PRÁCTICAS DE

LABORATORIO
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

1.
MUESTRAS Y EXÁMENES ÚTILES PARA LA BÚSQUEDA
DE PARÁSITOS INTESTINALES

I. OBJETIVOS
1. Explicar los procedimientos de obtención y
manejo de materia fecal para realizar
estudios microscópicos.
2. Describir los procedimientos de laboratorio
frecuentemente usados en el diagnóstico
de parasitosis intestinales.
En lactantes, la muestra se obtiene mediante
la cucharilla rectal, si el examen requerido es
el microscópico en fresco. Las muestras,
deben ser etiquetadas con el nombre del
paciente, número de muestra, fecha y hora de
colección. Generalmente, se recomienda
examinar tres muestras, en días sucesivos,
durante un periodo de siete a diez días.

3. Describir el procedimiento para conservar Dependiendo de la consistencia de la materia

materia fecal con solución de formaldehido.
4. Describir el examen coproparasitoscópico
directo en fresco.
5. Describir el examen coproparasitoscópico
de sedimentación simple.
II. INTRODUCCIÓN
El diagnóstico de las parasitosis intestinales
depende del hallazgo de huevos, larvas o
adultos de helmintos y quistes o trofozoítos de
protozoos en heces, por lo tanto, la recolección
y el manejo adecuado de las muestras fecales
son indispensables para la identificación
correcta de los parásitos en el laboratorio.
fecal, se elige el procedimiento para la
búsqueda de trofozoítos, quistes, ooquistes,
huevos o larvas (ver esquema).
Si las heces son blandas, diarreicas y líquidas,
deben examinarse dentro de las dos primeras
horas de haber sido recolectadas; si esto no es
posible, se adiciona una solución
conservadora, por ejemplo: alcohol de
polivinilo (PVA), merthiolate-iodo-formol (MIF)
o Schaudin. Las heces formadas pueden ser
examinadas durante el mismo día de su
colección; si no es posible, pueden ser
refrigeradas durante 24-48 h o conservadas en
solución de formaldehido 10%.

Son factores que interfieren con el examen de

las heces, la ingestión de medicamentos
previa a su recolección y las muestras viejas o
conservadas de manera inadecuada.

La cantidad de materia fecal suficiente para un

examen rutinario, es una muestra del tamaño
de una nuez o de dos o tres cucharadas
soperas. La materia fecal se deposita en un
recipiente de boca ancha con tapa hermética y
limpia; no debe contaminarse con agua, orina
o cualquier otro material extraño; no debe
obtenerse de la taza del baño ni del suelo.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011
La proporción en que se usan las soluciones
conservadoras, es de una parte de materia
fecal y tres de la solución; las heces pueden
mantenerse así durante semanas o meses.
Otras muestras útiles en la búsqueda de
parásitos intestinales son el contenido
duodenal, raspado perianal, aspirado rectal o
material obtenido por rectosigmoidoscopia.
Existe una diversidad de exámenes útiles en el
diagnóstico de parasitosis intestinales, la
selección del examen adecuado, dependerá
de la consistencia de la materia fecal o de los
síntomas del paciente. Los exámenes
frecuentemente utilizados son el directo en
fresco y los de concentración, que se basan en
los principios físicos de flotación o
sedimentación.
El examen en fresco es el más sencillo y se
recomienda para la búsqueda de trofozoítos de
protozoos, en muestras pastosas, diarreicas o
líquidas. Los exámenes de concentración se
recomiendan para la demostración de quistes,
ooquistes, huevos o larvas.
III. MATERIAL
1. Para conservar materia fecal en solución de
formaldehido 10%:
a) Un frasco con 200 ml de solución de
formaldehido al 10%.
b) Una probeta graduada de 100 ml.
c) Un frasco conteniendo aproximada-mente
50 g de materia fecal con huevos y
quistes de parásitos.
d) Un frasco (Gerber) con etiqueta.
e) Abatelenguas de madera.
2. Para realizar el examen coproparasitos-
cópico en fresco:
a) Frascos gotero con lugol.
b) Frascos gotero con solución de NaCl a
0.85%.
c) Aplicadores de madera.
d) Portaobjetos de 26 x 76 mm.
e) Cubreobjetos de 22 x 22 mm.
f) Microscopio.
g) Diapositivas
3. Para realizar el examen de sedimentación
simple:
a) Tubos cónicos de 15 ml.
b) Frasco (Gerber).
c) Pipetas Pasteur de tallo largo con bulbo
de caucho.
d) Cuadros de gasa de 12 x 12 cm.
e) Embudos de plástico de 12 cm de
diámetro y tallo corto.
f) Abatelenguas de madera.
g) Portaobjetos de 26x76 mm.
h) Cubreobjetos de 22x22 mm.
i) Diapositivas.
IV. MÉTODO
1. Conservación de materia fecal en solución
de formaldehido: Demostración con
diapositivas
a) Con un abatelenguas, colocar apro-
ximadamente 5 g de materia fecal en el
frasco de vidrio.
b) Añadir 15 ml de solución de for-
maldehido caliente y mezclar con el
abatelenguas hasta obtener una
suspensión homogénea.
c) Etiquetar el frasco, con el nombre del
paciente, número de muestra y fecha.
2. Coproparasitoscópico microscópico en fres-
co: Demostración con diapositivas
a) Colocar una gota de solución NaCl al
0.85%, en un portaobjetos.
b) Con un aplicador obtener aproximada-
mente 2 mg de la materia fecal y
mezclarla en la gota de solución salina.
c) Hacer una suspensión uniforme y retirar
los detritos macroscópicos.
d) Colocar un cubreobjetos y hacer la
observación microscópica inmedia-
tamente con los objetivos 10X y 40X.
e) En otro portaobjetos colocar una gota
de lugol y continuar como con la gota de
solución salina.
3. Coproparasitoscópico por sedimentación
simple: Demostración con diapositivas
a) Con un abatelenguas colocar apro-
ximadamente 10 g de heces, en el
frasco de vidrio.
b) Añadir 50 ml de agua de la llave. Hacer
una suspensión homogénea.
c) Filtrar a través de la gasa y recoger el
filtrado en el tubo cónico.
d) Dejar sedimentar durante 30 min.
e) Decantar el sobrenadante.
f) Con la pipeta Pasteur colocar una gota
del sedimento en un portaobjetos.
g) Si el sedimento es grueso añadir una
gotita de solución salina.
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h) Cubrir con una laminilla y observar en el ____________________________________

microscopio con los objetivos 10X y
____________________________________
40X.
i) Colocar una gota del sedimento en otro ____________________________________
portaobjetos y teñirla con lugol.
6. ¿Qué entiende por examen
j) Cubrirla con una laminilla y observar en
coproparasitoscópico cualitativo?:
el microscopio con los objetivos 10X y
____________________________________
40X.
____________________________________
____________________________________
CUESTIONARIO PARA RESPONDER
DURANTE LA PRÁCTICA ____________________________________
____________________________________
Con el apoyo de la información recibida en el
laboratorio conteste las siguientes preguntas: ____________________________________
1. ¿Cuál es el examen de laboratorio de
elección para la búsqueda de huevos, quistes
o larvas en heces?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
2. ¿Cuál es el examen de laboratorio de
elección para la búsqueda de trofozoítos en
heces?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
3. ¿Cuáles son las indicaciones para el uso de
la cucharilla rectal?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
4. ¿Por qué se recomienda qué en los
exámenes coproparasitoscópicos por
concentración se estudien tres muestras
seriadas de materia fecal?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
5. ¿Cuál es la función de las sustancias
conservadoras como el alcohol polivinílico o el
merthiolate-iodo-formol en los estudios
coproparasitoscópicos?:
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011
2.
MUESTRAS Y EXÁMENES ÚTILES PARA LA BÚSQUEDA
DE PARÁSITOS EXTRAINTESTINALES
I. OBJETIVOS
1. Enlistar cinco ejemplos de muestras útiles
para la búsqueda de parásitos
extraintestinales.
2. Describir como se realiza un frote san-
guíneo y su tinción con colorante de
Giemsa.
3. Enlistar cinco parasitosis en las que la
biopsia es un recurso útil para su
diagnóstico.
4. Describir la biopsia de músculo de rata
infectada con Trichinella spiralis.
II. INTRODUCCIÓN
La identificación de parásitos de localización
extraintestinal, depende de su demostración
en sangre, tejidos, exudados, esputo,
aspirados, orina o LCR.
La detección de parásitos sanguíneos
(protozoos y helmintos) se logra mediante un
examen directo en fresco, frote o gota
gruesa.
Mediante el examen directo en fresco se
pueden detectar hemoflagelados o 2. Examen directo en fresco, de sangre del ratón:
microfilarias, debido a su motilidad o a su
gran tamaño. Sin embargo, es necesario
realizar preparaciones teñidas, para
visualizar las características morfológicas
específicas, ya sea en extendido delgado o
gota gruesa.
En los exudados vaginal, uretral u orina, la
búsqueda e identificación de Trichomonas
vaginalis, se logra mediante el examen
directo en fresco en base a su motilidad.
En algunas parasitosis, la biopsia puede
resultar de gran utilidad en la búsqueda del
agente etiológico, p.e. trichinellosis,
onchocercosis, leishmaniasis y toxoplasmosis;
ocasionalmente en cisticercosis.
El material de biopsia, puede ser útil para hacer
examen directo, comprimiendo la muestra entre
dos portaobjetos o para hacer improntas
(leishmaniasis). Si la biopsia es obtenida durante
un proceso quirúrgico, puede fijarse y hacer cortes
histológicos.
Otros recursos útiles para el aislamiento de
algunos protozoos sanguíneos, son el hemocultivo
(medio NNN), el xenodiagnóstico y la inoculación
en ratones.
III. MATERIAL
1. Frote sanguíneo del ratón: Demostración con
diapositivas
a) Torundas con etanol a 70 %.
b) Un frasco gotero con metanol.
c) Frascos con colorante de Giemsa.
d) Frascos gotero con aceite de inmersión
e) Soportes para portaobjetos.
f) Pipetas Pasteur, con bulbo de caucho.
g) Papel limpia lentes.
Demostración con diapositivas
Por laboratorio:
a) Un ratón infectado con T. cruzi.
b) Un par de guantes para cirujano.
c) Unas tijeras rectas.
d) Un frasco gotero con solución de NaCl a
0.85%.
e) Portaobjetos 26x76 mm.
f) Cubreobjetos 22x22 mm.
3. Describir como se realiza una biopsia de tejido
muscular: Demostración con diapositivas
a) Fragmentos de tejido muscular, de rata in-
fectada con Trichinella spiralis, comprimidos
entre dos portaobjetos.
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IV. MÉTODO _________________________________________

