IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE MONOSACARIDOS Y DISACARIDOS

ASSIA .A,TORDECILLA.A

Facultad de educación y ciencias

programa de biología
Universidad de Sucre, Sincelejo.

RESUMEN

En esta práctica se realizó la identificación de los diferentes carbohidratos, la soluciones a

estudiar fueron : Glucosa,sacarosa,lactosa,fructosa,ribosa,en las cuales se utilizaron diferentes
pruebas que se basan en la reactividad de los grupos funcionales carbonilo e hidroxilo que
hacen parte de estos y les confieren la base para la mayoría de las reacciones usadas para su
identificación y su respectivo análisis, en cada demostración se obtuvo resultados positivos y
en otros negativos. En sí se logró reconocer los carbohidratos por medio de reacciones
coloreadas de carácter cualitativo y así diferenciar Hexosas de pentosas, aldosas de cetosas e
identificar azúcares reductores y no reductores con la respectiva prueba.

PALABRAS CLAVE: Carbohidratos,Disacaridos,Monosacaridos,

Molisch,fehling,Seliwanoff,Tollens,Bial

1.INTRODUCCIÓN

Los hidratos de carbono constituyen un de carbono en la sangre de los vertebrados

grupo de compuestos naturales con enlace
carbonilo ( aldehído o cetona) que además
tienen varios grupos hidroxilo.Entre ellos
se encuentran los azúcares
(monosacáridos) y sus polímeros, los
oligosacáridos y los polisacáridos.
Los polímeros de los hidratos de carbono,
sobre todo los almidones y algunos
disacáridos, son compuestos nutritivos
muy importantes (pero no esenciales ). En
el intestino se degradan hasta convertirse
en monosacaridos y se reabsorben como
tales.La forma de transporte de los hidratos
es la glucosa , que es capacitada por la
célula y degradada para la obtención de
energía (glucólisis) o para ser
transformada en otros metabolitos.
Algunos órganos (sobre todo el hígado y el
músculo ) almacena el glucógeno como
hidrato de carbono de reserva polimérico.
Las moléculas de ​glucógeno están unidas
mediante un enlace covalente a una
proteína, la glucogenina.
Es habitual que los hidratos de carbono
oligoméricos y poliméricos se asocien en
forma covalente con los lípidos o con las
proteínas para formar los glucolípidos y
las glucoproteínas que se encuentran por
ejemplo,en las membranas celulares. Las
glucoproteínas también se hallan
solubilizadas en la sangre (proteínas
plasmáticas) y como componentes de los
proteoglucanos, elementos importantes de
la sustancia intercelular.
El monosacárido natural más importante,
la D- glucosa, es un aldehído alifático con
seis átomos de carbono de los cuales cinco
contienen un grupo hidroxilo (1).Como los
átomos de carbono dos a cinco son centros
quirales.
Figura 1.Centros quirales
La aldopentosa, más conocida como ,la
D-ribosa, forma parte de la estructura del
RNA y de las coenzimas nucleotídicas,
donde siempre se le encuentra como
furanosa. La D- xilosa y la L-arabinosa, al
igual que la ribosa, se encuentra rara vez
en forma libre.En cambio son muy
abundantes como constituyentes de los
polisacáridos en las paredes celulares de
las plantas.
Figura 2.Aldosas

