Dosage des L’addition du sulfate de cuivre
protéines et de la soudre à une solution
sériques de protéines sériques
entraine une énolisation des
fonctions peptides pour
former un complexe de
coloration violette.
Recherche Les protéines dénaturées par
des l’acide nitrique concentré
protéines précipitent au contact de cet
urinaires acide .
Dosage de La méthode enzymatique est
l’urée basée sur les réactions
Determiner la
concentration de votre
serum en protéines:
𝐓𝐚𝐮𝐱 𝐩𝐫𝐨𝐭𝐞𝐢𝐧𝐞𝐬 𝐬é𝐫𝐢𝐪𝐮𝐞 =
𝐀𝐛𝐬(𝐝𝐨𝐬𝐚𝐠𝐞)
𝐀𝐛𝐬(𝐄𝐭𝐚𝐥𝐨𝐧)
*concentratio
n de l’étalon
𝐓𝐚𝐮𝐱 𝐝’𝐮𝐫é𝐞 (𝐠/𝐥) =
𝐀𝐛𝐬∗(𝐀𝟏_𝐀𝟐 𝐭𝐮𝐛𝐞 𝐬𝐞𝐫𝐮𝐦)
𝐀𝐛𝐬∗(𝐀𝟏_𝐀𝟐 𝐭𝐮𝐛𝐞 é𝐭𝐚𝐥𝐨𝐧)
*n
VN=64à83 g/l ↓ ou hypoprotéinémie est due :
Soit aux affections suivantes :
-Syndromes néphrotiques (protéinurie importante)
-Cirrhoses (insuffisance de synthèse hépatique)
-Gastro-entéropathies excudatives.
-Hémorragies aigues.
-Brulures
-Malnutrition
Soit à une augmentation de l’eau plasmatique par
hémodilution, mais ceci ne se produit
qu’exceptionnellement en pathologie.
↑ ou hyperprotéinémie:
-Les disglobulinémies (myélome, maladie de
Waldenstrom)
-La dimunition de l’eau vasculaire qui est le témoin
d’une hemoconcentration.
Toutes hyperproteinemie dépassant 80 g/l impose
une électrophorése des protéines sériques .
Pathologie au- En présence de protéines,
delà de il y a apparition d’un disque blanc mince et net à la
100mg/l surface de séparation de l’acide et de l’urine dont
l’épaisseur et le temps d’apparition est en fonction de
l’importance de la protéinurie.
VN entre 0,17 ↑ ou hyperazotémie :
g/l et 0,49 g/l Les IR et les nephrites aigues (glomérulaire ou
 décrites par Talke et Set
Tiffany et al.
Sous l’action de l’uréase,
l’urée est hydrolysée en gaz
carbonique (CO2) et
ammoniaque(NH3).
La diminution de l’absorbance
et la conversion du NADH en
NAD+ mesurée pendant un
temps donné à 340 nm est
proportionnelle à la
concentration en urée dans le
serum
Dosage de La creatinine en solution
la alcalin donne avec une
créatinine solution de picrate de sodium
une coloration rouge orange
se pretant à un dosage
colorimétrique à 500 nm. La
vitesse de formation de ce
complexe est proportionnelle
à la créatinine sérique..
Des substances (bilirubine,
hemoglobine) interfèrent
avec la créatinine lors de ce
dosage. La modification de
concentration de l’étalon tubulaires)
(le taux depend de l -Les néphrites chroniques (glomérulaire ou
alimentation, l age, le interstitielles et d’origine urologique)
sexe et la diurèse) -L’hyperuréogénèse
-L’oligurie des maladies cardiaques
-La diminution des volumes extra cellulaires
(diarrhées et vomissements majeurs) entrainant une
hyperconcentration
-Brulures
↓ ou hypoazotémie :
-Carence nutritive protéique
-Insuffisance hépatocellulaire
-Pertes digestives (vomissements, diarhées)
Taux de creatinine= Homme : entre Nette élévation :
(𝐀𝟐_𝐀𝟏)𝐬𝐞𝐫𝐮𝐦 8_13 mg/l Les IR :nephrites aigues. Cette élévation peut
*
(𝐀𝟐_𝐀𝟏)é𝐭𝐚𝐥𝐨𝐧 𝐜𝐫𝐚𝐭𝐢𝐧𝐢𝐧𝐞 atteindre parfois 60 à 70 mg/l dans les néphrites
n mg /l chroniques.
Hypercréatinémie :
La concentration de Myopathies et les hypercatabolismes azotés.
l’etalon : n=20mg/l
A : absorbance
 cette méthode, méthode Clairance de la
cinétique en 2 points permet créatinie :
d’élimner les interférences . 𝐔∗𝐕
𝐂𝐈 = 𝐦𝐥/𝐦𝐢𝐧
NB : Cette methode est 𝐏
linèaire jusqu’à 150mg/l au U=créatinie urinaire
dela de 150 l’echantillon est V=Débit urinaire
dilué avec l’eau distillée qui ml/min
sera introduit dans les P= creatinine
calculs . plasmatique
CI révèle une
signification lors de
l’évolution de
l’insuffisance rénale.
