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ICONONZO (TOLIMA)
Bogotá, Colombia
2011
i
UNIVERSIDAD DE LA SALLE
ICONONZO (TOLIMA)
Código: 14052084
Código: 14051143
Director
Bogotá, Colombia
2011
ii
APROBACIÓN
DIRECTOR _________________________
JURADO _________________________
JURADO _________________________
i
DIRECTIVOS
ii
COMPROMISO
Los trabajos de grado no deben contener ideas que sean contrarias a la doctrina
iii
AGRADECIMIENTOS
Sin embargo quiero hacer énfasis en la gratitud que le tengo a los Doctores Carlos
me place que estén como jurados de mi tesis de grado; En primer lugar el Doctor
que poseo, él me dio las bases para formarme en un área que hoy en día y gracias a
que las cosas hay que hacerlas de la mejor manera posible, pero de forma práctica,
rentable y dinámica.
Quiero dedicar un párrafo aparte para el Doctor José Carlos Coelho quien me ha
iv
en un mercado muy competido buscando la forma de ofrecer calidad e innovación en
académica en pregrado y nunca tuvo excusas para prestarme una mano amiga
persona que ha sido para conmigo, por esas razones para mi es y será por siempre
Por otra parte, se lo difícil que hubiera sido andar este camino sin la compañía diaria
López, a quien considero una gran persona pero más que eso un gran AMIGO, a él
muchísimas gracias por estar ahí y ser mi apoyo en estos duros años que hemos
persona hermosa que con orgullo puedo decir que amo, es quien está a mi lado
siempre para apoyarme y hacerme feliz; Solamente con ella es con quien deseo
compartir el resto de mis ciclos, para Diana Díaz muchísimas gracias por hacer parte
mi madre, creo que jamás me alcanzará el tiempo para decirle gracias al ser que me
dio la vida, esa persona que me ha cuidado celosamente desde el primer momento
v
que debo seguir, ella me enseño a valorar lo que se consigue con trabajo duro, es
quien aun siendo un hombre me cuida y se preocupa por mi; Es la persona que no
corazón y con todo el amor que siento por ella creo que me quedo corto diciéndole
infinitamente GRACIAS.
Primero que todo quiero agradecerle a las personas que realmente se merecen este
logro, y que han sido el motor y la inspiración para todas las cosas en mi vida, a mis
padres Héctor Zumaeta y Yaneth Acero, a ellos les digo gracias por apoyarme y
siempre a mi lado, ya que sin sus consejos, sin su ayuda y sin su amor esto no
habría sido posible. A mi hermano Yair, por ser eso, un verdadero hermano que
Quiero también agradecerles a las personas con las cuales compartí la mayoría del
tiempo durante esta etapa y que sin ellos las cosas no hubieran sido iguales, a los
que realmente les pudo llamar amigos y colegas con los cuales estudie, aprendí y me
divertí a Alejo, Pablo, Rafa, Iván, Aida, Sonix, Margara, y Judi, a todos ellos muchas
vi
Finalmente quiero darles las gracias a los doctores que me acompañaron durante mi
Doctores Mauricio Ruge, César Gómez y José Carlos Coelho, los cuales hacen parte
conocimientos.
vii
TABLA DE CONTENIDO
LISTA DE TABLAS................................................................................................................................. x
LISTA DE FIGURAS ............................................................................................................................ xii
RESUMEN ............................................................................................................................................ xiv
ABSTRACT .......................................................................................................................................... xvi
INTRODUCCIÓN ................................................................................................................................... 1
OBJETIVOS ........................................................................................................................................... 4
Objetivo General .................................................................................................................................... 4
Objetivos Específicos............................................................................................................................ 4
1. MARCO TEÓRICO ........................................................................................................................ 5
1.1 ANTECEDENTES DE LA INSEMINACIÓN ARTIFICIAL PROFUNDA .................................. 5
1.2. RAZA BRAHMAN .................................................................................................................... 13
1.2.1. Características físicas ......................................................................................................... 14
1.2.2. Ganado Cebú en Colombia ............................................................................................... 15
1.2.3. Indicadores productivos y reproductivos ......................................................................... 15
1.3. CICLO ESTRAL BOVINO ...................................................................................................... 19
1.3.1. Foliculogénesis .................................................................................................................... 20
1.3.2. FASES DEL CICLO ESTRAL ............................................................................................ 27
1.3.2.1. Fase folicular o de regresión lútea (Proestro) ............................................................. 27
1.3.2.2. Fase periovulatoria (Estro y Metaestro) ....................................................................... 28
1.3.2.2.1. Estro .............................................................................................................................. 28
1.3.2.2.2. Metaestro ...................................................................................................................... 30
1.3.2.3. Fase luteal (Diestro) ........................................................................................................ 30
1.3.3. Dinámica folicular ................................................................................................................ 31
1.3.4. Protocolo de sincronización para Inseminación a tiempo fijo (DIB) ............................ 34
1.3.4.1. Mecanismo de acción del dispositivo intravaginal (DIB) ........................................... 38
1.3.4.2. Mecanismo de acción del Benzoato de estradiol ....................................................... 39
viii
1.3.4.3. Mecanismo de acción de la Prostaglandina F2α (PGF2α) ....................................... 40
1.3.4.4. Mecanismo de acción de la Gonadotropina corionica equina (eCG) ...................... 41
