PENENTUAN TOTAL FLAVONOID DAN FENOLIK DARI EKSTRAK DAN

FRAKSI DAUN TANAMAN TIN (Ficus carica L.) VARIETAS BROWN

TURKEY DAN PURPLE JORDAN

Noveri Rahmawati1*, Emma Susanti1, Elza2

1
Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau, Pekanbaru, 28928

ABSTRAK
Tanaman tin (Ficus carica L.) merupakan salah satu tumbuhan yang diketahui mengandung senyawa flavonoid dan fenolik. Tujuan penelitian ini
adalah untuk mengetahui kadar flavonoid total dan fenolik total dari ekstrak metanol dan fraksi daun tin varietas Brown Turkey dan Purple Yordan.
Pengujian penentu kadar flavonoid total dilakukan dengan metode reagen pengompleks aluminium klorida dan untuk penentuan kadar fenolik total
dilakukan dengan metode Folin Ciocalteu. Hasil penelitian menunjukkan varietas Purple Jordan mengandung kadar flavonoid dan fenolik total
paling tinggi dibandingkan varietas Brown Turkey, yang dapat dilihat pada fraksi etil asetat. Kadar total flavonoid fraksi etil asetat varietas Purple
Jordan adalah 88,6 mg QE/g ekstrak dan varietas Brown Turkey adalah 73,5 mg QE/g ekstrak. Sedangkan kandungan total fenolik fraksi etil asetat
varietas Purple Jordan adalah 99,6 mg GAE/g ekstrak dan varietas Brown Turkey adalh 93,2 mg GAE/g ekstrak.

Kata kunci : Tin (Ficus carica L.), flavonoid, fenolik.

ABSTRACT
Tin (Ficus carica L.) are one species of plant that is known to contain flavonoids and phenolic compounds. A study was conducted to measure and
determine the total levels of flavonoids and total quantities of phenolic from the methanol extraction and fraction of tin leaves of the Brown Turkey
and Purple Jordan varieties. The results found when determining the total flavonoid content was carried out by using the aluminum chloride
complexing reagent method, while for the determination of the total phenolic content, the Folin Ciocalteu method was used. The results showed that
the Purple Jordan variety contained vastly higher levels of flavonoids and phenolic compared to the Brown Turkey variety, The results which can be
seen in the ethyl acetate fraction quantities . The total quantity levels of flavonoids within Purple Jordan varieties when using the ethyl acetate fraction
method were 88.6 mg QE / g extract while with the Brown Turkey varieties the results were 73.5 mg QE / g extract. When we added the total
phenolic content of Purple Jordan varieties of ethyl acetate fraction this was 99.6 mg GAE / g extract and Brown Turkey variety were 93.2 mg GAE /
g extract.

Keywords : Tin (Ficus carica L.), flavonoids, phenolic.

PENDAHULUAN dilakukan, pada sampel segar, ekstrak metanol dan

Tanaman tin (Ficus carica L.) adalah anggota dari
genus Ficus yang termasuk dalam keluarga Moraceae
(Tian et al, 2014). Tanaman tin ini berasal dari Arab
dan Asia barat, namun tanaman ini juga telah banyak
dibudidayakan di negara-negara Timur Tengah lainnya,
daerah Mediterania dan bahkan di Indonesia. Beberapa
varietas tin yang banyak dibudidayakan di Indonesia
adalah varietas Brown Turkey dan Purple Jordan
karena cocok ditanam di Indonesia yang beriklim
tropis. Secara tradisional tanaman tin (Ficus carica L.)
ini telah banyak digunakan. Rebusan daunnya dapat
mencegah wasir, menstabilkan tekanan darah, diabetes
dan sebagai peluruh batu ginjal (Lim, 2012; Guvenc et
al, 2009).
Kandungan kimia yang terdapat pada daun tin
(Ficus carica L.) berupa senyawa alkaloid, flavonoid,
fenolik, terpenoid, saponin, dan beberapa senyawa
bioaktif seperti arabinose, β-amirin, β-karoten,
glikosida, β-sitosterol dan xanthon (Joseph and Raj,
2011). Dari pengujian fitokimia yang telah dilakukan
pada kedua varietas daun tin (Ficus carica L.)
mengandung senyawa kimia yang berbeda tiap
varietasnya. Berdasarkan uji fitokimia yang telah
fraksi dari kedua varietas daun tin (Ficus carica L.)
mengandung senyawa fenolik, flavonoid, alkaloid,
terpenoid dan steroid.
Berdasarkan beberapa penelitian yang telah
dilakukan, Solomon et al (2006) menyatakan daun
tanaman Ficus carica L. diketahui merupakan sumber
senyawa fenolik yang sangat baik dan memiliki
aktivitas antioksidan yang tinggi yang bisa mencegah
beberapa penyakit. Penelitian dari beberapa varietas
Ficus yang terbukti memiliki kandungan total fenolik
yaitu, berdasarkan penelitian Mahmoudi et al (2016),
yang menyatakan bahwa dari beberapa varietas daun
tin (Ficus carica L.) di Algeria memiliki kandungan
total fenolik dan total flavonoid yang berbeda tiap
varietasnya, dari sepuluh varietas yang di uji, varitas
Bither yang paling tinggi kandungan fenolik total yaitu
58,704 mg GAE/g DE dan yang terendah pada varietas
Hamra yaitu 42,889 mg GAE/g DE, sedangkan untuk
flavonid total yang paling tinggi ditunjukkan pada
varietas Safra yaitu 16,039 mg QE/g dan yang paling
rendah flavonoid totalnya pada varietas Dhokkar
11,667 mg QE/g. Berdasarkan hasil penelitian
Wahyuni dan Hertiani (2016) tentang penentuan

