Generación de bioelectricidad utilizando

bacterias reductoras de sulfato como anódicas

y microalgas como biocatalizadores catódicos.
Smita S. Kumar a , Suddhasatwa Basu b , Saloni Gupta a , Jyoti Sharma un y Narsi R. Bishnoi un
Departamento de Ciencia e Ingeniería Ambientales, Universidad de Ciencia y Tecnología Guru
Jambheshwar , Hisar 125001, Haryana, India; b Departamento de Ingeniería Química, Instituto Indio de
Tecnología de Delhi, Nueva Delhi 110016

RESUMEN
Debido a que las especies de microalgas realizan fotosíntesis oxigenadas, pueden
emplearse en la cámara del cátodo de las células de combustible microbiano, lo que
anula la necesidad de aireación mecánica para las reacciones de reducción de
oxígeno. Se utiliza una configuración en forma de H convencional para el análisis
comparativo de la generación de bioelectricidad utilizando cultivos de microalgas puras
y mixtas. Tres reactores se inoculan simultáneamente con bacterias reductoras de
sulfato como cultivo anódico y mixto de microalgas (MA # 1) y dos especies puras en
la cámara catódica en reactores separados (MA # 2; MA # 3). Los potenciales
máximos de circuito abierto de 670, 476 y 529 mV se logran con MA # 3, MA # 2 y MA
# 1, respectivamente. Se obtienen densidades de potencia del orden de 442.5, 69 y
135 mW / m3 para cultivos de microalgas MA # 3, MA # 2 y MA # 1, respectivamente.
Los valores más altos de potencia y densidad de corriente se obtienen con MA # 3
inoculado con especies de algas puras. Las especies de algas también se examinan
para determinar su contenido de lípidos mediante el uso de espectroscopia infrarroja
de transformada de Fourier, espectroscopia del Nilo rojo y análisis de contenido de
lípidos. Una buena cantidad de contenido de lípidos se muestra en las imágenes de
espectroscopia. El contenido de biomasa es mayor para el consorcio de algas (MA #
1), mientras que el contenido de lípidos es mejor en el caso de especies de algas
puras (MA # 2).

PALABRAS CLAVE
SRB; bioelectricidad; biocátodos; FTIR; microalgas; lipidoso, espectroscopia del nilo rojo

INTRODUCCIÓN
Se están buscando continuamente alternativas de energía renovable sin emisiones de
carbono para enfrentar la crisis mundial del agotamiento de combustibles fósiles y la
contaminación ambiental [1]. La actual crisis del calentamiento global se puede aliviar
con el uso de bioenergía renovable [2]. La bioenergía es sostenible, limpia y sin
emisiones de carbono, y se puede reponer antes en comparación con los combustibles
fósiles convencionales finitos. Hay varias formas de producir bioenergía, como la
producción de biocombustibles a partir de cultivos alimentarios y semillas oleaginosas,
materias primas no alimenticias, microalgas y materias primas como aceite vegetal y
grasas animales; la producción de biodiésel forma microalgas utilizando biorreactores
y estanques abiertos; y la producción de bio-hidrógeno utilizando algas [3]. La
tecnología de celda de combustible microbiana (MFC) puede producir energía y tratar
los desechos simultáneamente, proporcionando una ventaja adicional sobre otros
métodos de producción de energía [4,5]. El diagrama esquemático de una celda de
combustible microbiano se ilustra en la Figura 1. El trabajo de investigación se ha
intensificado para explorar la tecnología MFC para la producción de electricidad
utilizando diversos tipos de aguas residuales, en comparación con los sistemas
convencionales de tratamiento de agua que consumen mucha energía.
La energía solar también puede ser directamente aprovechada y convertida en energía
eléctrica combinando microalgas con MFC en dispositivos electroquímicos conocidos
como celdas de combustible microalgaemicrobial [6, 7]. Esta combinacion es
particularmente apropiado considerando que las formas de vida fotosintética operan
como productores de oxígeno in situ cuando se incorporan a la cámara del cátodo del
MFC. Las MFC de microalgas hacen uso de esta suposición e incluyen la oxidación
del sustrato en los bioanodos mediante biocatalizadores y algas como biocátodo, que
actúa como un aceptor de electrones terminal con reducción simultánea de dióxido de
carbono a biomasa.

Ánodo : Orgánico importar ! Carbón dióxido þ protones þ electrones

Cátodo : Oxígeno þ protones þ electrones ! agua en
general reacción : Orgánicoimportar þ oxígeno !
Carbono - dióxido þ agua þ bioelectricidad

La energía de la biomasa también puede ser explotada en forma de biodiesel del

cultivo de microalgas. Zhao et al. [1] estudió el cultivo de microalgas para la fijación de
carbono y la producción de lípidos en microalgas utilizando lixiviados de relleno de
tierra como fuente de nutrientes. El objetivo principal del estudio es diseñar y ejecutar
MFC de doble cámara (DC) únicamente con catalizadores microbianos en las cámaras
de ánodo y de cátodo. La investigación sobre microalgas y MFC se está llevando a
cabo de manera intensiva con su integración que lleva al desarrollo de MFC de
microalgas [8]. La biomasa de algas generada durante el ciclo de producción de
electricidad también se puede utilizar para la extracción de petróleo.