Cuando el hidroxilo anomérico de un está por un enlace glucosidico alfa con el

monosacárido se une al grupo OH de otro carbono 4 de una segunda molécula de
azúcar con un enlace glucosídico se glucosa.
obtiene un disacárido Como en todos los Figura 3.Maltosa
glucósidos, no hay posibilidades de
mutarrotación en el enlace glucosídico y
dado que la formación de estos enlaces en
los disacáridos naturales es enzimática y
estereoespecífica, se halla solo uno de los
tipos de enlaces ( α o β ).
La lactosa " azúcar de la leche" es el
hidrato de carbono más importante de la
La maltosa se obtiene como producto de
leche en los mamíferos, La leche de vaca
la degradación de almidón en la malta y
contiene aproximadamente 4,5 % de
como producto intermedio en la digestión
lactosa mientras que en la leche materna
intestinal . En la maltosa el grupo OH
de las mujeres hay hasta 7,5 %. En la
anomérico de una molécula de glucosa
lactosa el grupo anomérico OH de la
galactosa está unido por un enlace
B-glucosidico con el C-4 de una glucosa.
Por lo tanto , la molécula de lactosa está
extendida y los dos anillos piranosicos se
localizan casi en el mismo plano.
Figura 4.Lactosa
La sacarosa, un azúcar que sirve como
forma de transporte de los hidratos de
carbono en los vegetales y como reserva
soluble de estos es muy apreciada por los
seres humanos debido a su sabor
dulce.Como fuentes de este azúcar pueden
mencionarse las plantas que lo contienen
en alta concentración,como la caña de
azúcar o la remolacha.Por hidrólisis
enzimática del néctar de las flores que
contiene sacarosa, catalizada por la enzima
invertasa, en el tracto digestivo de las
abejas se produce miel , una mezcla de
glucosa y fructosa. En la sacarosa los dos
grupos anoméricos OH de los dos azúcares
están unidos glucosídica mente por lo que
la sacarosa pertenece a los azúcares no
reductores.(Koolman.J & En 2 tubos de ensayo de forma separada se
Rohm.Klaus.2005)
Figura 5.Sacarosa
2.MATERIALES Y MÉTODOS
2.1.Prueba de Molisch
Se marcó 4 tubos de ensayo con
glucosa,fructosa, sacarosa y agua, y se
agregó 1ml de cada sln;luego se agregó 0.2
ml de reactivo de Molisch y un ml de
ácido sulfúrico .Finalmente se observó la
interfase de dos líquidos.
2.2.Prueba de fehling
Se marcó 5 tubos de ensayo con glucosa,
fructosa,lactosa,sacarosa y agua.Se ​agregó
1ml de cada sln;luego se agregó 0.5 ml de
reactivo de fehling a y b. Por último se
calentó en baño de maría a ebullición
durante 3 minutos.
2.3.Prueba de seliwanoff
Se marcó 2 tubos de ensayo con glucosa y
fructosa.Se agregó 0.5 ml de sln y 0.5 ml
de reactivo de seliwanoff y se calentó en
baño de maría por 2 minutos.
2.4. Prueba de Tollens
Se marcó 4 tubos de ensayo, con
glucosa,fructosa, sacarosa y lactosa,luego
se agregó 5 ml de reactivo de tollens a
cada tubo.Por último se calentó a 50° por
10 minutos y se observó si hubo o no
presencia de un espejo de plata.
2.5.Prueba de Bial
agregó ribosa y glucosa, luego se agregó 2
ml de reactivo de Bial y feCl₃ al 1% p/v.
Por último se calentó hasta ebullición y se
observó la presencia de una coloración
azul verdoso.
 3.3.Prueba de Seliwanoff
3.RESULTADOS
Tabla 3.​Resultado de la prueba para
3.1.Prueba de Molisch
distinguir aldosas y cetosas.
Tabla 1.​Resultado prueba de molisch

3.4. Prueba de Tollens

Tabla 4.​Resultado de la prueba de tollens
glucosa fructosa sacarosa

agua glucosa fructosa sacarosa lactosa

3.5.Prueba de Bial
3.2.Prueba de fehling
Tabla 5.​Reconocimiento de pentosas
Tabla 2.​Resultado reconocimiento
prueba de azúcares.