1.4. CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA ........................................................................................ 42
1.4.1. Hiperactivación espermática .............................................................................................. 43
1.4.2. Contenido en glucosa-6-fosfato ........................................................................................ 45
1.4.3. Contenido en NADPH ......................................................................................................... 45
1.5. FECUNDACIÓN....................................................................................................................... 46
1.5.1. Interacción del espermatozoide con la zona pelúcida ................................................... 46
1.5.2. Fusión .................................................................................................................................... 49
1.5.3. Activación.............................................................................................................................. 50
2. MATERIALES Y MÉTODOS ..................................................................................................... 52
2.1. LOCALIZACIÓN....................................................................................................................... 52
2.2. POBLACIÓN Y MUESTRA .................................................................................................... 53
2.3. VARIABLES.............................................................................................................................. 54
2.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO ...................................................................................................... 55
2.5. MÉTODOS Y PROCEDIMIENTOS ...................................................................................... 57
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN .................................................................................................. 74
3.1. EVALUACIÓN SEMEN BOVINO BRAHMÁN BLANCO 221/42 AVG JUANCHO ........ 74
3.2. NOVILLAS PREÑADAS A PRIMER SERVICIO ................................................................. 76
3.3. DISCUSIÓN.............................................................................................................................. 78
4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .......................................................................... 81
5. LISTA DE REFERENCIA ........................................................................................................... 83
ANEXOS ............................................................................................................................................... 92
ix
LISTA DE TABLAS
Tabla 4. Inseminación Artificial a Tiempo Fijo con dos lugares de deposición del
dispositivo.................................................................................................................. 11
con el dispositivo convencional en el cuerpo del útero (DCC), con el dispositivo Ghent
en el cuerpo del útero (DGC) y con el dispositivo Ghent en ambos cuernos uterinos
(DGc). ........................................................................................................................ 12
x
Tabla 8. Protocolo de sincronización para inseminación a tiempo fijo DIB ............... 37
Tabla 11. Protocolo de sincronización para inseminación a tiempo fijo DIB + PGF2α
Tabla 12. Evaluación microscópica semen bovino Brahmán blanco 221/42 AVG
Juancho ..................................................................................................................... 74
Tabla 14. Posibles combinaciones de frecuencias con los mismos totales marginales
Tabla 15. Probabilidad exacta asociada con cada una de las disposiciones de
xi
LISTA DE FIGURAS
folicular. ..................................................................................................................... 33
Figura 9. Regresión del folículo dominante y emergencia de una nueva onda folicular
.................................................................................................................................. 39
Figura 16. Evaluación semen bovino Brahmán blanco 221/42 AVG Juancho. ......... 59
xii
Figura 17. Chapetas numeradas y cordón para hacer collares ................................ 60
Figura 18. Novillas con collares distintivos del tratamiento al que pertenecían ......... 61
Figura 19. Dispositivo intravaginal bovino DIB 0,5 gr y montaje en el aplicador ...... 62
xiii
RESUMEN
animal como lo son leche y carne llevan a las personas vinculadas con la producción
mejoramiento genético-productivo para este caso del ganado bovino; motivo por el
artificial tradicional (IAT),junto con todos sus factores asociados. Para esto, fueron
seleccionadas 20 novillas de raza Brahman blanco con edades que van desde los 23
hasta los 30 meses y peso aproximado que está entre los 300 y 400 Kg. Estos
dispositivo intravaginal liberador de progesterona (DIB® 0,5 gr), para luego dividirlas
independientemente con las dos técnicas a analizar. Logrando determinar que por
(TC). Por lo anterior, estamos seguros que al modificar la IAT por IAP en condiciones
xiv
Palabras clave: IAP, IAT, TC.
xv
ABSTRACT
The requirements of the growing human population for food of animal origin such
as milk and meat lead people involved in livestock production to innovate in search of
livestock enterprises. The aim of this study was to review the literature on deep
artificial insemination (DAI) with all its associated factors and analyze a fieldwork
where this technique is compared with traditional artificial insemination (TAI). For this,
we selected 20 white Brahman heifers with ages ranging from 23 to 30 months and
approximate weight between 300 and 400 kg. These heifers received an estrus
(DIB® 0.5 g), then they were divide in two groups of 10 repetitions each one and were
inseminate at fixed time and independently with the two techniques to analyze. Been
determined that through deep artificial insemination can reduce the number of sperm
in each insemination dose and improve the conception rates (CR). Therefore, we are
confident that modifying the TAI by DAI on commercial terms can give a boost to the
xvi
INTRODUCCIÓN
método eficiente que permita al ganadero lograr mayor número de preñeces con la
menor inversión posible, a través del uso de un procedimiento que permita optimizar
alternativa real más viable para mejorar los parámetros productivos en las
Esta técnica de reproducción asistida se define como el método por medio del
tanto en ganaderías de carne, leche y doble propósito (Giraldo, 2007; Barth, 1993).