Figura 1. Diagrama esquemático de la celda de combustible microbiana con biocátodos de microalgas y

bacterias reductoras de sulfato (SRB) como biocatalizadores anódicos

MATERIALES Y MÉTODOS

DC-MFC
Se usó una configuración en forma de H convencional para el análisis comparativo de
la generación de bioelectricidad utilizando cultivos de microalgas puras y mixtas. Los
reactores MFC (7 cm £ 7 cm £ 7 cm) se construyeron con material de plexiglás. Na fi
on ® 117 (un área abierta efectiva igual a 36 cm2), utilizado como electrolito de
membrana de intercambio de protones (PEM), se colocó entre la malla acrílica para
refuerzo mecánico. El volumen de trabajo de las cámaras fue de 300 mL. La figura 2
ilustra la configuración utilizada para el estudio.

Figura 2. (a) Fotografía de la configuración de la celda de combustible microbiana utilizada para el

estudio; (b) Fotografía de cámaras de células de combustible microbianas con ánodo y cátodo y entre el
electrolito de la membrana de intercambio de protones.

BIOCATALIZADOR

Los cultivos mixtos de bacterias reductoras de sulfato (SRB) empleados en el presente

estudio se aislaron de los sedimentos recolectados en el sitio de descarga de
Bhalaswa , Delhi, mediante medio de crecimiento Postgate modificado (selectivo para
SRB) y se emplearon como catalizadores anódicos en el presente estudio. Se
agregaron trescientos cincuenta mililitros de medio Postgate modificado con inóculo
SRB a las cámaras anódicas de los tres reactores. No se realizó ninguna inyección
externa para el mantenimiento de las condiciones anaeróbicas en el reactor antes o
durante la operación. Los siguientes componentes se utilizaron para constituir el medio
de crecimiento Postgate modificado (g / L del medio):
MgSO4.7H2O 2.0; CaSO41.0; NH4Cl 1.0; extracto de levadura 1.0; K2HPO4 0.5;
lactato de sodio 5 ml; ácido ascórbico 0,1; FeS - O4.7H2O 2.0; Acido tioglicólico 0,1
mL / L.
BG-11 medio se utilizó para el crecimiento y manteni - Nance tanto de las especies de
algas, así como el Consor - cio. El cultivo de algas se mantuvo en el laboratorio a 25 §
1 ○ C. La composición del medio BG-11 fue (g / L): NaNO3 1.5; K2HPO4 0,04;
MgSO47H2O 0,075;CaCl22H2O 0,036; ácido cítrico 0,006; cit amonio férrico - tasa de
0.006; EDTA (sal disódica) 0,001; Na2CO3 0,02; y 1 ml de solución de elementos
traza con la siguiente composición (g / L): H3BO3 2.86; MnCl24H2O 1,81;
ZnSO47H2O 0,222; NaMoO4.2H2O 0.39; CuSO4.5H2O 0.079; Co ( NO3) 26H2O
0.0494.

MEDICIONES ELECTROQUIMICAS

En una configuración de combustible microbiano (Figura 2 (a)), el cultivo de algas de 4

días se alimentó a la cámara del cátodo desde los cultivos mantenidos para crecer
más en la cámara del cátodo solamente. Tres reactores se inocularon
simultáneamente con SRB como cultivos anódicos y mixtos de microalgas (MA # 1) y
dos especies puras en el catéter de reactores separados (MA # 2; MA # 3). La
generación óptima de bioelectricidad se comparó en términos de voltaje de circuito
abierto (OCV), densidad de potencia (PD) y densidad de corriente (CD) más altos. Una
vez completado el ciclo, las especies de algas también se examinaron para determinar
su contenido de lípidos mediante espectroscopia infrarroja de transformada de Fourier
(FTIR) y espectroscopia roja del Nilo. El contenido de lípidos se analizó mediante una
ligera modificación del método de Bligh y Dyer. El perfil OCV de los tres MFC con
diferentes cátodos de microalgas se registró y observó durante un período de 10 días
en intervalos de tiempo fijos con el uso de un multímetro digital. Las características de
voltaje-corriente de los MFC se determinaron aplicando resistencia externa en el rango
de 10 a 90,000 V en un intervalo de 30 min

Se proporcionan entre las variaciones de carga para la estabilización de la tensión

observada.
.

