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Manejo de Bioseguridad en el Laboratorio de Química Orgánica de Productos

Naturales
Informe de Bioseguridad

Natalia Arango López1 Isabel Moreno López2 Diana Rosero Morillo3 Elena Marcela
Quevedo Mejía4 Natalia Fuentes Medina5
Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
narangol@unal.edu.co1
Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
imoreno@unal.edu.co2
Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
dmroserom@unal.edu.co3
Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
emquevedom@unal.edu.co4
Ingeniería Biológica, Facultad de Ciencias, Universidad Nacional de Colombia Sede Medellín
nfuentesm@unal.edu.co5

Agosto 27, 2019

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Resumen
En el presente informe se indaga sobre los principales requerimientos de bioseguridad que deben implementarse en un
laboratorio con potencial riesgo microbiológico y químico, dependiendo estos del nivel en el que el laboratorio se clasifique. Para
ello, y para conocer más a fondo sus prácticas de bioseguridad, se realizó una visita al Laboratorio de Química Orgánica de
Productos Naturales de la Universidad de Antioquia. Se observaron parámetros tales como la adecuación de las instalaciones, el tipo
de investigaciones que se llevan a cabo en este sitio, los protocolos que deben llevarse a cabo en caso de accidentes, la prevención de
riesgo, la disposición final de residuos, entre otros. La información obtenida a partir de una encuesta previamente elaborada se
contrastó con la inspección durante la visita, y con los lineamientos del Manual de Bioseguridad de la OMS y de Metrosalud. Se llegó
a la conclusión de que el laboratorio, al momento de la evaluación, tenía correctamente definido su nivel de bioseguridad (nivel 2), y
gracias a ello, era posible controlar los posibles factores de riesgo a los cuales pueden enfrentarse todos los investigadores y operarios.

Palabras Clave: Bioseguridad, nivel de bioseguridad, riesgo químico, encuesta.

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1. Introducción químicos como la descomposición y la fermentación, y

La bioseguridad es una de las prácticas más
importantes en cualquier espacio en el cual se manipule material
biológico, no sólo para garantizar la seguridad y protección del
investigador u operario, sino para mantener la confiabilidad de
los resultados obtenidos en las diferentes investigaciones y,
ahorrar dinero y tiempo en pérdidas por contaminación [1].
El proceso de implementación de medidas de
bioseguridad en los laboratorios fue progresivo y estuvo ligado a
los siguientes hechos históricos:
• 1546: Girolamo Fracastoro dió inicio al debate sobre la
relevancia de las enfermedades infecciosas.
• 1860-1864: Louis Pasteur expone su “"teoría germinal de
las enfermedades infecciosas", según la cual toda
enfermedad infecciosa tiene su causa (etiología) en un
germen con capacidad para propagarse entre las
personas, además de ser el causante de procesos
su causa no provenía de adentro del cuerpo debido a un
desequilibrio de humores como se creía
tradicionalmente” [2].
• 1865: “Barón Joseph Lister instituyó la práctica de
técnicas antisépticas y del uso de ácido carbólico como
desinfectante al trabajar en el quirófano” [3]. A partir de
aquí se empezaron a definir los lineamientos de las
prácticas de bioseguridad actuales.
• Mediados del siglo XX: En EE. UU. se establecieron
normas de bioseguridad para el trabajo adecuado en el
laboratorio [4].
• 1941: En EE. UU. se realizó el primer estudio de casos
de infecciones por prácticas laborales.
• 1978: Pike y Sulkin (importantes en el desarrollo de las
prácticas de bioseguridad) generan 4 estudios que
incluían resultados de 4,079 casos reportados en EE. UU.