productivas de los animales; al cruzar hembras bovinas con toros probados que
Dicha tasa se obtiene del producto entre la tasa de concepción por la tasa de
2
Con el pasar de los años se han formulado propuestas y técnicas para encontrar
del istmo del oviducto, donde se lleva a cabo la capacitación espermática que le
Resulta claro también que la IAP se debe llevar a cabo por profesionales
laboral en un campo donde los mayordomos, técnicos y tecnólogos cada vez toman
más fuerza.
3
OBJETIVOS
Objetivo General
blanco.
Objetivos Específicos
4
1. MARCO TEÓRICO
En el año 1952 se congeló por primera vez semen de un toro, prolongando la vida
2008).
nació en la finca San Ramón en el año de 1958, tras lo cual la técnica comienza a
1951; Salisbury y Van Demark, 1951; Stewart y Melrose, 1952; Olds et al., 1953,
5
Sin embrago, un estudio realizado por Senger (1988) en el cual se inseminaron
4178 hembras bovinas, por el contrario concluyó que la técnica de IAP genera un
con el uso de la IAT (Tabla 1), el cual fue avalado y concuerda con los hallazgos de
derecho e izquierdo
6
Tabla 1. Influencia del sitio de deposición espermático en el útero sobre el índice de
método para mejorar las tasas de fertilidad en el ganado con bajas dosis de semen
aun cuando este sea poco fértil o los espermatozoides que contiene hayan perdido
capacidad fecundante.
7
días de diferencia; Las novillas recibieron IAP o IAT a tiempo fijo con única o doble
comparación con el grupo con dosis estándar de semen e IAT (Tabla 2), coincidiendo
sus hallazgos con los reportados por López-Gatius (Citado en Kurykin et al., 2003).
En el mismo sentido Soto et al. (2002), publicaron una investigación que involucró
en total 776 hembras bovinas de las cuales 433 fueron inseminadas en el cuerpo del
útero y 333 por medio del método bicornual, mostrando como resultado porcentajes
3). Lo que indica un resultado 19% superior para las hembras inseminadas en por lo
Este mismo estudio permite observar además que la fertilidad con el primer
servicio lograda a través del método bicornual resultó en una tasa superior al
en Soto, 2002).
8
Tabla 2. Efecto de la presencia de cuerpo lúteo en la segunda aplicación de PGF2
inseminación novillas
Porcentaje de Preñez Porcentaje de Preñez
n % n % n % n %
9
Senger (Citado en Verbeckmoes, Van soom y De kruif, 2004) indica que se
espermatozoides que llegan al punto de fecundación por acción del flujo retrogrado
grupos de novillas para IATF con semen sexado, evaluó el sitio de deposición
10
existe diferencia significativa en el tiempo de IATF pero si en el punto de
Hunter (2001) por su parte reporta que disminuyendo inclusive 100 veces la
Tabla 4. Inseminación Artificial a Tiempo Fijo con dos lugares de deposición del
dispositivo.
11
Señala además que se ha realizado suficiente investigación concluyente en
cuanto a la IAP en cerdas y yeguas, pero aun es grande el campo que falta abarcar
con el dispositivo convencional en el cuerpo del útero (DCC), con el dispositivo Ghent
en el cuerpo del útero (DGC) y con el dispositivo Ghent en ambos cuernos uterinos
(DGc).
Método No. % % No
TNR % Desconocido
Inseminación Inseminaciones Preñez Preñez
12
1.2. RAZA BRAHMAN
La raza Brahman es originaria de Texas, nació como producto del cruce de las
rigurosamente descartados, y así dar origen a una nueva raza de carne con
características Bos indicus que se adaptara bien a los climas tropicales y sub-
facilidad, su piel es bastante fina y los rendimientos de sus canales son elevados, lo
13
Este ganado es muy rústico lo cual le hace ideal para las condiciones
Las hembras tienen una mayor vida productiva, hasta un 50% más larga que las
además tienen gran instinto materno y están muy bien adaptadas a regiones de
Su talla es grande con cabeza ancha, perfil recto, cuello corto y grueso, cuernos
cortos que se proyectan hacia atrás y hacia afuera, orejas largas y colgantes. Su
vientre es voluminoso con cruz alta y giba bien desarrollada tanto en la hembra como
El color gris acero es el más común en nuestro medio, los toros Brahman blanco
tienen tendencia a ser más oscuros en el tercio corporal anterior y/o posterior;
aunque también existe la variedad roja; su piel es muy fina y los rendimientos de
canal que tiene esta raza son elevados (Guía de razas, 2009).