*Corresponding Author: Elza

Farmasi, Sekolah Tinggi Ilmu Farmasi Riau,
Email: Elzaelza487@gmail.com
Telp. +62 82288732027
IJCCS ISSN: 1978-1520
kandungan fenolik dan flavonoid total sari larut air
daun Ficus carica L. dilaporkan kandungan total
fenolik pada daun Ficus carica L. adalah 1,43% b/b
GAE dan kandungan total flavonoid pada daun Ficus
carica L. adalah 1,42% b/b RE. Pada hasil penelitian
Trifunschi, et al (2015) melaporkan kandungan fenolik
dan flavonoid total dari ekstrak etanol daun Ficus
carica L. untuk total fenolik daun adalah 25,25 mg
cathecol/g dan untuk total flavonoid daun adalah 2,62
mg rutin/g.
Penelitian terkait genus Ficus lainnya adalah
penelitian Lushaini, et al (2015) tentang kandungan
total fenolik Ficus variegata. Pada penelitian ini
digunakan beberapa fraksi, dari hasil pengukuran yang
dilakukan diperoleh kandungan total fenol yang paling
tinggi terdapat pada fraksi metanol yaitu 48,848 µg
TAE/mg sedangkan yang terendah terdapat pada fraksi
n-heksan yaitu 17,281 µg TAE/mg. Untuk fraksi
kloroform kandungan total fenol adalah 18,929 µg
TAE/mg.
Berdasarkan uraian di atas maka dilakukan
penelitian terhadap perbandingan kandungan total
flavonoid dan total fenolik pada ekstrak dan fraksi dari
daun tanaman tin (Ficus carica L.) varietas Brown
Turkey dan Purple Jordan. Daun tanaman tin
diekstraksi dengan metode maserasi (Hanani, 2016).
Setelah dilakukan ekstraksi, selanjutnya ekstrak yang
diperoleh difraksinasi bertingkat berdasarkan tingkat
kepolarannya sehingga senyawa yang terdapat dalam
ekstrak akan larut sesuai sifat kepolarannya (Sarker et
al, 2006). Setelah difraksinasi kemudian dilakukan
penetapan total fenolik dan total flavonoid dengan alat
microplate reader. Digunakan microplate reader
karena memiliki beberapa keuntungan yaitu sampel
yang digunakan sedikit, sensitifitasnya lebih tinggi,
pekerjaan menjadi lebih cepat, serta datanya lebih
akurat (Shmaefsky, 2006).
Berdasarkan latar belakang di atas, maka
dilakukan penentuan total flavonoid dan total fenolik
dari ekstrak dan fraksi daun tin (Ficus carica L.)
varietas Brown Turkey dan Purple Jordan untuk
melihat pada sampel manakah yang memberikan kadar
total flavonoid dan fenolik tertinggi.
METODOLOGI
Alat dan Bahan
Alat-alat yang digunakan adalah Microplate
reader, timbangan analitik, vial, alat destilasi
(Clvenger Apparatus®), rotary evaporator, kertas
saring, corong, tisue, tabung reaksi, kaca, penangas air,
aluminium foil, labu ukur, batang pengaduk, plat tetes,
pipet tetes, pipet mikro dan alat-alat gelas lainnya.
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini
adalah daun tanaman tin (Ficus carica L.) varietas
Brown Turkey dan Purple Jordan, aquadest, metanol,
n-butanol, n-heksana, etil asetat, kloroform, kloroform
amoniak, asam sulfat, asam klorida, asam asetat
anhidrat, logam magnesium, besi (III), pereaksi Mayer,
pereaksi Lieberman-Bourchard, FeCl3, asam galat,
kuersetin, reagen, folin-ciocalteu 0,25 N, Na2CO3
7,5%, NaNO2 5%, AlCl3 10%, NaOH 1M.
Persiapan Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini
adalah daun tanaman tin (Ficus carica L.) varietas
Purple Jordan yang diperoleh dari perkebunan tanaman
tin di jalan Melur, kelurahan Sidomulyo Barat,
kecamatan Tampan, Pekanbaru. Sampel tersebut
disortasi basah dan didapatkan4,164 kg daun tin segar
varietas Brown Turkey dan 2,914 kg daun tin segar
varietas Purple Jordan, sampel dikeringanginkan dan
disortasi kering. Simplisia dihaluskan dengan blender
dan didapatkan simplisia halus masing-masing
sebanyak 1,126 g dan 750 g.
Pembuatan Ekstrak Metanol
Simplisia masing-masing sebanyak 1,125 g dan
750 g dimaserasi dengan metanol di dalam botol gelap
selama lima hari dengan lima kali pengulangan. Hasil
maserasi kemudian dipekatkan dengan rotary
evaporator sehingga didapatkan ekstrak kental metanol
masing-masing sebanyak 158,8534 g dan 83,4808 g.
Pembuatan Fraksi n-Heksana, Etil Asetat, n-
Butanol
Ekstrak metanol sebanyak 15 gram difraksinasi
dengan 50 mL air dan 50 mL n-heksana di dalam
corong pisah, lalu kocok secukupnya. Biarkan sampai
terbentuk 2 lapisan kemudian dipisahkan. Perlakuan ini
dilakukan 5 kali pengulangan sehingga diperoleh fraksi
n-heksana. Lapisan air difraksinasi kembali dengan 50
mL etil asetat dan dilakukan beberapa kali pengulangan
seperti perlakuan di atas sehingga diperoleh fraksi air
dan fraksi etil asetat. Lapisan air kemudian difraksinasi
kembali dengan 50 mL n-butanol dan dilakukan
beberapa kali pengulangan seperti perlakuan di atas
sehingga diperoleh fraksi air dan fraksi n-butanol.
Hasil fraksi diuapkan dengan rotary evaporator
sehingga didapatkan ekstrak kental fraksi n-heksana
sebanyak 4,323 gram varietas Brown Turkey dan 1,886
gram varietas Purple Jordan, fraksi etil asetat sebanyak
2,441 gram varietas Brown Turkey dan 2,337 gram
varietas Purple Jordan, fraksi n-butanol sebanyak 2,102
gram varietas Brown Turkey dan 3,4399 gram varietas
Purple Jordan, fraksi air sebanyak 5,748 gram varietas
Brown Turkey dan 4,618 gram varietas Purple Jordan.
Penentuan Kadar Total Flavonoid
Sampel sebanyak 2 mg ditimbang dan
dilarutkan dalam 2 ml pelarut yang sesuai, sehingga
didapatkan larutan induk dengan konsentrasi larutan
1000 ppm. Selanjutnya larutan induk dengan
konsentrasi 1000 ppm dipipet 100 µL, dan dimasukkan
ke dalam sumuran microwell plate dengan tiga kali
pengulangan ditambah 50 µL NaNO2 5% dan 50 µL
AlCl3 10% , kemudian diinkubasi selama 5 menit
diruang gelap dengan suhu ruangan. dan ditambah 100
µL NaOH 1 M dan diamkan selam 30 menit ditempat
yang gelap. Selanjutnya diukur serapannya pada
panjang gelombang 510 nm (Taei dkk, 2008).
Penentuan Kadar Total Fenolik
Sampel sebanyak 2 mg ditimbang dan
dilarutkan dalam 2 ml pelarut yang sesuai, sehingga
didapatkan larutan induk dengan konsentrasi larutan
1000 ppm. larutan induk dengan konsentrasi 1000 ppm
IJCCS ISSN: 1978-1520

