I.

Resumen

El alga unicelular Chlamydomonas reinhardtii se ha usado como organismo modelo en estudios

de herencia citoplasmática de plastos debido a su ciclo de vida relativamente sencillo, su rápida

multiplicación y abundante progenie. Es una especie fundamentalmente haploide que se

reproduce asexualmente por mitosis en condiciones favorables, liberando una nueva generación

de zoosporas haploides. En condiciones desfavorables, como la ausencia de nitrógeno, las

zoosporas desarrollan en gametos de tipos de apareamiento opuestos – positivo y negativo –, pero

morfológicamente indistinguibles (isogametos). La fusión de los gametos produce un cigoto

diploide (zigospora) que posee una pared celular resistente a las condiciones adversas. Cuando

aparecen las condiciones adecuadas, el cigoto realiza meiosis y produce cuatro zoosporas

haploides móviles – dos de apareamiento positivo y dos de apareamiento negativo –.

II. Características del género Chlmydomonas y su uso como organismo modelo

Es un género de microalgas verdes capaces de desarrollarse mixotróficamente; es decir, de forma

autótrofa (puede producir su propio alimento) o heterótrofa (obtiene su alimento de fuentes

externas), según la disponibilidad de compuestos orgánicos y la intensidad lumínica.

Presenta una morfología ovoide de aproximadamente 10 micrómetros, y en su extremo

anterior posee dos flagelos que le proporcionan movilidad, además de estar involucrados en la

reproducción sexual. La mayor parte de su espacio intracelular está ocupado por un único

cloroplasto con forma de copa, el cual posee alrededor de 80 copias de su genoma. (Rivera, 2011)

Estudios descriptivos en el siglo XIX condujeron a la comprensión del ciclo de vida de

Chlamydomonas y a su reconocimiento temprano como un organismo con posibilidades de

análisis genético debido a su rápida multiplicación y su fácil manipulación en cultivos de

laboratorio, sobre todo en la especie C. reinhardtii (Desroche, 1912).

III. Tipos de reproducción y ciclo de vida de Chlamydomonas reinhardtii

Como la mayoría de hongos y algas unicelulares, C. reinhardtii presenta un ciclo de vida en el

que predomina la fase haploide, con reproducción asexual y sexual, dependiendo del entorno. La

reproducción asexual ocurre a través de divisiones mitóticas dentro de la pared celular de una

célula parental durante la etapa vegetativa haploide. Usualmente se producen cuatro u ocho

células hijas flageladas que son liberadas de la pared celular. Si las condiciones del medio son

apropiadas, las células vegetativas crecerán hasta iniciar un nuevo ciclo de reproducción asexual.

La reproducción sexual involucra dos gametos móviles morfológicamente indistinguibles

(isogametos) que pertenecen a tipos de apareamiento opuestos: positivo (mt +) o negativo (mt-). En

condiciones adversas; como la oscuridad, la deshidratación y la alteración del equilibrio de

nutrientes (principalmente compuestos nitrogenados), las células vegetativas haploides alteran su

metabolismo y se diferencian en gametos especializados para el apareamiento de tipos opuestos

(Sager y Granick, 1954). La fusión del citoplasma de los gametos, la lisis de la pared celular y la

fusión de los núcleos haploides lleva a la formación de un cigoto cuatriflagelado que

posteriormente fusiona sus cloroplastos (Brown et al., 1968), pierde sus flagelos y madura hasta

formar una zigospora. Las zigosporas adquieren una pared celular muy gruesa y resistente al

entorno desfavorable, que le permite sobrevivir hasta la reaparición de las condiciones adecuadas;

entonces, la zigospora se divide por meiosis y forma cuatro células hijas haploides flageladas

(zoosporas) con tipos de apareamiento mt+ y mt- en la proporción mendeliana 2:2.

