CUESTONARIO

1.- ¿QUE ES UN MEDIO DE CULTIVO? Y ¿PARA QUE SIRVE?

Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que en concentraciones
adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los
microrganismos y sirve como medios son esenciales en el laboratorio de
Microbiología por lo que un control en su fabricación, preparación, conservación
y uso, se asegura la exactitud, confiabilidad y reproducibilidad de los resultados
obtenidos.

2.- ¿CUALES SON LA CARACTERISTICAS DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

NATURALES O COMPLEJOS Y DE LOS SINTETICOS?

Por su origen

Químicamente definidos o
Naturales o complejos
sinteticos

Se preparan a partir de Su composición química se

sustancias naturales de conoce con exactitud, cada
origen animal o vegetal de componente es de alta
composición química no pureza analítica y realiza un
rigorosamente constante: aporte específico.
leche, suero, macerado de
Ejemplo: medios para
maíz, etc.
autótrofos

3.- ¿Qué es un agar?

El agar es un polímero sulfatado de azúcares, obtenido de algas marinas,
compuesto principalmente por D-galactosa, 3,6-anhidro-L-galactosa y ácido D-
glucurónico. En el agar bacteriológico el componente dominante es un
polisacárido que se obtiene de ciertas algas marinas y que presenta la indudable
ventaja de que a excepción de algunos microorganismos marinos, no es utilizado
como nutriente.
Es un buen agente solidificado porque, una vez que se funde en agua hirviendo,
puede enfriarse hasta una temperatura de 40 a 42º c, sin endurecerse, y no
fundirá de nuevo hasta que no se alcance una temperatura de 80 a 90ºC. Es
también excelente porque la mayoría de los microorganismos no pueden
degradarlo y también se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los
medios de cultivo.
Medio de cultivo de acuerdo a su estado (consistencia):
- Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado,
denominándose por esta razón caldos. El medio líquido más utilizado es
el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne
y peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende la
obtención de una suspensión bacteriana de una determinada
concentración.

- Medios sólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos, agregándoles

un agente gelificante los utilizados son la gelatina y el agar Gelatina: Es
una proteína animal obtenida de los huesos. Tiene el inconveniente de
que es hidrolizada por muchas bacterias, y además su uso está muy
limitado porque el punto de fusión es bajo, El agar puede utilizarse para
diferentes fines, aunque los más importantes son:
- Agar comercial para la industria alimenticia, agar bacteriológico, agares
purificados y agarosa, usa para electroforesis en gel.

- Medios semisólidos: Se preparan a partir de los medios líquidos,

agregando a éstos un agente solidificante en una proporción menor que
para preparar medios sólidos. Uno de sus usos de investigación de la
movilidad de las bacterias.

4.-
 Medios comunes: Son aquellos que poseen los componentes mínimos
para que pueda producirse el crecimiento de bacterias que no necesiten
requerimientos especiales. El medio más conocido de este grupo es el
agar nutritivo o agar común, que resulta de la adición de agar al caldo
nutritivo. Otros representantes de este grupo son el agar triplicase de soja,
el agar Columbia, etc.

 Medios de enriquecimiento: son medios líquidos que favorecen el

crecimiento de un tipo de microorganismo en particular. Permiten
aumentar el número de microorganismos de ese tipo. Usualmente
contienen una o más sustancias inhibidoras del crecimiento de los
microorganismos con excepción de los que se quieren cultivar.

Ejemplo: al añadir glucosa y utilizarla los microorganismos producen

ácidos, acidificándose el medio por lo que es preferible no utilizar glucosa
en los medios de mantenimiento.
 Medios selectivos: son parecidos a los de enriquecimiento, se diferencian
por ser medios sólidos y están diseñados para el aislamiento de
microorganismos específicos. (Para bacterias como Salmonella typhi y
Clostridium botulinum).