14
1.2.2. Ganado Cebú en Colombia
Unidos, a partir de ese entonces comenzó el trabajo de mestizaje con las razas
Una década después ya se podía adquirir animales 7/8 Cebú, que transmitían a
Las hembras Brahman alcanzan un peso de 600 a 750 Kg; el peso al nacimiento
(Carrizales, 2005).
15
Existen varios indicadores del desempeño reproductivo, sin embargo la edad a
primer parto (E1P) es uno de los más representativos en la evaluación tanto de los
genéticos en sus ejemplares, sobre todo en las razas cebú y especialmente con la
raza Brahman, con lo cual se han mejorado los parámetros tanto reproductivos como
productivos.
16
Según Díaz, Badillo y Reneau (Citados en Castellanos, 2007) la edad a primer
parto para las hembras Brahman está por el margen de 37.9 y 39.1 meses. Sin
un promedio de 33.4 meses para edad a primer parto (Tabla 6), de cual se infiere
75 8 138.1 126.7
25 9 151.8 -
17
18 10 167.8 -
12 11 183.5 -
8 12 199.8 -
y obtuvo media aritmética, desviación estándar, rango anual y total de los principales
parámetros reproductivos durante los años 1995 y 2000, entre los cuales se evaluó la
edad a primer parto (E1P), dejando evidencia que este indicador tiende a disminuir
AÑO X S RANGO N
18
2000 938 56.17 864 996 4
lúteo, el cual determina el inicio de la pubertad fue de 717 días para novillas
Brahman lo cual establece que la E1P podría ser de 997 días aproximadamente,
adecuado.
ciclo reproductivo de los animales, para así identificar y resolver las perturbaciones
19
El ciclo estral es un proceso fisiológico que tiene como finalidad preparar las
desarrollo del feto. El ciclo estral no depende solamente del aparato reproductor de la
1.3.1. Foliculogénesis
primarios (Figura 2), quienes en conjunto con una capa de epitelio simple plano
(Palma, 2001)
20
Luego hasta el 2/3 de gestación, el folículo modifica su estructura y pasa a ser un
folículo primario (Figura 3) al modificar su capa epitelial por simple cúbica gracias a la
(Palma, 2001)
cromatina, replica su ADN, forma los microtúbulos del huso y empieza a abrir su
comunicación entre cromatidas hermanas unidas por medio del centrómero (Callejas,
2001).
21
Una vez superada está, tiene lugar la tercera etapa o paquiteno, que se
cromosomas homólogos, con el fin que cada cromosoma logre tener expresión
separadas en quinina (Figura 4), quienes detendrán su división meiotica hasta que la
meses de edad para ganado Bos taurus y 11-15 meses para los Bos indicus (Galina,
2006).
(Palma, 2001)
22
Cuando la hembra alcanza la pubertad el folículo pasa a ser terciario, el ovocito
adquiere una gruesa capa de glicoproteínas llamada zona pelúcida, la cual servirá
como protección del embrión en sus primeros días de desarrollo en caso que haya
la primera de ellas tiene como fin producir estrógenos por acción de la hormona FSH
Posterior a ellas se halla una vacuola (Antro folicular), rodeada por la granulosa y
esta su vez separada de la teca interna por la membrana basal y como última medida
la capa celular que brinda protección al folículo en crecimiento llamada teca externa
(Palma, 2001)
23
El siguiente paso en el crecimiento folicular es el folículo de Graff, que
de tamaño en el antro folicular que eleva la presión interna y en acción sinérgica con
una capa de tejido conjuntivo fibroso que realiza tensión sobre la teca externa, se
lleno de sangre que hace referencia al folículo estallado (cuerpo hemorrágico), quien
la formación del huso mitótico, esta etapa se llama metafase y es la segunda fase de
celular y por lo tanto tracción hacia los polos de la célula por parte de los
microtúbulos del huso sobre los cromosomas y la posterior división celular, lo que
citoplasma (1er cuerpo polar) y un óvulo funcional que inicia la segunda meiosis
24
al finalizar la formación de las dos células hijas que estas sean haploides (Callejas,
2001).
(SPZ) que fecunde el oocito para reactivar el bloqueo ocasionado por la falta de
centriolos para la formación del huso mitótico de la misma (Figura 6) (Álvarez, 2006).
(Callejas, 2001).
25
Figura 6. Desarrollo de la meiosis, desde la ovogénesis que se desarrolla en el
(Volodymyr, 2004)
26
En el caso que no se hubiera presentado la fecundación, el ovulo moriría
Según Callejas (2001), el ciclo estral bovino se puede dividir en tres fases:
Este periodo dura 2 a 3 días, comienza con la regresión del cuerpo lúteo del ciclo
27
Los estrógenos son producidos por las células que forman la pared del folículo
en desarrollo, una capa externa que son las células de la teca y otra capa interna que
luego son convertidos a estrógenos por las células de la granulosa, quienes han sido
1.3.2.2.1. Estro
periodo de receptividad tiene una duración de 18 horas pero puede variar entre 6 y
días en promedio. De todas formas, el intervalo entre dos celos puede variar
28
Durante el estro, el organismo de la hembra está bajo la acción de hormonas
receptores para la LH, necesarios para que el folículo siga su crecimiento y produzca
torna refractario al estradiol y cesan todas las manifestaciones del mismo (Callejas,
2001).
