrocarburos a la degradación microbiana puede clasificarse generalmente de la siguiente manera:
alcanos lineales alcanos ramificados alcanos cíclicos aromáticos pequeños [6, 22]. Algunos
compuestos, como los hidrocarburos aromáticos policíclicos de alto peso molecular (HAP), pueden no
degradarse en absoluto [23]. La degradación microbiana es el principal y último mecanismo natural
mediante el cual se pueden limpiar los contaminantes de hidrocarburos del petróleo del medio
ambiente [24-26]. Jones et al. Informaron sobre el reconocimiento de hidrocarburos aromáticos
derivados del petróleo biodegradados en sedimentos marinos. [27]. Estudiaron la extensa
biodegradación de compuestos aromáticos de alquilo en sedimentos marinos que se produjo antes de
la biodegradación detectable del perfil de n-alcanos del petróleo crudo y los microorganismos, a saber,
Arthrobacter, Burkholderia, Mycobacterium, Pseudomonas, Sphingomonas y Rhodococcus.
Degradación alquilaromática. La degradación microbiana de los hidrocarburos del petróleo en una
corriente tropical contaminada en Lagos, Nigeria, fue reportada por Adebusoye et al. [28]. Nueve cepas
bacterianas, a saber, Pseudomonas fluorescens, P. aeruginosa, Bacillus subtilis, Bacillus sp.,
Alcaligenes sp., Acinetobacter lwoffi, Flavobacterium sp., Micrococcus roseus y Corynebacterium sp.
fueron aislados de la corriente contaminada que podría degradar el petróleo crudo.
Los hidrocarburos en el medio ambiente son biodegradados principalmente por bacterias, levaduras y
hongos. La eficiencia informada de la biodegradación varió desde 6% [29] a 82% [30] para hongos del
suelo, 0,13% [29] a 50% [30] para bacterias del suelo y 0,003% [31] a 100% [32] para bacterias
marinas. Muchos científicos informaron que se requieren poblaciones mixtas con amplias capacidades
enzimáticas generales para degradar mezclas complejas de hidrocarburos, como petróleo crudo en el
suelo [33], agua dulce [34] y ambientes marinos [35, 36].

Las bacterias son los agentes más activos en la degradación del petróleo y funcionan como
degradadores primarios del petróleo derramado en el medio ambiente [37, 38]. Incluso se sabe que
varias bacterias se alimentan exclusivamente de hidrocarburos [39]. Floodgate [36] enumeró 25
géneros de bacterias degradadoras de hidrocarburos y 25 géneros de hongos degradadores de
hidrocarburos que se aislaron del medio ambiente marino. Una compilación similar de Bartha y Bossert
[33] incluyó 22 géneros de bacterias y 31 géneros de hongos. En días anteriores, el grado de estudio
de las bacterias, levaduras y hongos filamentosos en la biodegradación de los hidrocarburos del
petróleo fue una función limitada del ecosistema y las condiciones ambientales locales [7]. Das y
Mukherjee informaron sobre el petróleo crudo del suelo contaminado con petróleo del noreste de la
India [40]. Acinetobacter sp. se encontró que era capaz de utilizar n-alcanos de longitud de cadena
C10-C40 como única fuente de carbono [41]. Los géneros bacterianos, a saber, Gordonia,
Brevibacterium, Aeromicrobium, Dietzia, Burkholderia y Mycobacterium aislados de suelo contaminado
con petróleo demostraron ser los organismos potenciales para la degradación de hidrocarburos [42].
Daugulis y McCracken informaron sobre la degradación de los hidrocarburos poliaromáticos por
Sphingomonas [43].

Los géneros de hongos, a saber, Amorphoteca, Neosartorya, Talaromyces y Graphium, y los géneros
de levadura, a saber, Candida, Yarrowia y Pichia se aislaron de suelos contaminados con petróleo y
demostraron ser los organismos potenciales para la degradación de hidrocarburos [42]. Singh [44]
también informó sobre un grupo de hongos terrestres, a saber, Aspergillus, Cephalosporium y
Pencillium, que también se encontró que eran el degradador potencial de los hidrocarburos del petróleo
crudo. Se observó que las especies de levadura, a saber, Candida lipolytica, Rhodotorula
mucilaginosa, Geotrichum sp, y mucoides de Trichosporon aislados de agua contaminada degradan
los compuestos del petróleo [45].

