Академический Документы
Профессиональный Документы
Культура Документы
72 años
VICERRECTORÍA ACADÉMICA
FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD
PROGRAMA BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
NÚCLEO TEMÁTICO
PREVENCIÓN Y DIAGNÓSTICO CLÍNICO DE ENFERMEDADES
HEMATOLÓGICAS E INMUNOLÓGICAS EN SERES VIVOS
COMPONENTE TEMÁTICO
HEMATOLOGÍA GENERAL I
DOCENTES
ESP. BLANCA AIRETH DAZA MORA
ESP. JULIE VIVIANA VELANDIA C. Ms (C)
1 – OBJETIVO
Sensibilizar al estudiante acerca de la importancia de conocer y aplicar las normas de
bioseguridad y el control de calidad en la profesión de Bacteriología y Laboratorio Clínico
2 - PRELABORATORIO
3 - MARCO TEÓRICO
BIOSEGURIDAD
Los laboratorios clínicos hacen parte de un área del cual emergen muchos agentes
potencialmente agresivos, tanto para la salud de las personas que en ellos laboran como
para las instalaciones de este.
Por lo tanto, todos los procedimientos analíticos pueden acarrear riesgos muchas veces
incalculable, que se puede ver potencializado por la adquisición de nuevas técnicas,
productos químicos y biológicos, así como la implementación de nuevos equipos.
(martinez, 2009)
Por lo demás existe una serie de riesgos que pueden causar daño a las personas que
se encuentran dentro de él, tales como las muestras de los pacientes, las agujas,
sustancias químicas, reactivos, elementos de vidrio, entre otros. Mediante el
conocimiento de las normas de bioseguridad se busca disminuir el riesgo de accidentes
laborales en este aspecto. A nivel del laboratorio de hematología, la exposición a sangre
y líquidos corporales es uno de los mayores riesgos. En 1991, la Occupational Safety
and Health Administration (OSHA) emitió la norma de Exposición ocupacional a los
patógenos transmitidos por sangre, la cual especifica las precauciones universales para
proteger al personal de laboratorio.
Las siguientes normas de bioseguridad son sugeridas por la OSHA y deben ser
aplicadas por todos los laboratorios:
Losguantesdebenser
desechados en BOLSA ROJA
El gobierno colombiano regula una serie de medidas en busca de asegurar tanto a las
personas que laboran en áreas con posibles riesgos biológicos como a los usuarios de
los mismos, es así como el Ministerio de Salud mediante el decreto 2676 del año
2000, reglamentó la gestión integral de los residuos hospitalarios y similares y por
medio del Ministerio del Medio Ambiente mediante la Resolución Número 01164
de 2002, optó el Manual de Procedimientos para la Gestión Integral de los Residuos
Hospitalarios similares.
1 – OBJETIVO
Adquirir los conceptos y habilidades básicas para una adecuada obtención de muestra
sanguínea.
2 – PRELABORATORIO
3 - MARCO TEÓRICO
TOMA DE MUESTRA
Dentro de las recomendaciones para una adecuada atención de los pacientes tenemos:
Ser amable, saludar y sonreír, siempre se debe pensar como nos gusta que nos
atiendan, así como nos gustaría a nosotros, así atender a los demás, pensar que
es un familiar y atenderlo como tal. Hacer sentir importante al paciente.
Saber qué cantidad de muestra se necesita y que especificaciones debe tener la
muestra, es decir, si se debe tomar con o sin anticoagulante y que anticoagulante
se debe usar, que cantidad de muestra se necesita para el procedimiento y
obtener suficiente cantidad de manera que no se necesite volver a llamar al
paciente para tomar nueva muestra.
Hacer que el paciente y los familiares se sientan cómodos, el lugar de toma de
muestra debe ser agradable, con suficiente luz, espacio y ventilación.
El profesional que toma la muestra debe transmitir seguridad y profesionalismo
en el procedimiento que va a realizar.
Respetar las normas de bioseguridad. Todas las muestras biológicas son
potencialmente infecciosas. Vestir todos los elementos de barrera esenciales
para este procedimiento, siempre deben lucir impecables.
ANTICOAGULANTES
Los anticoagulantes son sustancias que como su nombre lo dice previenen la realización
del proceso de coagulación, existen diferentes tipos de ellos, en polvo o líquidos. Debe
seleccionarse siempre el tipo de anticoagulante apropiado para el estudio que se va a
realizar y la adecuada proporción de anticoagulante – sangre.
Estos compuestos realizan su acción quelando el calcio (Ca++), fijándolo pero sin llegar
a precipitarlo. Se ha empleado sales EDTA disódicas, dipotásicas y tripotásicas siendo
las de potasio las más recomendadas por ser más soluble en la sangre. El EDTA-K3, al
suministrarse en forma líquida, puede ejercer alguna dilución sobre la muestra total de
sangre, además se ha observado el inconveniente de que a determinada concentración
disminuye el tamaño de los glóbulos rojos (VCM), especialmente después de 2 horas
de tomada la muestra y puede inducir agregación plaquetaria in Vitro, lo que puede
causar una falsa trombocitopenia cuando se realiza en conteo mediante recuento
electrónico. Por todo esto el comité internacional para la estandarización en hematología
(ICSH), aconseja como anticoagulante a elección para la realización de cuadros
hemáticos a la sal dipotásica de EDTA (EDTA-K2) y menciona estas cuatro ventajas:
Respeta la morfología de los glóbulos rojos y leucocitos, de manera que permite
la realización del extendido de frotis de sangre periférico después de 2 horas de
haberse tomado la muestra.