de personal contagiado por Brucella sp., Coxiella
burnetii,virus de hepatitis B (HBV), Salmonella typhi,
Francisella tularensis, Mycobacterium tuberculosis,
Blastomyces dermatitidis, virus de la encefalitis equina
de Venezuela,Chlamydia psittaci, Coccidioides immitis,
entre otros. Concluyeron que menos del 20% de los casos
estaban asociados a accidentes laborales. El 80% restante
fue atribuido a infecciones por aerosoles en trabajadores
que tenían contacto directo con el agente en cuestión. [3].
Adicionalmente, otros estudios de estos personajes
permitieron dilucidar que los laboratorios en los que
había mayores riesgos de infección eras los laboratorios
clínicos.
• 1974: el Center for Disease Control and Prevention
(CDC) realizó la primera clasificación de los agentes
patógenos en cuatro grupos de riesgo. A partir de esto,
“tanto los National Institutes of Health (NIH) de los
Estados Unidos como la Organización Mundial de la
Salud (OMS) actualizaron el sistema, sentando así las
bases para la clasificación de los laboratorios en función
del grupo de riesgo al que pertenecen los patógenos que
manejan.” [3]. Y así, se terminaron por publicar guías de
bioseguridad por parte de los entes de mayor relevancia
en salud como los anteriores mencionados que aún
siguen vigente y cada vez se renuevan.
Son estas regulaciones y normativas en cada país las
que estipulan la adecuada disposición final de los diferentes
desechos y las diferentes instituciones públicas y privadas deben
acogerse a estos. Unas buenas prácticas de bioseguridad pueden
mejorar el nivel y la calificación del laboratorio, lo que beneficia
a los investigadores y al centro en sí mismo, pues, la
bioseguridad es uno de los aspectos necesarios para obtener una
acreditación que certifique la competencia del laboratorio en los
procesos que desarrolla. Es importante, por tanto, analizar los
procedimientos actuales de un laboratorio a la luz de estas
normas para así, determinar la forma de apropiación de estas
prácticas en la vida real.
Por la anterior razón, mediante este informe, se
observaron las prácticas de bioseguridad en un laboratorio de
Química Orgánica de Productos Naturales, donde se trabaja de
forma interdisciplinar en la búsqueda de moléculas bioactivas de
origen natural, en dónde se involucra su análisis estructural,
síntesis, transformación y actividad/ensayo. Algunas de sus
líneas de investigación abarcan la búsqueda de antiparasitarios,
estabilidad de medicamentos y reconocimiento de materias
primas de uso farmacéutico, insecticidas y acaricidas.
2. Metodología
Se realizó una visita guiada al Laboratorio de Química
Orgánica de Productos Naturales de la Universidad de
Antioquia, se aplicó la encuesta del Anexo 1. de forma verbal a
un investigador asociado del laboratorio mientras se realizaba el
recorrido. Toda la información obtenida se contrastó con lo
observado. La elaboración de la encuesta se realizó bajo los
parámetros del Manual de Bioseguridad de la Organización
Mundial de la Salud [1].
3. Resultados
3.1 Información recolectada a partir de la encuesta
y la visita
El laboratorio de Química Orgánica de Productos
Naturales, está coordinado por el Dr. Wiston Quiñones Fletcher.
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En este trabajan docentes e investigadores, estudiantes de
pregrado y posgrado (maestría y doctorado), y practicantes de
semilleros de investigación de diferentes áreas del conocimiento.
El enfoque es de tipo investigativo y de desarrollo, mas no de
tipo académico - formativo.
El laboratorio se centra en, principalmente, la
búsqueda de moléculas bioactivas de origen natural, lo cual
puede implicar además de la química otras áreas científicas tales
como la farmacología, microbiología, toxicología, agronomía, la
entomología y zootecnia, entre otras. De igual manera, se
explora la biología molecular en el sentido de tratar de explicar
la susceptibilidad de plantas a patógenos por defectos en las vías
enzimáticas conducentes a la fabricación de fitoalexinas. La
exploración de una sustancia involucra su análisis estructural,
síntesis, transformación y actividad/ensayo, con la
implementación de investigaciones en química computacional y
modelación molecular, las que conjugan la actividad
experimental con parámetros electrónicos, topológicos y
estéricos modelados por química computacional.
Su investigación multidisciplinaria teórica y
experimental con los Productos Naturales considera cuatro
frentes principales: agronómico relacionando la química
orgánica, con la fitopatología y la biología molecular;
bioquímico, estudiando la regulación enzimática y la biosíntesis
de metabolitos terciarios en plantas importantes; farmacológico,
a través de ensayos biodirigidos obtener moléculas activas como
líderes o puntos de partida para su optimización farmacológica;
y química.
El laboratorio registra un nivel de bioseguridad básico
tipo 2, donde se trabaja toda la parte química en Cámaras de
Extracción y para casos específicos en una Cámara Seca de
Nitrógeno. La parte de microbiología se realiza en un
Laboratorio de Microbiología asociado a la SIU y al laboratorio
en cuestión; en éste cuentan con una cámara de flujo laminar,
incubadoras y áreas para el cultivo. En sus estudios
microbiológicos trabajan con hongos fitopatógenos, en los cuales
miden la actividad biológica de plantas como potenciales
fungicidas o fungistáticos. El investigador entrevistado nos
confirma que nada que tenga que ver con microbiología se
realiza en el laboratorio visitado, y que, además, no se trabaja
con ningún patógeno, fluidos, ni sangre; únicamente con
sustancias químicas.
El principal objetivo de la asepsia y la protección del
investigador es evitar la contaminación de la muestra o la
afectación del proceso experimental. De esta forma, el
investigador tiene un alto grado de compromiso con el
laboratorio, ya que no sólo debe tener gran cuidado en sus
prácticas, sino que debe cuidar su indumentaria. Debe llevar
zapatos cerrados, bata antifluido de manga larga y guantes, para
casos específicos debe utilizar gafas y máscaras de gas.
Al consultar con el investigador entrevistado, se
confirmó que antes de ingresar a trabajar en el laboratorio se
debe de cumplir un proceso de inducción donde se aprende cómo
utilizar los diferentes equipos; los efectos tóxicos de reactivos y
sustancias químicas, las vías de exposición y los peligros que
puedan estar asociados a su manipulación y almacenamiento; y
los parámetros de bioseguridad que se deben seguir. Además,
deben asistir a capacitaciones de seguridad brindadas por la
brigada, salud ocupacional, ARL y salud pública. Cuando un
investigador se enferma no puede ingresar al laboratorio, en
cambio puede realizar trabajo de consulta o de oficina.