 Medios diferenciales: son medios que contienen indicadores de productos

derivados de la actividad microbiana de los microorganismos. No
contienen ningún tipo de sustancia con actividad antimicrobiana.
Permiten revelar características fisiológicas de los microorganismos.
(Para bacterias como: Streptococcus pyogenes y Escherichia coli)

 Medios de transporte: aseguran la viabilidad de los microorganismos

desde el momento de la toma hasta su procesamiento, son medios pocos
nutritivos, líquidos o semisólidos, que no favorece el crecimiento de los
microorganismos. Otros pueden inhibir la acción enzimática de
autodestrucción o efectos letales de la oxidación. Como ejemplos
tenemos caldo tioglicolato, solución de Ringer, medio de Stuart.

 Medios de conservación: conservan una cepa por diversa razones nos

interesa mantener u se usa e control de calidad de pruebas y reactivos.
Se utilizan para conservar una cepa que, por diversas razones nos
interese mantener. Fundamentalmente se utilizan como controles de
calidad de las pruebas y reactivos utilizados en el Laboratorio de
Microbiología. En el laboratorio se pueden conservar las cepas de tres
formas:

a) haciendo pases periódicos de placa a placa.

b) mediante liofilización de una suspensión bacteriana.
c) congelando las cepas en leche descremada estéril al 0,1%.

 Medios inhibidores: Cuando las sustancias añadidas a un medio selectivo

impiden totalmente el crecimiento de una población microbiana, se
denomina inhibidor. Los medios inhibidores podrían considerarse como
una variante más restrictiva de los medios selectivos. Los medios
inhibidores se consiguen habitualmente por adición de sustancias
antimicrobianas o de cualquier otra que inhiba completamente el
desarrollo de una población determinada. Un medio inhibidor es el
MacConkey que permite el crecimiento de los gérmenes Gram negativos
e impide el crecimiento de los Gram positivos.

 Medios de mantenimiento: Suelen ser distintos a los de crecimiento

óptimo ya que el crecimiento rápido y prolífico suele ocasionar la
muerte rápida de las células.

Ejemplo: al añadir glucosa y utilizarla los microorganismos producen

ácidos, acidificándose el medio por lo que es preferible no utilizar glucosa
en los medios de mantenimiento.
5.- ¿Qué es un factor de crecimiento?

Los factores de crecimiento son compuestos orgánicos que, como los

micronutrientes, se necesitan en muy pequeñas cantidades y sólo por algunas
células. Los factores de crecimiento son vitaminas, aminoácidos, purinas,
pirimidinas. Aunque la mayoría de los microorganismos son capaces de
sintetizar estos compuestos, en algunos casos es necesario suministrarlos en el
medio de cultivo.

6.- ¿qué sustancias son utilizadas en los medios de cultivo como fuentes
de: C, N, P y S?

Elementos energéticos y constitutivos y Macro elementos

 Fuente de Carbono (CO2) son para autótrofos y azúcares para

heterótrofos. Se necesita el carbono para la construcción de muchas
moléculas necesarias para la célula.

 Fuente de Nitrógeno (N) son NO3-, NH3 o N2. (Autótrofos) y Aminoácidos

y proteínas. El nitrógeno es metabolizado para proveer proteínas, ácidos
nucleicos y polímeros de pared.

 Fuente de Azufre (S) y se adiciona como: SO42-, tiosulfatoo sulfuro y la

célula lo utiliza para: Producir aminoácidos (cisteína y metionina) y
diferentes coenzimas.

 Fósforo (P) se adiciona como: Fosfatos de sodio y funciona como Buffer

Para producción de ATP, fosfolípidos y Ac Nucleicos.

7.- ¿qué factores físicos y químicos afectan los medios de cultivo?

AGENTES FÍSICOS AGENTES QUÍMICOS

Temperatura Desinfectantes y antisépticos
Desecación pH
Radiaciones Antibióticos

Ondas sonoras

Presión hidrostática

Presión osmótica