Asegura la conservación de las células sanguíneas durante 24 horas si la sangre
se mantiene a 40C
Cuando se suministra de manera seca no ejerce ninguna acción de dilución
Inhibe la aglutinación de plaquetas
Se utiliza con menos frecuencia y es recomendado al igual que el citrato de sodio para
las pruebas de hemostasia. Se emplea en forma de solución de oxalato sódico (0.1M)
en la proporción de un cuarto (1 volumen de solución y 4 volúmenes de sangre).
Las compañías comerciales proveen los tubos para recolectar la muestra con los
respectivos anticoagulantes, es importante tener en cuenta las recomendaciones del
fabricante en cuanto a cantidad de muestra requerida, fecha de caducidad, manera de
mezclar, entre otros.
A. ORDEN MÉDICA:
Las venas superficiales de la cara anterior del antebrazo son las más comunes para la
venopunción. Las tres venas principales que se utilizan son: vena cefálica, ubicada en
la parte superior del antebrazo y del lado del pulgar de la mano; vena basílica, ubicada
en la parte inferior del antebrazo y del lado del dedo meñique de la mano; vena cubital
mediana, que conecta las venas basílica y cefálica en la fosa anticubital (flexión del
codo) y es la vena de elección
Si el paciente aprieta el puño después de aplicar el torniquete la vena se torna más
prominente. El Bacteriólogo debe palpar la vena con su dedo índice PARA determinar
la profundidad, la dirección y el diámetro. Si en ninguno de los brazos se puede hallar
la vena, se examinan las venas del lado dorsal de la muñeca, la mano o el pie. Si el
profesional no percibe la vena, se sugiere solicitar la ayuda a un colega de mayor
experiencia en este aspecto.
D. PROCEDIMIENTO:
E. ORDEN DE LA TOMA
PUNCIÓN CAPILAR
PUNCIÓN EN TALÓN
Es el método de elección para los pacientes neonatos y los niños antes de que empiecen
a caminar. El sitio a elección son las áreas laterales del talón
PROCEDIMIENTO:
5. POST LABORATORIO
1. Indique que puede causar hemolisis en la muestra sanguínea y coagulo en
muestras recolectadas en tubos con anticoagulante.
2. ¿Cuál es el calibre de la aguja que se utiliza en adultos para la toma de muestra?
3. Dibuje los tubos según el orden de toma de muestra especificando cuál es su
aditivo y color del tubo correspondiente a cada uno de ellos.
4. Realice un mapa mental plasmando el procedimiento adecuado de la toma de
muestra.
BIBLIOGRAFÍA
1 – OBJETIVO
2 - PRELABORATORIO
1. ¿Cuáles son las partes de extendido de sangre periférica?
2. ¿Cuál es la coloración que se emplea para el extendido de sangre periférica?
Explique brevemente su fundamento
3. ¿Cuál es la zona ideal de lectura del extendido de sangre periférica y dibújelo?
¿Por qué esta zona es la ideal?
4. Que parámetros conforman el cuadro rojo, cuadro blanco y plaquetas
5. ¿En qué objetivo se debe ubicar la zona ideal de lectura del extendido de
sangre periférica y en cual se realiza el recuento celular?
3 - MARCO TEÓRICO
Una lámina extensora que tenga borde liso, suave y de esquinas romas
Tener varias láminas nuevas y desengrasadas
Colocar una gota de tamaño adecuado, si es demasiado grande el extendido
quedará muy grueso o muy largo y si la gota es muy pequeña, los extendidos
quedaran muy cortos o muy delgados.
El extendido debe cubrir alrededor de dos tercios a tres cuartas partes de la longitud del
portaobjeto
Debe ser parejo, sin irregularidades, agujeros o estrías
COLORACION DE WRIGHT
Lleva el nombre de James Homer Wright, su descubridor, que la obtuvo a partir de una
modificación de la tinción de Romanowsky, en 1902. Es una coloración policromática,
la cual está constituida fundamentalmente por la combinación de eosina, componente
ácido y azul de metileno, componente básico así como sus derivados por oxidación del
mismo, que se conocen con los nombres de azures A, B, y C. Estos colorantes son muy
sensibles a los cambios de PH de las diferentes estructuras celulares, de manera que
las que tienen carácter básico fijan eosina, y las que poseen características ácidas, fijan
el azul de metileno. La afinidad de las granulaciones por los colorantes permite clasificar
los polimorfonucleares en tres tipos de células, los eosinófilos cuyos gránulos tienen
características básicas, fijan el colorante ácido, tiñéndose de naranja. Los gránulos de
basófilo poseen carácter ácido, fijando el colorante básico de manera que se tiñen de
color azul oscuro. Los gránulos del neutrófilo poseen características neutras de manera
que fijan ambos colorantes, tomando un color pardo rojizo. Los azures tiñen de color
púrpura las granulaciones primarias o azurófilos de los neutrófilos, promielocitos,
monocitos y algunos linfocitos. Del mismo modo tiñen ciertas inclusiones eritrocitarias
derivadas de la cariorrexis (punteado basófilo) o los parásitos del paludismo.