Dosage du Le cholesterol se trouve dans 𝐓𝐚𝐮𝐱 𝐝𝐞 𝐜𝐡𝐨𝐥𝐞𝐬𝐭𝐞𝐫𝐨𝐥 VN est inf à 2 ↑ ou hypercholestérolémie (défense) :
cholesterol le plasma sous forme dissout = g/l -Ictères par rétention
total parce qu’il est liés aux 𝐀𝐛𝐬(𝐄𝐜𝐡 𝐬𝐞𝐫𝐮𝐦) Varie avec -Néphroses lipoidiques
*n
protéines sous forme de 𝐀𝐛𝐬(é𝐭𝐚𝐥𝐨𝐧 𝐜𝐡𝐨𝐥𝐞𝐬.) l’age, le sexe, -Hypothyroidies
lipoproteines.. Dont n=2 g/l la -Troubles du métabolisme lipidique (diabète, obésité,
Son dosage nécessiteson nycthémère.. athéromes, xanthomatoses)
extraction au prealable suivi Le rapport chol ↓ ou hypocholestérolémie (fatigue) :
du dosage colorimétrique. esterifié/chol -Insuffisances hépatiques graves (cirrhose, coma
Mais ces methodes peuvent total =65 à 75% hépatique)
causer les interférences avec qui diminue -Infections aigues graves
les chromogènes (biliribune) dans les -Hyperthyroidies
La méthode enzymatique atteintes -Insuffisances surrénaliennes
décrite par Alain et coll exclut hepatiques
 ces interferences. Les graves et reste
enzymes utilisées sont : normal dans
cholesterol esterase_ les ictères par
cholesterol oxydase_ rétention .
Peroxydase.
Dosage de Association glucose oxydase- 𝐆𝐥𝐲𝐜é𝐦𝐢𝐞 𝐠/𝐥 = A jeun : entre Le diagnostic de diabète sucré est posé si :
la glycémie peroxydase : 𝐀.é𝐜𝐡𝐚𝐧𝐭𝐢𝐥𝐥𝐨𝐧 0,7 et 1,05 g/l _Il ya des signes cliniques (polyurie et polydipsie)
*n
_Sous l’action du glucose- 𝐀 é𝐭𝐚𝐥𝐨𝐧 Les methodes associés à une glycémie> à 2 g/l PP.
oxydase : Dont n=1 g/l=5,55 non _En absence de signes cliniques, si la glycémie à jeun
D-glucose+O2+H2O→acide mmom/l enzymatiques est> 1,26 g/l à 2 reprises.
gluconique+H2O2 donnent des _Si la glycémie est > 2 g/l à la 2 ème h d’un test de
_Sous l’action de la valeurs élevés tolérance au glucose.
peroxydase : Pour une glycémie entre 1,1 et 1,26g/l on parle
H2O2+amino-4 d’hyperglycémie modérée à jeun.
antipirine+hydroxybenzoate_
Na→H2O+quino neimine
rouge
Recherche Recherche basée sur le _Si le mélange reste bleu après refroidissement : il y a
des sucres pouvoir réducteur des oses à absence de sucres réducteurs.
reducteurs chaud et en milieu alcalin vis- _L’apparition d’un précipité rouge brique d’oxyde de
dans à-vis d’un réactif cuivrique cuivre indique la présence de sucre dans les urines.
l’urine (liqueur de Fehling) _Au dela de 2,25 mMoles, pathologie pouvant
atteindre 300 à 400 mMoles lors du diabète non
traité.
Recherche L’aldéhyde salicylique donne _Acidocétose et coma diabétique
des corps avec l’acétone en milieu _Jeun glycémique
cétoniques fortement alcalin un
complexe de coloration rouge
(réaction de Frommer)
Pvt : plasma (sang prélevé sur
héparinate de Na) ou les
urines receuillie sur
mercurothiolate
Dosage de En présence d’acide
la sulfosalicylique, les proteines
protainora précipitent. La densité du
chie trouble obtenu est
proportionnelle autaux de
protéines présentes dans le
LCR .
_Vomissements prolongés
_Certaines glycogénoses
_Interférences médicamenteuses
Taux normal L’Hyperprotéinorachie :
entre 0,15 et _Compressions médullaires avec blocage.
à 0,45 g/l _De toutes les hémorragies méningées
NB : LCR _De tous les processus infectieux méningés
normal a un (méningite purulente, méningite aigue
aspect clair lymphocytaire..)
Il y a une concordance entre le taux d’albumine et la
cytologie. Mais l’augmentation de l’albumine ne va
toujours de pair avec l’augmentation des éléments
cellulaires :
_Dans le cas des compressions médullaires et
cérébrales, on observe une hyperprotéinorachie sans
réaction cellulaire.
_Dans le cas de l’encephalite épidémique, il y a
augmentation d’éléments cellulaires sans que la
protéinorachie varie.