Si bien las algas y los protozoos son miembros importantes de la comunidad microbiana en los
ecosistemas acuáticos y terrestres, los informes son escasos sobre su participación en la
biodegradación de hidrocarburos. Walker et al. [51] aisló un alga, Prototheca zopfi, que era capaz de
utilizar petróleo crudo y un sustrato de hidrocarburo mixto y exhibió una gran degradación de n-alcanos
e isoalcanos, así como hidrocarburos aromáticos. Cerniglia et al. [52] observaron que nueve
cianobacterias, cinco algas verdes, una alga roja, una alga parda y dos diatomeas podrían oxidar el
naftaleno. Los protozoos, por el contrario, no habían demostrado utilizar hidrocarburos.

3. Factores que influyen en la degradación de hidrocarburos del petróleo

Se ha reconocido que varios factores limitantes afectan la biodegradación de los hidrocarburos del
petróleo, muchos de los cuales han sido discutidos por Brusseau [53]. La composición y la
biodegradabilidad inherente del hidrocarburo contaminante del petróleo es la primera y más importante
consideración cuando se evalúa la idoneidad de un enfoque de remediación. Entre los factores físicos,
la temperatura juega un papel importante en la biodegradación de hidrocarburos al afectar
directamente la química de los contaminantes, así como a la fisiología y diversidad de la flora
microbiana. Atlas [54] encontró que a bajas temperaturas, la viscosidad del aceite aumentaba, mientras
que la volatilidad de los hidrocarburos tóxicos de bajo peso molecular se reducía, retrasando el inicio
de la biodegradación.
La temperatura también afecta la solubilidad de los hidrocarburos [62]. Aunque la biodegradación de
hidrocarburos puede ocurrir en un amplio rango de temperaturas, la velocidad de biodegradación
generalmente disminuye con la disminución de la temperatura. La Figura 1 muestra que las tasas de
degradación más altas que generalmente ocurren en el rango de 30 a 40 ° C en ambientes de suelo,
20 a 30 ° C en algunos entornos de agua dulce y 15 a 20 ° C en ambientes marinos [33, 34]. Venosa
y Zhu [63] informaron que la temperatura ambiente del ambiente afectó tanto las propiedades del aceite
derramado como la actividad de los microorganismos. Se ha informado de una importante
biodegradación de los hidrocarburos en ambientes psicrofílicos en regiones templadas [64, 65].
Figura 1: Tasas de degradación de hidrocarburos en suelos, agua dulce y ambientes marinos.

Los nutrientes son ingredientes muy importantes para la biodegradación exitosa de contaminantes de
hidrocarburos, especialmente nitrógeno, fósforo y, en algunos casos, hierro [34]. Algunos de estos
nutrientes podrían convertirse en un factor limitante que afectaría los procesos de biodegradación.
Atlas [35] informó que cuando se produjo un gran derrame de petróleo en ambientes marinos y de
agua dulce, el suministro de carbono aumentó significativamente y la disponibilidad de nitrógeno y
fósforo se convirtió en el factor limitante para la degradación del petróleo. En ambientes marinos, se
encontró que era más pronunciado debido a los bajos niveles de nitrógeno y fósforo en el agua de mar
[36]. En general, se considera que los humedales de agua dulce son deficientes en nutrientes debido
a la gran demanda de nutrientes por parte de las plantas [66]. Por lo tanto, las adiciones de nutrientes
fueron necesarias para mejorar la biodegradación del contaminante oleoso [67, 68]. Por otro lado, las
concentraciones excesivas de nutrientes también pueden inhibir la actividad de biodegradación [69].
Varios autores han informado sobre los efectos negativos de los altos niveles de NPK en la
biodegradación de hidrocarburos [70, 71], especialmente en compuestos aromáticos [72]. La
efectividad de los fertilizantes para la biorremediación de petróleo crudo en sedimentos intermareales
subárticos fue estudiada por Pelletier et al. [64]. El uso de estiércol de aves de corral como fertilizante
orgánico en suelos contaminados también se informó [73], y se encontró que la biodegradación se
incrementó en la presencia de estiércol de aves solo. Maki et al. [74] informaron que la fotooxidación
aumentaba la biodegradabilidad de los hidrocarburos del petróleo al aumentar su biodisponibilidad y,
por lo tanto, mejorar las actividades microbianas.