_________________________________________
1. Frote sanguíneo. Demostración con
diapositivas _________________________________________
a) Con unas tijeras cortar el extremo distal
_________________________________________
de la cola del ratón.
b) Colocar una gota pequeña de sangre en _________________________________________
el extremo de un portaobjetos.
2. Mencione dos protozoosis extraintestinales en
c) Colocar sobre la gota el extremo de otro
las que el frote de sangre sea de utilidad
porta-objetos y dejar que se extienda a
diagnóstica:
lo largo del borde.
_________________________________________
Procurar que entre ambos portaobjetos
se forme un ángulo de _________________________________________
aproximadamente 45°.
_________________________________________
d) Con movimiento firme hacer el exten-
dido. Este debe cubrir _________________________________________
aproximadamente, tres cuartas partes
_________________________________________
del portaobjetos y no presentar
“escalones” o alguna otra irregularidad. 3. ¿Qué parásitos extraintestinales se pueden
e) Dejar secar el extendido a temperatura demostrar mediante un examen directo en fresco?:
ambiente. _________________________________________
f) Inclinar la preparación y escurrirle
_________________________________________
metanol para fijarlo.
g) Colocar el frote, ya fijado, sobre el _________________________________________
soporte para portaobjetos, cubrirlo con
_________________________________________
el colorante de Giemsa y dejarlo actuar
durante 30 min. _________________________________________
h) Lavar al chorro de agua de la llave, en
4. En el hombre ¿en qué productos biológicos se
forma suave y breve.
puede realizar la búsqueda de Trichomonas
i) Observar en el microscopio con el
vaginalis?:
objetivo 100X.
_________________________________________
2. Examen directo en fresco de sangre. _________________________________________
Demostración con diapositivas.
_________________________________________
a) Cortar con las tijeras un pequeño frag-
mento de la porción distal de la cola del _________________________________________
ratón infectado con T. cruzi.
_________________________________________
b) Observar en el microscopio con los ob-
jetivos de 40X y 100X.
5. Correlaciona las siguientes columnas:
3. Biopsia de músculo de rata: Demos-
tración con diapositivas ( ) Impronta A) Leishmaniasis
a) Observar en el microscopio con el ob- cutánea
jetivo 10X y luego con el de 40X.
( ) Frote y gota gruesa B) Amibiasis
intestinal
CUESTIONARIO PARA RESPONDER
DURANTE LA PRÁCTICA ( ) Cultivo de heces C) Tricomoniasis
urogenital
Con el apoyo de la información recibida en el
( ) Examen directo de D) Malaria
laboratorio, conteste las siguientes secreción vaginal
preguntas:
1. Escriba cinco parasitosis extraintestinales ( ) Xenodiagnóstico E) Tripanosomiasis
en las que sea de utilidad diagnóstica la americana
biopsia:
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011
3 y 4.
DIAGNÓSTICO DE GIARDIASIS Y CRIPTOSPORIDIOSIS
I. OBJETIVOS
1. Enlistar los exámenes de laboratorio
utilizados para el diagnóstico de la
giardiasis y criptosporidiosis.
2. Mencionar los productos en que debe
buscarse Giardia lamblia y es posible realizar la búsqueda de antígeno
Cryptosporidium sp.
3. Reconocer microscópicamente trofozoítos
y quistes de G. lamblia.
4. Reconocer microscópicamente los ooquis-
tes de Cryptosporidium sp.
II. INTRODUCCIÓN
Giardia lamblia es un enteropatógeno
flagelado que se localiza usualmente en las
criptas de la mucosa del duodeno y la
porción inicial del yeyuno.
Clínicamente hay datos que permiten
sospechar el diagnóstico de giardiasis, sin
embargo es recomendable confirmarlo
mediante exámenes de laboratorio.
El producto idóneo para buscar G. lamblia, es
la materia fecal y el tipo de examen que se
realice, dependerá de su consistencia; así,
en el caso de evacuaciones líquidas o
pastosas el examen indicado será
microscópico directo en fresco, para realizar
la búsqueda de trofozoítos, con su
característica forma piriforme y su disco
suctor en el tercio anterior, así como un par
de núcleos y cuatro pares de flagelos que le
confieren su movilidad característica (fig. 4.1,
pág.68).
Si las heces son formadas se emplearán
métodos de concentración por flotación o
sedimentación para realizar la búsqueda de
quistes. Éstos presentan una forma ovoidal
con dos a cuatro núcleos en su interior. A los
lados de los núcleos pueden verse los
flagelos retraídos, así como sus axonemas
ubicados longitudinalmente al diámetro
mayor del quiste (fig. 4.2, pág. 68).
Tanto en heces diarreicas como en formadas
mediante las técnicas de ELISA y CIEF.
Cuando no se logre encontrar G. lamblia
después de practicar varios exámenes de
materia fecal, deberá recurrirse al estudio
microscópico de contenido duodenal
obtenido por sondeo o si se cuenta con otros
instrumentos como la cápsula de Beal,
Crosby-Kugler-Watson; ésta última también
sirve para obtener biopsia. Actualmente se
puede recurrir a técnicas inmunológicas tales
como: hemaglutinación indirecta, ELISA,
CIEF e immunoblot.
La cryptosporidiosis es una entidad en la que
el agente etiológico se reconoció como
patógeno para el hombre hasta 1976, en esa
época se asoció en pacientes con síndrome
de inmunodeficiencia adquirida o inmuno-
comprometidos y actualmente también en
individuos inmunocompetentes.
El agente causal, Cryptosporidium, se
localiza en el intestino delgado, por lo tanto el
producto donde debe buscarse es la materia
fecal y el método más eficiente es el de
concentración por flotación con sacarosa
(Sheather), donde se estudia el
sobrenadante microscópicamente en
contraste de fase.
Para reconocer los ooquistes con menos
dificultad se puede recurrir a diferentes
tinciones, entre otras: Giemsa, Ziehl-Neelsen
modificado o Kinyoun.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

Con ésta última tinción los ooquistes se f) Examinar la preparación en el microscopio,

observan como estructuras redondeadas de con los objetivos 10X, 40X y 100X. Los
aproximadamente 5 µm de diámetro con una ooquistes de Cryptosporidium se tiñen de
pared oquística no refringente, que se tiñen color cereza.
de un color rojo brillante. Ocasionalmente es
posible ver delineados en su interior cuatro
esporozoítos (fig. 5.3, pág. 183).

También se puede recurrir a la técnica de

inmunofluorescencia directa (heces) con
anticuerpos monoclonales; determinación de
anticuerpos IgG e IgM por
inmunofluorescencia y ELISA.

III. MATERIAL

1. Un frasco con materia fecal que con-tenga

quistes de G. lamblia.
2. Serie de transparencias con el proce-
dimiento de la cápsula de Beal. 4.1 Trofozoítos de Giardia lamblia, mostrando su típica forma
3. Preparaciones fijas con trofozoítos y piriforme, así como sus flagelos. Microscopia de contraste de
quistes de G. lamblia. fases. Colección: M. Ponce-Martínez, 1000X.
4. Papel limpia lentes.
5. Frasco con aceite para inmersión.
6. Preparaciones fijas con ooquistes de
Cryptosporidium sp.
7. Una preparación de heces de ratón con
Cryptosporidium sp. fijada con metanol.
8. Microscopios.
9. Portaobjetos de 26x76 mm.
10. Cubreobjetos 22x22 mm.
11. Diapositivas.
12. Material para la tinción de Kinyoun

IV. MÉTODO

1. Observar las preparaciones fijas en el

microscopio, con los objetivos 40X y 100X
e identificar quistes y trofozoítos de G.
lamblia y ooquistes de Cryptosporidum sp. 4.2 Quistes de Giardia lamblia con su característica forma ovoidal.
1000X.
2. Tinción de Kinyoun:
a) Preparar un extendido de heces frescas o
conservadas en formol; dejar secar al
aire.
b) Fijar la preparación con metanol durante 1
min, dejar secar.
c) Cubrir la preparación con carbol-fuscina y
teñir durante 5 min.
d) Lavar con alcohol-ácido y enjuagar con
agua de la llave.
e) Teñir con azul de metileno de Löeffler
durante 1 min; lavar con agua de la llave y
dejar secar al aire.

4.3 Ooquiste de Cryptosporidium sp. (O) teñido en

tinción de Kinyoun. Obsérvense las levaduras
circundantes (L). Colección: O. Vázquez, inmersión
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

CUESTIONARIO PARA RESOLVER 6. Con el apoyo de los siguientes esquemas

DURANTE LA PRÁCTICA escriba:

En base a la información recibida en el 6A. Nombre del parásito y fase en la que se

laboratorio conteste las siguientes preguntas. encuentra.
1. Mencione dos productos biológicos útiles ____________________________________
para realizar el diagnóstico de la giardiasis:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
Nombre de las estructuras señaladas con
2. ¿Cuál es el examen de laboratorio de flechas:
elección para el diagnóstico de la giardiasis
aguda?:
____________________________________ A
____________________________________

3. ¿Cuál es la fase del parásito que se

observa en este examen?:
____________________________________
____________________________________

4. ¿Cuál es el examen de laboratorio de

elección para el diagnóstico de la giardiasis
crónica?:
____________________________________
____________________________________ a.___________________________________
b.___________________________________
5. ¿Cual es la indicación para solicitar
c.___________________________________
exámenes especiales como el sondeo
duodenal o la cápsula de Crosby-Kugler-
Watson?:
____________________________________
____________________________________
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B C

6B. Nombre del parásito y fase en la que se
encuentra:
____________________________________
____________________________________
6C.1 Nombre del parásito y fase en la que se
encuentra.
6C 2. Exámenes de laboratorio útiles para su
diagnóstico.

Nombre de las estructuras señaladas con
flechas:
a.___________________________________
b.___________________________________
c.___________________________________
d.___________________________________
e.___________________________________
6C 3. Nombre de las estructuras señaladas con
flechas.
6C.1.__________________________________
______________________________________
6C.2. _________________________________
______________________________________
______________________________________
______________________________________

6C.3. a. _______________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011
5.
DIAGNÓSTICO DE AMIBIASIS
I. OBJETIVOS
1. Analizar y discutir las ventajas y desventajas
de los recursos de laboratorio, disponibles
actualmente para el diagnóstico de los
diferentes cuadros clínicos de
entamoebosis.
2. Mencionar las indicaciones de cada uno de
los exámenes de laboratorio utilizados en el
diagnóstico de amibiasis.
3. Citar los productos útiles que deben tomarse
para la búsqueda de Entamoeba histolytica.
4. Reconocer microscópicamente trofozoítos y
quistes de E. histolytica.
II. INTRODUCCIÓN
Una de las protozoosis intestinales con las que
se enfrenta el médico con cierta frecuencia es
la amibiasis. Desde el punto de vista clínico
esta parasitosis es similar a otras entidades
por lo que es muy importante recurrir a
diferentes exámenes de laboratorio, que
permitan poner en evidencia al agente
etiológico que es E. histolytica. Ahora bien, es
relativamente fácil la búsqueda de trofozoítos y
quistes de este protozoo, en la materia fecal.
Los trofozoítos miden de 10 a 65 micrómetros
de diámetro. En su citoplasma se puede
diferenciar el ectoplasma hialino hacia la
periferia, así como un endoplasma granuloso
con aspecto de vidrio molido.
Su núcleo, localizado hacia el centro muestra
un endosoma central, con gránulos de
cromatina pequeños adosados a la membrana
nuclear.
Los trofozoítos poseen movimiento activo,
resultante de la formación de seudópodos
(prolongaciones digitiformes de endoplasma)
fig. 5.1 pág. 71).
Los quistes de E. histolytica miden de 5 a 20
micrómetros con una forma ovoide o esférica
dada por su pared quística. En los quistes
maduros se pueden observar cuatro núcleos
con cariosoma central y cromatina fina
periférica (fig. 5.2 pág. 71).
El diagnóstico también se puede realizar
durante la búsqueda de antígeno en heces con
la técnica de ELISA. Pero cuando se aloja
fuera del intestino por ejemplo en hígado,
pulmón u otros tejidos, no es fácil su hallazgo
por los métodos de laboratorio rutinarios, sino
que se tiene que recurrir a la biopsia o la
detección de anticuerpos específicos mediante
técnicas como: contrainmunoelectroforesis,
inmunodifusión, ELISA, inmunoelectroforesis
hemagluti-nación indirecta,
inmunofluorescencia o fijación del
complemento.
En el intestino es posible encontrar protozoos
u otros elementos que en un examen
microscópico de heces, pueden llegar a
confundirse con E. histolytica tales como: E.
coli, E. hartmanni, Endolimax nana o
macrófagos, entonces es necesario conocer
sus características morfológicas para evitar
errores de diagnóstico, que en última instancia
perjudican al enfermo.
Por lo comentado, es importante para el
estudiante de medicina que en un futuro
atenderá pacientes, se familiarice con los
distintos métodos de laboratorio con los que se
cuenta actualmente para realizar
correctamente el diagnóstico de los diferentes
tipos clínicos de amibiasis, sus ventajas y
desventajas, los productos que deben tomarse
para buscar E. histolytica y por último,
interpretar los resultados que le proporciona el
laboratorio, efectuando una correlación
razonable con los datos clínicos que presente
el paciente.
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III. MATERIAL

1. Un frasco con heces que contengan quistes 4. Observar microscópicamente las prepara-
de E. histolytica, E. coli y Endolimax nana. ciones con cortes de tejido, con los
2. Pipetas Pasteur y bulbos de caucho. objetivos de 10X, 40X y 100X. Describir la
3. Portaobjetos de 26x76 mm. morfología de los trofozoítos de E.
4. Cubreobjetos de 22x22 mm. histolytica.
5. Aplicadores de madera. 5. Observar microscópicamente las prepara-
6. Medio de cultivo con trofozoítos de E. ciones fijas de materia fecal, con objetivos
histolytica. 10X y 100X, para identificar trofozoítos de
7. Aceite para inmersión E. histolytica y quistes de E. histolytica, E.
8. Frasco gotero con solución salina isotónica. coli y E. nana.
9. Frasco gotero con lugol parasitológico.
10. Microscopios ópticos.
11. Preparaciones fijas de heces con
trofozoítos y/o quistes de E. histolytica,
E. coli y E. nana.
12. Preparaciones con cortes histológicos
de tejidos con trofozoítos de E.
histolytica.
13. Diapositivas.