7- BIBLIOGRAFÍA
CAR – RODAK, Atlas de hematología clínica. Editorial Medica Panamericana, tercera edición
2010
LOPEZ BORRASCA, Antonio. Enciclopedia Iberoamericana de Hematología Ediciones
Universidad de Salamanca. Madrid . 1992.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología Clínica. 2ª ed. Manual Moderno. México. 2002
MIALE, Jhon. Hematología. Medicina del laboratorio. Reverté. Barcelona. 1985.
OSORIO SOLIS, Guido Hematología. Técnicas y procedimientos de laboratorio Mediterráneo.
Santiago. 1996.
ROBERT S. HILLMAN. Manual de hematología. El manual moderno. 2 ed. 1998.
RODAK BF. Hematología: Fundamentos y aplicaciones clínicas. 2ed. Buenos Aires Médica
Panamericana. 2004
RUIZ, ARGUELLES. Fundamentos de Hematología. Médica Panamericana. México. 2000
SANS-SABRAFEN J. Hematología Clínica. 4ª ed. Madrid; Harcourt S. A. 2001
VIVES, Joan Lluis. Manual de Técnicas de laboratorio en Hematología. Salvat. Barcelona. 1998.
WILLIAM WILLIAMS. Manual de Hematología. MC Graw Hill. 6 ed. 2001.
2 – PRELABORATORIO
3 - MARCO TEÓRICO
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de 13 x 100
- Pipetas de 5 - 50µl
- Pipetas automáticas de 1000 µl
- Reactivo de Turck (ácido acético al 3%)
- Cámara de neubauer
- Laminillas de cuarzo
PROCEDIMIENTO:
Enfocar la cámara en aumento de 10x y ubicar el cubículo A para iniciar el conteo de las
células nucleadas, se debe contar los cuatro cuadrantes, A, B, C y D, sumar todas las
células contadas y hacer el cálculo según la siguiente fórmula:
Cámara de neubauer.
Foto tomada de: RODAK Bernadette F. Hematología Fundamentos y aplicaciones
clínicas Segunda edición, pág. 157
CAUSAS DE ERROR:
Los normoblastos se cuentan fuera de los 100 leucocitos ya que son células nucleadas
de la línea eritroide. Cuando el recuento es mayor a 10 normoblastos en 100 leucocitos
hay que hacer corrección del valor del número de leucocitos ya que por ser células
nucleadas no se diferencian al realizarse el recuento tanto manual como automatizado
de leucocitos. La fórmula para realizar dicha corrección es:
NORMOBLASTO O
GLOBULO ROJO NUCLEADO
6. POSTLABORATORIO
¿Qué es leucocitosis y leucopenia y en que ocasiones se presenta?
¿Qué es valor absoluto y valor relativo en los leucocitos?
¿Cuál es el valor de referencia de cada una de las células observadas en la
práctica?
Como se denomina el aumento y la disminución de cada una de las células,
por que ocurre estas alteraciones y mencione algunas de las patologías que se
presentan con cada una de las células
7- BIBLIOGRAFÍA
CAR – RODAK, Atlas de hematología clínica. Editorial Medica Panamericana, tercera edición
2010
LOPEZ BORRASCA, Antonio. Enciclopedia Iberoamericana de Hematología Ediciones
Universidad de Salamanca. Madrid . 1992.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología Clínica. 2ª ed. Manual Moderno. México. 2002
MIALE, Jhon. Hematología. Medicina del laboratorio. Reverté. Barcelona. 1985.
OSORIO SOLIS, Guido Hematología. Técnicas y procedimientos de laboratorio Mediterráneo.
Santiago. 1996.
ROBERT S. HILLMAN. Manual de hematología. El manual moderno. 2 ed. 1998.
RODAK BF. Hematología: Fundamentos y aplicaciones clínicas. 2ed. Buenos Aires Médica
Panamericana. 2004
RUIZ, ARGUELLES. Fundamentos de Hematología. Médica Panamericana. México. 2000
SANS-SABRAFEN J. Hematología Clínica. 4ª ed. Madrid; Harcourt S. A. 2001
VIVES, Joan Lluis. Manual de Técnicas de laboratorio en Hematología. Salvat. Barcelona. 1998.
WILLIAM WILLIAMS. Manual de Hematología. MC Graw Hill. 6 ed. 2001.
1 – OBJETIVO
Adquirir las habilidades para la realización de hematocrito, hemoglobina y
velocidad de sedimentación manual.
Correlacionar la citometría hematológica del cuadro rojo, a partir de la valoración
de los diferentes parámetros que lo conforman.
2 - PRELABORATORIO
1. ¿Qué parámetros conforman el cuadro rojo y qué importancia tiene cada uno
de ellos?
2. ¿Qué es el hematocrito y como se realiza de manera manual?
3. Mencione los valores de referencia de hemoglobina y hematocrito
4. ¿Qué es la velocidad de sedimentación globular, cuales son las etapas de la
velocidad de sedimentación globular?