4. Mecanismo de Degradación de Hidrocarburos del Petróleo.

La degradación más rápida y completa de la mayoría de los contaminantes orgánicos se produce en

condiciones aeróbicas. La Figura 2 muestra el principio principal de la degradación aeróbica de los
hidrocarburos [75]. El ataque intracelular inicial de contaminantes orgánicos es un proceso oxidativo y
la activación, así como la incorporación de oxígeno, es la reacción clave enzimática catalizada por las
oxigenasas y las peroxidasas. Las vías de degradación periférica convierten los contaminantes
orgánicos paso a paso en intermedios del metabolismo intermediario central, por ejemplo, el ciclo del
ácido tricarboxílico. La biosíntesis de la biomasa celular se produce a partir de los metabolitos
precursores centrales, por ejemplo, acetil-CoA, succinato, piruvato. Los azúcares requeridos para
diversas biosíntesis y crecimiento son sintetizados por la gluconeogénesis.

Figura 2: Principio principal de degradación aeróbica de hidrocarburos por microorganismos.

La degradación de los hidrocarburos del petróleo puede estar mediada por un sistema enzimático
específico. La Figura 3 muestra el ataque inicial a los xenobióticos por oxigenasas [75]. Otros
mecanismos involucrados son (1) la unión de células microbianas a los sustratos y (2) la producción
de biosurfactantes [76]. El mecanismo de captación vinculado a la unión de la célula a la gota de aceite
aún se desconoce, pero la producción de biosurfactantes ha sido bien estudiada.

Figura 3: Reacciones enzimáticas involucradas en los procesos de degradación de hidrocarburos.

5. Enzimas que participan en la degradación de los hidrocarburos.
Las alcanohidroxilasas del citocromo P450 constituyen una superfamilia de ubicuo Meme-thiolate
Monooxygenases que desempeñan un papel importante en la degradación microbiana del aceite,
hidrocarburos clorados, aditivos de combustible y muchos otros compuestos [77]. Dependiendo de la
longitud de la cadena, se requieren sistemas de enzimas para introducir oxígeno en el sustrato para
iniciar la biodegradación (Tabla 1). Los eucariotas superiores generalmente contienen varias familias
P450 diferentes que consisten en un gran número de formas P450 individuales que pueden contribuir
como un conjunto de isoformas a la conversión metabólica de un sustrato dado. En microorganismos,
tal multiplicidad de P450 solo se puede encontrar en pocas especies [78]. Se encontró que los sistemas
enzimáticos del citocromo P450 están involucrados en la biodegradación de los hidrocarburos del
petróleo (Tabla 1). La capacidad de varias especies de levaduras para usar n-alcanos y otros
hidrocarburos alifáticos como única fuente de carbono y energía está mediada por la existencia de
múltiples formas microsómicas del Citocromo P450. Estas enzimas del citocromo P450 se han aislado
de especies de levaduras como Candida maltosa, Candida tropicalis y Candida apicola [79]. La
diversidad de los sistemas de alcanooxigenasa en procariotas y eucariotas que participan activamente
en la degradación de los alcanos en condiciones aeróbicas como las enzimas del citocromo P450, las
membranas integrales di-hierro alcano hidroxilasas (p. Ej., AlkB), las dioxonas solubles en hierro y las
monooxigenasas. Van Beilen y Funhoff [80] han analizado el cobre que contiene monooxigenasas de
metano.

Tabla 1: Enzimas involucradas en la biodegradación de hidrocarburos del petróleo.

