25/04/2014

BIOQUIMICA GENERAL Y BUCAL - FOUBA -

CADENA
RESPIRATORIA
y
FADH2
FOSFORILACIÓN
OXIDATIVA

CITOPLASMA
Procesos
ATP
oxidativos

Cofactores
reducidos Desaminación
NADH + H+ NH3
e -
FADH2

CO2
MITOCONDRIA

Reoxidación e -
e -
de los
cofactores ATP
reducidos

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MITOCONDRIA:
Localización de
la etapa final de
la oxidación de
los nutrientes
(1948)

Albert L. Lehninger
1917--1986
1917

REOXIDACIÓN DE COFACTORES REDUCIDOS EN reacciones

metabólicas a través de la
CADENA RESPIRATORIA

NADH NAD+
FADH2 FAD

e-
Transportadores electrónicos
O2

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CADENA DE
TRANSPORTADORES
ELECTRÓNICOS:
los complejos proteicos y sus
grupos prostéticos

FMN
Complejo I NADH-ubiquinona reductasa
Complejos Fe-S
FAD
Complejo II Succinato-ubiquinona reductasa
Complejo Fe-S
Cit b
Complejo III Ubiquinol citocromo c reductasa Cit c1
Complejo Fe-S
Cit a
Complejo IV Citocromo c oxidasa Cit a3
2 Cu++

ORGANIZACIÓN DE LOS TRANSPORTADORES

ELECTRÓNICOS EN LA CADENA:
• complejos I, III y IV: proteínas integrales de membrana
• Coenzima Q y cit c: transportadores móviles (Q embebida en
la MMI y cit c ubicado en la cara externa de la MMI)

FADH2

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Reducción y Oxidación
Flujo de e- de transportadores
Gradientes de reducción crecientes

Agentes
Agente
reductores
oxidante
fuertes
fuerte

NADH y FADH2 ceden e- a la cadena,

su pasaje de un transportador a otro

libera energía

½O2+ 2H+ H2O

FADH2

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La liberación de E libre que

FADH2 acompaña al flujo de e-

impulsa el bombeo de H+
a través de la MMI
desde la matriz hacia el espacio
intermembrana

El gradiente electroquímico resultante se

utiliza para sintetizar ATP
en un complejo proteico transmembrana a través del
cual los H+ fluyen nuevamente hacia la matriz

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Desde el NADH hasta el O2 hay 3 descensos importantes

de energía libre:

en el cj I, III y IV

NADH

FADH2 Que aportan suficiente

energía para sintetizar
ATP

FINALIDAD DE LA CADENA
RESPIRATORIA

1) Reoxidación de las coenzimas reducidas:

NADH y FADH2

2) SÍNTESIS de ATP

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FOSFORILACIÓN OXIDATIVA:

ES EL MECANISMO POR EL CUAL

LA DISMINUCIÓN DE ENERGÍA LIBRE

QUE ACOMPAÑA AL FLUJO DE ELECTRONES

A LO LARGO DE LA CADENA RESPIRATORIA

SE ACOPLA A LA SÍNTESIS DE ATP

ACOPLAMIENTO entre TRANSPORTE DE e- y

FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

John Walker

ATP
sintetasa
Paul Boyer Matriz mitocondrial

SÍNTESIS de ATP por ATP sintasa

sintasa:: premio Nobel 1997

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• Cataliza la síntesis de ATP debido al flujo

de H+ desde el EIM a la matriz
ATP sintetasa • Dos componentes:
F1: una proteína periférica de membrana
F0: una proteína integral (poro de H+)

Funcionamiento de la
ATP sintetasa
La translocación de H+ a través de F0

cambios conformacionales de F1-ATPasa

flujo de H+ ⇒ E de enlace fosfato (ATP)

RENDIMIENTO ENERGÉTICO de la REOXIDACIÓN de:

• por cada mol de NADH que se oxida, se sintetizan 3 moles de ATP
(cj I, III y IV)
• por cada mol de FADH2 que se oxida, se sintetizan 2 moles de ATP
(cj III y IV)

ATP
NADH
ATP

FADH2

ATP

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¿Cuál será el destino del

ATP intramitocondrial
generado por el acoplamiento
de la cadena respiratoria y la
fosforilación oxidativa?
oxidativa?
La E libre de los procesos
catabólicos, captada por el ADP,
es utilizada para sintetizar ATP
necesario para procesos de
sínteis, transporte de moléculas,
contracción muscular, etc.