5. ¿Cuál es el valor de referencia de la técnica de wintrobe?
3 - MARCO TEÓRICO
HEMATOCRITO
PROCEDIMIENTO MANUAL
Llenar tres cuartas partes de un tubo capilar, puede ser heparinizado, en tal caso
se emplea sangre sin anticoagulante o un capilar sin anticoagulante cuando se
emplea sangre con EDTA.
Limpiar la sangre que quede por fuera del tubo capilar
Sellar uno de los extremos con plastilina
Colocar los capilares en la microcentrífuga de manera equilibrada
Tapar la microcentrífuga
Centrifugar durante 5 minutos entre 10.000 a 15.000 rpm
Leer el valor del hematocrito en los dispositivos de lectura, colocar donde termina
la plastilina y empieza los glóbulos rojos en cero, donde termina el plasma en
100 y extrapolar donde termina los glóbulos rojos en la reglilla, no se debe incluir
la capa de blancos.
HEMOGLOBINA
La hemoglobina es una proteína compleja constituida por el grupo hem que contiene
hierro y le da el color rojo al eritrocito, y una porción proteínica, la globina, que está
compuesta por cuatro cadenas polipeptídicas (cadenas de aminoácidos), que
comprenden dos cadenas alfa y dos cadenas beta. La hemoglobina es la principal
proteína de transporte de oxígeno en el organismo, es capaz de fijar eficientemente el
oxígeno a medida que este entra en los alveolos pulmonares durante la respiración,
también es capaz de liberarlo al medio extracelular cuando los eritrocitos circulan a
través de los capilares de los tejidos
HEMOGLOBINA
EQUIPO HUMAMETER HB PLUS (Marca HUMAN)
PRINCIPIO DE LA PRUEBA
El reactivo en este caso NaOH 0.1 mol/L, forma con la hemoglobina y son sus variantes
un complejo que se detecta por fotometría. La intensidad del color es proporcional a la
concentración de hemoglobina en la muestra analizada. También se miden todas las
especies y derivados de la hemoglobina clínicamente relevantes, incluida la
hemoglobina fetal, la sulfahemoglobina, la metahemoglobina y carboxihemoglobina.
REACTIVO
Tensioactivos 2.5 %
NaOH 0.1 mol/l
PROCEDIMIENTO
Las muestras de sangre pueden ser obtenidas con anticoagulante EDTA, heparina,
citrato de sodio y citrato-fosfato-dextrosa CPD o sin anticoagulante. La sangre total
capilar debe utilizarse inmediatamente antes de que se produzca la coagulación.
MANERA DE USO:
Conectar el equipo
Accionar el interruptor principal para prender el equipo
El indicador “blank” comienza a parpadear solicitando la medición del blanco
Introduzca una cubeta sin usar en el portacubetas del fotómetro, de manera que
las superficies lisas deben estar colocadas de derecha a izquierda como lo
indican las flechas.
Oprimir el botón READ para medir la absorbancia del blanco
El indicador “blank” deja de parpadear y se oprime ENTER para que el equipo
almacene el dato.
Luego aparece SAMPLE 1, indicando que el equipo está listo para analizar la
primera muestra.
Se coloca el tubo con la muestra No1 en el portacubetas del fotómetro, se oprime
READ para leer la muestra, el equipo muestra en pantalla la absorbancia en la
parte superior y en la parte inferior la concentración de la hemoglobina en g/dl.
Oprimir ENTER para almacenar el resultado obtenido.
Colocar la segunda muestra y proceder de la misma manera, así sucesivamente
hasta leer todas las muestras necesarias
Si se requiere nuevamente medición del blanco. Pulsar simultáneamente los
botones (SHIFT) y READ, el botón BLANCO parpadeará para pasar nuevamente
el blanco y guardar el dato.
Para la realización del procedimiento, se emplea las cubetas Reagent Hb.
Cuando los glóbulos rojos son pequeños (VCM bajo), o son escasos (anemia), y
aumento de la concentración en plasma de proteínas como fibrinógeno, globulinas,
plasminógeno, haptoglobina, proteína C Reactiva, ceruloplasmina, alfa 1 antitripsina,
inmunoglobulinas se presenta un aumento en la velocidad de sedimentación globular.
Los glóbulos rojos presentan en su superficie ácido ciálico que le brinda una intensa
carga negativa conocida como potencial Z, de manera que se repelen unos a otros y
hace que permanezcan separados, cuando existe un aumento de proteínas de fase
aguda, especialmente fibrinógeno e inmunoglobulinas reducen el potencial Z de los
eritrocitos permitiendo que se aglutinen más rápidamente y formando las llamadas pilas
de moneda las cuales tienen un mayor peso y por consiguiente van a sedimentarse y
acumularse en el fondo del tubo más rápidamente.
MATERIALES:
Tubos de Wintrobe
Tubos de Westergreen – Eurotubo
Sangre anticoagulada
Aguja Pasteur
Jeringa
Soporte para los tubos de wintrobe
PROCEDIMIENTO
MÉTODO DE EUROTUBO: se coloca el tubo dentro del tubo donde se tomó la muestra
para el cuadro hemático, se realiza presión para permitir el llenado completo del tubo al
vació, no deben quedar burbujas. Se deja en posición perfectamente vertical por espacio
de 60 minutos, al cabo de los cuales se cuenta los milímetros que ha descendido los
glóbulos rojos.