29
1.3.2.2.2. Metaestro
Tiene una duración promedio de 5 a 8 días post ovulación, depende del tiempo
(Ortega, 2005).
Es la fase más prolongada del ciclo estral; Esta comandada por la acción de la
en las células de la granulosa para dar lugar a la formación del cuerpo lúteo, que
30
crecimiento del cuerpo lúteo, hasta alcanzar los máximos niveles alrededor del día 10
estimulada por la acción de la FSH que dará lugar a un nuevo folículo dominante no
ovulatorio que finalmente sufrirá atresia y permitirá el desarrollo de otra onda folicular
(Guaqueta, 2007).
Los días 16 a 18 del ciclo estral son críticos para el mantenimiento de la función
del cuerpo lúteo y los niveles de progesterona elevados. Si la vaca no está gestante
el cuerpo lúteo será destruido por la liberación de PGF2α producida en el útero. Esta
2007).
onda del ciclo, se da un incremento sustancial de los niveles de estrógenos que hace
que el ciclo se repita y la vaca empiece a presentar un nuevo ciclo estral (Guaqueta,
2007).
31
Cuando la concentración plasmática de FSH aumenta se forma una onda
dominante listo para ovular al completar su desarrollo; En las células de dicho folículo
se producirá inhibina y otros factores locales haciendo que los folículos restantes se
retroalimentación positiva sobre la GnRH hipotalámica, que coincide con los valores
superficie del ovario el folículo dominante se expande ligeramente para luego ser
luteales en formación para generar el cuerpo lúteo funcional que alcanza su madurez
cada una genera un grupo de folículos antrales que inician su crecimiento hasta los 4
32
Ginther et al. (Citados en Huanca, 2001), afirman que la primera onda folicular
día 10 en ciclos de 2 ondas o en el día 9 para los ciclos de 3 ondas con una tercera
folicular.
metabólicas y se atresie; sin embargo cuando ocurre la regresión del cuerpo lúteo,
33
1.3.4. Protocolo de sincronización para Inseminación a tiempo fijo (DIV)
del 5%, del cual 10% corresponde a sistemas productivos ganaderos de Cría
(Corpoica, 2004).
Uno de los factores que más afecta este porcentaje es la detección de celo;
20 y el 50% de celos, y más del 30% de las vacas inseminadas no están en celo.
Los protocolos de sincronización para IATF han resultado muy útiles para
2008).
primer lugar el correcto desarrollo de la fisiología del ciclo estral, en segundo el uso
34
Figura 8. Protocolo de sincronización para inseminación a tiempo fijo DIB
(González, 2008).
calores en novillas de cruce Cebú es tan efectiva como con los de 1 gr, revelando
Una investigación realizada para IATF con animales de raza Bradford y Nelore
35
concluyendo además que dicho aumento está ligado a la aplicación de 400UI de
Un estudio presentado por Avilés, Cutaia, Videla Dorna, Aba y Bó, (2005a),
de P4 durante 7 días (DIB 1 gr ®;DIB 0,5 gr ®, Syntex S.A y CIDR-B 1,9 g ®, Pfizer
finalmente el DIB 1 gr ®.
(P=0,318). Sin embargo, todas las vacas del grupo DIB 0,5 gr ® tuvieron niveles
menores a 1 ng/ml antes de la remoción del dispositivo, por lo cual se concluyó que
no sería factible la utilización del DIB 0,5 gr ® usado por 7 días para ejercer control
ultrasonografía.
36
Tabla 8. Protocolo de sincronización para inseminación a tiempo fijo DIB
DIA ACCION
0 Aplicar el Dispositivo intravaginal (DIB®)
0 Inyectar Benzoato de estradiol 2mg IM
8 Inyectar Prostaglandina F2α 150µg IM
8 Retirar el Dispositivo intravaginal (DIB®)
9 Inyectar Benzoato de Estradiol 1mg IM
10 Inseminar a Tiempo Fijo 52-56 hs tras retirar DIB®
IATF. Sin embargo el DIB 0,5 gr ® usado (20,0%) resulta en menores porcentajes de
cíclicas.
por FSH y LH, dando como resultado la síntesis y liberación suficiente de estradiol
Un estudio realizado por Cutaia et al., (2006), en 482 novillas cebú, con
condición corporal promedio de 3 - 3,5 y 24 meses de edad; demostró que las tasas
37
de preñez son superiores cuando se utilizan protocolos donde se aplica 75µg de
59,5% con la utilización de PGF2α el día 0 y 8; contra 51.3% para PGF2α solamente
el día 8.
Otro estudio similar realizado por Pincinato et al., (2007), en 471 novillas cebú,
con respecto a donde solo se administró el día 8 (48,3% DIB 0,5 gr ®).
