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Cromatografía Gases CG Líquidos (HPLC)

Fundamento Se basa en que un líquido volátil o
un soluto gaseoso son arrastrados
por una fase móvil gaseosa que
circula sobre un líquido estacionario
que recubre un soporte sólido o
sobre una superficie sólida
absortiva.
Fase móvil Gas inerte
Técnica de separación de muestras
no volátiles o de alto peso
molecular. En la cromatografía
líquida, la fase móvil es un líquido
que fluye a través de una columna
que contiene a la fase estacionaria.
La separación cromatográfica en
HPLC es el resultado de las
interacciones específicas entre las
moléculas de la muestra en ambas
fases, la móvil y la estacionaria.
Liquido

Columnas • Capilares Hasta 100 m, diámetros Columnas para cromatografía de

(características) de 0.15 a 0.32 mm líquidos
• Empacadas De 1 a 5 m diámetros • Las columnas para cromatografía
de 2 a 4 mm) de líquidos se construyen de
ordinario con tubo de acero
inoxidable de diámetro interno
uniforme. Cientos de columnas
empaquetadas que difieren en
tamaño y relleno se comercializan
por distintos fabricantes.
Temperatura de La temperatura de la columna es Temperatura variable
trabajo una variable importante, depende
del punto de ebullición de la
muestra y el grado de separación
requerido. Para muestras cuya
temperatura de ebullición varia
ampliamente se aplica
programación de temperatura en el
horno.
Detectores DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD Detector • A diferencia de la
TERMICA (TCD) cromatografía de gases, en la
El funcionamiento del detector se cromatografía de líquidos no hay
basa en el principio de que un detectores tan aplicables
cuerpo caliente pierde calor a una universalmente ni tan fiables. Uno
velocidad que depende de la de los mayores retos en el desarrollo
composición del gas que lo rodea. de la cromatografía de líquidos ha
DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD sido el perfeccionamiento de los
TÉRMICA detectores.
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Consta de un bloque metálico con 4
celdas integradas en pares; por
donde pasa el efluente de la
columna y por donde pasa el gas de
arrastre puro. Este es un método no
destructivo dependiente
concentración, con selectividad
universal.
DETECTOR DE IONIZACIÓN DE
FLAMA (FID)
El funcionamiento se basa en el
principio de que la conductividad
eléctrica de un gas es directamente
proporcional a la concentración de
las partículas cargadas dentro del
gas.
DETECTOR DE CAPTURA DE
ELECTRONES (ECD)
Es un detector de respuesta
selectiva. Es utilizado para el análisis
de muestras ambientales ya que es
sensible a compuestos orgánicos
que contienen halógenos como los
plaguicidas y los bifenilos
policlorados.
Características Para tener alta eficiencia en la
de la muestra columna se requiere que el volumen
de muestra sea de tamaño
adecuado.
Volumen de Por lo general se manejan de
muestra décimas de µL a 20 µL para
columnas empacadas.
Aplicaciones  Hidrocarburos
Aromáticos Policíclicos
(PAH´s)
 Pesticidas
organoclorados
 Hirocarburos del
petróleo
 Mezclas de disolventes
 Muestras
medioambientales
DETECTORES Los detectores en
cromatografía de líquidos son de dos
tipos básicos. Los detectores
basados en una propiedad de la
disolución. • Detectores de índice de
de refracción • Detectores
electroquímicos Los detectores
basados en una propiedad del
soluto. • Detectores de absorbancia
• Detectores de fluorescencia •
Detector de dispersión de luz
Para tener alta eficiencia en la
columna se requiere que el volumen
de muestra sea de tamaño
adecuado.
Por lo general se manejan de
décimas de µL a 20 µL para columnas
empacadas.
 Fármacos: Antibióticos,
sedantes esteroides,
analgésicos
 Bioquímica: Aminoácidos,
proteínas, carbohidratos,
lípidos
 Productos de alimentación:
Edulcorantes artificiales,
antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos
 Productos de la industria
química: Aromáticos
condensados, tensoactivos,
propulsores, colorantes
 Contaminantes: fenoles,
Pesticidas, herbicidas, PCB
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 Química forense: Drogas,

venenos, alcohol en sangre,
narcóticos
 Medicina clínica: Ácidos
biliares, metabolitos de drogas,
extractos de orina, estrógenos.

Parámetros El número de platos teóricos, N es El número de platos teóricos, N es un

cromatográficos un número útil para propósitos
N,α,R comparativos de la eficiencia de la
columna.
(α) Se utiliza para calcular el poder
de separación de una columna
RESOLUCION. Mide la separación
entre dos picos
número útil para propósitos
comparativos de la eficiencia de la
columna.
(α) Se utiliza para calcular el poder
de separación de una columna
RESOLUCION. Mide la separación
entre dos picos

Diagrama del
equipo
Puedes
anexarlo fuera
del cuadro
CUADRO COMPARATIVO CROMATOGRAFÍA DE GASES (GC) Y
CROMATOGRAFÍA DE LÍQUIDOS (HPLC)