PROCEDIMIENTO
Tomar la muestra en tubos al vació que contienen solución de citrato de sodio
al 3.8% como anticoagulante, el volumen requerido es de aproximadamente 2
ml. La tolerancia de del equipo con respecto al nivel es de + 5 mm y – 20 mm.
Si esto pasa el instrumento mostrará un “LE” como mensaje de error de nivel.
Mezclar muy bien la muestra por aproximadamente 5 minutos antes de insertar
el tubo en el instrumento.
Encender el equipo usando el botón ubicado en la parte posterior del mismo
Por alrededor de un minuto, el display muestra “test” en ambas filas mientras los
componentes electrónicos y mecánicos son chequeados.
Luego el instrumento está listo, aparece el mensaje LOAD, para comenzar el
ciclo del análisis
El test comienza cuando el tubo es insertado en el instrumento.
No remover el tubo de esta posición antes de haber terminado la prueba. Si esto
sucede el test será abortado
12 minutos después de comenzado el test, finalizará reportando en la pantalla el
resultado de 1 hora en la primera fila y el resultado de 2 horas en la segunda
línea.
Estos resultados desaparecen si se coloca otro tubo en la misma posición.
Equipo HUMASED 20
ERRORES ANALITICOS
Resultados bajos:
Posible coagulo en la muestra. Repetir el test con una nueva muestra
Cuando la muestra ha sido recolectada por más de dos horas
Cantidad de la muestra insuficiente, alterando la relación sangre/anticoagulante,
afectando el resultado del test
Resultados altos
La muestra no está correctamente mezclada
Si el instrumento ha sido instalado en una superficie que no tiene un nivel
correcto. Un 3% de inclinación puede incrementar la lectura un 30 %
Cantidad de muestra excesiva, alterando la relación sangre/anticoagulante
afectando el resultado del test.
4 - MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPOS
6. POSTLABORATORIO
1. ¿Qué es anemia y que parámetro del cuadro rojo nos indica que hay anemia?
2. ¿Cómo se clasifican las anemias?
3. ¿Que son los índices eritrocitarios? como se determinan
4. Porque la VSG es importante para el seguimiento de enfermedades inflamatorias
e infecciosas.
5. Nombre un estado fisiológico que nos pueda acelerar la VSG
7- BIBLIOGRAFÍA
CAR – RODAK, Atlas de hematología clínica. Editorial Medica Panamericana, tercera edición
2010
LOPEZ BORRASCA, Antonio. Enciclopedia Iberoamericana de Hematología Ediciones
Universidad de Salamanca. Madrid . 1992.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología Clínica. 2ª ed. Manual Moderno. México. 2002
MIALE, Jhon. Hematología. Medicina del laboratorio. Reverté. Barcelona. 1985.
OSORIO SOLIS, Guido Hematología. Técnicas y procedimientos de laboratorio Mediterráneo.
Santiago. 1996.
ROBERT S. HILLMAN. Manual de hematología. El manual moderno. 2 ed. 1998.
RODAK BF. Hematología: Fundamentos y aplicaciones clínicas. 2ed. Buenos Aires Médica
Panamericana. 2004
RUIZ, ARGUELLES. Fundamentos de Hematología. Médica Panamericana. México. 2000
SANS-SABRAFEN J. Hematología Clínica. 4ª ed. Madrid; Harcourt S. A. 2001
VIVES, Joan Lluis. Manual de Técnicas de laboratorio en Hematología. Salvat. Barcelona. 1998.
WILLIAM WILLIAMS. Manual de Hematología. MC Graw Hill. 6 ed. 2001.
1-OBJETIVO
2-PRELABORATORIO
Cuál es la importancia de realizar el recuento de reticulocitos?
Porque se realiza la corrección del recuento de reticulocitos?
Cuál es la diferencia entre anemia regenerativa y arregenerativa? De tres
ejemplos de ellas?
3- MARCO TEORICO
4- MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de 13 x 100
- Pipetas de Pasteur
- Pipetas automáticas de 50 µl
- Microscopio
- Aceite de inmersión
- Laminas extensoras
- Lamina Portaobjetos
- Colorante azul de cresil brillante
- Incubadora (37ºC)
5- PROCEDIMIENTO
1. En tubo pequeño dispensar dos gotas de sangre total y dos gotas del
colorante.
2. Mezclar suavemente y dejar de 5 a 10 Minutos a 37ºC
3. Realice un extendido con la mezcla anterior, dejar secar y observar al
microscopio objetivo de 100X con aceite de inmersión.
RECUERDE que el sitio ideal para este recuento es donde se encuentre
100 glóbulos rojos y se cuenta en 10 campos microscópicos.
(Entre más inmadura la célula más restos de RNA posee en su interior).
4. Realice los cálculos de la siguiente manera:
6- REGISTROS Y REPORTES
Se informan en porcentaje.
