AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE ENTEROBACTERIAS

1. INTRODUCCION:

La familia Enterobacteriaceae constituye un grupo grande y heterogéneo de bacterias

gramnegativas. Reciben su nombre por la localización habitual como saprofitos en el tubo
digestivo, aunque se trata de gérmenes ubicuos, encontrándose de forma universal en el
suelo, el agua y la vegetación, así como formando parte de la flora intestinal normal de
muchos animales además del hombre. Escherichia coli, el microorganismo más prevalente
de esta familia, es una de las bacterias prototípicas sometidas a estudio. En la tabla 1 se
detallan los géneros y las especies de enterobacterias con importancia clínica. En la tabla
2 se resumen las principales características microbiológicas de la familia
Enterobacteriaceae.
2. RESULTADOS:

 E.coli en medio Mac Conkey:

 Salnonella y Shiguella en medio SS:

  Observación cultivos de Pseudomonas en TSI y compararlos con cultivos de
E.coli y Shiguella.

 Comportamiento de enterobacterias en los medios de aislamiento y composición

de estos:
A) Citrobacter sp.
B) Enterobacter sp.

C) Klebsiella sp.
D) Salmonella sp.

E) Shiguella sp.
F) Proteus sp.

 Siembra de enterobacterias:

a) MacConkey:
 b) SS:

3. LECTURA:

 E.coli en medio Mac Conkey:

 Mantiene el color rojo grosella. Es coliforme porque si degrada lactosa.

 Salmonella y Shiguella en medio SS:

 El SS es un medio mucho mas selectivo que el de MacConkey en razón de la

cantidad de inhibidores que lleva. Por lo tanto es un medio de aislamiento
para los lactosa –

 Medio TSI:
1. Glucosa
2. Lactosa
3. Sacarosa

 E. coli: hubo una acidificación del medio virando el color de medio

anaranjado a amarillo. Produce gas A/A -+
 Salmonella, Shiguella y E.coli primero degradan lactosa.
 Ninguno degrada sacarosa.

 Comportamiento de enterobacterias en los medios de aislamiento y composición

de estos:
A) Citrobacter sp.

 Acido +
 Gas –
  La bacteria produce un componente (ácido sulfhídrico) que al entrar en contacto
con el Fe produce sulfuro de fierro (color negro).

B) Enterobacter sp.

 Rojo en la parte superior lo cual indica que no ha degradado lactosa.

 Amarillo = acido +
 Anaranjado = alcalino +
 Producción de gas.

C) Klebsiella sp.

 No ha degradado lactosa (rojo)

 Anaranjado = alcalino +
 Amarillo = acido +
 Producción de gas

D) Salmonella sp.

 No degrada lactosa (rojo)

 Sulfuro de fierro (negro)
 Acido = amarillo

E) Shiguella sp.

 No degrado lactosa (rojo)

 Acido = amarillo

F) Proteus sp.

 No degrada lactosa (rojo)

 Sulfuro de fierro (negro)

 Siembra de enterobacterias:
a) MacConkey:
o COPRO: lactosa – (vario el color) E. coli
o Salmonella sp.: lactosa – colonias traslucidas

b) SS:
o COPRO: se encontró otro tipo de salmonella, posiblemente lactosa –
o Salmonella sp: colonias negras características de Salmonella typhi.
 AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE PSEUDOMONAS

1. Introducción:

Sinónimos: Bacilo piociánico.

Tipo: Bacteria.

Características: Pseudomonas aeruginosa pertenece a la familia Pseudomonaceae. Se trata

de un bacilo recto o ligeramente curvado Gram negativo, con un tamaño de 2–4 x 0,5-1
micras, y móvil gracias a la presencia de un flagelo polar. En relación con su metabolismo,
es aerobio (aunque puede desarrollarse en condiciones anaerobias utilizando nitrato),
catalasa positivo y oxidasa positivo. Se caracteriza por producir una variedad de pigmentos,
como la piocianina (de color azul verdoso), la pioverdina (pigmento fluorescente de color
verde amarillento) y la piorrubina (de color rojo).

