INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA N°5

ENZIMA

Nombre: ROQUE MUÑOZ LOPEZ Código: 20122112202

Nombre: JUAN DAVID ARIAS Código: 20121108969

Nombre: ANDRES FELIPE VILLEGAS PATIÑO Código: 20121110387

PROFESOR: EDUARDO PASTRANA

UNIVERSIDAD SURCOLOMBIANA

FACULTAD DE INGENIERIA

INGENIERIA AGRICOLA

NEIVA, NOVIEMBRE DE 2013

 INTRODUCCIÓN

En la siguiente práctica de laboratorio se desarrolla diferentes actividades para el

reconocimiento de enzimas presentes en los tejidos animales y vegetales, de igual
forma, enzimas contenidas en la saliva humana. Para ello se realizó distintos
procesos de reconocimiento, desnaturalización e hidrolisis enzimáticas. Como se
sabe una vida carente de enzimas no sería en esencia como se conoce, porque
estas tienen a su cargo funciones decisivas vinculas con la salud y enfermedad.
Químicamente las enzimas son proteínas y gracias a esto aceleran reacciones
químicas. Como proteínas son catalizadores muy potentes y eficaces.

También gracias a esta praxis se conoce acerca de los inhibidores enzimáticos

que necesariamente desfavorecen la actividad de las enzimas y por el contrario
los activadores siendo moléculas que incrementas la labor de estas. Se precisó en
que la temperatura, el pH, la concentración de la propia enzima afectan
directamente el trabajo de estas. De este modo en esta experiencia se reconoce
dos enzimas muy importantes como lo son: la catalasa presentes en las muestras
de carne y tomate posteriormente mencionadas y la amilasa encontrada en la
saliva humana, debido a factores como temperatura pierden su capacidad de
funcionar normalmente.
 BASE TEORICA

Los enzimas, además de ser unos catalizadores muy eficaces, presentan un alto
grado de especificidad química, es decir, son capaces de inducir la transformación
de un sólo tipo de moléculas y no de otros que también se encuentran presentes
en el medio de reacción. Un enzima es capaz de discriminar entre dos sustancias
que potencialmente podrían actuar como sustratos.
Las enzimas habitualmente son bastantes específicas tanto de tipo de reacción
que catalizan como del sustrato involucrado en la reacción. La forma, la carga y
las características hidrofílicas/hidrofóbicas de las enzimas y los sustratos son los
responsables de dicha especificidad. Las enzimas también pueden mostrar un
elevado grado de estereoespecificidad, regioselectividad y quimioselectividad.

CATALASA

Esta enzima está presente en casi todas las células aeróbicas y actúa
descomponiendo peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) en agua, así:

Fue una de las primeras enzimas purificadas y ha sido muy estudiada. Es una de
las enzimas más eficientes con una enorme velocidad de transformaciones por
segundo y subunidad.
 PROCEDIMIENTO

A. RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA
En un tubo de ensayo se agregan pequeños trozos de carne, en otro tubo
de ensayo distinto se adicionan pequeñas porciones de tomate.
Posteriormente a cada muestra se les añaden aproximadamente 1 ml de
peróxido de hidrogeno (H2O2), se observa la reacción y se espera la
identificación o presencia de catalasa.

B. DESNATURALIZACION DE LA CATALASA
Se toman nuevamente dos tubos de ensayo cada uno con dos muestras
diferentes, en el primero se agrega trozos pequeños de carne y en el
segundo trozos pequeños de tomate; se adicionan alrededor de 3ml de
agua, se calientan en el mechero y posteriormente se les añaden peróxido
de hidrogeno. Esperando que termine la reacción y adjuntando los datos
obtenidos.

C. HIDROLISIS ENZIMATICA
Con la ayuda de dos tubos de ensayo, agregándoles a cada uno
aproximadamente 2ml de almidón, y adicionalmente una cantidad de saliva
considerable. Luego se llevan al baño maría, después de alrededor de 15
minutos se sacan y al primer tubo de ensayo se le agrega 1ml de fehling
(1/2ml de A y 1/2ml de B), al segundo tubo de ensayo se le añade unas
gotas de lugol, observando los cambios que se efectúan y tomando los
datos obtenidos.
 RESULTADOS Y ANALISIS

1. RECONOCIMIENTO DE LA CATALASA

Como la catalasa es una enzima que se encuentra en las células de los

tejidos animales y vegetales se utilizó pruebas con carne y tomate.
Primeramente en la muestra con trozos de carne se observa un intenso
burbujeo, debido al desprendimiento de oxígeno, esto es porque el peróxido
de hidrogeno (H2O2), por efecto de la catalasa da lugar a agua (𝐻2 𝑂) y
oxígeno (𝑂2 ). En cambio con la muestra con trozos de tomate tienen una
menor actividad pero también se pone en manifiesto el desprendimiento de
oxigeno con una menor intensidad, se puede deducir que en la carne hay
más cantidad de catalasa que en el tomate.

2. DESNATURALIZACION DE LA CATALASA

Como sabemos la catalasa es químicamente una proteína, cuando se les

hace tratamiento térmico se evidencia la propiedad de desnaturalización
que tienen las proteínas, el cual consiste en la pérdida de su estructura
terciaria, lo que perjudica su función catalítica. Debido a esto NO se
observa desprendimiento de burbujas de oxígeno en ninguna de las dos
 muestras; en consecuencia al agregarse el peróxido de hidrogeno este no
se podrá descomponer. Resultado distinto al anterior.

3. HIDROLISIS ENZIMATICA

La enzima hidrolasa se origina en las glándulas salivales, esta tiene como

función digerir el almidón. Al revolver el almidón con la saliva, la enzima
amilasa es la encargada de degradarlo y producir azucares simples. Al
añadir Fehling a la disolución de almidón y la cantidad de saliva
posteriormente llevarlas al baño maría, como resultado dice que no hay ya
almidón, porque la amilasa de la saliva ha hidrolizado el almidón
cambiándolo en glucosa, por eso la reacción de Fehling es ahora positiva.
De un modo semejante, se examina la muestra con lugol de la cual se
puede interpretar el efecto que ahora da la reacción de polisacáridos
negativa, ya que el almidón (polisacárido) se ha hidrolizado.
 BIBLIOGRAFIA

 GUIAS DE LABORATORIO EDUARDO PASTRANA BONILLA (Enzimas)

 http://jose-canel.blogspot.com/p/presencia-y-desnaturalizacion-de-la.html
 http://academic.uprm.edu/~jvelezg/lab7-2.pdf