Es importante correlacionar el porcentaje de reticulocitos con el grado de policromatofilia
en el extendido de sangre periférica:
7- POST LABORATORIO
1. Correlacione los valores de los reticulocitos con la medula osea
normoproliferativa, hipoproliferativa e hiperproliferativa.
2. En las siguientes anemias como esperaría obtener los resultados de los
reticulocitos:
Anemia megaloblastica
Anemia ferropenica en tratamiento
Anemia hemolítica
Anemia aplasica
Anemia drepanocitica
3. Que es el IPR y cuál es su utilidad?
BIBLIOGRAFIA
CAR – RODAK, Atlas de hematología clínica. Editorial Medica Panamericana, tercera edición
2010
LOPEZ BORRASCA, Antonio. Enciclopedia Iberoamericana de Hematología Ediciones
Universidad de Salamanca. Madrid . 1992.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología Clínica. 2ª ed. Manual Moderno. México. 2002
MIALE, Jhon. Hematología. Medicina del laboratorio. Reverté. Barcelona. 1985.
OSORIO SOLIS, Guido Hematología. Técnicas y procedimientos de laboratorio Mediterráneo.
Santiago. 1996.
ROBERT S. HILLMAN. Manual de hematología. El manual moderno. 2 ed. 1998.
RODAK BF. Hematología: Fundamentos y aplicaciones clínicas. 2ed. Buenos Aires Médica
Panamericana. 2004
RUIZ, ARGUELLES. Fundamentos de Hematología. Médica Panamericana. México. 2000
SANS-SABRAFEN J. Hematología Clínica. 4ª ed. Madrid; Harcourt S. A. 2001
VIVES, Joan Lluis. Manual de Técnicas de laboratorio en Hematología. Salvat. Barcelona. 1998.
WILLIAM WILLIAMS. Manual de Hematología. MC Graw Hill. 6 ed. 2001.
DUARTE ROMERO, Monica. Manual del hemograma y el frotis de sangre periferica. Universidad
de los andes, Facultad de medicina, Ediciones Uniandes,2013.
DUARTE ROMERO, Monica. Hematologia Casos clínicos: preguntas y respuestas. Universidad
de los andes, Facultad de medicina, Ediciones Uniandes,2013.
CUADRO PLAQUETARIO
1 – OBJETIVO
Adquirir las habilidades para la realización del recuento de plaquetas en cámara
y en lámina
Correlacionar la citometría hematológica del cuadro plaquetario, a partir de la
valoración del recuento total de plaquetas y la observación morfológica en lámina
2 - PRELABORATORIO
3 - MARCO TEÓRICO
RECUENTO DE PLAQUETAS
MATERIALES Y REACTIVOS:
- Tubos de 13 x 100
- Pipetas de 2 ml
- Pipetas automáticas de 20 µl
- Reactivo de oxalato de amonio al 1 % filtrado
- Cámara de neubauer
- Laminillas de cuarzo
PROCEDIMIENTO:
Enfocar la cámara en aumento de 40x y ubicar el cubículo central para iniciar el conteo
de las plaquetas, se debe contar todo el cubículo central (25 cuadrados pequeños del
cuadrante central) y hacer el cálculo según la siguiente fórmula:
Las plaquetas son células sin núcleo, tienen un diámetro de 2 a 4 µm y de forma redonda
u ovalada, se observan con ligeras proyecciones, es importante aprender a conocerlas
porque así se evita confundirlas con detritus o fantasmas de eritrocitos. Por esta razón
es importante filtrar el reactivo previamente y mantener tanto la cámara como la laminilla
perfectamente limpias.
CAUSAS DE ERROR:
La muestra debe obtenerse de manera apropiada, no deben existir coágulos
porque allí se aglutinan las plaquetas y se obtendrá un resultado erróneo.
Cuando se hace por punción capilar debe realizarse rápidamente porque se
inicia el proceso de agregación plaquetaria, si hay demora en la llenada de la
pipeta, las plaquetas se agregan y van a darse un resultado inapropiado.
Todos los elementos deben estar perfectamente limpios
Si da valores muy bajos o muy altos se aconseja cambiar la dilución y por
consiguiente el cálculo
En 10X se ubica un campo donde los glóbulos rojos apenan se toquen entre sí, se
cuentan el número de plaquetas que existan en 10 campos y se saca el promedio. Este
se multiplica por 21.000. Se informa en plaquetas / mm³
Cuando hay trombocitopenias siempre se deben confirmar por dos métodos y realizar
el método de referencia.
6. POSTLABORATORIO
1. ¿Cuál es la zona ideal para el recuento en lámina de plaquetas? ¿Por
qué?
2. Nombre y explique las funciones de las plaquetas
3. ¿Por qué se producen las trombopenias?
4. ¿En qué patologías podemos encontrar trombocitosis?
7- BIBLIOGRAFÍA
CAR – RODAK, Atlas de hematología clínica. Editorial Medica Panamericana, tercera edición
2010
LOPEZ BORRASCA, Antonio. Enciclopedia Iberoamericana de Hematología Ediciones
Universidad de Salamanca. Madrid . 1992.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología Clínica. 2ª ed. Manual Moderno. México. 2002
MIALE, Jhon. Hematología. Medicina del laboratorio. Reverté. Barcelona. 1985.