TEORÍA DEL ACOPLAMIENTO

QUIMIOSMÓTICO

¿Cómo se explica este

acoplamiento entre la reoxidación
de las coenzimas y la síntesis de
ATP?
El gradiente electroquímico de protones a través de la membrana
interna mitocondrial (fuerza protomotriz) es crucial para los
procesos de transducción de energía y síntesis de ATP
(1961)

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TEORÍA DEL ACPLAMIENTO QUIMIOSMÓTICO

La transferencia de e- bombea H+ desde la matriz ⇒ espacio
intermembrana
genera ∆electroquímico a través de la MMI que se disipa por el
retorno pasivo de H+ por F0 (poro de H+) vinculado a la ATP sintetasa

El flujo de H+ a favor de su gradiente

electroquímico proporciona la E libre para la
síntesis de ATP

LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

depende del aporte continuo de ADP-3 y PO4H-2

para la síntesis de ATP-4

que luego debe ser transportado hacia el citosol

¿cómo se produce el transporte de estos

iones?

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• MME: permeable para la

mayoría de los solutos

• MMI: permeabilidad
selectiva

TRASLOCASAS

ADP/ATP
traslocasa

Fosfato
traslocasa

REGULACIÓN DE VELOCIDAD DE TRANSPORTE DE e-:

CONTROL RESPIRATORIO

flujo de acoplamiento Fosforilación

electrones de ADP

La magnitud del consumo de O2 mitocondrial

está regulado por los niveles de ADP y Pi =
sustratos de la fosforilación oxidativa

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AGENTES QUE INTERFIEREN CON LA

FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

Desacoplantes
de la cadena respiratoria

Inhibidores
de la fosforilación oxidativa

Desacoplantes de la cadena respiratoria

Ácidos débiles liposolubles

Los H+ bombeados hacia el espacio El AH se disocia en el interior

intermembrana se combinan con A- por el pH ligeramente
(base conjugada del ácido) generando alcalino
AH que atraviesa la MMI

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EL CASO DE LA
TERMOGENINA
(proteína localizada en la grasa
parda)

Relación entre tejido

adiposo y termogénesis

• termogenina = actúa como un

desacoplante natural
• Permite el pasaje de H+ desde el
espacio intermembrana a la matriz
sin pasar por F1-F0

Desacoplantes de la cadena respiratoria

EFECTO:
• la energía de oxidación no se conserva como ATP
• la relación ADP/ATP se eleva
• mayor consumo de O2
• mayor velocidad de transporte de e-

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Inhibidores de la fosforilación oxidativa

Inhiben la disipación del gradiente electroquímico

interfiriendo con la fosforilación oxidativa

EFECTO::
EFECTO
• impiden el retorno de los H+ a la matriz mitocondrial
• no hay síntesis de ATP
• decrece la velocidad de transporte de e-
• disminuye el consumo de O2

INTERFIEREN CON LA FOSFORILACION OXIDATIVA:

Tipo de interferencia Compuesto Blanco Modo de acción

Cianuro Inhiben la citocromo-

CO oxidasa
Bloquea la transferencia
Inhibición de la Antimicina A electrónica desde el cit
transferencia b al cit c1
electrónica
Rotenona Impiden la transferencia
electrónica desde un
Amital centro Fe-S a la
ubiquinona
Inhibición de la ATP
Oligomicina Inhibe F0 y CF0
sintetasa
Carbonil-cianuro Acarreadores hidrofóbicos
Fenilhidrazona de
Desacoplamiento de la Protones
Dinitrofenol
Fosforilación y el
transporte Valinomicina Ionóforo del K+
electrónico Forma poros conductores
Proteína Desacopladora
de H+ en la MMI del
(termogenina)
tejido adiposo pardo

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REOXIDACIÓN del NADH citosólico

MECANISMO de LANZADERAS

REOXIDACIÓN del NADH citosólico

NADH generado en el citosol (glucólisis)
NADH no puede atravesar la MMI
DEBE SER REOXIDADO
glucosa

lanzaderas

piruvato

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LANZADERA DEL MALATO – ASPARTATO EIM

Mitocondrias de
hígado
y corazón

Por cada NADH citosólico que se reoxida

un NAD+ intramitocondrial se reduce y rinde 3 ATP por FO

Es la más activa

Matriz
mitocondrial

LANZADERA DEL GLICEROL 3-

3-FOSFATO

Mitocondrias de
músculo esquelético
y cerebro

Por cada NADH citosólico que se reoxida

un FAD intramitocondrial se reduce yrinde 2 ATP por FO

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Cuál será el rendimiento energético obtenido de la oxidación

completa de una molécula de glucosa que ingresa a la célula y
cómo lo justifica?

glucosa

BALANCE DE LA OXIDACIÓN COMPLETA DE 1 mol de Glu

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Múltiples asesinos han utilizado cianuro o arsénico para

eliminar a sus víctimas. ¿Sabían realmente de qué morían?
Aunque sea demasiado tarde….. Ayúdelos a entender por qué.

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