La enzimología es una disciplina bioquímica centrada en el estudio y caracterización
de las enzimas, que
son biomoléculas proteicas o ribonucleicas que catalizan reacciones químicas en los sistemas biológicos. Estudia, por ello: la implicación de las enzimas en el metabolismo; su estructura; su cinética; su posible aplicación en la biotecnología; su variabilidad en la filogenia; los adyuvantes enzimáticos, como los cofactores y las coenzimas; etc.
OBJETIVOS GENERALES
Comprender el concepto de enzima y conocer sus características generales.
Conocer con profundidad los aspectos cinéticos y los mecanismos que subyacen en su actividad. Conocer sus posibilidades ténicas y sus aplicaciones de interés industrial.
PROGRAMA TEÓRICO
1.- Concepto, clasificación y nomenclatura. Características. Determinación de la
actividad enzimática. Unidades. 2.- Cofactores. Coenzimas: Cosustratos y grupos prostéticos. Metales. 3.- Cinética Química. Cinética enzimática. Relaciones monosustrato . Relaciones bisustrato. Cinéticas del estado estacionario y relajación. 4.- Inhibición enzimática. Inhibición Reversible e irreversible. Inhibición competitiva, no competitiva y acompetitiva. 5.- Efecto del pH y de la temperatura sobre la actividad enzimática. 6.- Cinética de enzimas con sitios interaccionantes. Fectos homotrópicos y heterotrópicos. 7.- Estrategias catalíticas de las enzimas. Estabilización del estado de transición. Efecto de proximidad y orientación. Catálisis ácido base. Catálisis covalente. Catálisis por distorsión. 8.- Mecanismos de acción de las enzimas. Lisozima, RNAasa, Serinproteasas, Glutation reducta, Aldolasa, aminoacil-tRNA sintetasa, Superóxido dismutasa (efecto Circe). 9.- Aislamiento y purificación de las enzimas. Criterios de pureza. 10.- Tecnología enzimática. Enzimas de interés industrial. Inmovilización de las enzimas y de otros sistemas biocatalíticos. Biosensores, acoplamiento a electrodos. Inmunoensayo con marcaje enzimático. Bioelectrosíntesis. 11.- Optimación de las características de las enzimas. Mutagénesis dirigida. Aplicación industrial. Estabilización química y térmica.
PROGRAMA DE PRÁCTICAS
1.- Cinética enzimática I.
Estudio cinético de la actividad de la tirosinasa de champi–ón. Distribución y aislamiento de la enzima. Medida de su actividad. Cálculo de la KM y Vmax.
2.- Cinética enzimática II
Efecto del PA de la temperatura sobre la actividad de la tirosinasa de champi–ón. Inhibición de su actividad por el ácido cinámico. Cálculo de la KI. 3.- Inmovilización de las enzimas Inmovilización de la tripsina en sefarosa y en poliacrilamida. Construcción de un reactor con la enzima inmovilizada. Estudios cinéticos.
- Enzymes. M. Dixon y E.C. Webb. Tercera edición. 1.979. - Enzyme structure and mechanism. A. Fersht. Segunda edición. 1.985. - Introducción a las aplicaciones de las enzimas. R. Serrano. Primera edición. 1.985. - Introduction to biocatalysis using enzymes and microorganism. S.M. Roberts, NM. Turner, AJ. Willets, MK. Turner. Primera edición. 1.995