dipipet 100 µL dari larutan induk, dimasukkan kedalam

microplate reader ditambahkan 50 µL dengan folin-
ciocalteu 0,25 N, kemudian diinkubasi selama 5 menit KTFe = V (ml) x X(µg/ml) x FP (ml/ml)
diruang gelap suhu ruang, campuran tersebut Bobot sampel (mg)
ditambahkan 100 µL Na2CO3 7,5% kemudian Keterangan :
diinkubasi lagi selama 30 menit diruang gelap suhu KTFe =Kandungan total fenolik (µg GAE/mg
ruang. Kemudian diukur absorbannya pada panjang ekstrak)
gelombang 765 nm (Mustafa dkk, 2010) V = Volume Larutan Induk
X = Konsentrasi (µg/ml)
ANALISIS DATA FP = Faktor pengenceran (ml/ml)
Kandungan total flavonoid dan fenolik
dihitung berdasarkan persamaan garis yang diperoleh HASIL DAN PEMBAHASAN
dari kurva standar, sehingga diperoleh persamaann Hasil
regresi linier, yaitu: Sebanyak 1.126 g simplisia daun tanaman tin
varietas Brown Turkey dan 750 g varietas Purple
Y=a + bx Jordan diektraksi dengan metode maserasi dan
Keterangan : difraksinasi. Hasil ekstrak dan fraksi dilakukan
Y = Absorban yang diperoleh dari sampel pemeriksaan kandungan metabolit sekunder. Hasil uji
a = Intersep fitokimia pada ekstrak metanol daun tin varietas Brown
b = Slop Turkey mengandung alkaloid, flavonoid, fenolik dan
x = konsentrasi dari sampel steroid. Sedangkan fraksi n-heksan mengandung
Absorban sampel dimasukkan ke dalam alkaloid dan steroid, fraksi etil asetat mengandung
persamaan kurva standar sebagai nilai y, dimana nilai x alkaloid, fenolik, flavonoid dan steroid, fraksi n-
yang diperoleh merupakan konsentrasi dalam ppm. butanol mengandung alkaloid, fenolik, flavonoid dan
Lalu dihitung kandungan total flavonoid dan total terpenoid, fraksi air mengandung alkaloid, fenolik,
fenolik dengan menggunakan rumus: flavonoid dan terpenoid.
Pengujian fitokimia varietas Purple Jordan
KTF = V (ml) x X(µg/ml) x FP (ml/ml) menunjukkan pada ekstrak metanol mengandung
Bobot sampel (mg) alkaloid, flavonoid, steroid dan fenolik. Sedangkan
Keterangan : pada fraksi n-heksana mengandung alkaloid dan
KTF =Kandungan total flavonoid (µg QE/mg terpenoid, fraksi etil asetat mengandung alkaloid,
ekstrak) flavonoid, fenolik, terpenoid, fraksi n-butanol
V = Volume Larutan Induk mengandung alkaloid, fenolik, flavonoid, dan fraksi air
mengandung alkaloid, fenolik, flavonoid dan saponin.
X = Konsentrasi (µg/ml)
FP = Faktor pengenceran (ml/ml)

Tabel 1. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak dan Fraksi Daun Tin Varietas Brown Turkey
Golongan Ekstrak Fraksi
Pereaksi
Senyawa metanol n-heksana Etil asetat n-butanol Air

Endapan putih Endapan putih Endapan

Endapan putih Endapan putih
Alkaloid Mayer lemah lemah putih
(+) (+)
(+) (+) (+)

Merah muda
Logam Mg + Bening merah muda Merah muda Merah muda
Flavonoid lembayung
HCl p (-) (+) (+) (+)
(+)
Hijau Hijau Hijau
Hijau Bening
Fenolik FeCl3 kehitaman kehitaman kehitaman
(+) (-)
(+) (+) (+)
Tidak
Tidak berbusa Tidak berbusa Tidak berbusa Tidak berbusa
Saponin H2O berbusa
(-) (-) (-) (-)
(-)
Tidak
Terbentuk
Liebermann- Merah terbentuk Merah Merah muda
Terpenoid warna merah
Burchad (+) warna Merah (+) (+)
(+)
(-)
IJCCS ISSN: 1978-1520