Viabilidad, propagación y transmisión

Reservorio Suelo húmedo, agua, aguas residuales, vegetación, humanos y animales.
Hospedadores Humanos y animales.
Dosis infectiva mínima (DIM) Se desconoce en la actualidad.
Supervivencia ambiental Se encuentra ampliamente distribuida en la naturaleza, en el agua
(ríos, lagos, depósitos, duchas, bañeras, piscinas y piscinas de hidromasaje, etc.), en los
suelos húmedos, en los vegetales y en los materiales húmedos (alimentos, fómites);
también puede formar parte de la flora microbiana normal saprófita de las zonas húmedas
de la piel (axilas, conducto auditivo, región perineal y mucosas). Su temperatura óptima de
crecimiento es de 37ºC, pero puede tolerar temperaturas de hasta 45ºC-50ºC. Puede
sobrevivir durante al menos 70 días en agua destilada.

Formas de resistencia: No presenta formas de resistencia

2. Resultados:

A) Observación de cultivos sembrados de Pseudomonas en agar y caldo glutamato:

Pseudomonas sp. en AGAR

GLUTAMATO

Pseudomonas sp. en CALDO

GLUTAMATO
3. Discusión:

 Pseudomonas en Agar Glutamato:

Bacteria: Pseudomonas sp.

 Características de la bacteria:
o Colonias irregulares
o Crecen como manchas.
o Colonias secas, se siembran en agar glutamato porque es la única
bacteria que usa glutamato.
o Bacteria piógena porque causa inflamaciones que incluyen pus.
Medio de cultivo: agar glutamato.
 Características del medio:
o Pigmentación: verde
o Olor a mote
o Es sólido.
Lectura:
Forman colonias irregulares, crecen como manchas.

 Pseudomonas en Caldo Glutamato:

 Características del medio:
o Pigmentación: verde
o Olor a mote
o Es liquido

Lectura:
No precipita porque es aerobia,. Solo sedimenta, al final se le agrego
cloroformo para matar a las bacterias, liquido transparente que se forma
en la parte superior son las bacterias muertas por el cloroformo.
 OBSERVACION DE VIBRIO CHOLERAE

1. Introduccion:

Vibrio es un género de bacterias Gram negativas, perteneciente al orden de los Vibrionales,

de las gamma-proteobacterias, con forma de bacilos curvados. Bioquímicamente se
caracterizan por dar positivo en las pruebas de la catalasa y de la oxidasa, también dan
negativo en la adenina dihidrolasa, y positivo en la ornitina descarboxilasa. Vibrio cholerae
concretamente es sacarosa, manitol positivo y nitrato reductasa positivo.

Es una bacteria anaerobia facultativa, y su metabolismo es fermentativo; pueden fermentar,

entre otros sustratos, la glucosa. Poseen flagelación polar, que les otorga una movilidad
máxima. Pese a que nutricionalmente son poco exigentes, se emplean medios específicos
para aislarlos de muestras clínicas. El sodio estimula su crecimiento y además tolera pH
alcalinas, por eso se utiliza para su cultivo agua de peptona alcalina.

En el caso de la cepa bacteriana inocua de Vibrio cholerae, producto de una conversión

lisogénica por acción de un Bacteriófago, está igualmente se transforma en una cepa
tremendamente virulenta que puede causar cólera.

A partir de vómitos o heces diarreicas, se extrae un alícuota que es introducido en un

medio de transporte. De éste, se puede efectuar la observación en fresco, al microscopio de
contraste de fase, o mediante una tinción de Gram. Existen kits de anticuerpos para
efectuar su determinación e identificación por inmunofluorescencia.