Por otra parte, queda evidenciado que al implementar IATF con sincronización de
celo, no solo se obtienen mejores tasas de preñez, sino además permite predecir con
mejores cuidados neonatales, los cuales se ven reflejados en las curvas de ganancia
mucosa vaginal absorbe de 0.5 a 0.6 mg diarios durante 9 días, asegurando así el
38
Además, crea la regresión del folículo dominante y acelera el recambio de las
ondas foliculares, seguido del cese de productos foliculares (Inhibina) que produce el
aumento de FSH encargada de crear una nueva onda folicular (Pincinato et al., 2006)
(Figura 9).
Figura 9. Regresión del folículo dominante y emergencia de una nueva onda folicular
(González, 2008).
39
Se utiliza para sincronizar el crecimiento folicular, ya que los estrógenos inducen
permitiendo así la emergencia de una nueva onda folicular que lleve a un nuevo
lúteo y varían según el momento del ciclo en que se encuentre el animal (Echeverría,
2006).
que provoca la apertura del cérvix (Vane & Botting; Phillippe et al; Niswender et al;
luteolisis del mismo hacia el final del diestro o gestación (Mc Donald; Adams; De la
40
El Cloprostenol® (Laboratorios Calier de los andes S.A.) es un análogo sintético
de la PGF2α con isomería óptica D; que le permite estimular una rápida regresión del
relajación del cérvix, por ser 3 a 4 veces más potente que aquellos compuestos con
que con igual forma química presentan estructuras moleculares distintas y por esto
En vacas entre los días 10 y 150 de gestación puede provocar aborto dos a tres
41
1.4. CAPACITACIÓN ESPERMÁTICA
que tras el coito pueden tardar en producirse hasta 8 horas (Háfez, 2002); Ocurren
al., 2001).
oviducto, debido que la presencia del óvulo en el ámpula del mismo no garantiza que
42
1.4.1. Hiperactivación espermática
(Álvarez, 2006).
43
Figura 11. Cambio en el patron de movimiento de espermatozoides hiperactivados
(Álvarez, 2006).
44
1.4.2. Contenido en glucosa-6-fosfato
glucosa-6-fosfato a otras vías metabólicas como por ejemplo la ruta de las pentosas,
45
Tal como sucede con la glucosa-6-fosfato, los espermatozoides que se capacitan
van a tener mayores niveles de NADPH que aquellos que no se capacitan (Álvarez,
2006).
1.5. FECUNDACIÓN
del oocito y a regular el movimiento ciliar del oviducto para facilitar su transporte al
ámpula del oviducto donde se produce la fecundación (Figura 12) (Volodymyr, 2004).
Para llevar a cabo este proceso los espermatozoides deben atravesar el cumulus
(Volodymyr, 2004).
otros en la zona pelúcida del oocito (receptores ZP1, ZP2, ZP3), encargados de la
46
La unión primaria del espermatozoide, relacionada con los receptores ZP3,
1994).
(Álvarez, 2006).
ocultos en la MAI (PH 20, PH 30), que interaccionan con los receptores ZP2 y
47
Por otra parte la unión secundaria también toma un rol importante en la activación
antes de la reaccion acrosómica, (N) nucleo, (MN) membrana nuclear, (A) acrosoma,
(Palma, 2001).
48
Yanagimachi, (1994), plantea que la interacción del espermatozoide con el oocito
En el mismo sentido las células del cumulus son las encargadas de la liberación
retrasar la reacción acrosómica para evitar que está se produzca antes de tiempo
(Yanagimachi, 1994).
1.5.2. Fusión
para fusionarse con la membrana plasmática del oocito (Figura 14) y dar lugar a
Este proceso se encuentra muy poco estudiado, pero se sugiere que está
como la fertilina y la ciristestina (Blobel et al., 1992, citados por Volodymyr, 2004).
49
Figura 14. Union de membranas celulares ovocito-espermatozoide
(Álvarez, 2006).
1.5.3. Activación
La liberación del Ca++ se produce en el interior del oocito por dos vías, una
50
oscilina, que ejerce su acción sobre el retículo endoplásmico liso, reservorio celular
tras la activación del factor promotor de la meiosis (MPF), por efecto del Ca++, la
para evitar la poliespermia, debido a que estos contienen una enzima proteolítica que
proteínas de unión a la actina, que forman los microfilamentos que se van a situar
quienes se desplazan hacia el centro del óvulo, donde se rompen los membranas
que los rodea y el material genético se ordena en el huso mitótico, dando como
2004).
51
2. MATERIALES Y MÉTODOS
2.1. LOCALIZACIÓN
hectáreas, de las cuales 23.841 corresponden al área rural que en su mayoría están
molestos, ya que se hallaban en pastoreo al aire libre su confort total fue dependiente
52
De igual manera el contacto con los animales fue el estrictamente necesario para
reducir el estrés por manejo, ya que solo se reunieron para los chequeos
Sexo: Hembras
Edad: 23 - 30 meses
para reproducirse, puesto que era la única forma de lograr mantener y llevar a
artificial.