IV. MÉTODO

1. Realizar un examen directo en fresco, a

partir del medio de cultivo y observar la
morfología y movilidad de los trofozoítos
de E. histolytica con los objetivos 10X,
40X.
5.1 Examen microscópico en fresco de materia fecal.
2. Realizar un examen coproparasitoscópico Obsérvese un trofozoíto de Entamoeba histolytica con
en fresco: varios eritrocitos fagocitados. Colección: R. Álvarez, 40X.
a) Colocar una gota de solución de cloruro
de sodio a 0.85% sobre un portaobjetos.
b) Tomar con un aplicador apro-
ximadamente 2 mg de la materia fecal y
mezclarla con la gota de solución salina.
c) Hacer una suspensión uniforme y retirar
los detritos macroscópicos.
d) Cubrir con una laminilla y efectuar la
observación microscópica, con los
objetivos 10X y 40X.
e) En otro portaobjetos depositar una gota
de lugol.
f) Continuar con los incisos b) al d).

3. Hacer una preparación teñida con lugol de

las heces formadas para identificar y
diferenciar quistes de E. histolytica, E. coli y
E. nana.
Hacer la observación microscópica con los
objetivos de 10X y 40X.
5.2 Quiste de Entamoeba histolytica en el que se aprecian
cuatro núcleos con su cariosoma central. Colección: J.
Tay, 100X.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

CUESTIONARIO PARA RESOLVER DURANTE LA PRÁCTICA

1. Correlaciona las siguientes columnas anotando la letra correcta en el paréntesis

correspondiente:

A) Examen de elección en el diagnóstico de ( ) Hemaglutinación indirecta.

la entamoebosis intestinal aguda.

B) El método de laboratorio más adecuado ( ) Examen directo en fresco.

para confirmar el diagnóstico del absceso
hepático entamoebiano es.
( ) Impronta.
C) Es de utilidad para buscar trofozoítos en
Entamoeba histolytica en úlceras
cutáneas. ( ) Coproparasitoscópico de concentración
flotación de tipo cualitativo.
D) Para la confirmación diagnóstica de una
entamoebosis intestinal crónica es de
utilidad realizar.

2. En el siguiente esquema, escriba lo que a continuación se indica.

2A.Nombre del parásito y fase en la que se encuentra: ___________________________________

2B. Nombre de las estructuras señaladas con letras:

a.___________________________________ b.___________________________________
c.___________________________________ d.___________________________________
e.___________________________________ f .___________________________________
g.___________________________________
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3 Con base a la información recibida en el laboratorio, escriba los nombres de las estructuras
parasitarias que se muestran en las siguientes fotografías:
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

6.
DIAGNÓSTICO DE BALANTIDIASIS Y BLASTOCISTOSIS

I. OBJETIVOS

1. Enlistar los exámenes de laboratorio
utilizados para el diagnóstico de
balantidiasis y blastocistosis.
2. Mencionar los productos en los cuales
deben buscarse Balantidium coli y
Blastocystis hominis.
3. Reconcer trofozoítos de B. coli en cortes
histológicos.
II. INTRODUCCIÓN
La balantidiasis es una protozoosis cuyas
manifestaciones clínicas son muy similares a
las que se presentan en la amibiasis,
shigelosis y otras, por lo que debe recurrirse
a exámenes de laboratorio para demostrar el
agente etiológico: Balantidium coli.
Blastocystis hominis por mucho tiempo fue
confundido con levaduras intestinales del
hombre debido a su frecuente presencia en
las heces. Actualmente, con los avances en
ultramicroscopia y medios de cultivo, se ha
logrado establecer claramente taxonómi-
camente su posición de protozoo. La
clasificación taxonómica lo incluye como un
rizopoda del orden Amoebidae, y se propone
su ubicación en el suborden Blastocystina.
Morfológicamente son células esféricas, de
tamaño variable, multinucleadas, con
membrana limitante, sin forma quística y gran
cantidad de organelos y con mitocondria. Se
multiplican principalmente por fisión binaria,
pero también mediante endodiogenia y
esquizogonia. Su hábitat es el intestino del
hombre y de otros primates.

Esta protozoosis es quizá la más fácil de

diagnosticar con exámenes de laboratorio
que son sencillos, rápidos y baratos. Ahora
bien, el tipo de examen dependerá de la
consistencia de la materia fecal que es el
producto que debe estudiarse; si es líquida o
pastosa debe recurrirse al examen
microscópico directo en fresco. En el que se
deberán buscar trofozoítos grandes (58-120
µm) de forma ovoidal, rodeados de cilios. En
su citoplasma es posible observar vacuolas
alimenticias y contráctiles, así como un
macronúcleo en forma de riñón (fig. 6.1, pág.
75).

Si la materia fecal es formada, deberá

estudiarse por métodos de concentración
para buscar quistes. Éstos presentan forma 6.1 Trofozoítos de Balantidium coli en un examen directo en
fresco de materia fecal. Colección: R. Álvarez, 40X.
esférica o ligeramente ovoidal y miden de 40
a 65 µm y se encuentran rodeados por una
pared quística gruesa transparente en el
interior de la cual se observa al macronúcleo
y una hilera de cilios (fig. 6.2, pág. 76).
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

III. MATERIAL

1. Pipeta Pasteur con bulbo de caucho.

2. Cultivo de ciliados.
3. Aceite para inmersión.
4. Corte histológico de colon, con trofozoítos
de B. coli.
5. Portaobjetos 26x76 mm.
6. Cubreobjetos 22x22 mm.
7. Diapositivas.
8. Preparaciones fijas de B. hominis

IV. MÉTODO

1. Examen en fresco del cultivo de ciliados.

a) Observar las preparaciones fijas de corte
de intestino con B.coli en el microscopio, con 1.________________________________
los objetivos 10X y 40X.
_________________________________
b) Identificar protozoos ciliados.

2. ________________________________
__________________________________
__________________________________
__________________________________

3. ______________________________
a. ________________________________
b. ________________________________
c. ________________________________

6.2 Trofozoíto de Balantidium coli en el que se aprecia el

macronúcleo de forma arriñonada. Colección: I. de Haro,
40X.

CUESTIONARIO PARA RESOLVER

DURANTE LA PRÁCTICA

Con base en la información recibida durante

su práctica de laboratorio, escriba lo que a
continuación se le indica:
1. Nombre del parásito y fase en la que se
encuentra.
2. Exámenes de laboratorio útiles para su
diagnóstico.
3. Nombre de las estructuras señaladas con
flechas.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

7.
DIAGNÓSTICO DE TENIASIS E HIMENOLEPIASIS

I. OBJETIVOS microscópicamente a qué especie de Taenia

corresponden (fig. 7.1, pág. 77).
1. Mencionar los exámenes de laboratorio
empleados para el diagnóstico de
teniosis, sus ventajas y limitaciones.

2. Elaborar un cuadro sinóptico, seña-lando

las diferencias morfológicas que existen
entre Taenia solium y Taenia saginata.

3. Reconocer en preparaciones fijas, es-

cólices y proglótidos grávidos de T. solium
y T. saginata.

4. Enlistar los exámenes coproparasitos-

cópicos útiles para el diagnóstico de la
himenolepiasis.

5. Identificar microscópicamente las es- 7.1 Huevo de Taenia sp. mostrando su característica cubierta radiada
tructuras que elimina en heces un y el embrión hexacanto en su interior. Microscopia de contraste
paciente con himenolepiasis. interferencial diferencial de Nomarski. Colección: O. Vázquez, 1650X.

II. INTRODUCCIÓN Independientemente de que solamente los

Los agentes etiológicos de la teniosis: Taenia
solium y T. saginata, se localizan en el
intestino delgado del hombre, que es el único
huésped definitivo de estos céstodos. Un
dato importante que orienta al diagnóstico de
teaniosis, es el antecedente de la expulsión
de proglótidos en las heces en forma
espontánea, lo cual es frecuente en el caso
de T. saginata, aunque a veces también
sucede en el caso de infección por T. solium.
El individuo que aloja una tenia puede
eliminar proglótidos junto con las heces, los
cuales miden de 10 a 20 mm de longitud por
5 a 7 mm de ancho y son blanquecinos.
Ocasionalmente se pueden encontrar huevos
en la materia fecal y deben reportarse como
Taenia sp., ya que es imposible distinguir
huevos de T. solium son infectantes para el
hombre; es recomendable que todos los
proglótidos de Taenia solium que se
manipulen en el laboratorio, se manejen con
cuidado. Los procedimientos para la
búsqueda de huevos de Taenia sp. en heces,
como el examen coproparasitoscópico,
tienen una sensibilidad de alrededor de 50 %.
Otro recurso es el método de Graham.
Para identificar específicamente a los
proglótidos grávidos, se requiere aclararlos
con solución alcohol-formol-ácido acético
(AFA) o teñirlos con carmín de Semichón
para poder realizar el conteo de las ramas
uterinas. T. saginata posee entre 14 y 20 a
cada lado del útero, mientras que T. solium
solamente presenta de 7 a 13 (fig. 7.2, pág.
78 y fig. 7.3, pág. 78).
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

En pacientes con el antecedente de Posiblemente el método de elección a futuro,

eliminación de proglótidos se recomienda
que, después del tratamiento, se colecte la
materia fecal eliminada a las 24, 48 y 72
horas y que se envíe al laboratorio cada día,
en donde mediante el tamizado de las
mismas se buscarán los proglótidos y el
escólex para identificación de especie y
comprobación de eliminación del parásito
(figs. 7.4 y 7.5, pág. 78).
será el de hibridación directa utilizando
sondas de DNA marcadas con radioactividad,
que detecta hasta un huevo y además
distingue las dos especies de Taenia.
Otra técnica prometedora es la detección de
antígenos en heces mediante la técnica de
ELISA.

10.2 Proglótido de Taenia solium donde se aprecian las

ramas uterinas.
Contraste con tinta negra. Colección: J. Zayman.

10.3 Proglótido grávido de Taenia saginata mostrando sus

ramas uterinas.
Técnica de contraste con tinta negra. Colección: J. Zayman.