Tidak Tidak Tidak

Terbentuk Terbentuk
Liebermann- terbentuk terbentuk terbentuk
Steroid cincin biru warna hijau
Burchad warna hijau warna hijau warna biru
(+) (+)
(-) (-) (-)

Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak dan Fraksi Daun Tin Varietas Purple Jordan
Golongan Ekstrak Fraksi
Pereaksi
Senyawa metanol n-heksana Etil asetat n-butanol Air

Endapan
Endapan putih Endapan putih Endapan putih Endapan putih
Alkaloid Mayer putih
(+) (+) (+) (+)
(+)

Logam Mg + Jingga Bening Jingga Merah tua Merah muda

Flavonoid
HCl p (+) (-) (+) (+) (+)

Hijau Hijau Hijau

Bening Hijau
Fenolik FeCl3 kehitaman kehitaman kehitaman
(-) (+)
(+) (+) (+)

Tidak berbusa Tidak berbusa Tidak berbusa Tidak berbusa Berbusa

Saponin H2O
(-) (-) (-) (-) (+)

Liebermann- Merah Merah Merah Bening Bening

Terpenoid
Burchad (+) (+) (+) (-) (-)
Tidak Tidak Tidak Tidak Tidak
Liebermann- terbentuk terbentuk terbentuk terbentuk terbentuk
Steroid
Burchad warna biru warna biru warna biru warna biru warna biru
(-) (-) (-) (-) (-)

yaitu pada ekstrak sebesar 51,4 mg GAE/g ekstrak,

Pengujian total flavonoid ekstrak metanol
dan fraksi daun tin varietas Brown Turkey, yaitu pada
ekstrak sebesar 42,2 mg QE/g ekstrak. Fraksi n-
heksana 0,7 mg QE/g ekstrak, fraksi etil asetat sebesar
73,5 mg QE/g ekstrak, fraksi n-butanol sebesar 31,2
mg QE/g ekstrak dan fraksi air sebesar 14,4 mg QE/g
ekstrak. Kadar flavonoid ekstrak metanol dan fraksi
daun tin varietas Purple Jordan, yaitu pada ekstrak
sebesar 45,9 mg QE/g ekstrak, Fraksi n-heksana
sebesar 1,7 mg QE/g ekstrak, fraksi etil asetat sebesar
88,6 mg QE/g ekstrak, fraksi n-butanol sebesar 35,2
mg QE/g ekstrak dan fraksi air sebesar 17,8 mg QE/g
ekstrak. Hasil pengujian dapat dilihat pada Tabel 3.
pengujian total fenolik untuk ekstrak
metanol dan fraksi daun tin varietas Brown Turkey,
Fraksi n-heksana 0,6 mg GAE/g ekstrak, fraksi etil
asetat sebesar 93,2 mg GAE/g ekstrak, fraksi n-butanol
sebesar 28,8 mg GAE/g ekstrak dan fraksi air sebesar
19,3 mg GAE/g ekstrak. Kadar fenolik untuk ekstrak
metanol dan fraksi daun tin varietas Purple Jordan,
yaitu pada ekstrak sebesar 55,2 mg GAE/g ekstrak,
Fraksi n-heksana 1,7 mg GAE/g ekstrak, fraksi etil
asetat sebesar 99,6 mg GAE/g ekstrak, fraksi n-butanol
sebesar 35,8 mg GAE/g ekstrak dan fraksi air sebesar
21,4 mg GAE/g ekstrak. Hasil pengujian dapat dilihat
pada Tabel 3.

Tabel 3. Kadar Total Flavonoid dan Fenolik Daun Tin (Ficus carica L.)
Kadar Kadar
NO Tumbuhan Sampel Total Flavonoid Total Fenolik
(mg QE/g ekstrak) (mg GAE/g ekstrak)