6. Captación de hidrocarburos por biosurfactantes.
Los biosurfactantes son un grupo heterogéneo de compuestos químicos tensioactivos producidos por
una amplia variedad de microorganismos [57, 58, 60, 81-83]. Los surfactantes mejoran la solubilización
y la eliminación de contaminantes [84, 85]. La biodegradación también se ve reforzada por los
surfactantes debido a la mayor biodisponibilidad de los contaminantes [86]. Cameotra y Singh [87] han
informado sobre la biorremediación de lodos de petróleo con biosurfactantes. En este estudio se usó
un consorcio microbiano que consiste en dos aislamientos de Pseudomonas aeruginosa y un aislado
Rhodococcus erythropolis de suelo contaminado con lodo aceitoso. El consorcio logró degradar el 90%
de los hidrocarburos en 6 semanas en cultivo líquido. La capacidad del consorcio para degradar los
hidrocarburos de lodo se probó en dos ensayos de campo separados. Además, también se evaluó el
efecto de dos aditivos (una mezcla de nutrientes y una preparación de biosurfactante en bruto en la
eficiencia del proceso. El biosurfactante usado fue producido por un miembro del consorcio y se
identificó como una mezcla de 11 congéneres de renanolípidos. El consorcio degradó el 91% del
contenido de hidrocarburos del suelo contaminado con lodo de petróleo crudo del 1% (v / v) en 5
semanas. El uso separado de cualquier aditivo junto con el consorcio provocó un agotamiento del 91-
95% del contenido de hidrocarburos en 4 semanas , siendo la preparación de biosurfactante en bruto
un mejorador más eficaz de la degradación. Sin embargo, cuando se agregaron ambos aditivos junto
con el consorcio, se obtuvo más del 98% de agotamiento de hidrocarburos. Los datos confirmaron el
uso de un biosurfactante en bruto para la remediación de hidrocarburos.

Las pseudomonadias son las bacterias más conocidas capaces de utilizar hidrocarburos como fuentes
de carbono y energía y producir biosurfactantes [37, 87-89]. Entre las pseudomonads, P. aeruginosa
se estudia ampliamente para la producción de biosurfactantes de tipo glicolípido. Sin embargo, los
biosurfactantes de tipo glicolípido también se informan de otras especies como P. putida y P.
chlororaphis. Los biosurfactantes aumentan el área de superficie del aceite y esa cantidad de aceite
está realmente disponible para que las bacterias lo utilicen [90]. La Tabla 2 resume los informes
recientes sobre la producción de biosurfactantes por diferentes microorganismos. Los biosurfactantes
pueden actuar como agentes emulsionantes al disminuir la tensión superficial y formar micelas. Las
microgotas encapsuladas en la superficie de las células microbianas hidrófobas se toman dentro y se
degradan. La Figura 4 demuestra la participación de biosurfactante (ramnolípidos) producido por
Pseudomonas sp. y el mecanismo de formación de micelas en la absorción de hidrocarburos [75].

Tabla 2: Biosurfactantes producidos por microorganismos.

Figura 4: Participación de biosurfactante (ramnolípido) producido por Pseudomonas sp en la captación
de hidrocarburos.

7. Biodegradación de hidrocarburos de petróleo por células inmovilizadas

Las células inmovilizadas se han utilizado y estudiado para la biorremediación de numerosos productos
químicos tóxicos. La inmovilización no solo simplifica la separación y recuperación de las células
inmovilizadas, sino que también hace que la aplicación sea reutilizable, lo que reduce el costo general.
Wilsey y Bradely [91] utilizaron suspensión libre e inmovilizaron Pseudomonas sp. Para degradar la
gasolina en un sistema acuoso. El estudio indicó que la inmovilización dio lugar a una combinación de
un mayor contacto entre las gotas de células e hidrocarburos y un mayor nivel de producción de
ramnolípidos. Los ramnolípidos causaron una mayor dispersión de n-alcanos insolubles en agua en la
fase acuosa debido a sus propiedades anfipáticas y las moléculas consisten en restos hidrófilos e
hidrófobos que reducen la tensión interfacial de los sistemas de aceite-agua. Esto dio como resultado
una mayor interacción de las células con gotitas de hidrocarburo solubilizadas mucho más pequeñas
que las células y una rápida absorción de hidrocarburo en las células. Diaz et al. [92] informaron que
la inmovilización de células bacterianas mejoró la tasa de biodegradación del petróleo crudo en
comparación con las células vivas libres en un amplio rango de salinidad de cultivos. La inmovilización
se puede realizar en modo batch o continuo. Los reactores de lecho empacado se usan comúnmente
en modo continuo para degradar los hidrocarburos. Cunningham et al. [93] utilizaron la criogilación del
alcohol polivinílico (PVA) como una matriz de atrapamiento y microorganismos autóctonos del sitio.
Construyeron biopilas de laboratorio para comparar la bioaumentación inmovilizada con la
bioaumentación y bioestimulación de cultivos líquidos. Los sistemas inmovilizados fueron los más
exitosos en términos de porcentaje de remoción de diesel después de 32 días.