Ribosa

de izquierda a derecha:
fructosa,sacarosa y lactosa
4. DISCUSIÓN DE RESULTADOS
4.1. PRUEBA DE MOLISCH PARA
Glucosa, RECONOCIMIENTO DE
CARBOHIDRATOS
Esta prueba es un ensayo para
reconocimiento general de carbohidratos la
cual permite detectar la presencia de
hidratos de carbono en una muestra; está
basada en la formación de furfural o
derivados de éste (originado por los ácidos
concentrados que provocan una
deshidratación de los azúcares) a partir de
los carbohidratos para obtener el furfural
que se combina con el -naftol sulfonato
originando un complejo púrpura. También
sirve para el reconocimiento general de
carbohidratos donde polisacáridos y
disacáridos se hidrolizan formando
monosacáridos formando un color púrpura
violeta.(Díaz et al., 2009)
Todos los glúcidos por acción del ácido
sulfúrico concentrado se deshidratan
formando compuestos furfúricos (las
pentosas dan furfural y las hexosas dan
hidroximetilfurfural). Estos furfurales se
condensan con el reactivo de Molisch
(solución alcohólica de alfa-naftol), dando
un producto violeta.
1.prueba con reactivo de molisch
En la prueba de molisch, se utiliza ácido
sulfúrico en la reacción de deshidratación
(del monosacárido) y el alfa-naftol en la
reacción de condensación del furfural. Al
aplicar esta prueba, todos los carbohidratos
o glúcidos producen un complejo color
morado ( tabla )
(EUNED.Manual de lab para bioquímica)
4. 2. PRUEBA PARA AZÚCARES
REDUCTORES CON REACTIVO DE
FEHLING
la glucosa es un azúcar reductor ya que
como se puede ver en la figura 1 contiene
grupo aldehído la cual reduce al reactivo
de fehling a óxido de cobre rojizo.
el resultado para la sacarosa nos indica una
coloración azul determinando que esta
solución es un azúcar no reductor debido a
que la prueba salio negativa ,es decir , que
no se produjo la reducción.
El reactivo de Fehling se fundamenta en el
poder reductor del grupo carbonilo en las
aldosas, pues tienen la estructura química
abierta necesaria para actuar como agentes
reductores, y en algunas cetosas
(generalmente positiva en fructosa), lo que
se evidencia con la formación de un
precipitado rojo ladrillo (óxido cuproso)
(F.Louis & F.Mary. 1981).
Discutiendo los resultados positivos, ​que
se dieron en la glucosa, fructosa, lactosa
( tabla 2) el reactivo de fehling , reacciona
principalmente con los aldehídos porque
tienen un grupo carbonilo más expuesto,
que le da el carácter reductor.
La sacarosa no reduce el licor de fehling ni
reacciona con la fenilhidrazina, así que las
dos unidades de azúcar están unidas por
los hidroxilos glucosídicos de cada una de
ellas, por lo que la sacarosa no contiene
grupo aldehído libre .A diferencia de la
mayoría de los Azúcares , la sacarosa
cristaliza fácilmente, lo que puede ser
debido a que no se isomeriza en solución
(F.Louis & F.Mary. 1981).
2. prueba con reactivo de fehling
El poder reductor que pueden presentar los
azúcares proviene de su grupo carbonilo,
que puede ser oxidado a grupo carboxilo
con agentes oxidantes suaves. Si el grupo
carbonilo se encuentra combinado no
puede presentar este poder reductor.
Los azúcares reductores, en medio
alcalino, son capaces de reducir el ión
Cu2+ de color azul a Cu+ de color rojo.
Para ello el grupo carbonilo del azúcar se
oxida a grupo carboxilo. En medio
fuertemente básico como en nuestro caso
el NaOH el ión Cu2+ formaría Cu (OH)2
insoluble por eso añadimos tartrato sódico
potásico que actúa como estabilizador al
formar un complejo con el Cu2+.
La aparición de un precipitado de óxido
cuproso es indicativo de la presencia de un
aldehído (Dupont.D & Gokel. G.1985).
4.3. PRUEBA CON REACTIVO DE
SELIWANOFF
Esta prueba es específica para las cetosas.
Las cetosas se deshidratan más
rápidamente que las aldosas, dando
furfurales. Estos se condensan con el
resorcinol produciendo un complejo
coloreado.
En la prueba de Seliwanoff, se utiliza el
ácido clorhídrico en la reacción de
deshidratación ( del monosacárido) y el
resorcinol(1,3-dihidroxibenceno) en la
reacción de condensación del derivado del
furfural. En esta prueba el medio pasa de
incoloro a rojo o rosa (tabla 3) para las
cetohexosas y aldohexosas
(EUNED.Manual de lab para bioquímica).
3.reacción con Seliwanoff
4.4. PRUEBA CON REACTIVO DE
TOLLENS
El reactivo de tollens es esencialmente una
solución de nitrato de plata en hidróxido
de amonio, de cuya mezcla se forma un
ion conocido como diaminoplata Ag
(NH3)2+. Este ion por la acción del
aldehído, se reduce a plata metálica, la
cual se deposita en las paredes del
recipiente, a manera de una espejo de plata
(Fennema. O.1982).
4.reacción de tollens
4.5. PRUEBA DE BIAL
El reactivo de Bial contiene orcinol en
ácido clorhídrico, el cual forma complejos
de coloración sólo con las pentosas.
