IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS

Identification of carbohydrates

Diana Paola Soracipa Casallas1, Julieth Natalia Cortes2, Harold González Ramírez 3,
Alberto Jose Jiménez Rodríguez4.
Identificación de Carbohidratos. (2018). 120172180027 dianapsc10@gmail.com, 120162081243
juliethnatalia014@gmail.com, 120172180072 harrygonzalez06_26@outlook.es, 120172180065
betojo1000@gmail.com

31 agosto de 2018 (Bogotá)

Resumen: Palabras clave: Identificación de Carbohidratos,

Los carbohidratos son unidades bioquímicas
clasificados según el número de sus carbonos
en monosacáridos, disacáridos, oligosacáridos
y polisacáridos. Son moléculas de gran
importancia debido a que pueden ser
estructurales o de reserva energética para todos
los seres vivos. Esta práctica permite identificar
dichos carbohidratos en diferentes muestras por
medio de cuatro pruebas, estas son: la prueba de
Molisch, prueba de Benedict, prueba de Lugol
y prueba de Barfoed, reconociendo los distintos
tipos de carbohidratos que dichas pruebas
pueden identificar. Gracias a los diferentes
métodos se obtuvieron resultados suficientes
para determinar los grupos a los que
pertenecían algunas de las pruebas efectuadas.
En general estas fueron exitosas, pero debido a
errores durante la ejecución del procedimiento,
no se obtuvieron los resultados esperados en
una de ellas. Finalmente se identificaron
algunos de los carbohidratos estudiados y sus
características.
Prueba de Lugol, Prueba de Molisch, Prueba de
Benedict, Prueba de Barfoed
Introducción
Los carbohidratos o también conocidos como
glúcidos, básicamente están compuestos de
carbono (C), oxígeno (O2) e Hidrógeno (H) y
tienen una estructura química (CH2O) n. Se
definen químicamente como derivados
aldehídos o cetónicos de alcoholes superiores
polivalente (con más de un grupo OH) o como
compuestos que por hidrolisis dan estos
derivados. Son considerados como la principal
sustancia alimenticia para la mayoría de los
organismos, en especial la glucosa (azúcar más
simple), ya que proporciona la mayor parte de
energía y el carbono necesario para la
biosíntesis de ácidos nucleicos, lípidos,
proteínas y otros carbohidratos. 1,2.
Estos se encuentran ampliamente distribuidos
tanto en los tejidos vegetales, donde se
producen mediante la fotosíntesis, como en los
tejidos animales. Algunos carbohidratos
desempeñan funciones altamente específicas,
como la ribosa de los ácidos nucleicos en las
células, la galactosa en ciertos lípidos y la
manosa de las glicoproteínas.2.
Son la principal fuente de energía de menor
costo y fácil obtención para el organismo, los
sistemas nerviosos aportan un valor energético
de 4 kilocalorías/gramo, evitan la formación de
cuerpos cetónicos por el eficaz metabolismo de
los lípidos, en cierta medida ayudan a regular
los niveles normales de glucosa, colesterol y
triglicéridos en la sangre, proporcionan sabor a
los alimentos y bebidas, porque los
carbohidratos se consideran edulcorantes
naturales.3,4,5.
Una forma muy general de clasificarlos es
mediante la ubicación de su grupo carbonilo,
por esto pueden ser Aldosas, como la glucosa
(31% en la miel) o la ribosa, cuando tienen
grupo funcional aldehído y Cetosas, como la
fructosa (38% en la miel) cuando poseen el
grupo funcional cetona. 6,3.
Mollinedo3 expone dos clasificaciones
generales:
“Carbohidratos simples: Son aquellos azúcares
que tienen una absorción rápida y aportan al
organismo, solamente energía. Y los
carbohidratos complejos. Son los polisacáridos.
Estos azúcares se absorben de forma lenta, por
lo tanto, el tiempo de digestión es más
prolongado y se comportan como energía de
reserva.” (p2134).
Los carbohidratos simples se dividen en:
Monosacáridos, componentes básicos
de los hidratos de carbono, los cuales son
cetonas y aldehído orgánicos pequeños, sus
derivados pueden contener Nitrógeno (N),
Fósforo (P) o Azufre (S). Los monosacáridos
más sencillos son el gliceraldehído y la
dihidroxicetona, y los más comunes según su
tipo estructural son las pentosas y las hexosas.
