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M I C RO B I O LO G Í A
El virus
del resfriado común
Superan el centenar los rinovirus que causan, en humanos,
la mayor parte de los resfriados. Acceden a las células mediante la
unión a receptores específicos alojados en la superficie de la membrana
Núria Verdaguer, Ignasi Fita y Jordi Querol Audí
Ă ĈûĉüĈÿaúo ùoăİĄ ùoĄĉĊÿĊċďû ċĄa úû Ăaĉ Kruse llegó a la conclusión de que los virus («veneno», en la-
E
enfermedades más frecuentes. A pesar de tín) del filtrado eran los responsables de la enfermedad. Pero
tratarse de un trastorno leve, con síntomas no fue hasta mediados de los años cincuenta cuando científi-
que duran de una a dos semanas, es la causa cos de la Unidad de Investigación sobre el Resfriado Común,
principal de consultas médicas y absentismo en Gran Bretaña, cultivaron virus del resfriado.
laboral. Se estima que los niños sufren alre- En la actualidad se conocen más de 200 tipos de virus, de
dedor de seis a diez resfriados al año; los familias distintas, que causan los síntomas del resfriado co-
adultos, entre dos y cuatro, de promedio. El impacto económi- mún; los rinovirus o virus nasales (rino significa «nariz» en
co del resfriado común es, por tanto, notable. griego) son los principales. Los rinovirus humanos (HRV, por
La primera identificación de un virus como el agente cau- sus siglas en inglés), más de un centenar de virus con carac-
sante del resfriado común se debe a Walter Kruse, quien en terísticas serológicas distintas, integran el grupo más nutrido
1914 realizó un experimento crucial. Recogió secreciones nasa- de la familia picornaviridae; su nombre compuesto deriva de
les de un compañero enfermo de resfriado, las pasó a través «pico» (mínimo, los de menor tamaño), «RNA» (porque su ge-
de un filtro que retenía bacterias y otros microorganismos e noma consta de una molécula de ARN) y «virus». Se numeran,
inoculó el filtrado a varios voluntarios. La tercera parte de entre ellos, otros patógenos humanos como el virus de la polio,
los voluntarios inoculados desarrolló resfriados en tres días. los coxsackievirus y el virus de la hepatitis A. En total, la fami-
lia comprende unos 230 virus que, por su importancia médica
y económica, han sido objeto de intensos estudios.
EN SÍNTESIS El ciclo infeccioso se inicia con la unión del virus a la mem-
brana de la célula huésped, seguida de la penetración en el
La partícula vírica está formada por leza de esa proteína receptora deter- citoplasma vía endocitosis. Cuando el virus entra en el cito-
una cápside icosaédrica de unos mina la clasificación de los rinovirus, plasma, se desensambla, libera el ARN genómico y replica su
30 nanómetros de diámetro que en- los principales virus causantes del
información genética, que se traduce luego en una poliproteí-
vuelve y protege a una molécula de resfriado común.
na de unos 250 kilodalton. Esa proteína precursora experi-
ARN de cadena sencilla, de unos Una vez unido a la célula huésped, el
menta un procesamiento proteolítico posterior y da lugar a las
SEB CHANDLER/iStockphoto
NIm-Ia Región A
NIm-Ib
NIm-II
SALVO INDICACION, TODAS LAS ILUSTRACIONES SON CORTESIA DE LOS AUTORES
Región B
NIm-III Región C
Regiones antigénicas de los serotipos HRV14 y HRV2 repre- más largo que en HRV2, lo que explicaría que en HRV14 distin-
sentadas sobre un pentámero del rinovirus. En HRV14 (izquier- tos aminoácidos del mismo bucle B-C formen parte de dos sitios
da) se han localizado cuatro regiones antigénicas: NIm-Ia (rojo), antigénicos NIm-Ia y NIm-Ib. La región B, muy extensa, consta
NIm-Ib (azul), NIm-II (amarillo) y NIm-III (gris). En HRV2 de aminoácidos de las tres proteínas VP1, VP2 y VP3. El sitio an-
tres: A (azul), B (amarillo) y C (gris). La región antigénica A se tigénico C incluye un bucle expuesto de VP2 que no corresponde
halla en el bucle B-C de la proteína VP1, rodeando al eje quinario a ninguno de los sitios antigénicos descritos en HRV14. Este bu-
de la partícula icosaédrica. Ese bucle muestra una gran variabi- cle presenta también una elevada variabilidad en forma, longi-
lidad en longitud y secuencia entre los serotipos: en HRV14 es tud y secuencia entre los serotipos de rinovirus.