El investigador entrevistado explica que no se han
tenido accidentes con agentes químicos, más allá de derrames
ocasionales o rompimiento de vidriería, pero no se han tenido
incidentes con agentes biológicos. En caso de eventualidades la
Sede de Investigación Universitaria tiene un programa sobre
accidentabilidad o línea de atención segura, en conjunto con la
brigada, en la cual se brinda una respuesta inmediata. Además,
en el laboratorio propiamente, se tienen duchas para lavar los
ojos y el cuerpo.
Finalmente, los residuos se clasifican en canecas
azules y grises, para riesgo biológico únicamente cuentan con un
guardián, pues los desechos biológicos de biomasa se disponen
en la caneca roja del Laboratorio de Microbiología asociado.
Todos los diferentes tipos de desechos se recolectan en días
específicos por una empresa asociada a la SIU, la cual se encarga
luego de su separación y eliminación correcta. La empresa en
cuestión, recoge los desechos de todo el complejo de
laboratorios de la Sede de Investigación Universitaria.
3.2. Observaciones adicionales del visitante
Durante la visita se pudo observar el trabajo de los
diferentes estudiantes e investigadores, y se pudo evidenciar que
se llevaba la protección óptima y que se hacía un uso adecuado
de los espacios e instalaciones. Se observaron todas las áreas de
seguridad requeridas con su respectivo marcaje, entre ellas, zona
de botiquín y kit antiderrames, área de desechos orgánicos con
separación de residuos clorados y no clorados, área de vidriería
quebrada, zona para la ducha y lava ojos de emergencia, además,
se pudo observar las diferentes canecas de desechos roja
(guardián), azul y gris debidamente rotuladas. Por otro lado, los
parámetros relacionados con el diseño del laboratorio, el estado
de los equipos eléctricos, la iluminación, la aireación en el
laboratorio, entre otros, claramente cumplen con los
requerimientos de bioseguridad debido a que el laboratorio
pertenece a un complejo de investigación. Adicionalmente,
cuentan con dos rutas de evacuación completamente señalizadas
con los debidos extintores y señales de alarmas.
4. Discusión
Es de vital importancia entender los conceptos de
bioseguridad y aplicarlos para realizar un adecuado proceso de
investigación y mantener la integridad de los otros grupos de
investigación con los que se comparte espacio; como es el caso
del grupo evaluado en este trabajo.
Los procesos estipulados en las guías de bioseguridad
de la OMS para los laboratorios de nivel 1 y 2 describen un
código de prácticas que consiste en una orientación adecuada de
los procedimientos sobre acceso de los reactivos, protección del
personal, configuración de las zonas de trabajo, así como el
diseño y las instalaciones y las condiciones de salubridad, tanto
del espacio como de las personas que trabajan en él [1].
Realizando un proceso de comparación entre el código de
prácticas de la OMS y lo hallado en la visita, podemos definir
que el laboratorio de química orgánica de productos naturales
presenta una adecuada apropiación de estos conceptos y
prácticas.
Además, resulta importante señalar el hecho de que en
el grupo de investigación, a parte del proceso de inducción en
bioseguridad que le realizan a cada nuevo personal que empieza
a laborar en el laboratorio, mantiene guías de bioseguridad
impresas y a la vista que el personal puede acceder fácilmente en
caso de que lo necesite. Este comportamiento logra que en este
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laboratorio se haga un análisis continuo de los aspectos de
seguridad necesarios.
Uno de los aspectos más importante de las prácticas de
bioseguridad depende de cada uno de los miembros, y de la
compresión de la importancia de seguir las diferentes
recomendaciones, ya que al realizarse una visita la percepción
sobre el ambiente de trabajo es muy positiva, pero lo importante
es que todos estos comportamientos se mantengan en ausencia
de una supervisión. Esto se puede evidenciar en que los
accidentes reportados fueron a causa de una mala manipulación
del usuario, y no por falta de implementos de seguridad.
Por último, concluimos que, aunque resulte tedioso
mantenerse al tanto de estos aspectos de bioseguridad, resulta de
vital relevancia ser conscientes de la importancia de su adecuada
aplicación en los laboratorios del país, dado que permite que los
productos (ya sea resultado de investigaciones, alimentos, etc)
realizados en Colombia sean acogidos con validez y buena
aceptación por la comunidad internacional.
Conclusiones
• Las condiciones de bioseguridad en un laboratorio
permiten ambientes apropiados para que los procesos
de investigación se realicen de forma adecuada y
válida.
• Las guías de bioseguridad son una ayuda adecuada que
permite un buen ejercicio de comparación, con el que
se pueden ir generando ajustes en las prácticas de
laboratorio.
Referencias
[1] Organización Mundial de la Salud. “Manual de bioseguridad en el
laboratorio. Medigraphic”, 2005. [Online]. Disponible en:
https://www.who.int/topics/medical_waste/manual_bioseguridad_l
aboratorio.pdf
[2] “Teoría microbiana de la enfermedad", 2019. [Online]. Disponible
en:
https://es.wikipedia.org/wiki/Teor%C3%ADa_microbiana_de_la_e
nfermedad.
[3] H. Lara Villegas, N. Ayala Nuñez and C. Rodriguez Padilla,
"Bioseguridad en el laboratorio: medidas importantes para el
trabajo seguro", 2019. [Online]. Disponible en:
https://www.medigraphic.com/pdfs/bioquimia/bq2008/bq082c.pdf.
[4] [4] Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories",
2009. [Online]. Disponible en: https://www.cdc.gov/labs/pdf/CDC-
BiosafetyMicrobiologicalBiomedicalLaboratories-2009-P.PDF
[5] Metrosalud. “Manual de bioseguridad”, 2013.
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Anexo 1