Las menos comunes son las tetrosas y las
heptosas. 6
Disacáridos, se forman a partir de
enlaces o-glucosúrico entre dos
monosacáridos. 6
Oligosacáridos, son la combinación de
tres a nueve moléculas de monosacáridos, estos
se unen mediante enlaces glucosídicos. No
tienen la capacidad de solubilizarse en agua. 7
Los carbohidratos complejos o
polisacáridos, son azúcares que se absorben de
forma lenta, por lo tanto, el tiempo de digestión
es más prolongado y se comportan como
energía de reserva. 6
Reacción de Molisch: Esta prueba permite la
identificación de cualquier tipo de
carbohidratos, estos son deshidratados en
concentraciones ácidas para hidrolizar
oligosacáridos y polisacáridos en unidades más
pequeñas – monómeros, principalmente de
ácido sulfúrico y ácido clorhídrico, a una forma
furfural (deshidratación de pentosas y
pentosanos) o 5-hidroximetifurfural
(deshidratación de hexosas y hexosanos). El
furfural reacciona con α-naftol (en solución con
95% de etanol), dando color púrpura a los
aldehídos presentes en los azúcares. La
eficiencia en el momento de la tinción depende
de la concentración del carbohidrato en la
disolución muestra a estudiar, y de la
complejidad de este en su estructura química.
También funciona para reconocer otros
compuestos, como las glicoproteínas. El
resultado negativo de la prueba indica la
ausencia de carbohidratos. 8, 9
Reacción de Benedict: En soluciones alcalinas
el cobre es reducido por azucares dejando un
grupo aldehído libre, formando un óxido
cuproso que se tiñe. El reactivo de Benedict está
formado por sulfato de cobre, carbonato de
sodio y citrato de sodio (pH 10,5). El citrato
++
forma iones con cobre (Cu ) difícilmente
solubles en agua, evitando la precipitación de
carbonatos de cobre en soluciones alcalinas. El
reactivo de Benedict oxida aldehídos, pero no
alcoholes. Los carbohidratos que dan una
prueba positiva se denominan ácidos reductores
(representados con un color rojo ladrillo, verde
para pocas concentraciones del carbohidrato, y
si mantiene el color original, es decir azul, no
hay azucares reductores), pues en el proceso de
ser oxidados, reducen el ion cobre (Cu++) que se
encuentra libre en el reactivo. Algunas cetosas
como la fructosa también se denominan
azucares reductoras, a pesar de que la cetona
presente en su estructura no es oxidada, lo que
sucede es que las cetosas se convierten en
aldosas cuando se encuentran en un medio
básico, representativo del reactivo de Benedict.
8, 10
Reacción de Barfoed: Se usa para distinguir la
reducción de monosacáridos y disacáridos por
su velocidad de reacción. Este reactivo usa
iones de cobre para reducir azucares en un
medio ácido. El reactivo está compuesto por
acetato de cobre diluido en ácido acético. Los
colores de reacción son los mismos que en la
prueba de Benedict. 8, 9
Reacción de Lugol: Esta prueba plantea la
reacción de identificación de polisacáridos
como el almidón, una solución de yodo-di-yodo
disuelto en una solución acuosa de yoduro de
potasio forma complejos coloreados por
adsorción con los polisacáridos. Con el almidón
reacciona para dar una coloración azulada o
negra gracias a la formación de hélices donde la
cadena lineal del almidón se une con las
moléculas de yodo. El glucógeno forma una
coloración parcialmente rojiza, debido a que no
es completamente hidrolizado. Esto se debe a la
estructura que tiene la amilosa y la
amilopectina, que otorgan al almidón hélices
más largas, lo que permite una hidrólisis más
prolija. Otros monosacáridos no generan
ningún color en presencia de Lugol. 8, 11
Metodología
Las muestras a utilizar en tres de las pruebas de
reconocimiento (prueba de Molisch, prueba de
Lugol y prueba de Benedict) son Agua
destilada, Glucosa, Ribosa, Almidón, Miel,
Harina de trigo diluida a excepción de la prueba
de Barfoed, donde se utilizó Lactosa en lugar de
Almidón.
 Prueba de Molish
En cada tubo de ensayo vierta 1 ml de las
muestras correspondientes, aplique tres (3)
gotas de Ácido Sulfúrico y vierta 0.5 ml del
Reactivo de Molisch, mezclar cuidadosamente
y observar.