Una vez dirigida la sospecha al grupo, se siembra un alícuota en un medio de

enriquecimiento que sea selectivo, como el TCBS (que contiene tiosulfato, citrato, Sales
Biliares y Sacarosa). Una vez obtenido en cultivo puro, se procesa la muestra mediante
diversos tests bioquímicos: oxidasa, LDC, ODC, entre otros. Existen procedimientos de
aglutinación para determinar el biotipo; por ejemplo, el O1 (llamado El Tor) y el O139 son
los más relevantes clínicamente.

Crecen con rapidez en agar peptona, agar sangre con pH cercano a 9,0; o sobre agar TCBS,
y en 18 horas se pueden observar colonias típicas. Pueden incubarse unas pocas gotas de
heces, para enriquecimiento, durante 6 a 8 h en caldo taurocolato-peptona (pH 8 a 9).
2. Resultados:

3. Discusion:

 Produce el cólera
 Las diarreas son blanquesinas como “agua de arroz”
 Infección a nivel de intestino delgado
 En las heces eliminamos agua + iones (sales) por ende ocurre una deshidratación
extrema.
 AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE BACILO TUBERCULOSO

1. Introducción:

Sinónimos: Bacilo de Koch.

Tipo: Bacteria.

Características Mycobacterium tuberculosis pertenece a la familia Mycobacteriaceae. Junto

con M. africanum, M. bovis y M. microti constituyen el complejo de bacterias causantes de
la tuberculosis (TB).
Son bacilos Gram positivo, ácido-alcohol resistentes, con tamaño entre 0.2-0.7 x 1-10
micras (µm), ligeramente curvados, aerobios estrictos, inmóviles, no formadores de esporas
ni cápsulas y de crecimiento lento. M. tuberculosis es el agente causante de la tuberculosis
humana más frecuente.

Viabilidad, propagación y transmisión

Reservorio Humano: Hospedadores Humanos.

Dosis infectiva mínima (DIM): Menos de 10 bacilos por inhalación.

Supervivencia ambiental: Es capaz de sobrevivir durante meses en el esputo mantenido en

un lugar fresco y oscuro, y durante semanas en materiales como alfombras, cadáveres,
abonos, papel o ropa, o bien formando parte del polvo. Es muy sensible al calor, a la luz
solar y a la luz ultravioleta, pero es resistente al frío, a la congelación y a la desecación.

Formas de resistencia: En condiciones adversas puede entrar en estado de latencia.

Mecanismo de propagación y transmisión: La tuberculosis se transmite de persona a

persona, principalmente por las gotitas que una persona con tuberculosis pulmonar o
laríngea emite al toser, estornudar, hablar o cantar. Estas gotitas que contienen los bacilos
tuberculosos (en número de 1 a 3), son lo suficientemente pequeñas (1-5 µm de diámetro)
como para evaporar se y permanecer suspendidas en el aire varias horas, pudiendo pasar de
unos locales a otros a través de las corrientes de aire o a través de los circuitos del aire
acondicionado. Una persona infectada que no manifiesta síntomas no es contagiosa, ya que
han de pasar al menos 21 días o un mes para que pueda transmitir la enfermedad. La
tuberculosis pulmonar y laríngea son las más contagiosas. El mayor riesgo de infección se
da en trabajadores que realizan maniobras sobre el enfermo (inducción de esputos con
nebulizadores, fibrobroncoscopias); y en los casos de mayor proximidad física y mayor
tiempo de exposición, sobre todo en espacios pequeños, mal ventilados, poco soleados y con
escasa limpieza. Otras formas de transmisión son el contacto de gotitas infectadas con
mucosas o la inoculación accidental. Es responsable de casos de enfermedad nosocomial.
2. Resultados:

3. Discusión:

 El germen requiere no menos de 15 dias para presentar desarrollo visible.