10.4 Escólex de Taenia solium 10.5 Escólex de Taenia saginata

mostrando su rostelo con una doble mostrando sus cuatro ventosas.
corona de ganchos y cuatro Colección: J. Tay.
ventosas. Colección: J. Tay.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

La himenolepiasis es una parasitosis

causada por céstodos del género
Hymenolepis; principalmente por la especie
nana, que afecta frecuentemente a niños.
Ocasionalmente el hombre se infecta con H.
diminuta, que tiene como huéspedes
definitivos a ratas y ratones.

Hymenolepis nana es el céstodo más

pequeño que parasita al intestino delgado
(íleon) de los humanos, donde se encuentra
en gran cantidad, a veces varios miles.

Mide de 3 a 4 cm de longitud por 1 a 2 mm

de ancho; presenta un escólex con cuatro
ventosas y un rostelo retráctil armado con
una corona de ganchos; la cadena estrobilar
la constituyen proglótidos trapezoidales.
7.6 Huevo de Hymenolepis nana.
Obsérvese los engrosamientos polares y su embrión hexacanto.
Microscopia de campo claro 1000X.

Los huevos salen en las heces al

desintegrarse los proglótidos grávidos que se
caracterizan por tener una corteza gruesa y
transparente, provista de engrosamientos
polares, de los que sale un par de filamentos
y dentro se encuentra el embrión hexacanto
(fig. 7.6).

Los huevos de H. diminuta son similares a

los de H. nana, pero son más grandes y sin
filamentos polares.

El diagnóstico de la himenolepiasis en el
laboratorio, se logra fácilmente por la
observación de huevos en las heces de los
individuos infectados, mediante exámenes
coproparasitoscópicos de concentración por
flotación (Faust, Willis), por sedimentación
simple o método de Ritchie. También es útil
7.7 Huevo de Hymenolepis diminuta en el que se aprecia el embrión
el examen microscópico en fresco (fig. 7.7). hexacanto.
Microscopia de campo claro 1000X.
Los adultos de H. nana, rara vez se
encuentran en las heces, debido al tamaño
tan pequeño y a la destrucción que sufren en
el intestino.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

III. MATERIAL

1. Un frasco con proglótidos de T.saginata,

conservados en AFA.
2. Estereomicroscopio.
3. Preparaciones fijas con proglótido in-
maduro, maduro y grávido de T. solium,
proglótido inmaduro, maduro y grávido de
T. saginata y huevos de Taenia sp.
4. Microscopios.
5. Diapositivas.
6. Un frasco conteniendo materia fecal con
huevos de H. nana. ____________________________________
7. Aplicadores de madera.
8. Frascos gotero con lugol. 2. De acuerdo a los proglótidos
9. Frascos gotero con solución salina. esquematizados abajo escriba a que especie
10. Portaobjetos de 26x76 mm. de Taenia corresponde cada uno y en que
11. Cubreobjetos de 22x22 mm. fase se encuentran:
12. Preparaciones permanentes con adultos, A) B)
huevos y cisticercoides de H. nana.

IV. MÉTODO

1. Observación macroscópica de los pro-

glótidos contenidos en el frasco.

2. Observar con el microscopio estereos-

cópico las preparaciones fijas con los
objetivos 10X y 40X.

3. Hacer un examen coproparasitoscópico en

fresco (ver Práctica 1).

4. Observar al microscopio las preparaciones A) __________________________________

fijas con los objetivos 10X y 40X.
____________________________________
____________________________________
CUESTIONARIO PARA RESOLVER
B) __________________________________
DURANTE LA PRÁCTICA
____________________________________
1. En base a las estructuras señaladas en los
____________________________________
escólex abajo esquematizados haga la
identificación de la especie de Taenia a la
que corresponde cada uno: 3. ¿Cuál es el método de laboratorio de
elección para el diagnóstico de la teniasis?
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

Con base en la información recibida en el

laboratorio, escriba los nombres de las
estructuras parasitarias esquematizadas a
continuación:

____________________________________

____________________________________

A continuación conteste las siguientes

preguntas de manera breve y concisa.
1. ¿Cuál es el examen de laboratorio de
elección para la himenolepiasis?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________

2. ¿Cuáles son las características

morfológicas de un adulto de Hymenolepis
nana?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
8 y 9.
DIAGNÓSTICO DE GEOHELMINTIASIS
I. OBJETIVOS
1. Enlistar los exámenes de laboratorio útiles
en el diagnóstico de las geohelmintiasis.
2. Discutir la utilidad de los exámenes cuan-
titativos en la valoración de la intensidad de
las infecciones por geohelmintos.
3. Diferenciar macroscópicamente adultos de
Ascaris lumbricoides, Trichuris trichiura y
uncinarias.
4. Identificar microscópicamente huevos de A.
lumbricoides, T. trichiura y uncinarias, así
como larvas rabditoides de Strongyloides
stercoralis.
II. INTRODUCCIÓN
Los agentes etiológicos de las geohelmintiasis
son: T. trichiura, A. lumbricoides, S. stercoralis,
Necator americanus y Ancylostoma duodenale.
Todos excepto T. trichiura tienen ciclo
migratorio por hígado, corazón, pulmones para
finalmente establecerse en intestino delgado. T.
trichiura se localiza en el ciego.
Una vez establecidos los adultos en el intestino
delgado o grueso y cuando alcanzan su
madurez sexual, se eliminan las formas
diagnósticas en la materia fecal; así por medio
de métodos de concentración por flotación o
sedimentación se llega al diagnóstico.
En la tricocefalosis el diagnóstico se establece
por el hallazgo de huevos en las heces (fig. 8.1,
pág. 82).
El diagnóstico se puede establecer por medio
de la observación directa de los adultos, al
efectuar la rectosigmoidoscopia o en la mucosa
rectal prolapsada (fig. 8.2, pág. 82).
El diagnóstico de la ascariasis se fundamenta
en el hallazgo de huevos en las heces.
También resultan útiles en el diagnóstico de las
ascariasis, las pruebas inmunológicas, sobre
todo en etapas tempranas de la infección:
hemaglutinación indirecta,
contrainmunoelectroforesis (CIEF) e
inmunodifusión (fig. 8.3, pág. 84).
En la ascariasis masiva los pacientes pueden
eliminar adultos por la boca, narinas y otros
orificios; también pueden observarse en
estudios radiológicos cuando se utiliza medio
de contraste. En el empiema por ruptura de un
absceso hepático ocasionado por A.
lumbricoides, puede buscarse huevos en el
aspirado pleural.
En la necatoriasis, mediante exámenes CPS
cualitativos, no es posible definir la especie de
uncinaria de que se trate, debido a que en la
fase de huevo, comparten características
morfológicas. La diferenciación entre N.
americanus y A. duodenale, se logra con las
características morfológicas de las larvas
filariformes obtenidas en el cultivo de heces
(Harada-Mori) (fig. 8.4, pág. 84).
El diagnóstico de la estrongiloidosis, se logra en
el laboratorio con la demostración de larvas o
huevos en muestras de heces, esputo o
contenido duodenal obtenido por aspiración o
cápsula de Beal. En las heces recientes, se
pueden identificar larvas rabditoides y en heces
que han permanecido a temperatura ambiente
durante 24 h, si se encuentran larvas deben
diferenciarse de las de uncinarias.
Los exámenes CPS utilizados frecuentemente
para la identificación de larvas de S. stercoralis
son los de concentración (Faust, Willis). El de
Baermann es un procedimiento sencillo y
sensible en estrongiloidosis asintomática, cuya
importancia se ha incrementado en pacientes
inmunocomprometidos y que se encuentran en
riesgo de desarrollar autoinfección interna que
lleva a una complicación fulminante y fatal.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

En las geohelmintiasis es importante valorar la 2. Frasco conteniendo materia fecal con larvas
intensidad de la infección (leve moderada o de S. stercoralis y huevos de A.
grave) o la eficacia del tratamiento, mediante lumbricoides, T. trichiura y uncinarias.
exámenes CPS cuantitativos como: Stoll, Kato- 3. Cajas de Petri.
Miura o Kato-Katz. 4. Pipetas Pasteur con bulbo de caucho.
5. Cuadros de celofán de 22x30 mm, en
solución de verde de malaquita-glicerol.
6. Toallas de papel absorbente.
7. Pinzas.
8. Frasco gotero con lugol.
9. Aplicadores de madera.
10. Portaobjetos de 26x76 mm.
11. Cubreobjetos de 22x22 mm.
12. Microscopios ópticos.
13. Estereomicroscopios.
14. Cultivos de Harada-Mori (demostrativos).
15. Dispositivos de Baermann.
16. Frasco con adultos de T. trichiura.
17. Preparaciones fijas de geohelmintos.
18. Diapositivas.

8.1 Huevos de Trichuris trichiura mostrando su característica IV. MÉTODO

forma de barril y sus tapones polares mucilaginosos, así como
la masa embrionaria interior. Microscopia de campo claro. 1. Colocar en una caja de Petri, un adulto de
Colección: J. Tay, 400X.
A. lumbricoides.
a) Identificar las características
morfológicas macroscópicas con el
estereomicroscopio.

2. Método de Kato-Miura.
a) Colocar aproximadamente 50 mg de
heces en un portaobjetos y cubrirlo con un
cuadro de celofán.
b) Invertir la preparación, colocarla sobre
una toalla de papel absorbente y presionar
para distribuir uniformemente la materia
fecal.
c) Dejar la preparación en la estufa a 40°C
durante 30 min o una hora a temperatura
ambiente. Así se aclaran las heces pero no
los huevos de las helmintias.

3. Observar las preparaciones fijas de los

8.2 Prolapso rectal por Trichuris trichiura, obsérvense los
parásitos adheridos a la mucosa rectal prolapsada. geohelmintos.
Colección: F. Beltrán.

Ocasionalmente en los exámenes de las heces

no se detectan huevos, aun haciéndolos en
forma correcta y esto puede deberse a que los
helmintos sean machos o a que no hayan
alcanzado la madurez sexual.

III. MATERIAL

1. Frasco con adultos de A. lumbricoides.

PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

8.3 Huevos fértiles de Ascaris lumbricoides corticados y decorticados

mostrando en su interior la masa embrionaria (ME) en desarrollo.
Colección: R. Álvarez.

8.4 Huevo de uncinaria mostrando su pared delgada y masa

embrionaria interna en proceso de blastogénesis. 400X.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

DIFERENCIAS ENTRE LARVAS FILARIFORMES (F3)

Característica diferencial Necator americanus Ancylostoma duodenale Strongyloides stercoralis

Tamaño sin vaina 590 µm 660 µm 500 µm

Tamaño con vaina 650 µm 720 µm Generalmente sin vaina

Extremo bucal Redondeado Aplanado (chato) Redondeado

Espículas bucales Oscuras, gruesas, Menos visibles Ausentes

quitinosas
Extremo anterior Igual de ancho que el esófago Menos ancho que el esófago Igual de ancho que el esófago

Extremo caudal Agudo, muy afilado Cónico Aplanado, bífido

Extremo caudal (vaina) Estriaciones netas Estriaciones conspicuas

Elaboró: Dra. Irene de Haro Arteaga, 2002.

CUESTIONARIO PARA RESOLVER

DURANTE LA PRÁCTICA
Relacione los enunciados con las imágenes
presentadas y anote la letra correspondiente
en cada paréntesis:

A. Huevo infértil de Ascaris lumbricoides

(óvulo).

B. Huevo fértil decorticado de A.

lumbricoides.

C. Huevo larvado de segundo estadio de A.

lumbricoides.