Figura 2. Procedimiento prueba de Lugol

 Prueba de Benedict
Figura 1. Procedimiento prueba de Molisch
En los tubos de ensayo vierta 1 ml de las
 Prueba de Lugol muestras correspondientes y aplique tres (3)
gotas del reactivo de Benedict, mezclar
Vierta 1 ml de las muestras correspondientes en
cuidadosamente coloque los tubos por tres (3)
los tubos de ensayo y aplique tres (3) gotas de
minutos en baño de María en ebullición, retire,
Lugol, mezclar cuidadosamente y anote
deje enfriar y observar.
resultados.
Figura 3. Procedimiento prueba de Benedict

 Prueba de Barfoed Figura 4. Procedimiento prueba de Barfoed

En cada tubo de ensayo vierta 0.5 ml de

muestras de agua destilada, glucosa, ribosa y
lactosa, para la miel y la harina de trigo se
Resultados
utilizará 1 ml, aplique 1 ml del reactivo de
Barfoed, deposite los tubos de ensayo en agua Muestra PM PL PB PBa
hirviendo de diez (10) a quince (15) minutos, A - - - -
retire, deje enfriar y observar. B - - + -
C + - + +
D + + - NU
E + + + +
F + + - -
G NU NU NU -
 PM: Prueba de Molisch
PL: Prueba de Lugol
PB: Prueba de Benedict
PBa: Prueba de Barfoed
A: Agua Destilada – B: Glucosa – C: Ribosa
D: Almidón – E: Miel – F: Harina de trigo – G:
Lactosa
NU: No se utilizó en la prueba correspondiente
+: Positivo para la prueba correspondiente
-: Negativo para la prueba correspondiente
Tabla 1. Resultados práctica de identificación de
carbohidratos
Cuestionario
1. ¿Qué grupos funcionales están
presentes en los carbohidratos?
Los carbohidratos cuentan con dos
grupos funcionales, su clasificación se
da en disacáridos, oligosacáridos y
polisacáridos, estando formados por
monosacáridos, el esqueleto de estos es
lineal, cada átomo cuenta con un grupo
funcional oxhidrilo (-OH) y en uno solo
se contará con un grupo funcional
carbonilo (=C=O), si este se encuentra
en el final de la cadena pertenecerá a los
aldehídos (aldosa) de lo contrario será
cetona (cetosa) 12.
2. ¿Qué quiere decir que un
carbohidrato sea reductor?
Los carbohidratos reductores
aquellos con un grupo funcional
aldehído o cetona libre, si la molécula
está en forma abierta o potencialmente
libre si se encuentra en forma cíclica,
fundamentalmente son los
monosacáridos y oligosacáridos. Tos
los monosacáridos son reductores, los
disacáridos con el grupo funcional
hidroxilo lo será, a medida que
aumentan el número de monómeros su
característica reductora será menor, por
lo tanto, los polisacáridos no llegan a
serlo a menos que estos se hidrolizan,
mostrando características reductoras13.
3. ¿De qué disacárido y polisacárido
hace parte la glucosa?
En los glúcidos, se encuentra la glucosa,
hace parte de polisacáridos como el
almidón o el glucógeno, almacenando
energía para largos plazos.14
Disacáridos constan de dos azucares
unidos por medio de un enlace O-
glicosidico, por ejemplo, la sacarosa es
glucosa más fructuosa, o la lactosa
formada por glucosa y galactosa.
4. ¿En dónde se encuentra la celulosa y
qué papel desempeña?
Esta es una sustancia de sostén,
componente principal de las paredes
celulares de las plantas, se puede
encontrar en fibras vegetales como
son algodón, yuto, lino. Cáñamo y ramio, en
la madera de las coníferas y árboles de