53
2.3. VARIABLES
Inseminador <0.01
DC – Dispositivo convencional
DG – Dispositivo Ghent
54
Por esta razón, en este estudio de caso se trabajó con una única variable, la
Con el fin de eliminar toda variable adicional que pudiera alterar los resultados, se
Fisher; el cual permite analizar si dos variables dicotómicas están asociadas cuando
El test exacto de Fisher evalúa la probabilidad asociada a cada una de las tablas
2 x 2 (Tabla 10) que se pueden formar manteniendo los mismos totales de filas y
obtiene bajo la hipótesis nula de independencia de las dos variables que se están
considerando.
55
La probabilidad exacta de observar un conjunto concreto de frecuencias a, b, c y
Característica A
Presente a b a+b
Ausente c d c+d
Esta fórmula se obtiene calculando todas las posibles formas en las que
podemos disponer n sujetos en una tabla 2 x 2 de modo que los totales de filas y
que puedan formarse con los mismos totales marginales que la tabla de resultados, y
56
indicará la probabilidad de obtener una diferencia entre los grupos mayor o igual a la
asume que las dos variables no son independientes y están asociadas. En caso
sumar las probabilidades de aquellas tablas con un valor p asociado menor o igual a
Una novilla debe contar con un adecuado desarrollo corporal y fisiológico para
57
En este proyecto fueron seleccionadas 20 hembras bovinas en el municipio de
realizaron empleando semen bovino del toro Juancho de la raza Brahmán blanco con
cc y fue previamente evaluado para realizar control de calidad según el protocolo que
(Autores, 2011)
58
Las novillas fueron vacunadas contra fiebre aftosa en el mes de noviembre de
cíclicos.
Figura 16. Evaluación semen bovino Brahmán blanco 221/42 AVG Juancho
(Autores, 2011).
color negro para el grupo IAP y chapetas previamente numeradas desde el 1 hasta el
10; mientras las novillas del grupo IAT se identificaron con collares de color rojo y
59
chapetas con números de 11 a 20 (Figura17). Dándoles así un registro único que
e inseminación artificial a tiempo fijo a cada una de las hembras bovinas mediante el
(Autores, 2011)
60
Figura 18. Novillas con collares distintivos del tratamiento al que pertenecían
(Autores, 2011)
Tabla 11. Protocolo de sincronización para inseminación a tiempo fijo DIB + PGF2α
El día 0 del protocolo se implantó el DIB 0,5 gr a cada una de las novillas
concentración de progesterona (P4) circulante, tras la lisis del cuerpo lúteo presente
61
en el ciclo reproductivo y así evitar los altos niveles de P4 endógena que pudieran
Figura 19. Dispositivo intravaginal bovino DIB 0,5 gr ® (Laboratorio Syntex) y montaje
en el aplicador
(Autores, 2011)
62
Figura 20. Implantando el DIB 0,5 gr
(Autores, 2011)
63
Figura 21. Inyección de 2 ml de Benzoato de Estradiol® (Laboratorio Syntex) en el
anca izquierda
(Autores, 2011)
anca derecha
(Autores, 2011)
64
En el día 8 del protocolo de sincronización se retiró el dispositivo intravaginal DIB
(Autores, 2011).
(Autores, 2011).
65
Figura 25. Inyección de 1,7 ml de Novormon® en el anca izquierda
(Autores, 2011).
(Autores, 2011).
66
. El último día del protocolo de sincronización de celos correspondió a la
inseminación artificial de las novillas (Figura 27, 28 y 29) empleando dos técnicas de
(Autores, 2011).
67
Figura 28. Montaje de pajilla en pistola de inseminación artificial
(Autores, 2011).
aparato reproductor bajo los efectos de los estrógenos, los cuales se evidenciaron en
68
La inseminación se efectuó con previa restricción física de los animales, usando
que lo requirió.
pasar los anillos del cérvix para el caso de inseminación artificial tradicional (Figura
69
Figura 29. Inseminación artificial de novilla
(Autores, 2011).
70
Figura 30. Inseminación artificial tradicional
(DeJarnette, s.f)
(DeJarnette, s.f)
71
Figura 32. Equipo de inseminación artificial bovina
(Autores, 2011).
resultados.
72
Figura 33. Chequeo reproductivo 45 días post inseminación
(Autores, 2011).
exacto de Fisher para así tener una base objetiva al momento de validar los
73
3. RESULTADOS Y DISCUSIÓN
JUANCHO
LIP para el semen bovino importado al país; determinando así las características
(Autores, 2011).
74
Tabla 12. Evaluación microscópica semen bovino Brahmán blanco 221/42 AVG
Juancho
Motilidad Individual 40 %
Morfología
en Barrios, 2002).
75
3.2. NOVILLAS PREÑADAS A PRIMER SERVICIO
las variables (Tabla 13, 14 y 15); los resultados obtenidos no presentaron diferencia
significativa (p=0,05).
frente a la IATF-Tradicional
podrían obtener con los mismos totales marginales que en la Tabla 13.