Rahman et al. [94] realizó un experimento para estudiar la capacidad de las bacterias inmovilizadas en
las perlas de alginato para degradar los hidrocarburos. Los resultados mostraron que no hubo
disminución en la actividad de biodegradación del consorcio microbiano en el uso repetido. Se concluyó
que la inmovilización de células es una aplicación prometedora en la biorremediación de sitios
contaminados con hidrocarburos.

8. Agentes de biorremediación comercialmente disponibles

Los cultivos microbiológicos, los aditivos enzimáticos o los aditivos de nutrientes que aumentan
significativamente la tasa de biodegradación para mitigar los efectos de la descarga fueron desafiados
como agentes de biorremediación por la patente de EE. UU.S. [95]. Los agentes de biorremediación
se clasifican como agentes de bioaumentación y agentes de bioestimulación según los dos enfoques
principales para la biorremediación de derrames de hidrocarburos. Sus proveedores han propuesto y
promocionado numerosos productos de biorremediación, especialmente a principios de la década de
1990, cuando la biorremediación se popularizó como "la solución definitiva" para los derrames de
petróleo [96].

La EPA de los EE. UU. Compiló una lista de 15 agentes de biorremediación [95, 97] como parte de la
Lista de Productos del Plan Nacional de Contingencia de Contaminación de Petróleo y Sustancias
Peligrosas (NCP), exigida por la Ley de Agua Limpia, Ley de Contaminación del Petróleo de 1990. y
el Plan Nacional de Contingencia (NCP) como se muestra en la Tabla 3. Pero la lista se modificó y el
número de agentes de biorremediación se redujo a nueve.

Tabla 3: Agentes de biorremediación en el programa de productos NCP (Adaptado de USEPA, 2002).

Table 3: Bioremediation agents in NCP product schedule (Adapted from USEPA,
2002).

Product
Name or Trademark Manufacture
Type

BET BIOPETRO MC BioEnviro Tech, Tomball, TX

International Environmental
BILGEPRO NA Products, LLC, Conshohocken,
PA.
INIPOL EAP 22 NA Societe, CECA S.A., France
 Land and Sea Restoration LLC,
LAND AND SEA NA
San Antonio, TX
RESTORATION MICRO- Verde Environmental, Inc.,
MC
BLAZE Houston, TX
Oil Spill Eater International,
OIL SPILL EATER II NA/EA
Corporation, Dallas, TX
Oppenheimer Biotechnology, Inc.,
OPPENHEIMER FORMULA MC
Austin, TX
Marine Systems, Baton Rouge,
PRISTINE SEA II MC
LA
B & S Research, Inc., Embarrass,
STEP ONE MC
MN
Quantum Environmental
SYSTEM E.T. 20. MC Technologies, Inc(QET), La Jolla,
CA
VB591TMWATER,
VB997TMSOIL, AND NA BioNutraTech, Inc., Houston,TX
BINUTRIX
WMI-2000 MC WMI International, Inc

Abbreviations of product type:

MC: Microbial Culture
EA: Enzyme Additive
NA: Nutrient Additive.

Tabla 3: Agentes de biorremediación en el programa de productos NCP (Adaptado de USEPA, 2002).

Nombre o marca registrada Tipo de producto Fabricación
BET BIOPETRO MC BioEnviro Tech, Tomball, TX
BILGEPRO NA International Environmental Products, LLC, Conshohocken, PA.
INIPOL EAP 22 NA Societe, CECA S.A., Francia
TIERRA Y MAR NA Restauración de tierra y mar LLC, San Antonio, TX
MICRO-BLAZE DE RESTAURACIÓN MC Verde Environmental, Inc., Houston, TX
EIL SPILL EATER II NA / EA Oil Spill Eater International, Corporación, Dallas, TX
OPPENHEIMER FORMULA MC Oppenheimer Biotechnology, Inc., Austin, TX
PRISTINE SEA II MC Marine Systems, Baton Rouge, LA
PASO UNO MC B & S Research, Inc., Embarrass, MN
SISTEMA E.T. 20. MC Quantum Environmental Technologies, Inc (QET), La Jolla, CA
VB591TMWATER, VB997TMSOIL, Y BINUTRIX NA BioNutraTech, Inc., Houston, TX
WMI-2000 MC WMI International, Inc.
Abreviaturas de tipo de producto:
MC: cultura microbiana
EA: Aditivo Enzimático
NA: Aditivo Nutriente.

