Cromatografía

TRABAJO DISEÑO Y CONSTRUCCIÓN

Unidad 2, Fase 2

Presentado por:
Cindy Paola Camargo Mejía Cód.: 1095794698
Jhon Anderson Ramírez Tamayo Cód.: 1090476023
Sergio Luis Tarazona Cód.: 1090481196
Lizeth Paola Velasco Vidal Cod.: 1064432557

Presentado a:
Marcela Andrea Zambrano

Grupo: 401542-6

Universidad Nacional Abierta y a Distancia (UNAD)

Cead Bucaramanga
2018
INTRODUCCIÓN

La cromatografía es una de las operaciones fundamentales de la química gracias

a su versatilidad y simplicidad para separar mezclas, gracias a las diferencias en
propiedades. La aplicación de las propiedades, permite a los profesionales
desarrollar cada uno de los factores y solucionar de manera objetiva, problemas
en los distintos ámbitos. A través de desarrollo de ejercicios, se demuestra la
comprensión de conceptos y conocimientos, referentes la cromatografía y su
naturaleza, suministrados por el curso en el entorno de conocimiento.

El desarrollo de los problemas de manera colaborativa y la retroalimentación de

los ejercicios individuales, permite desarrollar y solucionar los interrogantes que
cada estudiante genera através de este método de enseñanza, permitiendo así la
interacción entre estudiantes y tutores, que permitirán la compresión de los
conceptos. Todo esto prepara al estudiante para trabajo en equipo, actividad muy
útil y necesaria en los diferentes ámbitos laborales
OBJETIVOS

Consultar las referencias bibliográficas de la Unidad 2 del curso con el fin de

conocer los conceptos básicos de la cromatografía que permitan desarrollar los
ejercicios prácticos.

Aplicar los conceptos y métodos básicos en la resolución de problemas de las

actividades individuales y colaborativas.

Desarrollar habilidades que permitan diferenciar los métodos de la cromatografía y

aplicar conocimientos en entornos laborales y/o cotidianos.
APORTE INDIVIDUAL DE JHON ANDERSON RAMÍREZ TAMAYO
CÓD:1090476023

Paso 4. De la lectura realizada en el paso anterior, de manera individual resuelva

los siguientes enunciados en un documento aplicando normas APA:

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de Rx.

2.4 𝑐𝑚
Rx= 3.4 𝑐𝑚

Rx= 0,705

b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en la

Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de Rf.

0,6 𝑐𝑚
Rf= 0.4 𝑐𝑚

Rf= 1,5
c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?
Por que fluye a través de una fase estacionaria, arrastrando con ella a los
compuestos de la mezcla que se mueve en una dirección definida. Puede ser un
líquido (cromatografía de líquidos o CEC). Un gas (cromatografía de gases) o un
fluido supercrítico (cromatografía de fluidos supercríticos). La muestra que se está
separando/analizando (formada de analito/s y el disolvente) se inyecta en la fase
móvil que se mueve a través de la columna. En el caso de la cromatografía líquida
de alta resolución, HPLC, la fase móvil es un disolvente no polar como
el hexano (fase normal) o bien algún disolvente polar (cromatografía de fase
reversa).

d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento con
la composición de la fase móvil?

Puesto que la fase móvil es inerte y quedo en la línea de siembra, el

Clorobenzaldehído es muy volátil, y nos puede reaccionar entonces es un
compuesto que no va a realizar ningún desplazamiento y por eso no tuvimos
moviento.
E. Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4 cm en
relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?

A la salida de la columna van saliendo consecutivamente todos los componentes y

el desplazador, separados pero uno junto al siguiente. En la práctica suele haber
un poco de solapamiento entre unos componentes y otros, por lo que el método no
es muy adecuado para separaciones cuantitativas, aunque presenta la ventaja de
poder determinar con facilidad el número de componentes. Además, la longitud de
cada zona (o volumen recogido) es una medida de la concentración de la especie
en la mezcla.
APORTE DE SERGIO LUIS TARAZONA CÓD.: 1090481196

Pasó 4. De la lectura realizada en el paso anterior, de manera individual resuelva

los siguientes enunciados en un documento aplicando normas APA:

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de Rx.
5.7 𝑐𝑚
Rx= 0.4 𝑐𝑚

Rx= 14.25

2.4𝑐𝑚
Rx= 3.4 𝑐𝑚

Rx=0.705

b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en la

Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de Rf.

0,6 𝑐𝑚
Rf= 0.4 𝑐𝑚

Rf= 1.5
c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?