 Sus colonias son secas y rugosas son notablemente polimorfas y tienen asi mismo
dimensiones muy variables.
 La coloración es crema y excepcionalmente algo rosada.
 Toda colonia de crecimiento muy precoz debe ser sospechosa de no pertenecer a la
especie.
 La inmediata siembra a un medio corriente y muy especialmente al agar glucosado
de Sabouraud es un medio rápido de descartar para tuberculosos.
 OBSERVACION DE BARTONELLA

1. Introducción:

En la mayoría de los casos, la enfermedad por arañazo de gato es causada por Bartonella
henselae, un bacilo Gram negativo pleomórfico y fastidioso que anteriormente se
denominaba Rochalimaea henselae. B. henselae pertenece a la familia Bartonellaceae.
Alguna vez se pensó que esta familia pertenecía al orden de las Rickettsiales, pero ha sido
eliminada del mismo. Existen dos serotipos/genotipos de B. henselae: el tipo I (Houston I)
y el tipo II (BA-TF [angiomatosis bacilar-fiebre de las trincheras]/Marsella). Se cree que
existen variedades de cepas dentro de estos serotipos. B. clarridgeiae también ha sido
hallada en los gatos y se la consideró como causante de enfermedad por arañazo de gato en
un médico veterinario. Anteriormente se pensaba que Afipia felis causaba esta enfermedad,
pero se la ha descartado como causa importante.
 2. Resultados:

3. Discusión:

o Colonias translucidas y pequeñas del germen en ela agar sangre

o Morfología bacilar o cocoide del germen, comprendido dentro de los contornos del
hematíe.
o No es fácilmente coloreable por el Gram.
 AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE STAPHYLOCOCCUS

1. Introducción:

Los cocos se asociaron por primera vez a

enfermedades humanas cuando fueron
observados en materiales purulentos
provenientes de abscesos humanos. En 1880
el cirujano escocés Sir Alexander Ogston
demostró que cocos agrupados en forma de
racimo eran la causa de ciertos abscesos
piógenos en humanos. Louis Pasteur arribó a
una conclusión similar al mismo tiempo,
pero en París. En el año 1882, Ogston llamo
a estos cocos “Staphylococcus”, derivando
el nombre de los términos griegos staphile (racimo de uvas) y kokkus
(frutilla). Morfológicamente, Ogston propuso este término de manera de
poder diferenciarlos de los estreptococos, formadores de cadenas. Ogston
demostró que la inyección a ratones de pus conteniendo estos cocos producía
los mismos síntomas observados en el humano. También observó que si
calentaba el pus y lo trataba con fenol, la enfermedad se prevenía.

Staphylococcus aureus se destaca como un importante patógeno humano,

produce infecciones tanto en la comunidad como a nivel hospitalario. En la
comunidad, las infecciones por S. aureus son a menudo agudas, piogénicas y
superficiales, aunque también puede producir, con menor frecuencia,
infecciones profundas como osteomielitis, neumonía y endocarditis aguda. A
nivel nosocomial S. aureus es un importante agente de infecciones de herida
quirúrgica, de prótesis y otras. También S. aureus es causa de una serie de
infecciones producidas por toxinas como el síndrome del shock tóxico, la
intoxicación alimentaria y el síndrome de piel escaldada. Staphylococcus
epidermidis es integrante de la flora normal de piel pero produce infecciones
crecientes de piel y anexos, colonizando cuerpos extraños y también es causa
de infecciones profundas en huéspedes inmunocomprometidos.
Staphylococcus saprophyticus es causa de infección urinaria baja en la mujer
joven.
2. Resultados:

3. Discusión:

 En este medio el Staphylococcus crece con notable rapidez, y en

algunos casos produce hemolisis, la que se manifiesta por un halo claro,
alrededor de la colonia, es preciso distinguir las colonias de este
germen de las correspondientes a otros gérmenes que pueden crecer al
mismo tiempo.
 El germen ha elaborado desoxyrribonucleasa, esta despolimeriza o
ADN y se observa una zona clara, alrededor del inoculo.
 AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE ESTREPTOCOCO

1. Introducción:

El género Streptococcus (del griego στρεπτό κοκκος; grano trenzado) es un grupo de

bacterias formado por cocos gram -positivos pertenecientes al filo firmicutes1 y al grupo de
las bacterias ácido lácticas. Estas bacterias crecen en cadenas o pares, donde cada división
celular ocurre a lo largo de un eje. De allí que su nombre, del griego στρεπτος streptos,
significa que se dobla o retuerce con facilidad, como una cadena. Los Streptococco son
oxidasa– y catalasa–negativos.