extremo 5’ a VPg (virion protein genome), una proteína diminu- extendida de su cadena polipeptídica; su extremo amino termi-
ta (22 aminoácidos) codificada por el propio virus. nal se halla modificado por la unión covalente a una molécula
En 1985, Michael G. Rossmann, de la Universidad de Purdue, de ácido mirístico, un ácido graso de 14 carbonos que parece in-
determinó la primera estructura cristalográfica de un rinovirus, tervenir en las interacciones con las membranas celulares.
el HRV14. La estructura revelaba que las tres proteínas mayores Una característica notable de las cápsides de los rinovirus es
(VP1, VP2 y VP3) se organizaban en la superficie de la partícula la presencia de un surco estrecho y profundo, que rodea los
icosaédrica, mientras que VP4 residía en la cara interna de la doce ejes quinarios de la partícula icosaédrica y está delimitado
partícula, en estrecho contacto con la molécula de ARN. por residuos de las proteínas VP1 y VP3. Cuando Rossmann re-
Conocemos ya la estructura atómica de cinco representan- solvió la estructura de HRV14 predijo que esa zona, el «cañón»,
tes del género Rhinoviridae: tres del grupo mayor (HRV14, sería la responsable de la unión con el receptor. La anchura de
HRV3 y HRV16) y dos del grupo menor (HRV1A y HRV2). De la tal depresión impediría el acceso a los residuos del fondo por
comparación entre las cinco estructuras se desprende que los parte de los anticuerpos, pero permitiría acomodar componen-
rinovirus presentan una homología estructural elevada. Las tes específicos más estrechos que se proyectaran desde el recep-
tres proteínas mayores (VP1, VP2 y VP3) comparten caracterís- tor celular. Los receptores deberían ser moléculas largas y es-
ticas estructurales: constan de un dominio central muy conser- trechas, con capacidad para interaccionar con los aminoácidos
vado, formado por un barril β de ocho cadenas antiparalelas en alojados en la base del cañón. Esa forma de unión permitiría al
forma de cuña. virus escapar de la respuesta inmunitaria, puesto que los anti-
Las diferencias entre las tres proteínas equivalentes en los cuerpos neutralizantes no podrían penetrar en el cañón, dado
distintos rinovirus estriban en el tamaño, secuencia y estructura su mayor tamaño.
de los bucles que conectan las cadenas β del barril central. Es En la actualidad se ha confirmado que el sitio de unión resi-
precisamente en esos bucles más accesibles donde se hallan los de en el interior del cañón, pero solo para los rinovirus del gru-
sitios de unión de los anticuerpos neutralizantes; tales regiones po mayor, no los del grupo menor.
determinan la superficie antigénica de los rinovirus. Todos los rinovirus estudiados presentan en el interior del
La proteína estructural más pequeña (VP4), que se aloja en barril β de la proteína VP1, justo por debajo de la base del ca-
la superficie interna de la cápside, presenta una conformación ñón, una hendidura rica en aminoácidos hidrofóbicos. Esa ca-
vidad se encuentra a menudo ocupada por un ligando de natu- que no ha sido expuesto previamente a un virus relacionado.
raleza lipídica (pocket factor) que desempeña una función Los anticuerpos pueden, en principio, unirse a cualquier re-
de suma importancia: estabiliza el virión durante el tránsito de gión de la superficie del virión. Sin embargo, se ha observado
una célula huésped a otra. que solo ciertas áreas limitadas de la superficie son dianas
Se han identificado varios tipos de compuestos de bajo peso para anticuerpos neutralizantes. Nos referimos a las regiones
molecular que desplazan el ligando de la cavidad. Reprimen la antigénicas.
infectividad del virus mediante la inhibición de funciones de La antigenicidad en rinovirus se ha estudiado ampliamente
la cápside. Los más estudiados de esos compuestos son los en dos serotipos: un representante del grupo mayor, HRV14, y
WIN, la tercera generación de antivirales neutralizantes deri- un representante de grupo menor, HRV2. Para ello se ha aplica-
vados de la rhodanina. En algunos rinovirus, la unión de esos do una técnica fundada en la selección de virus mutantes con
compuestos provoca una deformación del cañón y la consi- capacidad de escapar a la neutralización por un anticuerpo mo-
guiente pérdida de afinidad por ICAM-1. noclonal específico. Mediante la secuenciación del ARN se iden-
Se ha demostrado que los HRV exponen temporalmente al- tifican los aminoácidos alterados en el mutante. Posteriormen-
gunas regiones internas de las proteínas de la cápside. Este fe- te, a partir de las estructuras tridimensionales obtenidas por
nómeno de «respiración vírica» es inhibido por los compuestos difracción de rayos X, se localizan sobre la superficie del virus
WIN cuando se unen a la hendidura hidrofóbica de VP1. Se es- las mutaciones.