D. Huevo fértil corticado de A. lumbricoides.

E. A. lumbricoides hembra.

F. A. lumbricoides macho.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

Conteste las siguientes preguntas:

1. ¿Cuál es el examen de laboratorio más 6. ¿En qué situaciones es posible encontrar

adecuado para realizar el diagnóstico de la todos los exámenes coproparasitoscópicos
ascariosis?: negativos a pesar de estar cursando el
____________________________________ paciente con ascariasis intestinal?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
2. ¿Cuál es el criterio para realizar un ____________________________________
diagnóstico de tricocefalosis masiva
____________________________________
mediante exámenes de laboratorio?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________

3. ¿Cuál es la forma diagnóstica más

frecuentemente encontrada en heces en la
estrongiloidosis?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

4. ¿Mediante qué examen de laboratorio se

puede establecer el diagnóstico de
necatoriasis masiva?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________

5. ¿Qué resultado espera encontrar en un

coproparasitoscópico cuantitativo para
considerar a una ascariasis como masiva?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011
10.
DIAGNÓSTICO DE ENTEROBIASIS
I. OBJETIVOS
1. Enlistar los exámenes de laboratorio, útiles
en la búsqueda de Enterobius vermicularis.
2. Describir el método de Graham.
3. Discutir las condiciones en que se debe
practicar el Graham a un paciente.
II. INTRODUCCIÓN
La enterobiasis es una parasitosis que afecta
frecuentemente a grupos de personas que
viven en hacinamiento; se adquiere por la
ingestión de huevos de E. vermicularis, a
través de la contaminación de las manos al
rascarse la región perianal y posteriormente
llevárselas a la boca; otro mecanismo es por
contagio por la convivencia con individuos
portadores del parásito o por diseminación de
huevos por el polvo.
Los gusanos adultos se localizan en la región
íleocecal del intestino, donde permanecen
adosados por medio de sus expansiones
cuticulares cefálicas (alulas). Para establecer
el diagnóstico de certeza, es necesario
demostrar los adultos en heces o huevos del
parásito en la región perianal del huésped,
mediante el método de Graham. Por este
método, los huevos quedan adheridos a un
trozo de cinta adhesiva transparente.
Los huevos de E. vermicularis miden
aproximadamente 60 µm de largo por 20 a 30
de ancho. Son de forma ovalada, aplanados
por uno de sus lados, con uno de sus
extremos más ancho que el otro. Se
encuentran rodeados por una capa
transparente refringente con dos cubiertas
(fig. 10.1, pág. 88).
El estudio debe realizarse por la mañana,
antes de que el sujeto haya defecado o se
haya bañado, es recomendable hacerlo en
tres días sucesivos.
También es conveniente recomendar a la
madre que no le aplique talcos ni aceites al
niño en la región perianal ya que esto puede
interferir con la lectura de las muestras.
El diagnóstico específico, también puede
establecerse mediante la identificación de
adultos (hembras) que abandonan el
intestino durante la noche. Estos gusanos
son pequeños, blanquecinos y de aspecto
filiforme (fig. 10.2, pág. 88).
III. MATERIAL
1. Preparaciones fijas con huevos de E.
vermicularis.
2. Preparaciones fijas con adultos de E.
vermicularis.
3. Preparaciones fijas con corte histológico
de apéndice.
4. Microscopios.
5. Diapositivas.
IV. MÉTODO DE GRAHAM
1. Sobre el extremo de un abatelenguas,
colocar 8 cm de cinta adhesiva transparente
con la parte engomada hacia afuera y
sostenerla contra el abatelenguas con los
dedos índice y pulgar:
a) Colocar al paciente de manera que quede
expuesta la región perianal; presionar la cinta
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
adhesiva contra dicha región hacia la
izquierda y la derecha, teniendo cuidado de
cubrir toda el área entre la mucosa y la piel.
b) Pegar la cinta sobre un portaobjetos y
rotular con los datos del paciente.
c) Examinar la preparación en el microscopio
con los objetivos de 10X y 40X.
2. Observar las preparaciones fijas con los
objetivos 10X y 40X.
10.1 Huevos de Enterobius vermicularis mostrando
en su interior una larva en desarrollo, enrollada
sobre si misma. Microscopia de campo claro 1000X.
Colección: R. Álvarez.
10.2 Ejemplares adultos de Enterobius vermicularis
macho y hembra.
Colección: R. Álvarez.
CUESTIONARIO PARA RESOLVER
DURANTE LA PRÁCTICA
Con base a la información recibida en el
laboratorio y apoyándose en los esquemas
inferiores escriba:
A. Nombre del parásito y fase en que se
encuentra.
B. Tipo de examen de laboratorio más
adecuado para su identificación.
C. El nombre de la estructura señalada con la
flecha.
A.________________________________
B.________________________________
C.________________________________
A.__________________________________
B.__________________________________
C.__________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

11.
DIAGNÓSTICO DE TOXOPLASMOSIS

I. OBJETIVOS muy laboriosa, costosa y no se práctica en

1. Mencionar los exámenes de laboratorio
directos indirectos que se usan para el
diagnóstico de toxoplasmosis.
2. Interpretar los resultados de los métodos
indirectos y correlacionarlos con los
diferentes tipos clínicos de toxoplasmosis.
3. Reconocer microscópicamente trofozoítos
y quistes de Toxoplasma gondii.
II. INTRODUCCIÓN
El diagnóstico clínico de esta protozoosis no
es fácil debido entre otras causas a que el
agente etiológico, Toxoplasma gondii, es el
parásito más diseminado en el mundo. Esto
trae como consecuencia que la
toxoplasmosis pueda coexistir con cualquier
otra enfermedad, sin una relación causa-
efecto entre esta parasitosis y la
sintomatología del paciente.
cualquier laboratorio de análisis clínicos (fig.
11.1).
El aislamiento del parásito en animales de
experimentación a partir de productos tales
como: lesiones papulosas de piel, ganglios,
aspirado de médula ósea, placenta, útero,
líquido cefalorraquídeo, humor acuoso,
lágrimas, saliva, orina, leche, materia fecal, a
pesar de ser un método de diagnóstico
directo muy útil, tiene la desventaja de que es
muy laborioso, requiere de mucho tiempo
para obtener el resultado y su rendimiento es
muy bajo. También se recomienda la
demostración del parásito en cultivo de
tejidos, el cual tiene entre otras desventajas,
el de que solamente se practica en
laboratorios especializados.

Resulta muy difícil y con frecuencia

imposible, establecer el diagnóstico sin la
ayuda del laboratorio y aún así en muchas
ocasiones, tampoco se logra.

Los métodos de laboratorio pueden ser

directos e indirectos. Los primeros ayudan a
demostrar la presencia del parásito y los
segundos a detectar anticuerpos
específicos.

Métodos directos 11.1 Trofozoítos de Toxoplasma gondii provenientes de

exudado peritoneal, nótese su característica forma de arco.
Tinción de Giemsa. Colección: R. Álvarez. Microscopia de
Toxoplasma gondii se puede encontrar por campo claro 1000X.
medio del examen microscópico en fresco,
con tinción y en presenta grandes dificultades
y rara vez es concluyente. En este sentido, la
Métodos indirectos
técnica de la inmunoperoxidasa es muy útil
ya que es altamente sensible y específica,
En la práctica médica el diagnóstico de la
sin embargo, tiene la desventaja de que es
toxoplasmosis se basa fundamentalmente,
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
en la detección de anticuerpos específicos
mediante reacciones serológicas como la de
Sabin-Feldman, también conocida como
prueba del colorante o dyetest, es altamente
específica y sensible, sin embargo, las
dificultades técnicas en su realización limitan
su empleo, por lo que en la actualidad
prácticamente está en desuso.
Otras reacciones utilizadas son:
inmunofluorescencia indirecta, hemaglutina-
ción indirecta, fijación del complemento y
ELISA.
La variedad de antígenos que posee T.
gondii explica el empleo de diferentes
técnicas serológicas. Cada una de ellas tiene
su valor y limitantes, por eso es
indispensable asociar por lo menos dos, para
establecer de manera confiable el
diagnóstico.
En los casos con sospecha de toxoplasmosis
evolutiva, es recomendable repetir los
exámenes con dos a tres semanas de
intervalo para seguir la cinética de los
anticuerpos.
III. MATERIAL
1. Frasco gotero con colorante de Giemsa.
2. Papel limpialentes.
3. Aceite para inmersión.
4. Frote de exudado peritoneal de ratón
infectado con T. gondii.
5. Preparación permanente con trofozoítos
de T. gondii. Teñidos.
6. Microscopios.
7. Diapositivas
8. Preparación permanente con quistes de T.
gondii (teñidos).
IV. MÉTODO
1. Tinción del frote de exudado peritoneal:
a) Cubrir el frote con colorante de Giemsa y
dejar actuar durante 30 min.
b) Lavar al chorro de agua suavemente por
tiempo breve.
c) Dejar secar al aire.
2. Observar en el microscopio, con el objetivo
100X.
a) Observar en el microscopio la preparación
fija con el objetivo 100X.
CUESTIONARIO PARA RESOLVER
DURANTE LA PRÁCTICA
1. ¿Qué exámenes de laboratorio son de
utilidad para el diagnóstico serológico de la
toxoplasmosis?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
2. ¿Qué examen de laboratorio de tipo
serológico requiere de toxoplasmas vivos
para su realización?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
3. ¿Qué resultados espera encontrar en una
serología para la detección de anticuerpos en
un paciente inmunodeprimido con
toxoplasmosis?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
4. ¿Qué tipo de inmunoglobulinas debe de
solicitar para realizar el diagnóstico
confirmatorio de una toxoplasmosis
congénita y por qué?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
5. ¿Qué utilidad tienen los exámenes
parasitoscópicos en el diagnóstico de
latoxoplasmosis?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011
12.
DIAGNÓSTICO DE MALARIA
I. OBJETIVOS
1. Mencionar los exámenes parasitoscópicos
y serológicos utilizados en el diagnóstico
de la malaria.
2. Analizar las ventajas y desventajas de
cada uno de ellos.
3. Citar los productos en los que se puede
demostrar en forma directa o indirecta a
Plasmodium sp.
4. Describir y ejecutar en forma correcta un
frote y gota gruesa de sangre.
5. Reconocer microscópicamente las dife-
rentes fases de Plasmodium sp. en frotes
teñidos.
II. INTRODUCCIÓN
El diagnóstico de la malaria, debe
sospecharse en un paciente con síndrome
febril de etiología no determinada y que viva
o haya permanecido en zonas donde la
malaria sea endémica o que haya sido
transfundido.
El diagnóstico de certeza se establece
mediante la demostración de plasmodios en
la sangre, esto se logra, realizando un frote y
gota gruesa de sangre obtenida momentos
antes del acceso febril. Es conveniente tomar
varias muestras en cada caso, para tener
una mayor seguridad de encontrarlos. Este
método permite la identificación morfológica
de las fases evolutivas del ciclo eritrocítico y
la diferenciación entre las especies de
Plasmodium.
Tanto en pacientes en los que la parasitemia
es baja resulta difícil encontrar a los parásitos
por los métodos rutinarios, así como algunos
casos en que los datos epidemiológicos y
clínicos sean muy
sugestivos, se puede recurrir a la
concentración de una muestra de sangre y a
partir de esta realizar el frote y gota gruesa
(método de Knott) o bien, también se puede
realizar la técnica de QBC (Cuantitative Buffy
Coat).
En forma indirecta se puede investigar la
presencia de Plasmodium sp. en un paciente,
mediante reacciones serológicas tales como:
inmunofluorescencia indirecta,
hemaglutinación indirecta, ELISA y
radioinmunoensayo.
III. MATERIAL
1. Un ratón infectado con Plasmodium yoellii.
2. Portaobjetos 26x76 mm desengrasados.
3. Soporte para portaobjetos.
4. Papel limpialentes.
5. Frasco gotero con metanol.
6. Frasco gotero con colorante de Giemsa.
7. Aceite para inmersión.
8. Microscopios.
9. Preparaciones fijas de Plasmodium vivax,
P.malariae, P. falciparum.
10. Diapositivas
IV. MÉTODO
1. Frote y gota gruesa de sangre de ratón:
a) Hacer un frote con sangre de la cola de
ratón que cubra aproximadamente 3/4
partes del portaobjetos.
b) En el extremo libre colocar una gotita de
sangre y usando la esquina de un
portaobjetos, extenderla con movimiento
rotatorio, a manera de formar una
pequeña área de aproximadamente un
centímetro de diámetro (gota gruesa).
c) Colocar el frote ligeramente inclinado y
dejar escurrir metanol y lavar la gota
gruesa con agua.
d) Dejar secar al aire ambos portaobjetos.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
e) Colocar ambas preparaciones, sobre el
soporte y cubrirlas con colorante de
Giemsa.
f) Dejar actuar el colorante durante 30
minutos, agitando dos veces la gota
gruesa para remover la hemoglobina.
g) Lavar con el chorro de agua suavemente,
por tiempo breve.
h) Dejar secar al aire.
i) Observar al microscopio, con el objetivo
100X.
2. Observar al microscopio las preparaciones
fijas con el objetivo 100X e identificar los
estadios de trofozoítos, esquizontes y
gametocitos.
CUESTIONARIO PARA RESOLVER
DURANTE LA PRÁCTICA
1. Identifique a que fase corresponde cada
una de las estructuras parasitarias señaladas
en los siguientes esquemas:
ERITROCITOS PARASITADOS
A continuación conteste las preguntas o
complete los enunciados:
2. ¿Cuál es el examen de laboratorio de
elección, para realizar el diagnóstico de la
malaria?:
____________________________________
3. Para llevar a cabo el diagnóstico de
especie en la malaria. ¿En qué momento es
conveniente tomar la muestra?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
4. Describa brevemente como se realiza un
frotis de sangre periférica. ¿Con qué
colorantes se puede teñir y cuál es su utilidad
diagnóstica?: _________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