Ekstrak Metanol 42,2 51,4

Fraksi n-Heksana 0,7 0,6

1 Varieta Brown Turkey
Fraksi Etil Asetat 73,5 93,2
IJCCS ISSN: 1978-1520
Fraksi n-Butanol
Fraksi Air
Ekstrak Metanol
Fraksi n-Heksana
2 Varietas Purple Jordan
Fraksi Etil Asetat
Fraksi n-Butanol
Fraksi Air
Pembahasan
Sampel berupa ekstrak metanol dan fraksi dari
daun tanaman tin (Ficus carica L.) varietas Brown
Turkey dan Purple Jordan yang didapat dari
pengeringan sampel segar daun tin kedua varietas
kemudian dikeringkan.
Sampel kering kemudian diekstraksi
menggunakan pelarut metanol. Pemilihan pelarut
metanol dikarenakan pelarut metanol merupakan
pelarut yang bersifat universal yaitu pelarut yang dapat
menarik senyawa yang bersifat polar hingga nonpolar,
dan juga untuk mendapatkan ekstrak total dari sampel
yang digunakan (Anonim, 2008). Metode ekstraksi
yang dipilih adalah metode maserasi. Proses maserasi
ini dilakukan selama 3-5 hari dengan tiga kali
pengulangan di dalam botol yang gelap dan tertutup
rapat, hal ini dilakukan untuk menghindari terjadinya
oksidasi oleh pengaruh suhu dan cahaya (Harborne,
1987). Metode maserasi dipilih karena merupakan
metoda yang sangat sederhana dalam pengerjaan
maupun alat dan pelarut yang digunakan (Hanani,
2016). Maserat yang diperoleh dipekatkan
menggunakan rotary evaporator yang suhunya telah
diatur terlebih dahulu. Proses pemekatan merupakan
penguapan dari maserat yang masih mengandung
pelarut sehingga diperoleh ekstrak kental yang
bertujuan agar konsentrasi senyawa lebih besar dan
memudahkan dalam penyimpanan (Hanani, 2014).
Ekstrak metanol daun tin yang didapat
kemudian difraksinansi. Fraksinasi dilakukan
menggunakan tiga jenis pelarut yang berbeda
berdasarkan derajat kepolaran pelarutnya yakni n-
heksana sebagai pelarut senyawa yang bersifat non
polar, etil asetat sebagai pelarut senyawa yang bersifat
semi polar dan n-butanol sebagai pelarut senyawa yang
bersifat polar. Prinsip pemisahan ini mengikuti hukum
koefisien distribusi atau koefisien partisi (Hanani,
2016). Koefisien partisi merupakan keadaan ketika
suatu senyawa ditambahkan kedalam suatu campuran
yang tidak saling tercampur, maka senyawa tersebut
akan mendistribusikan dirinya diantara campuran
pelarut tersebut berdasarkan afinitas pada masing-
31,2 28,8
14,4 19,3
45,9 55,2
1,7 1,7
88,6 99,6
35,2 35,8
17,8 21,4
masing pelarut. Sehingga dari proses pemisahan,
senyawa polar akan terlarut ke dalam pelarut polar,
begitu pula dengan senyawa semi polar dan non polar
akan terlarut dalam pelarutnya (Cairns, 2004).
Hasil fraksinasi kemudian diuapkan pelarutnya
dengan alat rotary evaporator Harborne, 1987)
sehingga diperoleh fraksi kental dari masing-masing
fraksi. Selanjutnya dihitung nilai rendemen dari
masing-masing fraksi daun tin (Ficus carica L.) ini.
Nilai rendemen di peroleh dari perbandingan berat
fraksi yang diperoleh dengan berat ekstrak awal yang
ditimbang dikalikan 100%. Nilai rendemen ini dapat
menggambarkan kemampuan suatu pelarut untuk
mengekstraksi kandungan senyawa dalam ekstrak
sesuai dengan polaritasnya dalam satuan persen.
Setelah diperoleh ekstrak dan fraksi daun tin,
selanjutnya dilakukan pengujian total flavonoid dan
total fenolik dari ekstrak dan fraksi daun tin (Ficus
carica L.) varietas Brown Turkey dan varietas Purple
Jordan. Pengukuran dilakukan dengan menggunakan
alat microplate reader. Microplate reader merupakan
suatu spektrofotometer khusus yang disusun untuk
membaca lempeng microplate. Keuntungan dari alat ini
yaitu memungkin untuk dapat mengukur banyak
sampel secara bersamaan (Shmaefsky, 2006).
Penentuan kadar total flavonoid dilakukan
dengan metode kolorimetri yang menggunakan
aluminium klorida dan standar yang digunakan adalah
kuersetin. Pengukuran kadar flavonoid berdasarkan
atas pembentukan kompleks dari AlCl3 dengan
senyawa flavonoid pada gugus orto hidroksi keton
yang memberikan efek batokromik (Xu dan Chang,
2007). Penggunaan AlCl3 dan NaNO2 pada metode ini
memberikan warna kuning sehingga dapat dibaca
serapannya oleh spektofotometer UV-Vis serta untuk
mempertahankan panjang gelombang pada daerah
visible. Reaksi tersebut terjadi dalam suasana basa
sehingga adanya penambahan NaOH. Standar yang
digunakan adalah kuersetin, dimana kuersetin ini
merupakan senyawa flavonol terbesar dengan rumus
molekul C15H10O7 dan memiliki potensi sebagai
antioksidan.
IJCCS ISSN: 1978-1520
Kuersetin yang merupakan standar pada
penentuan kadar total flavonoid digunakan untuk
menentukan kurva kalibrasi. Kurva kalibrasi dibuat
dengan 5 seri konsentrasi dari kuersetin yaitu 20; 40;
60; 80 dan 100 µg/mL dan diukur absorbansinya pada