OSORIO SOLIS, Guido Hematología. Técnicas y procedimientos de laboratorio Mediterráneo.
Santiago. 1996.
ROBERT S. HILLMAN. Manual de hematología. El manual moderno. 2 ed. 1998.
RODAK BF. Hematología: Fundamentos y aplicaciones clínicas. 2ed. Buenos Aires Médica
Panamericana. 2004
RUIZ, ARGUELLES. Fundamentos de Hematología. Médica Panamericana. México. 2000
SANS-SABRAFEN J. Hematología Clínica. 4ª ed. Madrid; Harcourt S. A. 2001
VIVES, Joan Lluis. Manual de Técnicas de laboratorio en Hematología. Salvat. Barcelona. 1998.
WILLIAM WILLIAMS. Manual de Hematología. MC Graw Hill. 6 ed. 2001.
1 – OBJETIVO
Adquirir las habilidades para la realización del extendido de sangre periférico.
Adquirir experiencia en la observación de las características de las células
sanguíneas.
Correlacionar los datos aportados en la citometría hematológica del cuadro con
la observación morfológica en lámina
2 - PRELABORATORIO
3 - MARCO TEÓRICO
Se emplea para:
• Detectar las alteraciones cuantitativas y/o cualitativas de las células
sanguíneas.
• Establecer o confirmar un diagnóstico
• Seleccionar otros exámenes para diagnóstico diferencial
• Definir un pronóstico
• Definir terapia
• Vigilar un tratamiento
• Indicador de los efectos colaterales de la quimioterapia y/o radioterapia
La utilidad que brinda es que permite valorar los rasgos morfológicos de las 3
líneas celulares, realizar el recuento diferencial leucocitario, hacer un estimado
cuantitativo de leucocitos y de plaquetas y mirar cómo es la distribución de los
hematíes y plaquetas.
1 - Entre más madura es la célula el citoplasma es menos basófilo, es decir las células
joven o inmadura tiene el citoplasma de un color azul profundo. La excepción a esta
regla es la célula plasmática.
2 - La cromatina nuclear es más densa a medida que la célula madura, las células más
inmaduras poseen una cromatina laxa
Los gránulos neutrófilos son redondos, varían su color de entre rojizo y azul
rojizo, son de tamaño pequeño y puntiformes. Se encuentran en los neutrófilos
Los gránulos azurófilos son de color rojo, forma irregular, sin límites definidos y
difíciles de ver simple vista en los neutrófilos. Se distinguen bien en los linfocitos,
monocitos, células reticulares y de manera característica en los promielocitos.
6 – los blastos tienen un núcleo grande, escasa cantidad de citoplasma, usualmente en
núcleo ocupa ¾ partes de la célula. Generalmente carecen de gránulos, excepto los
blastos de origen mieloide.
PLAQUETA
Son pequeñas, redondas de 2ª a 4 um de diámetro, se observan de color lila con unos
pequeños gránulos en su interior, son fragmentos del citoplasma del megacariocito.
NEUTROFILO
Son el tipo predominante de leucocitos en sangre periférica en una persona adulta,
tiene un tamaño aproximado de 10 a 14 um. Citoplasma de color rosado pálido con
abundante gránulos neutrófilos, distribuidos de manera uniforme en todo el citoplasma.
El núcleo es de color morado, cromatina densa y fragmentada en lóbulos unidos por
puentes de cromatina muy delgados. Presentan de 2 a 4 lóbulos
EOSINOFILOS
Polimorfo nuclear con un diámetro aproximado de 12 um, citoplasma hialino con
gránulos grandes, redondos, refringentes de color naranja que abarcan en citoplasma.
El núcleo es de color morado, cromatina densa, generalmente dividida en dos lóbulos.
BASOFILO
Polimorfonuclear con un diámetro de 12 a 14 um, el citoplasma es rosado pálido aunque
en algunas ocasiones se observa de color azul claro, poseen unos gránulos grandes,
heterogéneos que varían de color azul oscuro y color lila los más pequeños, se
encuentran en toda la célula cubriendo tanto el núcleo como el citoplasma. Los gránulos
son hidrosolubles pudiéndose perder en el momento de la coloración, por esta razón la
cantidad de gránulos de célula a célula. Posee un núcleo morado, denso, que tiende a
lobularse, sin embargo es difícil de distinguir por estar cubierto con los gránulos.
MONOCITO
Célula mononuclear que mide de 14 a 20 um, es la célula más grande en sangre
periférica, el citoplasma es abundante de color azul grisáceo con gránulos azurófilos y
en ocasiones con vacuolas. Núcleo irregular en forma de frijol o riñón, cromatina fina e
irregularmente distribuida con pliegues característicos de la línea monocítica
LINFOCITO
Célula mononuclear con un tamaño variado, la mayoría de veces posee de 8 a 10 um,
sin embargo pueden tener un tamaño de 18 um. Citoplasma variado puede ser escaso
o abundante de color azul claro, puede tener gránulos azurófilos escasos y
generalmente en un solo lado del citoplasma, el núcleo es redondo y la cromatina es
homogénea, densa y grumosa.