Los estudios demostraron que los productos de biorremediación pueden ser efectivos en el laboratorio
pero significativamente menos en el campo [14, 17, 18, 98]. Esto se debe a que los estudios de
laboratorio no siempre pueden simular condiciones del mundo real complicadas como la
heterogeneidad espacial, las interacciones biológicas, los efectos climáticos y las limitaciones del
transporte masivo de nutrientes. Por lo tanto, los estudios de campo y las aplicaciones son las pruebas
finales o la demostración más convincente de la eficacia de los productos de biorremediación.
En comparación con los productos microbianos, muy pocos aditivos de nutrientes se han desarrollado
y comercializado específicamente como agentes de biorremediación comerciales para la limpieza de
derrames de hidrocarburos. Probablemente se deba a que los fertilizantes comunes son baratos, están
fácilmente disponibles y se ha demostrado que son eficaces si se usan correctamente. Sin embargo,
debido a las limitaciones de los fertilizantes comunes (por ejemplo, el lavado rápido debido a la marea
y la acción de las olas), varios productos de nutrientes orgánicos, como los productos de nutrientes
oleófilos, se han evaluado y comercializado recientemente como agentes de biorremediación. Cuatro
agentes, a saber, Inipol EAP22, Oil Spill Eater II (OSE II), BIOREN 1 y BIOREN 2, incluidos en el
Programa de productos NCP también se han incluido en esta categoría.

Inipol EAP22 (Societe, CECA S.A., Francia) figura en el Programa de productos de NCP como un
aditivo nutriente y probablemente el agente de biorremediación más conocido para la limpieza de
derrames de petróleo debido a su uso en Prince William Sound, Alaska. Este producto nutriente es una
urea que contiene microemulsión como fuente de nitrógeno, laureth fosfato de sodio como fuente de
fósforo, 2-butoxi-1-etanol como surfactante y ácido oleico para darle al material su hidrofobicidad. Las
ventajas reivindicadas de Inipol EAP22 incluyen (1) prevenir la formación de emulsiones de agua en
aceite al reducir la viscosidad del aceite y la tensión interfacial; (2) proporcionar una liberación
controlada de nitrógeno y fósforo para la biodegradación del petróleo; (3) que no muestra toxicidad
para la flora y la fauna y buena biodegradabilidad [99].

Oil Spill Eater II (Oil Spill Eater International, Corp.) es otro producto nutriente que figura en la Lista de
NCP [97]. Este producto está listado como un aditivo de nutrientes / enzimas y consiste en "nitrógeno,
fósforo, carbono fácilmente disponible y vitaminas para la rápida colonización de bacterias que ocurren
naturalmente". Se llevó a cabo una demostración en el campo en un sitio de bioventuración en un
Centro de Combate Aéreo Terrestre de Infantería de Marina (MCAGCC) en California para investigar
la eficacia de OSEII para mejorar la biodegradación de hidrocarburos en una zona vadosa contaminada
con combustible [106]

Investigadores del programa europeo EUREKA BIOREN realizaron una prueba de campo en un
ambiente de estuario para evaluar la efectividad de dos productos de biorremediación (BIOREN 1 y 2)
[114, 115]. Los dos productos nutritivos se derivaron de las comidas de pescado en forma granular con
urea y superfosfato como fuentes de nitrógeno y fósforo, y el material proteínico como fuente de
carbono. La principal diferencia entre las dos formulaciones fue que BIOREN 1 contenía un
biosurfactante. Los resultados mostraron que la presencia de biosurfactante en BIOREN 1 fue el
ingrediente más activo que contribuyó al aumento de las tasas de degradación del aceite, mientras que
BIOREN 2 (sin biosurfactante) no fue eficaz a ese respecto. El biosurfactante podría haber contribuido
a una mayor biodisponibilidad de los hidrocarburos al ataque microbiano.

9. Fitorremediación.
La fitorremediación es una tecnología emergente que utiliza plantas para manejar una amplia variedad
de problemas de contaminación ambiental, incluida la limpieza de suelos y aguas subterráneas
contaminadas con hidrocarburos y otras sustancias peligrosas. Los diferentes mecanismos, a saber,
control hidráulico, fitovolatilización, rizoremediación y fitotransformación. podría ser utilizado para la
remediación de una amplia variedad de contaminantes.