En el laboratorio, el ciclo de vida de C. reinhardtii se induce mediante cambios en el ambiente. La

iluminación continua produce un crecimiento logarítmico rápido en cultivo líquido dependiendo

de la cepa, la intensidad de la luz y la temperatura, y la composición del medio. La gametogénesis

se induce en C. reinhardtii en el laboratorio por privación de nitrógeno.

IV. Importancia en Genética

Los principales estudios genéticos realizados sobre el alga C. reinhardtii son en gran medida

sobre la herencia citoplasmática de genes cloroplastidiales, una forma de herencia no mendeliana.

Una pionera en este campo fue Ruth Sager (1954) que describió una mutación de resistencia a la

estreptomicina (srR) que es heredado de forma uniparental del progenitor mt +. La herencia

uniparental en Chlamydomonas se explica por la destrucción del genoma cloroplastial del

progenitor mt- luego de la fusión de los cloroplastos de ambos gametos (Nishimura, 1999).

Sager y Ramanis (1967) reportaron raras excepciones a la herencia uniparental que permitieron

detectar recombinantes entre los genotipos parentales. La tasa de recombinación aumentó cuando

los gametos mt+ fueron sometidos a radiación UV antes del apareamiento con gametos mt -. El

análisis cuantitativo de los recombinantes con marcadores moleculares permitió la elaboración de

mapas genéticos del genoma cloroplastial, que fue finalmente completado por Maul et al. en

2002.

Otros estudios genéticos realizados en Chlamydomonas incluyen:

 La determinación del patrón de herencia de mutaciones en cigotos diploides vegetativos a

través de test de complementación en medios de cultivo selectivos (Harris et al., 1974).

  Análisis cuantitativo de tétradas (las cuatro zoosporas producidas después de la meiosis en

la zigospora) para determinar grupos de ligamiento entre loci, la frecuencia de

recombinación y la interferencia (Gowans, 1965).

V. Bibliografía

Abe , J. , Kubo , T. , Takagi , Y. , Saito , T. , Miura , K. , Fukuzawa , H. , and Matsuda , Y.

(2004). The transcriptional program of synchronous gametogenesis in

Chlamydomonas reinhardtii . Curr. Genet. 46 , 304 – 315 .

Brown Jr, R. M., Johnson, S. C., & Bold, H. C. (1968). Electron and phase‐contrast

microscopy of sexual reproduction in Chlamydomonas moewusii. Journal of

Phycology, 4(2), 100-120.

Desroche, P. (1912). Reactions des Chlamydomonas aux Agents Physiques. Schulz, Paris.

Gowans, C. S. (1965). Tetrad Analysis. Taiwania, 11(1), 1-19.

Harris, E. H., Boynton, J. E., & Gillham, N. W. (1974). Chloroplast ribosome biogenesis in

Chlamydomonas: Selection and characterization of mutants blocked in ribosome

formation. The Journal of cell biology, 63(1), 160-179.

Maul, J. E., Lilly, J. W., Cui, L., DePamphilis, C. W., Miller, W., Harris, E. H., & Stern, D. B.

(2002). The Chlamydomonas reinhardtii plastid chromosome: islands of genes in a sea

of repeats. The Plant Cell, 14(11), 2659-2679.

Nishimura, Y., Misumi, O., Kato, K., Inada, N., Higashiyama, T., Momoyama, Y., & Kuroiwa,

T. (2002). An mt+ gamete-specific nuclease that targets mt− chloroplasts during sexual

reproduction in C. reinhardtii. Genes & development, 16(9), 1116-1128.

Rivera, R. (2011). La microalga verde Chlamydomonas reinhardtii: nueva alternativa para la

producción de proteínas recombinantes de interés médico. Ciencia.

Sager, R., & Granick, S. (1954). Nutritional control of sexuality in Chlamydomonas

reinhardi. The Journal of general physiology, 37(6), 729-742.

Sager, R., & Ramanis, Z. (1967). Biparental inheritance of nonchromosomal genes induced by

ultraviolet irradiation. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United

States of America, 58(3), 931.