AYUDAS EN LA OBSERVACIÓN DE LA MORFOLOGIA DE LEUCOCITOS
Los hematíes son las células más abundantes de la sangre , es una célula en
forma de disco bicóncavo , con un diámetro de 7 micras y un espesor de 2 a 3
micras , no posee núcleo , ni ribosomas , ni mitocondrias, posee un sistema
enzimático para obtener energía, después de la coloración de Wright , se
observa acidófilo por su alto contenido de hemoglobina, , pero no tiene núcleo,
posee membrana citoplasmática formada por una bicapa lipídica de fosfolípidos
, lípidos neutros y glucolípidos, en la que se insertan proteínas algunas de ellas
se extienden por toda la membrana y otras quedan en el interior.
En condiciones normales todos los eritrocitos tienen el mismo tamaño y forma,
son bicóncavos, pero en patologías podemos encontrar alteraciones
morfológicas en forma, tamaño y contenido de hemoglobina.
Normocitico: tamaño normal del eritrocito, 7.2- 7.9 micras con un VCM de 80 –
100 fl
ALTERACIONES DE COLOR
Su aparición refleja alteraciones en el contenido hemoglobínico. Existe
hipocromía cuando los hematíes se tiñen débilmente con la coloración de Wright,
es consecuencia de la disminución del contenido hemoglobínico eritrocitario
luego si no existe una enfermedad que la explique se debe pensar en una anemia
ferropénica o en una talasemia.
POLICROMATOFILIA
Es la presencia de hematíes con tonalidad gris azulada. Su aparición es signo
de inmadurez celular, por lo que suele observarse en anemias regenerativas
(reticulocitosis) o en ciertas anemias arregenerativas acompañada de salida
prematura de reticulocitos a sangre periférica. Los hematíes policromáticos se
caracterizan por su relativo mayor tamaño y su coloración azulada, en
comparación con el resto de los hematíes debido a su elevado contenido de
ARN.
AGLUTINACION ERITROCITARIA
4 - MATERIALES Y REACTIVOS:
- Laminas de extendidos de sangre periférico
- Colorante de Wright
- Microscopios
- Aceite de inmersión
5 - PROCEDIMIENTO:
6. POSTLABORATORIO
Como son las características morfológicas de las células sanguíneas
Como realiza el recuento diferencial leucocitario
Cómo valora las características de los glóbulos rojos
Como hace la correlación de los datos suministrados en el cuadro hemático
automatizado y el extendido de sangre periférico
7- BIBLIOGRAFÍA
CAR – RODAK, Atlas de hematología clínica. Editorial Medica Panamericana, tercera edición
2010
LOPEZ BORRASCA, Antonio. Enciclopedia Iberoamericana de Hematología Ediciones
Universidad de Salamanca. Madrid . 1992.
McKENZIE, Shirlyn. Hematología Clínica. 2ª ed. Manual Moderno. México. 2002
MIALE, Jhon. Hematología. Medicina del laboratorio. Reverté. Barcelona. 1985.
OSORIO SOLIS, Guido Hematología. Técnicas y procedimientos de laboratorio Mediterráneo.
Santiago. 1996.
ROBERT S. HILLMAN. Manual de hematología. El manual moderno. 2 ed. 1998.
RODAK BF. Hematología: Fundamentos y aplicaciones clínicas. 2ed. Buenos Aires Médica
Panamericana. 2004
RUIZ, ARGUELLES. Fundamentos de Hematología. Médica Panamericana. México. 2000
SANS-SABRAFEN J. Hematología Clínica. 4ª ed. Madrid; Harcourt S. A. 2001
VIVES, Joan Lluis. Manual de Técnicas de laboratorio en Hematología. Salvat. Barcelona. 1998.
WILLIAM WILLIAMS. Manual de Hematología. MC Graw Hill. 6 ed. 2001.
ANEXOS
VALORES DE REFERENCIA
Unificados por Docentes Hematología U.C.M.C
Junio 14 del 2007
CUADRO ROJO
SISTEMA CLASICO SISTEMA INTERNACIONAL
RBC 4200000 – 5500000/ µl 4.2 – 5.5 x1012/L
4.2 – 5.5 x 10 /µl
6
LEUCOPENIA
Ligera: 3.000 a 4.999/µl
Moderada: 2.000 a 3.000/µl
Marcada: menos de 2000/µl
ANEMIA
Hemoglobina:
Ligera: 11 – 12 gr/dL
Moderada: 8 – 10.9 gr/dL
Marcada: menos de 8 gr/dL
Trasfusión menos de 7 gr/dL
RDW
Ligera: 14.5 – 17 %
Moderada: 17 – 20 %
Marcada : mayor de 20 %
RETICULOCITOS
Valor relativo 0.5 – 2 %
Recién nacidos: hasta 5 %
Valor Absoluto 25.000 – 50.000 / mm3
TROMBOCITOSIS
• Ligera: 450.000 – 750.000/ µl
• Moderada: 750.000 – 1.000.000/µl
• Marcada: Mayor de 1.000.000/ µl
TROMBOCITOPENIA
• Ligera 100.000 – 150.000 /µl
• Moderada: 50.000 – 100.000 /µl
• Marcada: menos de 50.000 /µl
CARACTERISTICAS DEL GLOBULO ROJO – CLASIFICACION
DE LAS ANEMIAS