Instituto Politécnico Nacional

Escuela Superior de Ingeniería Química e Industrias Extractivas

Laboratorio de Técnicas de Separación. Optativa III

“Practica No.2 Purga Estabilización”

Profesor: Yair Cruz Narváez

Alumna: Vargas López Mónica Yarelly

3IM76

Fecha de entrega: 12/septiembre/2019

 Objetivos
 Conocer el funcionamiento de HPLC
 Aprender a purgar la bomba
 Aprender a estabilizar y manejar el equipo de HPLC

Antecedentes
HPLC.- Es una técnica utilizada para separar los componentes de una mezcla, que se lleva a cabo entre dos fases
una fija que puede ser un sólido, un líquido, un gel, un tamiz molecular o una resina intercambiadora de iones
soportados y una móvil que es un líquido a alta presión.
Alcances: Para sustancias:
• Termolábiles
• Compuestos iónicos
• Polímeros
• Macromoléculas

La bomba era la parte más importante del

sistema. Genera un flujo de eluyente desde
el depósito de disolvente al sistema, para
poder generar la alta presión.
Se coloca un inyector al lado de la
bomba lo más útil es una jeringa, y la
muestra se introduce en el flujo de
eluyente

La separación se realiza dentro de la

columna; por lo tanto, se puede decir que la
columna es el corazón de un sistema LC.

El eluyente utilizado para el análisis de LC puede

contener gases como el oxígeno, Cuando hay gas
presente en el eluyente, esto se detecta como ruido
y causa una línea de base inestable
 Metodología para la purga, estabilización y manejo del HPLC

Primero encender el módulo de Después encender el módulo de bombeo por

desgasificación directamente a la corriente donde pasa la fase móvil.
de luz.

Finalmente encender el detector.

 Tomar la jeringa de 100 ml y colocarla en la válvula
de purga. Luego abrir la válvula varias veces a la
izquierda hasta él llegue.

Purgar las líneas Ay B, jalando la jeringa 5 ml. Con el

fin de sacar cualquier burbuja que este en la línea.

Prender el software, elegir el programa a utilizar y crear el método

a utilizar con datos proporcionados por el profesor, para
estabilizar el equipo.
Correr el método y esperar a que finalice el análisis, Cuando ya se estabilice el equipo inyectar la
después apagar el software y equipo. muestra a analizar,

 https://www.youtube.com/watch?v=MaAAxmyV0uw

Conclusión
Es de suma importancia conocer el manejo de este equipo ya que si no se sabe bien manipularlo desde el
encendido y programarlo nuestro análisis no se dará eficientemente, y lo más importante se tiene que purgar y
estabilizar el equipo para poder hacer nuestros análisis. Es importante también tener valores de operación que se
encuentre en los rangos permitidos para que no se descomponga el equipo.

Bibliografía
 Potnuri, N., Rao, G. & Prasad, R. DEVELOPMENT AND VALIDATION OF RP-HPLC METHOD FOR
THE ESTIMATION OF SITAFLOXACIN IN BULK AND PHARMACEUTICAL DOSAGE FORMS
Original Article. (2014).
 Principios de análisis instrumental - Douglas A. Skoog, F. James Holler, Timothy A. Nieman
 http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/19630/Capitulo2.pdf