fronda.15
 5. ¿Qué es la quitina y en donde se
encuentra?
La quitina es una homo-polisacarido
lineal, formado de N-acetil-D-
glucosamina, esta se encuentra
repartida en los diversos reinos, como
en hongos, algunas algas, donde puede
llegar a sustituir la celulosa u otros
glucanos. En las células de la levadura
se puede ver en el tabique, pero el lugar
más reconocido es en lo animales
invertebrados donde constituye
exoesqueleto, formando una matriz
16
donde se da la mineralización.
6. ¿Cuál es la composición química de
los reactivos de Lugol, Benedict y
Molisch?
Lugol: Cristales de yodo-di-yodo en
una solución acuosa Ioduro de potasio
(IK)11
Benedict: Sulfato de cobre (CuSO4),
Carbonato de sodio (Na2CO3) y Citrato
9
de sodio (Na3C6H5O7)
Molisch: α-naftol en una solución de
etanol del 95% 8
Análisis de resultados
Prueba de Molisch:
Para esta prueba se obtuvo en la glucosa (B) un
resultado negativo probablemente debido a que
este azúcar, al ser un monosacárido además de
encontrarse en una concentración del 1%, no
generó la reacción esperada, ya que la prueba
8,9
permite hidrolizar hexosas ; por otra parte
muestras como la ribosa (C) arrojó un resultado
positivo debido a que esta tiene en su
composición glucosa6,3, la cual cuenta con un
grupo aldehído, que reacciona con el α-naftol
presente en el reactivo8,9 el almidón, clasifica
como carbohidrato, que es la reserva energética
para plantas y animales17 , está conformado por
largas cadenas de glucosa, por otro lado, la miel
cuenta con azucares como la fructuosa en un
6,3
38% dando un resultado positivo y por
el
último se tiene la Harina de trigo, los cereales
normalmente cuentan con fibra de celulosa
además de ser un compuesto altamente
almidonado, por lo tanto, esta prueba reacciono
al reactivo de molisch.
Prueba de Barfoed:
Teniendo en cuenta que las muestras con
reacción positiva frente a este reactivo, es decir
aquellas en las que se evidenció una
precipitación coloreada del óxido cuproso,
fueron ribosa (C) y miel (E), se afirma entonces
que estas muestras corresponden a azúcares
reductoras. El grupo hidroxilo (OH) de la ribosa
puede separar los iones de cobre (Cu++), a una
mayor velocidad que lo hace la hidrólisis de los
grupos de glucosa y fructosa presentes en la
miel. Lo que afirma el hecho que azucares más
complejos requieren un mayor tiempo de
exposición para presentar una reacción
evidente. Pero en este caso, no se refiere a que
el azúcar presente en el compuesto con mayor
tiempo de reacción (E) sea más complejo, sino
que la cantidad de azúcares a hidrolizar es
mucho más alta, teniendo en cuenta el
porcentaje de carbohidratos que tiene la miel
(glucosa: 30-35%, fructosa: 35-40%, sacarosa:
5-10%, y otras azúcares) que corresponden a un
80% de su composición total, es una cantidad
grande para realizar la reacción, lo que la hace
más lenta, sumada al hecho de la presencia de
azucares no reductoras como lo son la sacarosa.
18, 19
Prueba de Lugo
Por medio del reactivo de Lugol es posible
identificar polisacáridos solubles especialmente
el almidón. Dichos polisacáridos reaccionan
con el yodo, ingresando en su estructura a este
(I3-). En la puebla de Lugol realizada se obtuvo
