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LABORATORIO

IDENTIFICACION DE LOS CROMOSOMAS POLITENICO EN LAS GLANDULAS SALIVALES


DE LA FASE LARVARIA DE DROSOPHILA MELANOGASTER

INTRODUCCION
En 1881, E. G. ALBANI por primera vez observó la presencia de ciertas estructuras en los núcleos
de células de las glándulas salivales de una larva del insecto Chíronomus. Este descubrimiento
inició una serie de investigaciones sobre estas estructuras la cual aún continua. Estos estudios han
demostrado que las estructuras son cromosomas en los núcleos de las células que componen las
glándulas salivales de muchas especies de insectos del orden Díptera. Estos cromosomas son
diferentes a los que se encuentran en la mayoría de células somáticas, son mucho más grandes. El
aumento en tamaño resulta debido a que los cromosomas duplicados no se separan como
normalmente sucede en la mitosis, sino que permanecen lado a lado, Ocurren muchas divisiones
mitóticas sin división celular. Un solo cromosoma puede tener más de 1 000 duplicaciones una
junto a la otra en las grandes células de las glándulas salivales. Los centrómeros de todos los
cromosomas se encuentran apareados en una sola región llamada el cromocentro. El gran tamaño
y la facilidad relativa para su estudio han hecho de estos cromosomas valiosos objetos de estudio
citogenético.

OBJETIVOS
• Conocer y practicar las técnicas más usuales en la citogenética, utilizando material
biológico.
• Conocer e identificar la existencia de cromosomas politénicos en células glandulares
salivales de Drosophila Melanogaster así como conocer su importancia en el campo de la
genética.

MATERIAL Y METODO

Material biológico
- Cultivos de una cepa silvestre de Drosophila melanogaster con larvas de tercer estadio.

Equipo
- Microscopio estereoscopio
- Microscopio óptico.
- 1 platina de vidrio.
- Portaobjetos
- Cubreobjetos
- 1 vaso de precipitado de 50 ml.
- Reactivo de Aceto – orceina
- Pipeta Pasteur

METODOS
1. Sacar con una aguja de disección una larva de tercer estadio de Drosophila, la cual se
reconoce por ser proporcionalmente más grande que las de 1° y 2° estadios. Generalmente
estas larvas se encuentran en las paredes del frasco de cultivo. Se elige a una que se
encuentre activa.
2. Colocar la larva en una platina de vidrio, añadir una mínima cantidad de agua, esto para no
dejar que se seque la larva y así poder realizar la disección.
3. Realice la disección localizando primero las mandíbulas las cuales se distinguen claramente
por su forma y color negro, Fig. 1. Coloque la punta de una de las agujas en las mandíbulas
y la punta de la otra aguja en la región media del cuerpo de la larva.

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Fig. 1. Vista esquemática de la estructura de una larva de Drosophila melanogaster donde puede
observarse la localización de las glándulas salivales.

4. Hale en sentido opuesto las 2 agujas al mismo tiempo, para poder desgarras así a la larva.
5. Separe las glándulas salivales del resto de los órganos por la forma característica de sacos
alargados que aparentan estar formados por una red. Las glándulas generalmente se
quedan adheridas a la región mandibular.
6. Las glándulas salivales están rodeadas por tejido adiposo opaco, quite la mayor cantidad de
este tejido con ayuda de las agujas con el fin de que la preparación quedara más limpia.
7. Las glándulas salivales son órganos pares localizados cerca de extremo anterior de larva.
Las glándulas salivales generalmente tienen un cuerpo graso largo, delgado, unido a ellas.
8. Una vez separadas las glándulas salivales, transpórtelas con las agujas a un portaobjetos y
agregue unas gotitas de Aceto – orceina.
9. Observe las células de las glándulas con un núcleo claramente definido.
10. Para poder apreciar los cromosomas politénicos, realice un aplastado de las células
colocando suavemente el dedo pulgar sobre el cubreobjetos y se presione lo más
fuertemente posible.
11. Observar los cromosomas en el microscopio óptico a 40X y con ayuda del aceite de
inmersión apreciar a 100X.

Cuestionario
a) ¿En qué tipos de organismos se pueden observar los cromosomas
politénicos?
b) ¿Cuál es su función?
c) Explique brevemente la forma en la que se generan los cromosomas
Politénicos.
e) En Genética ¿Qué utilidad tiene los cromosomas politénicos?