ENCUESTA DE BIOSEGURIDAD

La siguiente encuesta se hace con fines meramente académicos, en el ejercicio de entender cómo manejan las normas de bioseguridad
laboratorios distintos a los de la Universidad Nacional. Este trabajo pertenece a la materia de Fundamentos de Cultivos Celulares del
pregrado de Ingeniería Biológica. Se compararán las respuestas de la encuesta con la información obtenida en la observación durante
el recorrido y se contrastará con las normas dadas en el manual de bioseguridad de la Organización Mundial de la Salud. El trabajo es
realizado por Natalia Arango López, Isabel Moreno López, Diana Rosero Morillo, Elena Quevedo Mejía y Natalia Fuente Medina, a
cargo de la profesora María Elena Márquez, correo memarque@unal.edu.co. Toda la información será únicamente consignada en un
informe escrito y no será publicada en algún medio.

A continuación se enumeran las preguntas que se realizarán durante la visita:

1. ¿Cuál es el nombre de la persona encargada del laboratorio?

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2. ¿Qué tipo de estudios y procesos se llevan a cabo en el laboratorio?

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3. ¿Qué áreas disciplinarias podemos encontrar? ¿Cuál es la composición de la población de investigadores? ¿Estudiantes de
pregrado, postgrado, docentes?
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4. ¿Cuál es el nivel de bioseguridad que registran?, en consecuencia, ¿manejan patógenos? ¿manejan sangre? ¿Algún tipo de
sustancia u organismo de riesgo biológico?
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5. ¿Qué sucede si alguien sufre un accidente o lesión en el laboratorio? ¿Cuál es el procedimiento a seguir?
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6. ¿Cuál es la indumentaria necesaria para trabajar en este espacio?

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7. ¿Existe una inducción sobre las normas de bioseguridad para todo el personal nuevo? ¿Cuáles son los requisitos para poder
trabajar en el laboratorio?
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8. ¿Han tenido accidentes de riesgo biológico en el último año? (de Agosto de 2018 a Agosto de 2019). ¿Cómo se manejaron?
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9. ¿Cómo manejan la disposición final de los desechos de riesgo biológico? ¿Cuál es la clasificación es estos residuos?
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10. ¿Qué pasa si una persona se enferma con una infección viral o bacteriana, puede seguir trabajando en el laboratorio?
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Anexo 2