panjang gelombang 510 nm dengan masing-masing
konsentrasi dilakukan dengan 3 kali pengulangan.
Absorban rata-rata yang diperoleh diplotkan dengan
konsentrasi dari kuersetin sehingga diperoleh
persamaan regresi linear y = 0,0088 x + 0,0309 dengan
nilai koefisien korelasi (r) sebesar 0,999 (Lampiran
18). Andayani dkk., (2008) menyatakan bahwa nilai r
yang mendekati satu menunjukkan persamaan regresi
linier dan dapat digunakan karena konsentrasi yang
mempengaruhi absorbansi sebesar 99%.
Kurva Standar Kuarsetin
1 oleh suatu alat yang disebut dengan microplate reader.
Absorbansi
0.5
y = 0.0088x + 0.0309
R² = 0.9996
0
0 50 100 150
Konsentrasi (ug/mL)
Gambar 1. Kurva Standar Kuersetin
Kemudian, masing-masing ekstrak dan fraksi
yang telah diukur absorbansinya dihitung kadar total
flavonoidnya dengan memasukkan kedalam persamaan
linear dari standar dan persamaan kadar total flavonoid
yang ekivalen dengan kuersetin. Pengujian kadar total
flavonoid dari ekstrak dan fraksi daun tin dilakukan
sebanyak tiga kali pengulangan agar diperoleh data
yang akurat.
Kadar total flavonoid dari ekstrak metanol
daun tin varietas Brown Turkey adalah 42,2 mg QE/g
ekstrak, pada fraksi n-heksana adalah 0,7 mg QE/g
ekstrak, pada fraksi etil asetat adalah 73,5 mg QE/g
ekstrak, pada fraksi n-butanol adalah 31,2 mg QE/g
ekstrak dan untuk fraksi air adalah 14,4 mg QE/g
ekstrak. Sedangkan kadar total flavonoid pada ekstrak
metanol daun tin varietas Purple yordan yaitu sebesar
45,9 mg QE/g ekstrak, pada fraksi n-heksana adalah
1,7 mg QE/g ekstrak, pada fraksi etil asetat adalah 88,6
mg QE/g ekstrak, pada fraksi n-butanol adalah 35,2 mg
QE/g ekstrak dan untuk fraksi air adalah sebesar 17,7
mg QE/g ekstrak.Kandungan total flavonoid
dinyatakan dalam QE (Quersetin Eqivalent) yaitu
jumlah kesetaraan µg kuersetin dalam 1 mg ekstrak.
Dari hasil, kadar flavonoid tertinggi terdapat
pada fraksi etil asetat. Diikuti ekstrak metanol, fraksi n-
butanol dan fraksi air sedang kadar flavonoid terendah
pada fraksi n-heksana. Pengujian total flavonoid yang
dilakukan Ahmed et al (2014) juga menunjukkan
bahwa fraksi etil asetat memiliki kandungan total
flavonoid yang tinggi dibandingkan semua sampel uji.
Perbedaan kadar flavonoid total pada setiap fraksi
disebabkan oleh flavonoid memiliki beberapa struktur
yang berbeda. Perbedaan struktur tersebut
menyebabkan senyawa golongan flavonoid memiliki
tingkat kelarutan yang berbeda-beda, tapi pada
umumnya senyawa flavonoid larut dalam pelarut semi
polar hingga polar.
Selanjutnya dilakukan penentuan kandungan total
fenolik. Penentuan kandungan total fenolik dengan
menggunakan reagen Folin-Ciocalteu dan asam galat
sebagai standar. Folin-Ciocalteu merupakan larutan
kompleks ion polimerik yang dibentuk dari asam
fosfomolibdat dan asam heteropolifosfotungstat Prinsip
metode ini yaitu terbentuknya kompleks berwarna biru
oleh senyawa fenolik senyawa didalam sampel akan
mereduksi fosfomolibdat fosfotungstat dalam Folin-
Ciocalteu membentuk molybdenum dalam suasana
basa, sehingga penggunaan sodium karbonat dapat
memberikan suasan basa dalam reaksi (Cicco et al.,
2009). Warna yang dihasilkan tersebut dapat dideteksi
Kadar yang dihasilkan dianggap sebagai kadar asam
galat dalam 1 g sampel.
Pada penentuan kadar total fenolik, terlebih
dahulu dilakukan penentuan kurva kalibrasi dari asam
galat dengan konsentrasi 20; 40; 60; 80 dan 100 µg/mL
yang diukur absorbansinya sehingga diperoleh
persamaan regresi linear y = 0,0092 x + 0,0157 dengan
r = 0,999. Nilai r berguna untuk mengetahui seberapa
besar konstribusi dari konsentrasi terhadap perubahan
nilai absorbansi. Jika nilai r =1, artinya variasi naik
atau turunnya nilai absorbansi disebabkan oleh
konsentrasi (Rachmat, 2013).
Kurva Standar Asam Gallat
1
0.8
Absorbansi
0.6
0.4
y = 0.0092x + 0.0157
0.2
R² = 0.9994
0
0 50 100 150
Konsentrasi (ug/mL)
Gambar 2. Kurva Asam Gallat
Dari persamaan regresi yang didapat tersebut,
maka dapat dihitung kandungan total fenolik dari
masing-masing sampel yang diukur absorbansinya
pada panjang gelombang 765 nm. Pemilihan panjang
gelombang ini berdasarkan pada penelitian terhadap
total fenolik yang telah dilakukan oleh peneliti-peneliti
sebelumnya (Xu and Chang, 2007; Ahmed et al.,
2014). Pengujian kadar total fenolik dilakukan
sebanyak tiga kali pengulangan. Pengujian dilakukan
sebanyak tiga kali pengulangan untuk keperluan
akurasi data.
Kadar total fenolik ekstrak metanol daun tin
varietas Brown Turkey adalah 51,4 mg GAE/g ekstrak,
pada fraksi n-heksana adalah 0,6 mg GAE/g ekstrak,
pada fraksi etil asetat adalah 93,2 mg GAE/g ekstrak,
IJCCS ISSN: 1978-1520