NB: LCR pathologique a un aspect trouble
Pathologie meningite : hyperproteinorachie
Dosage de Meme principe du dosage de
la la glycémie
glycorachie
Dosage _Pour ASAT : La glutamique
transamina oxaloacétique transaminase
se (TGO) ou aspartate
aminotransférase (AST) qui
catalyse la réaction suivante :
Sous l’action de TGO :
Ac. α cetoglutarate+ac
aspartique→ac glutamique+ac
oxaloacétique
Sous l’action de MDH :
Ac
oxaloacétique+NADH,H+→L
Malate+NAD+
Taux normal _Hyper glycorachie : Paralysie générale, l’hémiplégie,
est de 0,4 à 0,7 les tumeurs cérébrales, la sclérose en plaque et les
g/l affections à virus. Ces variations n’ont de signification
NB : LCR que si la glycémie est normale, car la glycorachie suit
normal a un les variations de la glycémie.
aspect clair _Hypo glycorachie : Les infections méningées aigues
ou chroniques et particulièrement dans les
méningites ç microbes pyogènes car les germes
utilisent le glucose pour leur développement .
_La glycorachie peut etre normale au cours de
certains syndromes neurologiques.
NB : LCR pathologique a un aspect trouble
Pathologie meningite Hypoglycorachie .
Activité transaminase _Pour ASAT : Constituent un test précoce de toutes les affections
UI/L=(A Abs/min)*1746 13-31 UI/L hépatiques entrainant une nécrose cellulaire ; en
_Pour ALAT : effet, elles augmentent bien avant la phase ictérique
10-40 UI/L et avant le moment où les ltests classiques
d’explorations fonctionnelles hépatiques deviennent
positifs.
Dans les hépatites virales les GPT sont sup aux GOT
La diminution de l’absorbance
due à la conversion du
NADH,H+ en NAD+ est
proportionnelle à l’activité
TGO mesurée dans le serum à
340 nm
_Pour ALAT : La glutamique
pyruvique transaminase (TGP)
ou alanine aminotransférase
(AST) qui catalyse la
réaction suivante :
Sous l’action de TGP :
Ac. α
cetoglutarate+alanine→ac
glutamique+ac pyruvique
Sous l’action de LDH :
Ac pyruvique+NADH,H+→L
lactate+NAD+
La diminution de l’absorbance
due à la conversion du
NADH,H+ en NAD+ est
proportionnelle à l’activité
ALT mesurée dans le serum à
340 nm
Phosphata En milieu alcalin (ph=10), les
se alcaline phosphatases alcalines
catalysent l’hydrolyse du p
nitro phenyl phosphate en
para nitrophenyl et
phosphate.
La vitesse d’apparition du p-
nitrophenol suivie par la
variation de l’absorbance à
405 nm est proportionnelle à
l’activité PAL dans le serum.
Dosage des La bilirubine se combine avec
bilirubines les sels de diazommanonium
pour former des azo-
diazoiques. Dans ce cas
particulier, l’acide
sulfamilique est diazoté avec
l’acide nitreux puis ensuite
couplée à la bilirubine. Ca
couplage entraine l’apparition
d’une coloration rouge
violacée due à la formation
d’une azo-bilirubine (Raction
Van Den Berg)
La bilirubine indirecte est
liposoluble, ne réagit pas avec
Les résultats sont 120-450 UI/L L’activité de la PAL est augmentée au cours de
exprimés en UI/L en Cholestase par obstruction biliaire.
utilisant un serum L’activité de la PAL est augmentée au cours des
étalon traité dans les ostéomalacies chez l’enfant.
memes conditions :
Activité PAL=(Moyenne
abs)/min*5450
_Bilirubine _Hyperbilirubinémie à bilirubine directe :
totale 2à10mg Dans les ictères par obstruction, on constate une
_Bilirubine bilirubinémie de 250 mg/l, presque totalement
conjuguée 0 à directe.
4 mg/l Dans les ictères par hépatite, la bilirubinémie tourne
_Bilirubine non autour de 100 mg/l dont 95% directe.
conjuguée 2à 6 _ Hyperbilirubinémie à bilirubine indirecte :
mg/l Correspond en général aux symdromes d’hémolyses.
Dans les ictères hémolytiques, la bilirubine environne
50 mg/l, dont 95% indirecte.
Incompatibilité foeto maternelle : Anémies de Bierner
Hepatites virales.
_Hyperbilirubinémie mixte :
Dans les cirrhoses compensées, il y a bilirubinémie
normale.
le réactif sulfamilique Par contre dans les cirrhoses décompensées, la
qu’après traitement bilirubinémie ne dépasse pas 60 à 80 mg/l (sous
alcoolique (alcool méthylique) forme mixte)
NB : PVT : le serum ou plasma _Hyperbilirubinémie constitutionnelle :
doit etre maintenu en Cancers de foie
l’absence de toute traça
d’hemolyse. Les échantillons
sont conservés à l’obscurité
car toutes les formes de
bilirubine sont
photosensibles.