Porque fluye en la fase estacionaria, donde arrastra los compuestos de la mezcla

y se mantiene definida donde pueden ser 3 clases Liquido Gas o fluidos.

d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento con
la composición de la fase móvil?

Porque la fase móvil se mantiene inerte en una sola posición siendo más
específicamente en la línea de la siembra “C” de la muestra donde no obtuvo
ningún especie de movimiento y se mantuvo estática.

e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4 cm

en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?

Hubo un desplazamiento en forma secuencial o de forma consecutiva de las

muestras donde se puede definir una forma cuantitativa de las mismas no hubo
una dispersión muestral y se mantuvo un equilibrio de las mismas donde la
muestra de 2.4 se mantuvo al margen de las demás.

APORTE Lizeth Paola Velasco Vidal Cod.: 1064432557

Se empleó una solución estándar para calcular el desplazamiento de la muestra.

La altura de la placa (h) es de 5.7 cm, la distancia del borde a la línea de siembra
es de 0.4 cm. El desplazamiento de la solución patrón (a) fue de 3.4 cm y el
desplazamiento de la muestra (d) fue de 2.4 cm (ver Error! Reference source not
found.).

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar, calcule el valor de Rx.
b.
 3.4cm

Sustancias
5.7
estándar
cm
2.4cm

0.4 cm

desplazamiento del compuesto

𝑅𝑋 =
desplazamiento del patrón

𝑋𝐴
𝑅𝑋 =
𝑋𝐵
3.4𝑐𝑚
𝑅𝑋 = =1
3.4 𝑐𝑚

Se empleó una fase móvil compuesta por 8% de Tolueno y 92% de

Diclorometano, y se sembraron cuatro muestras: a) 4-hidroxibenzaldehído, b)
Vainilla, c) Clorobenzaldehído y d) muestra problema. La altura de la placa (h) es
de 5.7 cm, la distancia del borde a la línea de siembra es de 0.6 cm y la distancia
del borde a la línea de frente de disolvente es de 0.4 cm. El desplazamiento de la
muestra a) es de 3.7 cm, de b) es de 2.9 cm, de c) es de 0 cm y de d) es de 2.3
cm (ver Error! Reference source not found.)

a. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en

la Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de Rf.

0.4 cm
 3.7cm

2.9c
5.7 m
cm
2.3cm

0c
m
0.6
cm

distancia recorrida por el compuesto(X)

𝑅𝑓 =
distancia recorrida por el eluyente (Y)

𝑅𝑓 Para la mancha (a)

𝑋𝐴
𝑅𝑓 =
𝑌
3.7𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.64
5.7𝑐𝑚

𝑅𝑓 Para la mancha (b)

𝑋𝐵
𝑅𝑓 =
𝑌
2.9𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.50
5.7𝑐𝑚

𝑅𝑓 Para la mancha (c)

 𝑋𝐶
𝑅𝑓 =
𝑌
0 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = =0
5.7𝑐𝑚

𝑅𝑓 Para la mancha (d)

𝑋𝐷
𝑅𝑓 =
𝑌
2.3 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 0.40
5.7𝑐𝑚

c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?

R// Por qué el Tolueno y el Diclorometano son compuestos poco polares

lo que permite que se desplacen con mayor velocidad.

d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento

con la composición de la fase móvil?

R// Por qué la muestra ” c “ está compuesta de

Clorobenzaldehído que es un compuesto orgánico con alta polaridad esto
significa que el oxígeno atrae con mayor fuerza a los electrones que al
carbono, por lo que la nube electrónica se desplaza hacia él haciendo que
el doble enlace entre el carbono y el oxígeno sea de naturaleza polar, con
un momento dipolar importante. La polaridad de los aldehídos va a
influenciar en sus propiedades físicas como la solubilidad. Lo que sucedió
en el ensayo 2 de la situación problema consistió en que los compuestos
de la fase móvil son poco polares y no logran solubilizar al aldehído que es
ente caso es el Clorobenzaldehído.
 e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4
cm en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?

R// Significa que las demás muestran eran la solución patrón / estándar y
estaban compuestas de la misma sustancia a diferencia de la muestra d
cuyo desplazamiento se vio reflejado en un recorrido menor lo que significa
que la muestra d está compuesta de un elemento más polar.

APORTE CINDY PAOLA CAMARGO MEJÍA CÓD.: 1095794698

a. Con el valor de desplazamiento registrado para la mancha reportada en la

Figura 1 y la distancia de la solución estándar,

Situación problema
 Altura de la placa (h) =5,7 cm
 Distancia borde de la línea de la siembre:0,4 cm
 Desplazamiento de solución patrón(a):3,4 cm
 Desplazamiento de la muestra(d): 2,4 cm

Calcule el valor de Rx.