Esta prueba se basa en la formación de
furfural, al hacer reaccionar pentosas con
HCl y posteriormente con orcinol. El
furfural es un aldehído electrofílico, en
presencia de ácido,adiciona fenoles (con
pérdida de agua) produciendo sustancias
altamente coloreadas, las pentosas originan
una coloración azul-verdosa(Morales,
2005).
En la prueba de Bial este furfural
reacciona con orcinol,dando compuestos
coloridos cuando el monosacárido es una
pentosa(Doria.M.2009).
5.Reacción de Bial
Los monosacáridos se subdividen en
pentosas y en hexosas razón por la cual la
Ribosa que hacen parte del grupo de
pentosas da resultado positivo en el
ensayo(tabla 5). y la glucosa dio negativo,
debido a que se encuentra en el grupo de
las hexosas.
5.CONCLUSIONES
● Se logró identificar de manera
cualitativa los comportamientos de
cada carbohidrato y la manera
como reaccionan.
● las pruebas de Acción reductora
nos ayudaron a seleccionar los
carbohidratos reductores a partir de
la coloración rojiza que obtuvieron.
● La mayoría de los monosacáridos y
algunos disacáridos poseen poder
reductor.
● La prueba de Fehling nos permite
identificar cual es un azúcar
reductor.
6.PREGUNTAS
1.Reacción de molisch: ​Es la prueba
específica para determinar la presencia de
carbohidratos en una muestra, logrando
diferenciar de otras moléculas orgánicas.
Se agrega el ácido sulfúrico para
deshidratar a los carbohidratos
(monosacáridos-deshidratación fuerte;
disacáridos y polisacáridos-deshidratación
suave) y el α-naftol para realizar la
condensación del furfural. (Doria.M.2009).
Reacción de fehling: Se utiliza como
reactivo para la determinación de azúcares
reductores. Sirve para demostrar la
presencia de glucosa, así como para
detectar derivados de ésta tales como la
sacarosa o la fructosa. El ensayo de fehling
se fundamenta en el poder reductor del
grupo carbonilo de los aldehídos. Éste se
oxida a ácido y reduce la sal de cobre en
medio alcalino a óxido de cobre, formando
un precipitado de color rojo.
Reacción de seliwanoff: Se utiliza para
identificar cetosas (hexosas). En este caso
se provoca una reacción de deshidratación
de cetohexosas para formar un
hidroximetilfurfural y luego este reacciona
con resorcinol para formar un compuesto
coloreado.
Reacción de tollens: es un procedimiento
para distinguir un aldehído de una cetona:
se mezcla un agente oxidante suave con un
aldehído o una cetona desconocida; si el
compuesto se oxida, es un aldehído, si no
ocurre reacción, es una cetona. El
complejo de plata amoniacal [Ag(NH3)2]+
en solución básica es el agente oxidante
utilizado en la prueba de Tollens. Si hay
un aldehído presente, éste se oxida a la sal
del ácido RCOO-. Al mismo tiempo, se
produce plata metálica Ag(s) por la
reducción del complejo de plata
amoniacal.
La plata metálica producida en esta
reacción recubre la parte interna del
recipiente y forma un espejo de plata.
Reacción de Bial: contiene orcinol en
ácido clorhídrico, el cual forma complejos
de coloración sólo con las pentosas.
2. ​Un azúcar reductor es todo azúcar con
un grupo carbonilo en su estructura, el cual
puede funcionar como aldehído o cetona
según su ubicación en dicha estructura. Se
llaman azúcares reductores porque poseen
la capacidad de reducir otros compuestos ● Doria. M.(2009).Experimentos de
gracias a la alta reactividad del doble química en microescala para
enlace del oxígeno. El oxígeno del grupo nivel medio superior.Universidad
carbonilo puede reaccionar con un grupo Iberoamericana.
alcohol en una reacción de
oxidación-reducción, formando
hemicetales o hemiacetales en solución
acuosa. Estas reacciones se ven
manifestadas en la ciclación de los
monosacáridos.(F.Louis & F.Mary. 1981). ● Morales.(2005).Reconocimiento
*por que es capaz de reducir su carbono de monosacaridos,disacaridos y
anomérico, formando enlaces glucosídicos de los polisacáridos.Universidad
con otras moléculas de azúcares. La nacionaldel callao.lima-perú.
sacarosa no es reductor ya que no posee un
carbono anomérico libre, y esto también ● Voet.D , Voet.J & Pratt.
no le permite la oxidación (Morales, C.(2007). Fundamentos de
2005). Bioquimica/Fundamental of
Biochemistry.Ed.Médica
4. la plata y sus derivados pueden llegar a Panamericana.
ser productos muy tóxicos al ambiente en
grandes concentraciones ya que es
absorbida por lo tejidos lentamente
ocasionando pigmentación en los mismos
de un color negruzco. Puede ocasionar
daños irreversibles en tejidos renales,
hepáticos pulmonares y cerebrales.

7. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

● Fieser.L &
Fieser.M.(1981).Quimica
orgánica fundamental.editorial
Reverte.
● Durst.H & Gokel.
G.(1985).Química orgánica
experimental.Editorial Reverte.

● Fennema.O.(1982).Introducción
a la ciencia de los
alimentos.Editorial Reverte.
.