Las especies conocidas de estreptococus que producen enfermedades a humanos son:

Estreptococos del grupo A: Streptococcus pyogenes producen amigdalitis e impétigo.

Estreptococos del grupo B: Streptococcus agalactiae producen meningitis en neonatos y
trastornos del embarazo en la mujer.
Neumococo: Streptococcus pneumoniae es la principal causa de neumonía adquirida en la
comunidad.
Streptococcus viridans es una causa importante de endocarditis y de abscesos dentales.
Streptococcus mutans causa importante de caries dental. Pertenece al grupo de estreptococos
viridans.
Algunas especies de los grupos C y G tienen en su pared la proteína G, que, por su capacidad
de unión a anticuerpos, tiene importantes aplicaciones en biotecnología.
2. Resultados:

3. Discusión:

 Streptococcus pyogenes en placa de agar sangre. Estos microorganismos producen

una variedad de toxinas, algunas de las cuales son capaces de lisar o destruír
eritrocitos. El resultado es una zona clara rodeando las colonias bacterianas. Esta
destrucción completa de los eritrocitos en el medio de agar se llama beta-hemolísis.
 AISLAMIENTO Y OBSERVACION DE GONOCOCO

1. Introducción:

Enfermedad infectocontagiosa bacteriana que afecta a membranas mucosas, producida por el

diplococo gram-negativo Neisseria gonorrhoeae (gonococo). En general se trata de una
infección de la uretra (uretritis) o del cuello del útero (cervicitis) que puede propagarse a las
glándulas y órganos vecinos. En otras ocasiones, la infección local primaria es extragenital,
produciendo proctitis, faringitis o conjuntivitis (oftalmía). Su importancia deriva de la
posibilidad de graves complicaciones, especialmente en la mujer (enfermedad pélvica
inflamatoria, esterilidad, embarazo ectópico), y de producir, en ocasiones, infección sistémica
(infección gonocócica diseminada). El reservorio es exclusivamente humano y el modo de
transmisión el contacto sexual, excepto en la conjuntivitis gonocócica neonatal (oftalmía) –
transmisión intraparto–. La presencia de algunas cepas de plásmidos cuyo código corresponde
a ß-lactamasas vuelve al gonococo resistente a la penicilina (N. Gonorrhoeae productora de
penicilinasa, NGPP). Cada vez con más frecuencia se observan resistencias a penicilina,
tetraciclina y espectinomicina.
2. Resultados:

3. Discusión:

 Crecen colonias puntiformes y traslucidas al comienzo y se hacen algo opalescentes

al completar su desarrollo.
 Colonias convexas y algo mucosas no alteran el medio.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

http://www.microbiologybook.org/Spanish/chapter12.htm

Bacterial Infections Humans: Epidemiology and Control. Ed. A.S.Evans and

P.S.Brachman. Plenum Publishing Corporation. 1991.

Benenson AS (ed.). Control of communicable diseases in man. 17ª Edición.

American Public Health Association. 2001.
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLOGICAS
ESCUELA DE CIENCIAS BIOLOGICAS

ALUMNA: FATIMA GONZALEZ PAREDES

PROFESORA: ADDERLY BENITES
CURSO: MICROBIOLOGIA GENERAL
CICLO: 5º A

AÑO: 2018
TRUJILLO – LA LIBERTAD
PERU