Rx= distancia recorrida por el compuesto de referencia(x)

Distancia recorrida por el eluyente

2,4 𝑐𝑚
𝑅𝑥 = = 0,705𝑐𝑚
3,4𝑐𝑚

b. Con el valor de desplazamiento registrado para cada mancha reportada en

la Figura 2 y en relación al frente de disolvente, calcule el valor de Rf.

Situación problema
 Altura de la placa (h) =5,7 cm
 Distancia borde de la línea de la siembre:0,6 cm
 Distancia del borde de la linea frente al disolvente:0,4 cm

Rf=distancia recorrida por el compuesto

Distancia recorrida por el disolvente

 0,6 𝑐𝑚
𝑅𝑓 = = 1,5 𝑐𝑚
0,4 𝑐𝑚

c. Justifique ¿por qué se empleó esa composición de fase móvil?

Fase móvil es la fase que se mueve en una dirección definida. Puede ser
un líquido, un gas o un fluido supercrítico La muestra que se está
separando (formada de analitos y el disolvente) se inyecta en la fase móvil
que se mueve a través de la columna.

d. ¿Por qué la muestra “c” del problema dos, no presentó un desplazamiento

con la composición de la fase móvil?

Tiempo cero o tiempo de retención del componente inerte (t0).

El tiempo cero (t0) o tiempo muerto (tm), es el tiempo de retención del

componente inerte o gas portador.

e. ¿Qué significa que la muestra problema presentara un desplazamiento 2.4 cm

en relación a las demás muestras que se encuentran en el ensayo?

Existen diversas formas de llevar a cabo un proceso cromatográfico. Dependerá

de cómo se introduce la muestra a separar y cómo se desplaza por la fase
estacionaria. Los métodos más comunes son:

 Desarrollo
 Elución
 Desplazamiento
 Análisis frontal
El método más utilizado es el de elución. Consiste en colocar la muestra en una
capa delgada, en la parte superior de la columna, lecho cromatográfico o fase
estacionaria. La fase móvil fluye a través de la fase estacionaria arrastrando los
componentes de la muestra. La velocidad de movimiento diferirá de un
componente a otro y permitirá la recogida de los componentes en momentos
distintos.
Pasó 6. Con la lectura del Anexo asociado al análisis realizado por Cromatografía
de gas, calculen y respondan de manera colaborativa los siguientes enunciados:

Situación problema

 Longitud (L):18,2 m
 dc diámetro interno 0,3mm
 df espesor de la partícula: 0,25 µm

a. Tiempo de retención corregido.

Es le tiempo que transcurre entre la aparición de la señal que corresponde
a un componente inerte y a la del componente considerado:
t'i = ti - t0

fq= 𝑇𝑅 = 1,74 – 0,34 = 1,4

Hq=𝑇𝑅 = 2,18 – 0,34 = 1,84

b. Medida de retención de los solutos como factor de capacidad

𝑇′𝑅
′
𝑇𝑅 − 𝑇𝑂
𝑘 = =
𝑇𝑂 𝑇𝑂

En donde
𝑇′𝑅 = tiempo de retención corregido
𝑇𝑅 =tiempo de retención
𝑇𝑂 =tiempo muerto

1,4 1,74−0,34 1,4

Fq= 𝑘 ′ = 0,34 = = 0,34 = 4,11
0,34

1,84 2,18−0,34 1,84

Hq= 𝑘 ′ = 0,34 = = 0,34 = 5,41
0,34

c. número de platos teóricos.

Se emplea la siguiente ecuación

𝑇𝑅
𝑁 = 16 ( )2
𝑊𝑏
En donde

𝑇𝑅= Tiempo de retención

𝑤𝑏= Ancho de base

Fq=

1,74
𝑁 = 16 ( ) 2 = 1098,44
0,21

2,1
Hq= 𝑁 = 16 (0,32) 2 = 742,5

c. Altura de plato.
Se emplea la siguiente ecuación

𝐿
𝐻=
𝑁
En donde

L=longitud de la columna

N=número de platos

Para Fq=

18,2 𝑚
𝐻= = 0,016
1098,44

Para Hq=

18,2 𝑚
𝐻= = 0 024
742,5
d. Factor de selectividad.

e. Resolución.
Se emplea la siguiente ecuación
𝑇′𝑅 2 − 𝑇′𝑅 1
𝑅𝑆=
1⁄ (𝑊 ′ + 𝑊 ′ )
2 𝑏 1 𝑏 2
En donde
𝑇′𝑅 2 = tiempo de retención corregido de Hq
𝑇 ′ 𝑅 1 =tiempo de retención recorrido de Hq
𝑊𝑏′ 2=ancho de base del Hq
𝑊𝑏′ 1= ancho de base de Fq

1,05 − 0,64 0,41

𝑅𝑆= = = 1,57
1⁄ (0,21 + 0,32) 1⁄ (0,53)
2 2

f. Resolución en relación al factor de retención, a la selectividad y a la eficiencia.