que el agua destilada (A), la glucosa (B) y la
ribosa(C); fueron las muestras que dieron
negativo para dicha prueba, debido a que el
agua no es un carbohidrato, mientras que la
glucosa(B) y ribosa(C) si son carbohidratos,
pero son monosacáridos (azucares simples) que
no se pueden descomponer en compuestos más
sencillos (hidrolisis) para incluir en su
estructura el yodo . Por otro lado, se puede
observar que en la práctica de laboratorio las
muestras de almidón (D), miel(E) y harina (F)
dieron positivas para la prueba de Lugol, por lo
que indico que el yodo y el yoduro del reactivo
reaccionaron con las muestras dando una
tinción azul-violeta y que con la hidrolisis del
almidón se liberaron unas dextrinas que tienen
una coloración marrón-rojizo que se observaron
como precipitado. Dicho resultado fue más
claro en la prueba de almidón debiLugoldo a su
la facilidad que tiene de hidrolizarse con el
yodo, la tinción que dio con la miel y harina
indican que son polisacáridos solubles y que
tienen almidón en su interior que les permite la
reacción con el Lugol.2,3, 12
Prueba de Benedict
Esta prueba permite identificar los azúcares
reductores con un precipitado anaranjado rojizo
8,10
, es evidente que las muestras de Glucosa
(B), Ribosa (C) y, Miel (E) son aldehídos que
están siendo oxidados, la pentosa (Ribosa (C))
es una aldosa (grupo que siempre reacciona con
el reactivo de Benedict) 6,3,8,10 ,de igual manera
y en mayor intensidad la hexosa (Glucosa (B))
es uno de los azúcares más reductores, sin
embargo, la Miel está conformada en una
aproximada proporción de Glucosa y Fructosa,
6,3
,siendo esta última una cetosa
equivocadamente se podría deducir que la
prueba para la miel debería ser negativa, sin
embargo, existen algunas cetosas, como la
Fructosa que al entrar en contacto con un medio
básico (necesario para la prueba) se
transforman en aldosas, si bien las muestras de
Harina de Trigo (F) y Almidón (D) no
respondieron al reactivo, es debido a que
cuentan con muchos anillos carbonados por lo
que el reactivo no es capaz de reducir el ion KDAA#v=onepage&q=bioquimica%20definic
cúprico,20. ion%20carbohidratos&f=false

Conclusiones 2. Bohinski.R. . Edición. Mexico: Pearson;

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monosacáridos, disacáridos,
4. Los Hidratos de carbono. Vive sano
polisacáridos, además de algunos
[Internet]. 2010 [citado 29 Ago 2018];
azúcares reductores.
Suplemento II, nº 3.862 . URL disponible en:
3. Es importante destacar que no todos
http://www.institutotomaspascualsanz.com/des
carbohidratos siguen los parámetros
cargas/publicaciones/vivesano/vivesano_15abr
establecidos para grupos en específico,
il10.pdf?pdf=vivesano-150410
pues algunos de ellos al entrar en
contacto con los reactivos presentan 5. FundaciónlasDelicias.com [Internet].
Quindio, Colombia; 2016 [Acutalizado 2016]
cambios particulares. Disponible en:
4. Debido a errores cometidos durante el http://www.fundacionlasdelicias.org/portal/im
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desarrollo de la práctica, no se
obtuvieron algunos resultados exactos 5.

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