pada fraksi n-butanol adalah 28,8 mg GAE/g ekstrak sampel lainnya. Kadar total flavonoid fraksi etil asetat
dan untuk fraksi air mengandung total fenolik sebesar varietas Purple Jordan adalah 88,6 mg QE/g ekstrak
19,3 mg GAE/g ekstrak. Sedangkan untuk kandungan dan varietas Brown Turkey adalah 73,5 mg QE/g
total fenolik dari daun tin varietas Purple Jordan yaitu ekstrak. Sedangkan kadar total fenolik fraksi etil asetat
pada ekstrak mengandung total fenolik sebesar 55,2 mg varietas Purple Jordan adalah 99,6 mg GAE/g ekstrak
GAE/g ekstrak, pada fraksi n-heksana 1,7 mg GAE/g dan varietas Brown Turkey adalah 93,2 mg GAE/g
ekstrak, pada fraksi etil asetat adalah 99,6 mg GAE/g ekstrak.
ekstrak, pada fraksi n-butanol adalah 35,8 mg GAE/g
ekstrak dan pada fraksi air mengandung total fenolik DAFTAR PUSTAKA
sebesar 21,4 mg GAE/g ekstrak.
Ahmed, N., Fatima, K., Saeed, R., 2014, Analysis of
Dari hasil pengujian yang diperoleh
Phenolic and Flavonoid Contents, and the
menunjukkan bahwa kadar total fenolik dari fraksi n-
Anti-Oxidative Potential and Lipid
heksan lebih rendah dibandingkan semua sampel uji.
Peroxidation Inhibitory Activity of
Hasil pengujian fitokimia juga menunjukkan negatif (-)
Methanolic Extract of Carissa opaca Roots
fenolik pada fraksi n-heksan. Hal ini disebabkan oleh
and Its Fractions in Different Solvents,
rendahnya polaritas pelarut n-heksan untuk dapat
Antioxidants, (3), 671-683.
menarik senyawa fenolik yang bersifat polar, sehingga
Al-Snafi, A.E., 2017. Nutritional and pharmacological
kandungan fenolik pada fraksi n-heksana sangat
importance of Ficus carica - A review.
sedikit. Kadar total fenolik tertinggi diperoleh dari
Department of Pharmacology, College of
fraksi etil asetat. Penelitian Pratiwi et al (2010) juga
Medicine. Iraq : Thi Qar University. (7),
menunjukkan kadar fenolik tertinggi terdapat pada
33-48.
fraksi etil asetat, karena umumnya senyawa fenolik
Anonim, 2000. Parameter Umum Standar Ekstrak
lebih mudah diekstraksi oleh pelarut organik yang
Tumbuhan Obat, Depertemen Kesehatan
bersifat semi polar dan polar. Hal ini menunjukkan
Republik Indonesia, Jakarta.
bahwa sampel daun tin (Ficus carica L.) banyak
Anonim, 2008, Farmakope Herbal Indonesia Edisi IV,
memiliki senyawa fenolik yang bersifat semi polar,
Depertemen Kesehatan Republik
sehingga mudah terekstraksi pada pelarut etil asetat
Indonesia, Jakarta.
yang juga bersifat semi polar. Kadar fenolik dan
Biotek, 2010, Microplate Instrumentation. Thecnical
flavonoid sedang yang dihasilkan pada fraksi air daun
Handbook.
tin diduga karena adanya glikosida flavonoid. (Hidayati
dkk, 2017; Pokorni dkk,2001)
Berdasarkan uraian hasil pengujian diatas Cairns, D. 2004. Essential of Pharmaceutical
menunjukkan perbedaan kadar total flavonoid dan Chemisty. Jakarta: Intisari Kimia Farmasi
Edisi II. EGC.
fenolik pada kedua varietas. Kadar total flavonoid dan
Chesworth, J.M., Stuchbury, T., and Scalfe, J.R.,1998,
total fenolik pada daun tin (Ficus carica L.) varietas
Agricultural Biochemistr, Chapman &
Purple Jordan lebih tinggi dibandingkan daun tin
(Ficus carica L.) varietas Brown Turkey. Hal ini juga Hall, London
dapat dilihat pada intensitas warna yang dihasilkan Condit, I. J., 1955. Hilgardia. A Journal of Agricultural
Science Published by the California
pada kedua varietas yang di uji, pada varietas Purple
Agricultural Experiment Station. Vol: 23
Jordan menunjukkan warna yang lebih pekat dari
No: 11
varietas Brown Turkey. Perbedaan juga dapat terlihat
Crozier, A.,Clifford M.N., Ashihara H., 2006, Plant
pada kelima sampel yang digunakan, sampel yang
mengandung kadar flavonoid dan fenolik total tertinngi Secondary Metabolites: Occurence,
yaitu pada sampel fraksi etil asetat dan kadar terendah Structure and Role in the Human Diet,
Oxford: blackwell publishing Ltd, Hal: 11-
pada sampel fraksi n-heksana.Menurut Muchtadi
16, 244-149, ISBN-13: 978-4051-2503-3
(2008) hasil yang berbeda ini dikarenakan komposisi
Dewi, N, 2013, Peluang Usaha Buah Tin Raup
setiap tanaman berbeda-beda dan dipengaruhi oleh
Keuntungan Besar Dari Bertanam Buah
beberapa faktor, yaitu perbedaan varietas, keadaan
cuaca tempat tumbuh, pemeliharaan tanaman, cara Tin, Yogyakarta:Pustaka Baru Press
pemanenan, waktu pemanenan, dan kondisi Folin, O., Ciocalteu, V, 1927. On Tyrosine and
Tryptophane Determinations in
penyimpanan.
Proteins. Jour.Bio.Chem., 73 : 627-650,
SIMPULAN 1927, in. Todd-Sanford, 10, 412.
Gandjar, I.G. dan Rohman, A., 2007, Kimia Farmasi
Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan
Analisis, Pustaka Pelajar, Yogyakarta.
dapat disimpulkan bahwa kadar flavonoid dan fenolik
Guvenc, M., M. Tuzcu, and O. Yolmaz. 2009. Analysis
total dari daun tin (Ficus carica L.) varietas Purple
of Fatty Acid and Some Lipophilic
Jordan lebih tinggi dibandingkan varietas Brown