tán llevando a cabo ensayos clínicos sobre la eficacia de alguno Todas las regiones neutralizantes caracterizadas se hallan
de los antivirales aludidos en el tratamiento de resfriados pro- concentradas en las regiones más expuestas o protuberantes de
ducidos por picornavirus. la superficie del virus, alojadas sobre todo en los bucles que co-
nectan las cadenas del barril β. Las zonas más prominentes de
SUPERFICIE ANTIGÉNICA la superficie de las cápsides aparecen así constituidas por resi-
El desarrollo de vacunas y antivirales constituye uno de los ob- duos potencialmente variables, para enmascarar, quizás, a re-
jetivos principales para mejorar la prevención y el tratamiento siduos más críticos ante la respuesta inmunitaria.
de las infecciones causadas por picornavirus. Se han desarro- La identificación de los sitios «de escape» (que le permiten
llado vacunas contra las infecciones de poliovirus y de HAV escapar de la respuesta inmunitaria) en la superficie del virión
que se están aplicando con éxito. En el caso del resfriado co- reviste importancia para el análisis de los mecanismos de neu-
mún, en cambio, la obtención de vacunas entraña una dificul- tralización, para entender la base molecular de los serotipos y
tad formidable, dadas la multiplicidad de serotipos y la débil para el desarrollo de vacunas basadas en subunidades de la
protección cruzada que existe entre ellos. Definimos un seroti- cápside. Los anticuerpos pueden neutralizar la infectividad
po por la capacidad que tiene un antisuero (suero con anti- vírica mediante diversos mecanismos: agregación de virus,
cuerpos) monoespecífico de neutralizar la infección vírica. Un estabilización de las cápsides (lo cual impide la desencapsi-
antisuero monoespecífico es el que se obtiene de un animal dación), inducción de cambios conformacionales en las partí-
INFECCIÓN
«Pocket factor»
HRV14 ICAM-1 HRV2 VLDL-R
COOH COOH
Vesículas
Grupo mayor VP4 VPg recubiertas Grupo menor
Tras un reconocimiento N-terminal de clatrina La interacción con el receptor no
«Pocket VP1
inicial, ICAM-1 se une factor» induce la desencapsidación. Los
más profundamente virus viajan con el receptor a tra-
en el cañón. Desplaza ATP vés de las vesículas recubiertas
Desencapsidación
así al ligando que ocupa ARN ATP
ADP+Pi de clatrina hasta el endosoma,
la cavidad (pocket factor), donde el medio ácido induce la
ADP+Pi
lo que induce la desestabi- Replicación ARN(+) desencapsidación.
lización del virus. ARN(–) Traducción Reciclaje Endosoma
Poliproteína
Procesado
ARN(+)
proteínas Proteínas no
estructurales estructurales Una vez que el ARN se ha liberado al citoplasma, se inicia la
(polimerasa)
replicación. Este ARN se traduce a una poliproteína precursora, que sufre un
Ensamblaje
y liberación procesamiento proteolítico para dar lugar a las proteínas víricas maduras. Las
proteínas de la cápside se ensamblan luego alrededor de los nuevos genomas
dando lugar a la progenie de virus infecciosos que por fin se liberan por lisis
celular.
virus a modo de anillo, firmemente unido a la cúpula del eje Picornavirus-receptor interactions. M. G. Rossmann, Y. He y R. J. Kuhn en Trends in Microbio-
quinario; ello explicaría el efecto inhibidor de la infección ob- logy, vol. 10, págs. 324-331, 2002.
The concerted conformational changes during human rhinovirus 2 uncoating. E. A. Hewat,
servado en experimentos in vitro.
E. Newman y D. Blaas en Molecular Cell, vol. 10, págs. 317-326, 2002.
X-Ray structure of a minor group human rhinovirus bound to a fragment of its cellular
APERTURA DE LA CÁPSIDE receptor protein. N. Verdaguer, I. Fita, M, Reithmayer, R. Moser y D. Blaas en Nature Structural
Una vez se ha unido a la célula huésped, el virus sufre un cam- and Molecular Biology, vol. 11, págs. 429-434, 2004.
bio estructural: abandona su forma nativa empaquetada para Minor group human rhinovirus-receptor interactions: geometry of multimodular attach-
ment and basis of recognition. J. Querol-Audí, T. Konecsni, J. Pous, O. Carugo, I. Fita, N. Verda-
adoptar una conformación con capacidad de traspasar el geno- guer y D. Blaas en FEBS Letters, vol. 583, n.o 1, págs. 235-240, 5 de enero de 2009.
ma vírico hasta el interior celular. Esa transformación procede Uncoating of human rhinoviruses. R. Fuchs, y D. Blaas en Reviews in Medical Virology, vol. 20,
en el grupo mayor de manera distinta que en el menor. n.o 5, págs. 281-297, septiembre de 2010.
DE INTERES PERMANENTE
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