Parámetros MFC # 1 MFC # 2 MFC # 3

Corriente máxima (mA) 0.4 0.139 0.352
Potencia máxima 0.038 0.019 0.124
( mW)
Densidad de corriente 11.36 8.1 20.5
(mA / m 2 )
Densidad de potencia 2.2 1.13 7.2
(mW / m 2 )
VCD (mA / m 3 ) 696.4 496.4 1257.1
VPD ( mW / m 3 ) 135.8 69 442.5
Resistencia interna ( V) 806 1570 508.4
Max OCV (mV) 529 476 670
Contenido lipídico 9.3 11.5 7.4
(%dcw )

Tabla 1. Bioelectricidad Generacion utilizando SRB como anódico y las microalgas como catódicas.
catalizadores

CARACTERIZACIÓN LIPÍDICA

El cultivo de microalgas (0,5 ml) utilizado en la cámara del cátodo de los tres MFC se
centrifugó durante 10 minutos a 5000 rpm. El sedimento obtenido después de la
centrifugación se lavó primero con agua destilada y luego se lavó varias veces con
solución salina normal. Las células de microalgas se suspendieron en una solución de
rojo Nilo (0,5 mg / ml en tono normal) seguido de una mezcla de glicerol / agua
(75:25). A continuación, se agitó con vórtex suavemente durante 1 min y se incubaron
en la oscuridad durante 15 min, seguido de la medición de la fluorescencia con una
Olympus Magnus fluorescencia micro- alcance. La biomasa de algas liofilizado (0,2 g)
se molió en un polvo fi ne con KBr y se presiona en un comprimido, y se analizó en el
rango de frecuencia 4000 400 cm¡1 utilizando una transformada de Fourier de
infrarrojos spectropho - Tometer (Agilent Vertex 70 V). El lípido total de algas. el
contenido de las muestras se extrajo con metanol - cloroformo (2: 1.5, v / v) siguiendo
un método modificado de Bligh y Dyer [9]. El procedimiento detallado para esti lípido -
mación y extracción, así como la biomasa, se informó anteriormente [10].
Figura 3. Voltaje de circuito abierto obtenido para diferentes biocátodos de algas, MA # 1, MA # 2 y MA #
3 en MFC.

Figura 4. Características de voltaje y corriente de MFC con diferentes biocátodos de algas, MA # 1, MA #

2 y MA # 3..

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Rendimiento de los bio-cátodos de algas en MFC.

La OCV obtenida para tres biocátodos diferentes en MFC se muestra en la Figura 3.

La OCV alcanzó su máximo después del día 3 para MA # 3, el día 4 para MA # 1 y el
día 5 para MA # 2. Esto es de acuerdo con la curva de crecimiento de SRB que
muestra los máximos de crecimiento después de 2 a 5 días de inoculación hasta el
agotamiento de la fuente de carbono (lactato en el presente estudio). El OCV se
mantuvo más o menos estable, alrededor de > 400 mV, durante el resto del tiempo
hasta el noveno día y luego comenzó a disminuir. El rendimiento de los tres reactores
está influenciado modestamente por el patrón de crecimiento de algas, ya que el
crecimiento de las algas es generalmente más lento y continúa igual durante mucho
tiempo con el mismo medio.
Se puede observar a partir de la Figura 4 que la generación de energía y la tensión
son los más altos en el caso de MA # 3 inoculado con especies puras 2, y el mínimo
para MA # 1 HAV - ing el consorcio de algas. El bajo rendimiento de MA # 1 en
comparación con los cultivos puros MA # 2 y MA # 3 puede deberse al crecimiento de
especies bacterianas en la cámara, lo que llevó a la contaminación del reactor y
dificultó el crecimiento de algas. Los diferentes parámetros de rendimiento de la
generación de bioelectricidad son: como se muestra en la Tabla 1. La resistencia
interna de MA # 2 es la más alta, a 1570 V, lo que resulta en un mal desempeño del
reactor. La resistencia interna es la más baja para MA # 3 (508 V), que proporciona el
mejor rendimiento.
Características físicas de los bio-cátodos de algas.

La Figura 5 ilustra las tres especies de algas examinadas bajo un microscopio fl

uorescente antes y después del lípido. tinción con tinte rojo Nilo para tener una idea de
su contenido de lípidos. La presencia de cuerpos amarillos muestra que una buena
cantidad de contenido de lípidos está presente en la especie, que se destaca y es
claramente visible después de la tinción. Los detalles morfológicos y otras
características celulares también se observaron bajo un microscopio de luz.