Se emplean las siguientes ecuaciones
Retención
𝐾′
𝑅=
1 + 𝐾′
Eficiencia
√𝑁
𝐸=
4
Selectividad
𝑎−1
𝑆=
𝑎

𝐾′ = medida de retencion de los solutos como factor de capacidad

N=número de platos teóricos

.a=factor de selectividad

Fq=retención

4,11
𝑅= = 0.80
1 + 4,11
Hq=retención
5,41
𝑅= = 0,84
1 + 5,41
Fq =eficiencia

√1098,44
𝐸= = 8,28
4
H q =eficiencia

√742,5
𝐸= = 6,81
4
Fq=selectividad

0,64 − 1
𝑆= = −0,5
0,64
Hq=selectividad

1,05 − 1
𝑆= = 0,04
1,05
Pasó 7. Con los resultados del paso seis, respondan las siguientes preguntas en
forma colaborativa:

a. ¿Qué indica el tiempo de retención en un análisis cromatográfico?

Se denomina tiempo de retención al tiempo transcurrido después de la inyección
de la muestra hasta que el pico alcance su máxima área, en algunos casos se
observan picos pequeños que hacen referencia a especies que no fueron
retenidas, denominadas tiempo muerto

Tiempo cero o tiempo de retención del componente inerte (t0).

El tiempo cero (t0) o tiempo muerto (tm), es el tiempo de retención del

componente inerte o gas portador.

Tiempo de retención de un componente (tii).

El tiempo de retención (ti o tR) es el tiempo transcurrido entre el instante en que se

introduce la mezcla y el instante en que se detecta la señal propia del componente
en su máxima intensidad. Los tiempos de retención no son reproducibles, ni
siquiera en una misma columna cromatografía.

Tiempo de retención corregido de un componente (t'i).

Es le tiempo que transcurre entre la aparición de la señal que corresponde a un

componente inerte y a la del componente considerado:

Tiempo de retención relativa (rip).

Es la razón entre los tiempos de retención corregidos del componente

considerado, i, y de otro, p, que se toma como patrón de referencia:

b. ¿Qué indica el número de platos?

Una característica importante de un sistema crornatográfico es su eficiencia,
expresada como una cantidad adimensional y llamada número efectivo de platos.
Refleja el número de veces que el soluto se reparte entre las dos fases durante su
paso a través de la columna. El número efectivo de platos se puede definir del
cronograma de una sola banda, Cromatografía.
c. ¿Qué indica la altura de plato?
La altura del plato es una buena forma de expresar la eficiencia de la columna en
unidades de longitud, sin especificar la longitud de la columna. Desde un punto de
vista teórico la altura del plato puede relacionarse directamente a las condiciones
experimentales y los parámetros de operación.

d. ¿Qué relación tiene la resolución con el factor de retención, a la selectividad

y a la eficiencia?
El factor de capacidad α de una columna, como su nombre lo indica, es un término
que define que tan selectiva es una columna para separar dos picos. Es de hacer
notar, que la columna puede ser selectiva a una separación, que se identifica por
un valor alto de este factor, pero si no se considera la mejora de los parámetros
que pueden afectar el ancho de un pico, aun así no se lograría la separación de
los mismos.
BIBLIOGRAFIA

Medellín, J. (2013). OVI – Separación de mezclas por Cromatografía de papel.

Bogotá, Colombia: UNAD - Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
Recuperado de http://hdl.handle.net/10596/156

Doria, G. (2013). Aplicaciones de la Cromatografía. En Módulo Cromatografía (pp.

28-44). Bogotá, Colombia: UNAD - Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
Recuperado de http://hdl.handle.net/10596/9904

Burriel Martí, F., Arribas Jimeno, S., Lucena Conde, F., & Hernández Méndez, J.
(2008). Cromatografía. En: Química analítica cualitativa (18 Edición., pp. 310-334).
Madrid: Paraninfo. Recuperado
de http://bibliotecavirtual.unad.edu.co:2081/ps/i.do?p=GVRL&sw=w&u=unad&v=2.
1&it=r&id=GALE%7CCX4056100039&asid=0753481720a1cd4eadbebdcef16242d
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