13.
DIAGNÓSTICO DE LEISHMANIASIS

I. OBJETIVOS Las pruebas inmunológicas útiles en el

diagnóstico de la leishmaniasis visceral,
1. Esquematizar la fase de amastigote y incluyen la intradermorreacción de
promastigote de Leishmania sp. Montenegro, la reacción de fijación del
complemento, inmunofluorescencia indirecta
2. Analizar los recursos de laboratorio útiles y ELISA.
para identificar Leishmania mexicana y L.
chagasi.
III. MATERIAL
3. Reconocer amastigotes de L. mexicana en
cortes histológicos de lesiones cutáneas. 1. Un tubo de medio de cultivo de NNN.
2. Frascos gotero con colorante de Giemsa.
4. Identificar microscópicamente amastigotes 3. Pipetas Pasteur estériles, con bulbo de
de L. chagasi en impronta de bazo. caucho.
4. Frascos gotero con aceite para inmersión.
5. Frascos gotero con metanol.
II. INTRODUCCIÓN 6. Papel limpialentes.
7. Portaobjetos 26x76 mm.
La leishmaniasis es una histoparasitosis 8. Cubreobjetos 22x22 mm.
producida por protozoos del género 9. Microscopios.
Leishmania, de localización intracelular; 10. Preparaciones fijas de L. mexicana y L.
caracterizada por lesiones cutáneas, chagasi.
mococutáneas o viscerales y cuyo agente 11. Diapositivas.
causal es transmitido por la picadura de
mosquitos del género Lutzomyia.

En su ciclo biológico, las especies del género

Leishmania, presentan una fase de
amastigote y otra de promastigote. Las
diferentes especies de Leishmania son
indistinguibles con esta morfología.

En las lesiones causadas por L. mexicana,

los amastigotes pueden identificarse en
improntas o cortes histológicos. Otros
recursos útiles para el aislamiento de este
protozoo, son el cultivo en NNN, las pruebas
inmunológicas, siendo la de fijación del
complemento la más usada (fig. 13.1).

En la leishmaniasis visceral, causada por L.

chagasi, para la identificación de 13.1 Impronta obtenida del borde de una úlcera del pabellón
amastigotes, se ha utilizado la biopsia de auricular de un paciente con leishmaniasis cutánea.
Obsérvese el acúmulo de amastigotes de Leishmania.
médula ósea y de ganglios linfáticos. Tinción de Wright. Microscopia de campo claro 1000X.
También se ha recurrido al cultivo de tales Colección: J. Tay.
muestras, en el medio de NNN.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

IV. MÉTODO
____________________________________
1. Con una pipeta Pasteur, aspirar un poco
4. ¿Cuál es el medio de cultivo para el
de líquido del medio de NNN, colocar una
aislamiento de leishmaniasis?:
gota sobre un portaobjetos y cubrirla con
____________________________________
un cubreobjetos.
a) Observar al microscopio con los ____________________________________
objetivos 10X y 40X.
____________________________________
2. En otro portaobjetos colocar una gota del ____________________________________
medio de cultivo, extenderla y dejarla
____________________________________
secar.
a) Fijar la preparación con metanol y dejarla
secar al aire. 5. ¿Qué fase del parásito se desarrolla en
b) Cubrirla con colorante de Giemsa y dejarlo este medio?:
actuar durante 30 min. ____________________________________
c) Lavar con agua de la llave a chorro suave
____________________________________
y dejar secar al aire.
d) Observar en el microscopio con los ____________________________________
objetivos 10X y 40X.
____________________________________
3. Observar en el microscopio las prepa- ____________________________________
raciones fijas, con el objetivo 100X.
6. Describa clara y brevemente la forma de
realizar una impronta cutánea:
CUESTIONARIO PARA RESOLVER
____________________________________
DURANTE LA PRÁCTICA
____________________________________
1. ¿Qué exámenes de laboratorio son útiles
____________________________________
para el diagnóstico de la leishmaniasis
cutánea?: ____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

2. ¿Qué estructuras espera encontrar para

confirmar el diagnóstico?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

3. En el caso de leishmaniasis visceral ¿cuál

es el material biológico más adecuado para
la búsqueda del agente etiológico?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

14.
DIAGNÓSTICO DE TRYPANOSOMIASIS

I. OBJETIVOS diagnóstico. En los tejidos de dichos

1. Esquematizar las fases de amastigote,
epimastigote y tripomastigote de
Trypanosoma cruzi.
2. Identificar microscópicamente las fases de
vida de T. cruzi, en cortes histológicos,
sangre fresca y frote sanguíneo de ratón y en
medio de cultivo NNN.
animales es posible observar nidos de
amastigotes (fig. 14.2, pág. 96).
Xenodiagnóstico. Es un método útil para
detectar al parásito durante la fase crónica de
la enfermedad. Se basa en la multiplicación
de T. cruzi en el tubo digestivo de triatóminos
y el examen posterior de sus heces durante
uno a tres meses.

3. Analizar la utilidad de los recursos de Existen además, pruebas inmunológicas que

diagnóstico, en las tres fases clínicas de la
trypanosomiasis americana.
II. INTRODUCCIÓN
La trypanosomiasis americana o enfermedad
de Chagas es causada por el flagelado T.
cruzi, que generalmente es transmitido al
humano por las heces de un artrópodo. El
parásito en el humano, afecta células del
sistema reticulo endotelial, particularmente
las de miocardio, esófago y colon.
Si bien en un paciente, los datos clínicos y
epidemiológicos pueden hacer sospechar de
la trypanosomiasis, los exámenes
parasicológicos pertinentes confirman la
presencia del agente causal.
de manera indirecta apoyan al diagnóstico
durante la fase crónica y son útiles en
estudios epidemiológicos. Las más usadas
son inmunofluorescencia indirecta, hemaglu-
tinación indirecta, contrainmunoelectro-
foresis, doble difusión y ELISA.
La reacción de fijación del complemento, fue
la primera prueba serológica de uso general,
sin embargo, por dificultades técnicas ha
caído en desuso.
En los casos de trypanosomiasis americana
congénita, la detección de IgM específica,
puede contribuir a confirmar un diagnóstico.

Examen de sangre. Las pruebas clásicas

para la detección de tripomastigotes, son el
examen directo y los extendidos (delgados o
gruesos) teñidos con Giemsa; sin embargo,
es recomendable hacer técnicas de
concentración de sangre mediante los
métodos de Stront o Woo (hematócrito) (fig.
14.1).

Aislamiento. El cultivo de sangre en medios

de NNN y la inoculación en ratones de
laboratorio, permiten el aislamiento del
parásito pero el tiempo que requiere (tres a
cuatro semanas) limitan su uso para el
14.1 Tripomastigote sanguíneo de Trypanosoma cruzi en frote
de sangre periférica en el que se puede observar el flagelo,
membrana ondulantes y el cinetoplasto. Tinción de Giemsa.
Microscopia de campo claro 1000X. Colección: J. Tay.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

3. Observar en el microscopio las

preparaciones fijas con los objetivos 40X y
100X.

14.2 Nidos de amastigotes obtenidos de tejidos de un ratón

inoculado con T. cruzi.
Colección: J. Tay, 1000X.

III. MATERIAL
1. Tubo con medio de cultivo de NNN.
2. Ejemplares de Triatoma sp.
3. Ratón infectado con T. cruzi.
4. Frasco gotero con solución salina.
5. Guantes.
6. Pipetas Pasteur estériles.
7. Aceite para inmersión.
8. Portaobjetos de 26x76 mm.
9. Cubreobjetos de 22x22 mm.
10. Papel limpia lentes.
11. Preparaciones fijas de T. cruzi. Teñidos
12. Microscopios.
13. Diapositivas.

IV. MÉTODO
1. Junto a la flama del mechero, destapar el
tubo con medio de cultivo y aspirar el
líquido con una pipeta Pasteur.
a) Depositar una gota sobre un portaobjetos
y cubrirla con una laminilla.
b) Observar al microscopio con los objetivos
10X y 40X.

2. El profesor cortará con tijeras, un pequeño

fragmento de la porción distal de la cola
del ratón.
a) Colocar una gota de sangre en un por-
taobjetos y añadir una gotita de solución
salina.
b) Mezclar con la esquina del cubreobjetos y
cubrir la preparación.
c) Observar al microscopio con los objetivos
10X y 40X.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

CUESTIONARIO PARA RESOLVER DURANTE LA PRÁCTICA

Anote el nombre y las características morfológicas de las siguientes fases parasitarias:
A.

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

B.

