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QUÍMICA BIOLÓGICA
PRACTICA N° 3
QUÍMICA BIOLÓGICA
I. OBJETIVO
El objetivo de la práctica es obtener experiencia con la identificación química de carbohidratos, lípidos y proteínas
contenidos en un tejido biológico.
II. MATERIALES
MATERIALES REACTIVOS EQUIPOS
Solución acuosa de Cocinas eléctricas
clara de huevo (en 3 Solución de ácido
volúmenes de agua) clorhídrico al 10%
Extracto licuado de Solución de Hidróxido
papa (10 %) sódico al 20%.
Aceite vegetal Reactivo de Benedict
Mechero Reactivo de Biuret
Beakers de 30 ml
Beakers de 300 ml
Pipetas
Tubos de ensayo
Éter de petróleo
Solución de Sudán III en
frasco cuentagotas
Tinta roja en frasco
Cuentagotas
Soluciones al 1 % de:
glucosa, maltosa,
lactosa, sacarosa y almidón
Plumón indeleble
A. IDENTIFICACIÓN DE LÍPIDOS
Tinción
Las grasas se colorean en rojo anaranjado por el colorante denominado Sudan III.
1. Disponer en una gradilla dos tubos de ensayo, colocando en ambos 2ml de aceite.
2. Añadir a uno, 4 o 5 gotas de solución alcohólica de Sudán III. Al otro tubo añadir 4-5 gotas de tinta roja.
Agitar ambos tubos y dejar reposar.
3. Observe y anote los resultados.
Solubilidad
1. Tomar dos tubos de ensayo y poner en cada uno de ellos 2-3 ml de agua y en el otro 2-3ml de éter de
petróleo.
2. Añadir a cada tubo 1cc de aceite y agitar fuertemente. Observar la formación de gotitas o micelas y
dejar en reposo. Se verá como el aceite se ha disuelto en el éter y en cambio no lo hace en el agua, y el
aceite subirá debido a su menor densidad.
C. IDENTIFICACION DE CARBOHIDRATOS
Prueba cualitativa con el reactivo de Benedict
1. Realice una prueba cualitativa para carbohidratos utilizando el reactivo de Benedict siguiendo las
indicaciones del cuadro contiguo:
Tubo N° R. Benedict H2O dest. Muestra: 1 ml Resultado
Glucosa 1%
1 3 ml 1 ml 0 0
2 3 ml 0 1 ml 0
3 3 ml 0 0 lactosa
4 3 ml 0 0 maltosa
5 3 ml 0 0 sacarosa
6 3 ml 0 0 almidón
Hidrólisis de la sacarosa
Como se veía en la experiencia anterior la sacarosa daba la reacción de Benedict negativa por no presentar
grupos hemiacetálicos libres. Ahora bien, en presencia del ácido clorhídrico (HCl) y en caliente, la sacarosa
se hidroliza descomponiéndose en los dos monosacáridos que la forman (glucosa y fructosa):
1. Tomar una muestra de sacarosa (2 ml) y añadir unas 10 gotas de ácido clorhídrico al 10%. Calentar en
baño maría hirviente durante 10 minutos.
2. Dejar enfriar y realizar la Prueba de Benedict. Observar el resultado. La reacción positiva nos dice que
hemos conseguido romper el enlace O-glucosídico de la sacarosa.
El polisacárido almidón se colorea de azul-violeta en presencia de yodo, debido no a una reacción química,
sino a la fijación del yodo en la superficie de la molécula del almidón, fijación que sólo tiene lugar en frío.
1. Colocar en una gradilla 4 tubos de ensayo con 3 ml de glucosa, maltosa, almidón y del extracto de
papa.
2. Añadir 5 gotas de Lugol en cada uno de los tubos de ensayo.
3. Observar los resultados positvos y negativos. Con este método puede identificarse el almidón.
D. IDENTIFICACION DE PROTEINAS
Coagulación
Reacción de Biuret