Vitamin in The Fruits of The Ficus carica
Turkey. Berdasarkan hasil yang didapat fraksi etil
Picked from the Adiyaman district, Res. J.
asetat dari kedua varietas mengandung kadar total
Biol. Sci. 4(3):320- 323
flavonoid dan fenolik yang paling tinggi dibandingkan
Hanani E. 2016. Analisis Fitokimia. Jakarta: EGC.
IJCCS ISSN: 1978-1520
Harbone, J.B.,1987, Metode Fitokimia Penentuan Cara
Modern Menganalisis Tumbuhan. Edisi
Ke-2, Terjemahan K. Padmawinata dan I.
Soediro. Penerbit ITB, Bandung.
Hidayati, N.D., Arifin, I., Antika, Y., Firdaus, A.,
Ardian, K.N. 2017. Pengujian Aktivitas
Antioksidan Ekstrak dan Fraksi Jantung
Pisang Mas (Musa acuminata colla)
Menggunakan Metode DPPH. Pharmacy.
14 (01).
Joseph, B., dan Raj, S. J. 2011. Pharmacognostic And
Phytochemical Properties Of Ficus Carica
Linn–An Overview. International Journal
of Pharmtech Research, 3(1), 8-12.
Lim, T. K. 2012. Ficus carica, di Dalam Edible
Medicinal and Non-Medicinal Plants
Volume 3 Fruits. Springer, Dordrecht,
heidelbreg. London: New York.
Lushaini, S., Wibowo, M.A., Ardiningsih, P., 2015,
Kandungan Total Fenol, Aktivitas
Antioksidan dan Sitotoksik Daun Kedadai
(Ficus variegata Blume), JKK, 4(2): 1-5.
Mahmoudi, S., Khali, Mustapha., Benkhaled,
Abderahim., Benamirouche, Karima.,
Baiti, Imen. 2016. Phenolic and Flavonoid
Contents, Antioxidant and Antimicrobial
Activities of Leaf Extracts From Ten
Algerian Ficus carica L. Varieties. Asian
Pacific Journal of Tropical Biomedicine.
Algeria. 6(3): 239-245.
Mawa, S., Khairana, H., dan Ibrahim, J. 2013. Ficus
carica L. (Moraceae): Phytochemistry,
Traditional Uses and Biological Activities.
Jurnal Drug and Herbal Research Central.
(1):1-8.
Markham, K,R,. 1988. Konsep Dasar Kimia Analitik,
Universitas Indonesia Press, Jakarta.
Muchtadi, D. 2013. Antioksidan dan Kiat Sehat Di
Usia Produktif, Alfabeta: Bandung.
Mustafa, R.A., Hamid, A.A., Mohamed, S. dan Abu
Bakar, F. 2010. Total phenolic compounds,
flavonoids, and radical scavenging activity
of 21 selected tropical plants. Journal of
Food Science. 75 (1): C28-C35.
Pokorni, j., Yanishlieva, N., dan Gordon, M. 2001. An
Antioxidant in Food Practical Application.
England: Wodhead Publishing Ltd.
Pratiwi, P., Suzery, M.., Cahyono,B., 2010. Total
Fenolat dan Flavonoid dari Ekstrak dan
Fraksi Kumis Kucing (Ortosiphon
stamineus B.) Jawa Tengah Serta Aktivitas
Antioksidannya. Jurnal Sains & Cyclodextrin, J. Pharm. SCI, 94 (5) :
matematika. 18 (4).
Rahardjo T,J., 2012, Kimia Hasil Alam, Pustaka
Pelajar, Jakarta.
Saifudin, A. 2014. Senyawa Alam Metabolik Sekunder
Teori, Konsep dan Teknik Pemurnian.
Yogyakarta: Deepublish.
Sastrohamidjojo, H., 1996, Sintesis Bahan Alam,
Gadjah Mada University press,
Yogyakarta.
Shmaefsky, B.R., 2006, Biotechnology 101, USA:
Greenwood Publishing Group.
Startil, P., Kuban, V., Fojtova, J., 2008, Comparison of
the Phenolics Contents and total activity in
wines as Determined by
Spectrophotometric Methods, Czech J.
Food Sci, 26(4) : 242-235.
Sarker, S. D., Latif, Z. Dan Gray, A. I. 2006. Natural
Product Isolation 2nd Edition, Natural
Product Isolation. New Jersey: Human
press inc. (1-26).
Solomon, A., Golubowicz, S., Yablowicz, Z.,
Grossman, S., Bergman, M., Gottlieb, H.,
Altman, A., Kerem, Z., & Flaishman, M.
A., 2006, Antioxidant Activities and
Anthocyanin Content of Fresh Fruits of
Common Fig (Ficus carica L.), J. Agric.
Chem., 54, 7717-7723.
Tian J, Zhang Y, Yang X, Rui K, Tang X, Ma J, Chen
J, Xu H, Lu L, Wang S. 2014. Ficus Carica
Polysaccharides Promote The Maturation
And Function Of Dendritic Cells. Int J Mol
Sci;15: 12469-12479.
Trifunschi, S.I., Munteahu, M.F.F., Ardelean, D.G.,
Orodon, M., Osser, G.M., Gligor, R.I.,
2015, Flavonoids and Polyphenols Content
and Antioxidant Activity of Ficus carica
L. Extracts From Romania, Matica Srpska
J. Nat. Novi Sad, 128: 57-65.
Umam, M. A., 2014.Ajaibnya Khasiat Daun dan Buah
Tin Penyembuh Segala Penyakit,
Semarang: Griya Mulia Indah.
Vermerris, W., Nicholson, R., 2006, Phenolic
Compound Biochemistry springer, The
netherlands.
Wahyuni , O.T., Hertiani, T, 2016, DPPH Radical
Scavenging Activity, Total Phenolics And
Flavonoids Of Water Soluble Extracts
Derived From Leaves And Fruit Of Ficus
Carica L. And Ficus Parietalis Bl, Trad.
Med. J.,21 (2) : 86-92
Xu, B.J., Chang, S.K.C., 2007, A Comparative On
Phenolic Profiles. And Antioxidant
Activities of Legumes as Affected by
Extraction Solvents, J. Food Sci. 72 (2) :
5159-5166.
Zheng, Y.,I.S. Haworthh., Z. Zuo., M.S. Chow A.H.,
2005, Physicochemical and Structural
Characterization of Querssetin-Beta-
1079-1089.
Zhu H., Wang Y., Liu Y., Xia Y., Tang T. 2009.
Analysis of Flavonoids in Portulaca
oleracea L. by UV–Vis Spectrophotometry
with Comparative Study on Different
Extraction Technologies. Food Analytical
Methods. (3) :90-97.
IJCCS ISSN: 1978-1520