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
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15.
DIAGNÓSTICO DE CISTICERCOSIS E HIDATIDOSIS
I. OBJETIVOS
1. Reconocer al metacéstodo de T. solium en
carne de cerdo.
2. Describir las características morfológicas
del metacéstodo de T. solium, en un corte
histopatológico de cerebro.
3. Mencionar las ventajas y limitaciones de
las técnicas empleadas en el diagnóstico
inmunológico de la cisticercosis.
4. Enlistar los estudios inmunológicos y su
utilidad en el diagnóstico de la hidatidosis.
5. Discutir la utilidad de la intradermorrea-
cción de Casoni.
6. Observar cortes histológicos de quiste
hidatídico.
7. Observar macroscópicamente un quiste
hidatídico.
II. INTRODUCCIÓN
La forma larvaria de T. solium (cisticerco),
que causa en el humano y en algunos
animales la cisticercosis, se ha encontrado
alojada en diferentes órganos y tejidos
causando una sintomatología muy variada, lo
cual hace muy difícil efectuar el diagnóstico
desde el punto de vista clínico.
La imagenología y el laboratorio, ofrecen una
ayuda muy valiosa en el diagnóstico de esta
enfermedad. En el primer caso se pueden
utilizar la radiografía simple de cráneo,
tomografía axial computarizada (TAC) y
resonancia magnética nuclear (RMN).
En el laboratorio se puede realizar el estudio
citoquímico de líquido cefalorraquídeo, en el
que se encuentran: aumento de la albúmina,
pleocitosis a base de linfocitos, disminución
de la glucosa y a veces eosinofilia.
Métodos inmunológicos
Para el diagnóstico inmunológico de esta
parasitosis, existen métodos que ayudan a
detectar anticuerpos producidos por el
huésped, en respuesta a la presencia de la
forma larvaria de T. solium en su organismo.
La utilidad de cada prueba es variable debido
a factores tales como: antígeno usado,
sensibilidad de la prueba, concentración de
anticuerpos en la muestra analizada (LCR o
suero), intensidad de la respuesta inmune del
huésped que a su vez depende del número
de parásitos, localización y estado evolutivo
del mismo; además depende también del
tiempo de evolución del padecimiento.
En la mayoría de la pruebas inmunológicas
que se usan, se emplea un extracto crudo de
forma larvaria de T. solium, obtenido de
carne de cerdo infectada, pero produce
reacciones cruzadas con otros parásitos.
Existe una fracción para “antígeno B” que
disminuye la posibilidad de reacciones
cruzadas, no permite el diagnóstico
diferencial entre cisticercosis e hidatidosis y
probablemente de otras enfermedades por
céstodos.
Entre las pruebas inmunológicas
frecuentemente utilizadas se encuentran: la
hemaglutinación indirecta (HAI), la
inmunoelectroforesis (IE), la inmunofluore-
cencia indirecta (IFI), la de ELISA y el
immunoblot.
La presencia de la etapa larvaria de céstodos
del género Echinococcus, en el humano y
herbívoros, se conoce como hidatidosis. La
especie más frecuente es E. granulosus,
cuya fase adulta se localiza en el intestino de
perros. El hombre actúa como huésped
intermediario al ingerir alimentos
contaminados con huevos de E. granulosus.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

El quiste hidatídico en el humano, muerte del paciente o una hidatidosis

generalmente se localiza en hígado. Es una secundaria.
vesícula unilocular cuya pared está
constituida por:
III. MATERIAL
a) Cutícula. Membrana más externa, lisa, de
color blanco, laminada y acelular. 1. Un frasco con un quiste hidatídico.
2. Portaobjetos 26x76 mm.
b) Membrana germinativa. Es una capa 3. Cubreobjetos 22x22 mm.
sincicial a partir de la que se forman 4. Preparaciones con corte histológico de
vesículas hijas, vesículas prolígeras y quiste hidatídico.
protoescólices (fig.15.1 y 15.2, pág. 100). 5. Microscopios.
6. Diapositivas.
El quiste se encuentra cubierto por una capa 7. Un fragmento de carne de cerdo con
de tejido conectivo, producida por el cisticercos.
huésped. 8. Una caja de Petri.
9. Solución salina al 0.85 %, 100 ml.
En el diagnóstico integral de la hidatidosis, 10. Estereomicroscopio.
deben considerarse datos epidemiológicos, 11. Portaobjetos de 26x76 mm.
clínicos, pruebas de inmunodiagnóstico y 12. Una preparación con corte histológico de
datos de estudios por imagen. cerebro, con formas larvarias de T. solium.

Las pruebas inmunológicas útiles para

confirmar el diagnóstico de hidatidosis IV. MÉTODO
incluyen: doble difusión, contra-
inmunoelectroforesis, inmunoelectroforesis, 1. Disecar formas larvarias de T. solium, de
hemaglutinación indirecta, la carne de cerdo y colocarlas en la caja
inmunofluorescencia indirecta, ELISA, de Petri con solución salina.
electrosinéresis e immunoblot. De estas
pruebas, las tres primeras, con la detección 2. Comprimir una vesícula entre dos porta-
del arco 5 de Capron, tienen alta objetos y presionar hasta aplastarla.
especificidad y buena sensibilidad en la
hidatidosis hepática, pero sensibilidad baja 3. Observar al microscopio con los objetivos
en la pulmonar. La prueba de ELISA tiene 10X y 40X. Identificar la corona de
alta sensibilidad, especialmente en la ganchos y ventosas los cuerpos
hidatidosis hepática. calcáreos, que son pequeñas masas
redondas de carbonato de calcio, que se
En la interpretación de las pruebas de encuentran en el parénquima del céstodo
inmunodiagnóstico, debe tenerse en y que semejan granos de arena muy
consideración que existen reacciones refráctiles.
cruzadas con otras especies de
Echinococcus y con el cisticerco de Taenia 4. Observar al microscopio óptico la pre-
solium. paración con corte histológico de cerebro,
con los objetivos 10X y 40X. Identificar la
En el diagnóstico integral de la hidatidosis, reacción inflamatoria, alrededor de la
son de gran utilidad tanto estudios forma larvaria de T. solium.
inmunológicos como estudios por imagen.
5. Observación macroscópica del quiste
Otro método útil, es el examen microscópico hidatídico.
de cualquiera de los elementos figurados del
quiste hidatídico, cuando éste se haya roto y 6. Observar al microscopio la preparación fija
comunicado con el exterior. Ante la sospecha con los objetivos 10X y 40X.
de hidatidosis, está contraindicado hacer
punción del quiste, porque puede
desencadenarse choque anafiláctico y la
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

15.1 Quiste hidatídico en cerebro nótese su gran tamaño.

Colección: Dr. Zyeman.

Tomografía de cráneo mostrando un cisticerco en

fosa posterior. Foto cortesía: J. Tay.

A. ¿Qué estudio es necesario para hacer el

diagnóstico definitivo?:
___________________________________
___________________________________

B. Con base a la información anterior y la

recibida en su práctica de laboratorio, escriba
tres exámenes de laboratorio inmunológicos
que le sirvan para avalar el diagnóstico:
___________________________________
___________________________________
___________________________________
15.2 Arenillas hidatídicas de un quiste hidatídico en las que
se observa el escólex y los ganchos. Colección:
Departamento de Microbiología y Parasitología.
*Conteste las siguientes preguntas de
manera breve y concisa:
CUESTIONARIO PARA RESOLVER 1. De las pruebas inmunológicas utilizadas
DURANTE LA PRÁCTICA en el diagnóstico de la hidatidosis, ¿cuales
tienen alta sensibilidad y especificidad en la
1. Se trata de paciente masculino de 45 años hidatidosis hepática?:
de edad con historia de cefalea crónica, ____________________________________
actualmente con datos de cráneo ____________________________________
hipertensivo. En los estudios de rayos X y ____________________________________
tomografía axial computada* se encontraron ____________________________________
imágenes sugestivas de cisticercos.

Su líquido cefalorraquídeo presentó aumento

de proteínas sin otros datos.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

2. Desde el punto de vista microscópico,

¿qué estructuras se deben encontrar en el
contenido de un quiste hidatídico para
realizar la identificación?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

3. ¿Cuál es la razón por la que la reacción de

Casoni da frecuentemente falsas positivas?:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

4. En el esquema inferior escriba el nombre

de las estructuras señaladas con letras:

A. __________________________________
B. __________________________________
C. __________________________________
D. __________________________________
E. __________________________________
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
16.
DIAGNÓSTICO DE FASCIOLOSIS Y PARAGONIMIASIS
I. OBJETIVOS
1. Enlistar los exámenes inmunológicos útiles
en el diagnóstico de fasciolosis y
paragonimiasis.
2. Discutir la utilidad de los exámenes
parasitoscópicos usados, para el
diagnóstico de fasciolosis y
paragonimiasis.
3. Identificar microscópicamente la fase
parasitaria diagnóstica de Fasciola
hepatica y Paragonimus mexicanus.
4. Observar macroscópicamente y microscó-
picamente adultos de F. hepatica.
II. INTRODUCCIÓN
La fasciolosis es una zoonosis causada por
el tremátodo Fasciola hepatica que tiene
como hospederos definitivos a animales
herbívoros y humanos, en los que se localiza
en los conductos biliares intrahepáticos.
La sospecha clínica de fasciolosis se
establece mediante la sintomatología del
paciente y tomando en consideración los
antecedentes epidemiológicos y hábitos de
alimentación. El diagnóstico se debe
confirmar mediante métodos directos durante
la fase de estado o indirectos durante la fase
migratoria o de invasión. Los métodos
directos consisten en la búsqueda de huevos
en heces mediante exámenes
coproparasitoscópicos de sedimentación
simple, Ritchie o en el contenido biliar
obtenido mediante sondeo o cápsula de Beal.
Otro método directo es el macroscópico, ante
el hallazgo de adultos, durante el acto
quirúrgico de vías biliares (fig. 16.1 y 16.2,
pág. 103).
En la etapa migratoria de F. hepatica
(periodo prepatente), el paciente no elimina
huevos en las heces, por lo que el
diagnóstico debe basarse en pruebas
inmunológicas que incluyen: ELISA,
inmunoelectroforesis, contrainmunoelectrofo-
resis, doble difusión, hemaglutinación
indirecta e immunoblot.
Las tres primeras técnicas, tienen un alto
grado de sensibilidad y especificidad, lo cual
las hace recomendables para su empleo
rutinario en el laboratorio.
Otras pruebas de laboratorio que coadyuvan
en el diagnóstico de la fasciolosis son: las
pruebas de funcionamiento hepático, cuya
normalización constituye un índice de
curación de la parasitosis.
La paragonimiasis es una zoonosis causada
por otro tremátodo: Paragonimus sp. y en
nuestro país por la especie P. mexicanus. Se
adquiere por ingestión de cangrejos,
langostinos y camarones de agua dulce
infectados o mal cocidos (cebiche).
El adulto se localiza en pulmón, sin embargo,
las formas juveniles pueden tener
migraciones erráticas a diversos órganos.
El diagnóstico parasitoscópico se hace por
identificación de huevos en esputo, líquido
pleural e incluso en materia fecal (por
deglución). También se han desarrollado
pruebas serológicas (RFC) y especialmente
una intradermoreacción.
III. MATERIAL
1. Un fragmento de hígado con F. hepatica.
2. Caja de Petri.
3. Pipetas Pasteur con bulbo de caucho.
4. Agujas de disección.
5. Solución salina.
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

6. Tubos con caracoles del género IV. MÉTODO

Stagnicola.
7. Portaobjetos 26x76 mm. 1. Disecar los conductos biliares, analizar las
8. Cubreobjetos 22x22 mm. alteraciones patológicas y obtener los
9. Microscopios ópticos. adultos de F. hepatica.
10. Estereomicroscopios.
11. Preparaciones fijas de F. hepatica: 2. Depositar unos adultos en cajas de Petri,
adultos, huevos y adulto en conducto lavarlos con solución salina y observarlos
biliar. P mexicanus: adulto. en el estereomicroscopio.
12. Diapositivas.
3. Colocar unos adultos en otra caja de Petri
con solución salina y con una aguja de
disección, hacer cortes en la región donde
se localiza el útero, haciendo una
suspensión de huevos.
4. Colocar una gota de la suspensión en
un portaobjetos y cubrirla con una
laminilla.
a) Observar al microscopio con los objetivos
10X y 40X.

5. Observar en el estereomicroscopio las

preparaciones permanentes con adulto de F.
hepatica y P. mexicanus.

6. Observar al microscopio las preparaciones

16.1 Huevo operculado de Fasciola hepatica teñido con
lugol. Microscopia de campo claro. de huevos y corte histológico de conducto
Colección: J. Tay, 400X. biliar con los objetivos 10X y 40X.