Cada grupo funcional se caracteriza por las pre - sencia de una banda de absorción de
energía único. Por lo tanto, para confirmar la presencia de contenido de lípidos, como
se mencionó anteriormente, los espectros FTIR también se registraron para el análisis
cuantitativo preliminar de las tres especies de algas. También es útil para comparar los
cambios para cuanti fi ca - ción de diversos grupos funcionales relacionados con
lípidos, hidratos de car-, celulosa, proteínas y ácidos nucleicos presentes en las
especies de algas. La Figura 6 muestra la respec - espectros tivo para la biomasa de
algas. Los espectros de FTIR revelan la presencia de estiramientos de Vas ( CH2), Vs
(CH2), V (COC) y Vas (> P = O) en todas las cepas de algas que indican la presencia
de lípidos y carbohidratos, lo que apoya fuertemente la capacidad de producción de
biodiesel de estas cepas En el espectro FTIR, una huella distintiva distintiva La región
está presente para los triglicéridos y fosfolípidos en las tres especies de microalgas. La
banda detectada en el rango de 3600–3300 cm¡1 es característica de los grupos O – H
y N – H libres y unidos, que podrían formar enlaces de hidrógeno con el grupo
carbonilo del enlace peptídico en la proteína [11,12] ; la banda observada en 3000–
2800 cm¡1 se atribuye a los componentes de ácidos grasos de las membranas; las
bandas en la región 2428-2345 cm1 representan la cadena alifática -CH Vs (CH3); y
las bandas de 1250 a 1200 cm1 ilustran la presencia de vibración de estiramiento de
fosfato en polisacáridos y ácidos nucleicos; mientras que 1200-900 cm1 confirman la
presencia de oligosacáridos y polisacáridos de carbohidratos V (COC) y (COP)
[11,13,14].

Figura 5. Nilo rojo fluorescencia y microscópico imagen para algas especies inoculado en MA # 1, MA # 2
y MA # 3 (una) antes de y (b) después de teñir con Nilo Rojo.
 Figura 6. Espectros de FTIR para especies de algas inoculadas en MA # 1, MA # 2 y MA # 3 que
muestran las bandas características de lípidos, proteínas, carbohidratos y otros.

Estimación de biomasa y lípidos de las muestras de algas.

En el caso del cultivo de microalgas, el tiempo de cultivo tiene una relación directa con
el contenido de biomasa. Inicialmente, se alimenta un cultivo de 4 días a la cámara del
cátodo, de modo que, en el momento de la recolección, después de la generación de
bioelectricidad, el cultivo por lotes tiene una antigüedad de 15 días. En el día 15, la
biomasa de las especies puras es más o menos igual pero más baja que la del
consorcio en MA # 1. Como se muestra en la Figura 7, el consorcio de algas inoculado
en MA # 1 muestra la masa bio- más alto, seguido por especies puras 2 (MA # 3) y
puros de especies 1 (MA # 2). La biomasa (Figura 7 (a)) del consorcio de algas
inoculado en MA # 1, y de las especies puras en MA # 2 y MA # 3, es de 1,25, 0,82 y
0,95 g / L, respec - tivamente. El contenido de lípidos de la inocu consorcio de algas -
se precisan en MA # 1, y de las especies puras en MA # 2 y MA # 3, se encuentra que
es 9,3, 11,5 y 7,48% en peso de células secas (DCW), respectivamente (Figura 7 (
segundo)).

Figura 7. (a) Contenido de biomasa y (b) contenido de lípidos de diferentes biocátodos después de la
generación de bioelectricidad al final del ciclo de lotes el día 15

CONCLUSIÓN

En este estudio, se evalúa el rendimiento de tres reactores con diferentes biocátodos

de algas con la ayuda de un MFC. El potencial máximo de circuito abierto de 670 mV
se alcanza con las microalgas MA # 3. Se obtiene la densidad de potencia ric de 442,5
mW / m3 para el cultivo de microalgas puro - A volumet. La biomasa del consorcio de
algas inoculado en MA # 1, y de las especies puras en MA # 2 y MA # 3, es 1.25, 0.82
y 0.95 g / L, respectivamente. El contenido de lípidos del consorcio de algas inoculado
en MA # 1, y de las especies puras en MA # 2 y MA # 3, es 9.3 , 11.5 y 7.48%
dcw , respectivamente. Se concluye que con el mantenimiento adecuado de condi de
crecimiento estéril - ciones, SRB y microalgas se puede utilizar en una célula de
combustible microbiana para derivar energía en forma de bio-eléctrica. Además, al
final del ciclo de lotes, se pueden recolectar algas para explotarlas por su contenido de
lípidos y luego la biomasa se puede alimentar a la cámara del ánodo como fuente de
carbón.

EXPRESIONES DE GRATITUD
Los autores agradecen a University Grant Commission, Basic Scientific Research,
New Delhi, por una subvención financiera, y al Fuel Cell Lab, IIT Delhi, por realizar los
experimentos.

DECLARACIÓN DE DIVULGACIÓN
Los autores no informaron ningún conflicto de intereses potencial.ORCID
Suddhasatwa Basu http://orcid.org/0000-0001-7288-2370

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