La fitorremediación puede ser rentable (a) para sitios grandes con bajos niveles de contaminación
residual por contaminantes orgánicos, metálicos o de nutrientes, donde la contaminación no representa
un peligro inminente y solo se requiere un "tratamiento de pulido"; (b) donde la vegetación se utiliza
como un límite final y cierre del sitio [116].

Las ventajas del uso de la fitorremediación incluyen la rentabilidad, las ventajas estéticas y la
aplicabilidad a largo plazo (Tabla 4). Además, el uso de la fitorremediación como una etapa de
tratamiento secundario o de pulido in situ minimiza la perturbación de la tierra y elimina los costos de
transporte y responsabilidad asociados con el tratamiento y la eliminación fuera del sitio
Tabla 4: Ventajas y desventajas de la fitorremediación sobre las tecnologías tradicionales.

Tabla 4: Ventajas y desventajas de la fitorremediación sobre las tecnologías tradicionales. Ventajas

desventajas Costo relativamente bajo Tiempos de remediación más largos Fácilmente implementado
y mantenido dependiente del clima Varios mecanismos para la eliminación de los efectos en la red
alimentaria podrían ser desconocidos El destino final de los contaminantes contaminantes puede ser
desconocido Resultados estéticamente agradables son variables Reduce los residuos en vertederos.
Material vegetal cosechable

La investigación y la aplicación de la fitorremediación para el tratamiento de la contaminación por

hidrocarburos de petróleo en los últimos quince años han proporcionado mucha información útil que
puede usarse para diseñar sistemas de remediación efectivos e impulsar mejoras e innovaciones
adicionales. La fitorremediación podría aplicarse para la remediación de numerosos sitios
contaminados. Sin embargo, no se sabe mucho sobre el destino de los contaminantes y las vías de
transformación, incluida la identidad de los metabolitos (Tabla 4). Existen pocos datos sobre las tasas
de eliminación de contaminantes y las eficiencias directamente atribuibles a las plantas en condiciones
de campo.

Se investigó el uso potencial de la fitorremediación en un sitio contaminado con hidrocarburos. El

Departamento de Gestión Ambiental de Alabama otorgó un sitio, que involucró aproximadamente 1500
yardas cúbicas de suelo, de las cuales el 70% de las muestras de referencia contenían más de 100
ppm de hidrocarburo total de petróleo (TPH). Después de 1 año de cobertura vegetal, se encontró que
aproximadamente el 83% de las muestras contenían menos de 10 ppm de TPH. También se investigó
la eliminación del hidrocarburo total de petróleo (TPH) en varios sitios de campo contaminados con
petróleo crudo, combustible diesel o desechos de refinería de petróleo, a concentraciones iniciales de
1,700 a 16,000 mg / kg de TPH [117, 118]. Se encontró que el crecimiento de la planta varía
dependiendo de la especie. La presencia de algunas especies condujo a una mayor desaparición de
la TPH que con otras especies o en el suelo no planeado. Entre las plantas tropicales probadas para
su uso en las islas del Pacífico, tres árboles costeros, kou (Cordia subcordata), milo (Thespesia
populnea) y kiawe (Prosopis pallida) y el naupaka nativo de playa de arbustos toleraron las condiciones
de campo y facilitaron la limpieza de suelos contaminados con combustible diesel [119]. Los pastos a
menudo se sembraron con árboles en sitios con contaminantes orgánicos como el método de
remediación primaria. Se descubrió que una cantidad tremenda de raíces finas en la superficie del
suelo es efectiva para unir y transformar contaminantes hidrófobos como TPH, BTEX y PAH. Los
pastos a menudo se plantaban entre hileras de árboles para proporcionar estabilización del suelo y
protección contra el polvo arrastrado por el viento que podía mover contaminantes fuera del sitio. Las
leguminosas como la alfalfa (Medicago sativa), el trébol igual (Trifolium hybridum) y los guisantes
(Pisum sp.) Podrían usarse para restaurar el nitrógeno en suelos pobres. La festuca (Vulpia myuros),
el centeno (Elymus sp.), El trébol (Trifolium sp.) Y la hierba canaria (Phalaris arundinacea) se utilizaron
con éxito en varios sitios, especialmente contaminados con desechos petroquímicos. Una vez
cosechados, los pastos podrían eliminarse como compost o quemarse.