7. Observar en el estereomicroscopio los

caracoles del género Stagnicola.

CUESTIONARIO PARA RESOLVER

DURANTE LA PRÁCTICA

Con base a la información recibida en el

laboratorio y con el apoyo en los
esquemas inferiores, escriba:
A. Nombre del parásito y fase en la que se
encuentra.

B. Tipo de examen de laboratorio más

adecuado para su identificación.

16.2 Adulto de Fasciola hepatica mostrando su forma C. El nombre de las estructuras señaladas
foliacea, cono cefálico,útero, testículos y ventosas ventral con flechas.
y cefálica. Colección: I. de Haro.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

A.__________________________________
B.__________________________________
C.__________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

A.__________________________________
B.__________________________________
C.__________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

17.
DIAGNÓSTICO DE TRIQUINOSIS

I. OBJETIVOS disminuye la sensibilidad del estudio. En

estas circunstancias, es recomendable
1. Enlistar los procedimientos parasitos- realizar digestión con jugo gástrico artificial y
cópicos e inmunológicos, útiles para el lectura del sedimiento al microscopio.
diagnóstico de triquinosis.
Otro examen de laboratorio, aunque poco
2. Identificar larvas de Trichinella spiralis en utilizado, es el xenodiagnóstico; para
corte histológico de músculo. practicarlo, se alimenta a una rata con
biopsia de tejidos de un paciente en estudio y
3. Realizar triquinoscopia e identificar larvas en una semana o menos, pueden detectarse
de T. spiralis en músculo de rata. adultos en intestino y larvas en los tejidos. En
aproximadamente un mes las larvas pueden
ser identificadas en fragmentos de músculo
II. INTRODUCCIÓN comprimido entre dos portaobjetos o digerido
en jugo gástrico artificial.
La trichinellosis es una helmintosis causada
por T. spiralis, que se caracteriza por
síndrome febril, signos óculopalpebrales,
mialgias y eosinofilia. Esta parasitosis
usualmente se sospecha por la
sintomatología y los antecedentes de
ingestión de carne de cerdo infectada cruda o
poco cocida.

En el laboratorio, el diagnóstico de
triquinosis, rara vez se logra mediante la
identificación de adultos y larvas. Durante la
fase intestinal de la infección, se puede
realizar el diagnóstico mediante la
identificación de adultos en heces en un
examen coproparasitoscópico. Durante la
fase de estado, el diagnóstico de certeza se
logra mediante la demostración de larvas en
biopsia de músculo deltoides, bíceps,
gemelos o pectorales. La presencia de larvas
se evidencia comprimiendo un fragmento de
músculo entre dos portaobjetos (fig. 17.1).
El fragmento de biopsia debe ser de
aproximadamente un gramo (1.5x1x0.5 cm).
Este procedimiento por lo general se procura
evitar en niños cuando se cuenta con otros
recursos diagnósticos (serología) debido a lo
cruento del procedimiento.
La toma de la biopsia se recomienda
después del día 25 de iniciada la infección ya
que antes de este tiempo, las larvas pueden
no estar enrolladas, lo que dificulta y
17.1 Biopsia de músculo estriado mostrando larvas de
Trichinella spiralis (T.s), obsérvese su disposición en
"espiral". Tinción tricrómico de Masson.
Otras pruebas útiles para confirmar el
diagnóstico de triquinosis, son las pruebas
inmunológicas como la de floculación con
bentonita y aglutinación con látex, que tienen
la ventaja de no permanecer positivas más
de un año, por lo tanto una prueba
fuertemente positiva indica una infección
reciente. La prueba de ELISA ha demostrado
tener 100 % de sensibilidad y especificidad
en pacientes con una semana de haber
adquirido la infección.
Otra prueba inmunológica útil es la
hemaglutinación indirecta.
 PROGRAMA ACADÉMICO DE LA ASIGNATURA DE MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

III. MATERIAL

1. Microscopios.
2. Fragmentos de músculo de rata infectada
con T. spiralis entre dos láminas.
3. Preparaciones con corte histológico de
músculo con larvas de T. spiralis.
4. Diapositivas.

IV. MÉTODO
1. Observar los fragmentos de músculo de
rata en el microscopio con los objetivos
10X y 40X.
2. Observar las preparaciones fijas en el
microscopio con los objetivos 10X y 40X.

CUESTIONARIO PARA RESOLVER

DURANTE LA PRÁCTICA
Con base en la información recibida en el
laboratorio y con el apoyo en el esquema
inferior escriba:
A. Nombre del parásito y fase en la que se
encuentra.

B. Tipo de examen de laboratorio más

adecuado para su identificación.

C. El nombre de las estructuras señaladas

con flechas.

A.__________________________________
B.__________________________________
C.__________________________________
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

18.
DIAGNÓSTICO DE ONCOCERCOSIS

I. OBJETIVOS Otra manera de realizar el diagnóstico es

mediante la técnica de ELISA que se está
1. Enlistar los métodos de laboratorio y de utilizando con resultados prometedores.
gabinete para confirmar el diagnóstico de
oncocercosis.
III. MATERIAL
2. Precisar la indicación y utilidad de cada
método. 1. Frasco con nódulos subcutáneos que
contienen O. volvulus.
2. Microscopios ópticos.
II. INTRODUCCIÓN 3. Microscopios estereoscópicos.
4. Una preparación fija con corte histológico
La oncocercosis es una filariosis ocasionada de oncocercoma.
por el nemátodo Onchocerca volvulus, el cual 5. Diapositivas.
en su estadio de adulto es de color blanco,
filiforme y conestriaciones transversales en
su cutícula; la infección se adquiere por la IV. MÉTODO
picadura de moscos de género Simulium que
albergan las formas infectantes. 1. Observar los oncocercomas con el
microscopio estereoscópico.
Los adultos de O. volvulus que se encuentran
en nódulos subcutáneos se localizan en las 2. Observar la preparación fija al microscopio
regiones del arco pélvico, temporal y occipital con los objetivos 10X y 40X.
del cráneo.

Las microfilarias generalmente se encuentran

en ganglios linfáticos y piel, en la proximidad
de los nódulos subcutáneos y en la
conjuntiva corneal. Excepcionalmente se
localizan en sangre periférica, orina y esputo;
después de la administración de
dietilcarbamazina, los pacientes pueden
eliminar microfilarias en la orina. Se confirma
la presencia del parásito en su estadio de
larva o adulto mediante los siguientes
estudios:

a) Extirpación y disección de nódulos

subcutáneos (oncocercomas).

b) Biopsia de piel de la región escapular.

c) Examen de sedimento urinario.

d) Observación de la cámara anterior del ojo

con lámpara de hendidura.
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CUESTIONARIO PARA RESOLVER

DURANTE LA PRÁCTICA
Se trata de un paciente masculino de 40
años de edad, que ha habitado toda su vida
en la región del Soconusco, Chiapas.
Iniciando su padecimiento actual hace
aproximadamente año y medio, con la
aparición de nódulos subcutáneos de
consistencia fibrosa en el cuero cabelludo, no
dolorosos, no fijos a planos profundos y que
han aumentado de tamaño lentamente.
1. En este paciente ¿cuál es el diagnóstico
clínico más probable?:
____________________________________
____________________________________

2. Mencione dos exámenes parasitoscópicos

de laboratorio que sirvan para confirmar su
diagnóstico clínico:
____________________________________
____________________________________
____________________________________
____________________________________

3. ¿Qué estructuras esperaría encontrar en

estos exámenes?:
____________________________________
Foto cortesía: J. Tay.
____________________________________
____________________________________

4. Describa brevemente qué estructuras

parasitarias esperaría encontrar en el interior
de los nódulos:
____________________________________
____________________________________
____________________________________

5. Mencione un método inmunológico auxiliar

en el diagnóstico de esta enfermedad:
____________________________________
____________________________________
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

19.
ARTROPÓDOS DE IMPORTANCIA MÉDICA
I. INSECTOS

I. OBJETIVOS
IV. MÉTODO
1. Mencionar las características generales de
los artrópodos. 1. Siguiendo las instrucciones del profesor y
en base a la clave pictórica referente a
2. Clasificar mediante una clave pictórica al- artrópodos, clasificar los artrópodos
gunos de ellos. proporcionados.

3. Identificar las principales características 2. Observación macro y microscópica de los

morfológicas de algunos artrópodos. especímenes y laminillas.

II. INTRODUCCIÓN

Los artrópodos son metazoos que se

caracterizan por tener sus patas articuladas,
simetría bilateral, cuerpo cubierto por quitina
y dimorfismo sexual. Su morfología es muy
variada y dependiendo de ella se puede
establecer el grupo taxonómico al que
pertenecen.

Muchos artrópodos tienen importancia

médica ya que pueden ser transmisores de
protozoos, helmintos, virus, bacterias y
pueden causar lesiones o reacciones
alérgicas.

III. MATERIAL

1. Serie de diapositivas mostrando la mor-

fología de algunos artrópodos.

2. Caja entomológica con ejemplares de

Triatoma spp., Rhodnius spp.,
Dipetalogaster sp., Blatella sp.,
Periplaneta sp., Vespa sp.

3. Microscopio esteroscópico.

4. Laminillas permanentes de diversos

artrópodos.

5. Microscopio óptico.
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20.
ARTROPÓDOS DE IMPORTANCIA MÉDICA
II. ARÁCNIDOS Y ÁCAROS

I. OBJETIVOS invalidez y muerte. Los más importantes, por

la patología que ocasionan al hombre son:
1. Identificar las principales características Latrodectus mactans, Loxosceles sp. Y
morfológicas de algunos artrópodos de la Centruroides sp.
clase Acárida (ácaros y garrapatas):

Orden Familia Género III. MATERIAL

Ixodida Ixodidae Rhipicephalus
Amblyoma
Argasidae Ornithodoros 1. Microscopio óptico.
2. Frascos con ejemplares de Centruroides
Prostigmata Demodicidae Demodex spp.; incluidos en acrílico.
Trombiculidae Eutrombicula
3. Preparaciones con ejemplares de ixódidos
Astigmata Epidermoptidae Dermatophagoides y argásidos.
Sarcoptidae Sarcoptes 4. Serie de diapositivas.
5. Microscopios esteroscópicos.
6. Pinzas de disección sin dientes.

2. Identificar las principales características

morfológicas de algunos artrópodos de la IV. MÉTODO
clase Arachnida (arañas y alacranes):
1. Observar macroscópicamente y micros-
Orden Familia Género
cópicamente las preparaciones y el
Aranea Theriididae Latrodectus
Loxoscelidae Loxosceles material proporcionado.

Scorpionida Buthidae Centruroides 2. Describir sus características morfológicas

principales.

II. INTRODUCCIÓN

La clase Acárida comprende varios órdenes,

entre los que se encuentran Ixodida con dos
familias: Ixodidae (garrapatas duras) y
Argasidae (garrapatas blandas), que tienen
importancia médica porque son transmisoras
de diversos agentes patógenos, así como por
el daño directo que producen. Los órdenes
Prostigmata y Astigmata incluyen familias de
acáros que son importantes como
transmisores de agentes patógenos o
causantes de alergias.

En la clase Arachnida existen artrópodos que

ocupan un lugar importante ya que causan
lesiones traumáticas, intoxicaciones,
 IV. PARASITOLOGIA – SEGUNDO AÑO, 2010-2011

CUESTIONARIO PARA RESOLVER DURANTE LA PRÁCTICA

Con base a la información recibida en el laboratorio y con ayuda de su libro de texto, complete el
siguiente cuadro:

Morfología macroscópica Género y especie Agente que transmite o

enfermedad que produce
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Morfología macroscópica Género y especie Agente que transmite

o enfermedad que produce