76
Tabla 14. Posibles combinaciones de frecuencias con los mismos totales marginales
Tabla 15. Probabilidad exacta asociada con cada una de las disposiciones de
77
3.3. DISCUSIÓN
inmunología uterina que se desarrolla en la fase periovulatoria del ciclo estral bovino,
compuesta por el estro y la primera parte del metaestro en las hembras bovinas
puesto que durante esta etapa se presentan cambios celulares que influyen en el
proceso de fertilización; en esa fase del ciclo estral bovino se hace necesario
realizan migración a través del lumen uterino (Dhaliwal et al., 2001; Martínez, 1996).
Este hallazgo sin ser definitivo concuerda con Kerns et al. Y Carson et al.
los animales del grupo control quienes no recibieron la aplicación de dicha hormona
esteroidea.
78
También, se ha determinado que los estrógenos actúan como una hormona de
crecimiento sobre las células del miometrio y las glándulas endometriales (Callejas,
Por otra parte, cabe señalar que los espermatozoides contenidos en las pajillas a
utilizar en la inseminación artificial han sufrido una serie de procesos que les lleva a
estar libres de secreciones de las glándulas anexas y a remplazar las mismas por un
medio de congelación que les permite encontrarse pre-capacitados, puesto que uno
De igual forma, Suarez (Citado en Gonçalves, 2008), indica que al menos el 50%
79
durante el proceso, lo cual disminuye su poder fecundante y su viabilidad post
tasas de concepción sin diferencia significativa con una dosis reducida de semen en
80
4. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
las que ofrece mejores tasas de concepción tras su adopción, a pesar de ello solo
permitió revelar una tendencia porcentual favorable de la IAP sobre la IAT; por tal
profesional para así colectar datos suficientes que lleven a brindar un dictamen
contundente.
profesionales en el área.
múltiples ventajas con dosis bajas de semen o con semen de baja calidad (sexado),
81
Colombia tiene el potencial geográfico y demográfico suficiente para realizar
adaptadores de tecnologías.
82
5. LISTA DE REFERENCIAS
producir carne en el trópico Boletín No. Extraído el 16 de Octubre 2010 desde de:
http://www.asocebu.com/getdoc/2b6a01fa-45d5-4522-a00d-
98b048a94d25/Monteria08_Comunicado2.aspx
83
Córdoba, Instituto de Reproducción Animal Córdoba, Universidad Nacional del
Clinics of North America, food animal practice. Female Bovine infertility. Volume 9 # 2
84
Callejas, S. (2001). Fisiología del ciclo estral bovino. En G. Palma, Biotecnología
Salle, Bogotá.
Cutaia, Pincinato, D.; Peres, L.C; Bó, G.A; Menchaca. (2006). Nuevos avances de
85
Dhaliwal, G. Murray, R. Woldehiwet, Z. (2001). Some aspects of immunology of
reproductive solutions.
animal.com.ar/informacion_tecnica/raza_criolla/36-reproduccion.pdf
N° 01.
86
Giraldo, J. (2007). Una mirada al uso de la inseminación artificial en bovinos.
Barranquilla.
161-163.
Hunter, R. Wilmut, I. (1982). The rate of functional sperm transport into the
87
Hunter, R. (2001). New Breeding Opportunities whit Deep Cornual Insemination:
36, 217-222.
exploit new sperm technologies in cattle. Animal Reproduction Science, 79, 157-70.
74-80.
88
Pacheco, J. Villalta, P. Barriga, D. (s.f). Capacitación espermática in vivo de
progesterona del dispositivo intravaginal Bovino DIV-B sobre las tasas de preñez
de PGF, dosis de P4 contenida y número de uso del DIB sobre los porcentajes de
(pp. 166–195)
89
Senger, P. Becker, W. Davidge, S. Hillers J. Reeves, J. (1988). Influence of
3010-3016.
activity in situ reveals limitation in the glutathione antioxidant defense system due to
disponibles en Sonora.
Urner, F. Sakkas, D. (1999). A possible role for the pentose phosphate pathway of
90
Extraído el 15 de Febrero de 2011 desde
http://www.dspace.espol.edu.ec/bitstream/123456789/1868/1/3696.pdf
complutense de Madrid.
91
ANEXOS
92
Anexo B. Dificultad, hora y sitio de depósito espermático en la inseminación artificial
93
94
95
96
97
98
99
100
101
102
Anexo C. Chequeo reproductivo 45 Días posterior a la inseminación artificial
ID Animal Hallazgo
1 Cargada
2 Cargada
3 Vacía – ODCL1
4 Cargada
5 Cargada
6 Cargada
7 Vacía – ODCL2
8 Cargada
9 Cargada
10 Cargada
11 Cargada
12 Cargada
13 Vacía – ODCL2
14 Vacía – OIF3
15 Cargada
16 Vacía – ODCL2
17 Vacía – OICL1
18 Cargada
19 Vacía – OICL2
20 Cargada
Convenciones
103