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Este documento describe el error fotométrico en la espectroscopia. Explica que el error fotométrico indica la repetitividad de las lecturas en un espectrofotómetro y está limitado por el ruido instrumental. Señala que la precisión de las mediciones es mayor entre 15-65% de transmitancia. Finalmente, concluye que los errores fotométricos pueden deberse a problemas de calibración de equipos, medición de absorbancia o transmitancia, uso de reactivos y materiales, y condiciones del equipo espect
Este documento describe el error fotométrico en la espectroscopia. Explica que el error fotométrico indica la repetitividad de las lecturas en un espectrofotómetro y está limitado por el ruido instrumental. Señala que la precisión de las mediciones es mayor entre 15-65% de transmitancia. Finalmente, concluye que los errores fotométricos pueden deberse a problemas de calibración de equipos, medición de absorbancia o transmitancia, uso de reactivos y materiales, y condiciones del equipo espect
Este documento describe el error fotométrico en la espectroscopia. Explica que el error fotométrico indica la repetitividad de las lecturas en un espectrofotómetro y está limitado por el ruido instrumental. Señala que la precisión de las mediciones es mayor entre 15-65% de transmitancia. Finalmente, concluye que los errores fotométricos pueden deberse a problemas de calibración de equipos, medición de absorbancia o transmitancia, uso de reactivos y materiales, y condiciones del equipo espect
La Fotometría es la ciencia que se encarga de la medida de la luz, como el brillo
percibido por el ojo humano.
Es decir, estudia la capacidad que tiene la radiación electromagnética de estimular
el sistema visual.
La mayoría de las mediciones que se realizan actualmente, en los laboratorios
clínicos son fotométricas, de ahí que la calidad analítica dependa entre otras cosas, del tipo y estado en que se encuentre el instrumento utilizado.
En cuanto al error instrumental o error fotométrico ∆ T se define como la precisión
que tiene un instrumento a la hora de realizar mediciones analíticas.
Experimentalmente se obtiene midiendo la transmitancia de unas 10-20 porciones
de una solución y calculando la desviación media de esas mediciones. Cada medida debe incluir las operaciones de vaciado, llenado y colocación de la celda en el portaceldas, así como el ajuste del 0.0% T (con el obturador) y del 100%T con el disolvente puro.
El error fotométrico o instrumental indica la repetitividad de las lecturas en un
espectrofotómetro. La exactitud y la precisión de un análisis espectroscópico frecuente, está limitado por la incertidumbre o ruido asociado al instrumento. Las mediciones en la espectroscopia implican un ajuste a un 100% T y finalmente la medición de la transmitancia o absorbancia de la solución. El ruido que se genera en cada uno de los procesos espectroscópicos da finalmente un valor total de incertidumbre en la medición, a este total se le conoce como error fotométrico. Como consecuencia de este tipo de error que se ha generado se le conoce como error fotométrico, la precisión en las lecturas de absorbancia, estará limitada por altos y bajos valores de esta misma.
Otra forma de interpretar el hecho de que a bajos y altos valores de absorbancia o
transmitancia, el grado de incertidumbre sea grande, es considerado que a baja absorbancia la intensidad del haz incidente y transmitido es prácticamente igual y el detector pasa a percibir un error grande al haber detectado la intensidad de dos haces muy semejantes. A altos valores de absorbancia la energía transmitida es muy pequeña que hace que no sea posible que se pueda medir con la precisión que es necesaria. Las determinaciones fotométricas dependen de que la magnitud de la absorbancia sea directamente proporcional a la concentración del compuesto de la muestra a medir, siendo necesario que se elabore una curva de calibración.
Desafortunadamente, lo que ha sido la comercialización de juegos de reactivos ya
preparados ha propiciado una práctica mala de laboratorio, que es el uso del factor de calibración química, que proviene de un sólo patrón de concentración conocida en sustitución de las curvas de calibración, olvidando que esto sólo es válido cuando la relación entre absorbancia y concentración es una línea recta que parte de cero.
Lo que se mide físicamente en todo fotómetro es la intensidad de la luz
transmitida, que esta se expresa en función de la luz incidente, en la relación que es lo que llegamos a conocer como transmitancia. La luz incidente puede considerarse como 1 ó 100, por lo que la T se multiplica por 100 para obtener el porciento de transmitancia (%T). Evidentemente que la luz transmitida resulta de la resta de otros componentes como la luz refractada y la reflejada, mismos que pueden ser más importantes en celdas y equipos en mal estado y afectar las mediciones fotométricas
La mayor precisión que se puede obtener va en un rango del 15% de
transmitancia a un 65% de esta misma, por lo que si se desea obtener un resultado de alta precisión, es conveniente que se diluya o se concentre la muestra a valorar, hasta que la absorbancia o transmitancia de esta muestra se encuentre en el rango de mayor precisión, que es el del 15%. El cálculo de un error fotométrico se puede valorar mediante la medición de su estándar, este se tiene que medir 10 veces y es preferible que se utilice el que se encuentra justo en la mitad de la curva de calibración en la misma celda.
Es importante tener en cuenta, que la exactitud de las mediciones fotométricas
depende también de otros factores como: la exactitud de la escala de longitud de onda, la linealidad de la respuesta del detector, la exactitud al hacer la lectura de absorbancia, la magnitud de la radiación dispersa y el ancho de banda efectivo. Por otra parte, la precisión depende de la respuesta aleatoria del detector utilizado por el tipo de ruido instrumental que lo caracterice. CONCLUSIÓN
Los errores instrumentales o errores fotométricos se pueden dar a muchos tipos
de casos, no siempre se dan por el analista o en las condiciones de la muestra, en la mayoría de estos casos se debe a la mala calibración de los equipos, como lo es en la medición de la curva de tolerancia. También en las medidas de la absorbancia y la transmitancia que en estos casos son muy importantes ya que son el valor principal de la mayoría de estos casos. El buen uso de los reactivos y los materiales toman un papel importante en los errores fotométricos que se pueden llegar a dar. El equipo que se utiliza en estos tipos de espectroscopia también pueden llegar a ser un factor importante en el error, es por ello que se debe tener y llevar una condición optima de cada de uno de los factores limitantes que están incluidos y pueden llegar a afectar.