La degradación microbiana en la rizosfera podría ser el mecanismo más significativo para la

eliminación de compuestos orgánicos de diesel en suelos contaminados con vegetación [120]. Esto
ocurre porque los contaminantes como los HAP son altamente hidrofóbicos y su absorción al suelo
disminuye su biodisponibilidad para la absorción de la planta y la fitotransformación.

10. Bacterias genéticamente modificadas

Las aplicaciones para microorganismos genéticamente modificados (GEM) en biorremediación han
recibido mucha atención para mejorar la degradación de desechos peligrosos en condiciones de
laboratorio. Existen informes sobre la degradación de contaminantes ambientales por diferentes
bacterias. La Tabla 5 muestra algunos ejemplos del uso relevante de la tecnología de ingeniería
genética para mejorar la biorremediación de contaminantes de hidrocarburos utilizando bacterias. Las
bacterias modificadas genéticamente mostraron una mayor capacidad de degradación. Sin embargo,
las preocupaciones ecológicas y ambientales y las restricciones reglamentarias son obstáculos
importantes para las pruebas de GEM en el campo. Estos problemas deben resolverse antes de que
GEM pueda proporcionar un proceso de limpieza efectivo a un costo menor.
Tabla 5: Ingeniería genética para la biodegradación de contaminantes.

Tabla 5: Ingeniería genética para la biodegradación de contaminantes.

Referencia a contaminantes de microorganismos.
Pseudomonas. vía putida 4-etilbenzoato Ramos et al. [100]
P. putida KT2442 vía tolueno / benzoato Panke y Sanchezromero [101]
Pseudomonas sp.FRI ruta cloro, metilbenzoatos Rojo et al. [102]
Comamonas. testosteroni
VP44 especificidad de sustrato o-, p-monoclorobifenilos Hrywna et al. [103]
Pseudomonas sp. LB400 especificidad de sustrato PCB Erickson y Mondello [104]
Pseudoalcaligenes
KF707-D2 especificidad de sustrato TCE, tolueno, benceno Suyama et al. [105]

El uso de bacterias modificadas genéticamente se aplicó al monitoreo del proceso de biorremediación,

monitoreo de cepas, respuesta al estrés, análisis de punto final y evaluación de toxicidad. Los ejemplos
de estas aplicaciones se enumeran en la Tabla 6. El rango de contaminantes probados incluyó
compuestos clorados, hidrocarburos aromáticos y tóxicos no polares. La combinación de conocimiento
microbiológico y ecológico, mecanismos bioquímicos y diseños de ingeniería de campo son elementos
esenciales para el éxito de la biorremediación in situ utilizando bacterias modificadas genéticamente.

Tabla 6: Aplicación de bacterias modificadas genéticamente para evaluar la eficiencia del proceso de
biodegradación.

11. Conclusión
 La limpieza de hidrocarburos de petróleo en el entorno del subsuelo es un problema del mundo real.
Una mejor comprensión del mecanismo de biodegradación tiene un alto significado ecológico que
depende de los microorganismos indígenas para transformar o mineralizar los contaminantes
orgánicos. El proceso de degradación microbiana ayuda a la eliminación del petróleo derramado del
medio ambiente después de la eliminación crítica de grandes cantidades de aceite por varios métodos
físicos y químicos. Esto es posible porque los microorganismos tienen sistemas enzimáticos para
degradar y utilizar diferentes hidrocarburos como fuente de carbono y energía.

El uso de bacterias genéticamente modificadas (GM) representa una frontera de investigación con
amplias implicaciones. Los beneficios potenciales del uso de bacterias modificadas genéticamente son
significativos. Pero la necesidad de bacterias GM puede ser cuestionable en muchos casos,
considerando que las especies indígenas a menudo se desempeñan adecuadamente, pero no
aprovechamos todo el potencial de las especies silvestres debido a nuestra limitada comprensión de
diversos mecanismos de fitorremediación, incluida la regulación de los sistemas enzimáticos que
degradan los contaminantes. .

Por lo tanto, sobre la base de la presente revisión, se puede concluir que la degradación microbiana
puede considerarse como un componente clave en la estrategia de limpieza para la remediación de
hidrocarburos del petróleo.

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