TABLA DE CONTENIDO:

TABLA DE CONTENIDO 1

INTRODUCCIÓN 2

OBJETIVOS Error! Bookmark not defined.

FUNDAMENTO TEÓRICO ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL 4

REACTIVOS 5

PREPARACION DE LAS SOLUCIONES AMORTIGUADORAS 5

LECTURA DE ABSORBANCIAS A DIFERENTES pH: 5

CÁLCULOS: 6

ELABORA LA GRAFICA DE A VS PH PARA CADA LONGITUD DE ONDA SELECCIONADA. 6

DETERMINAR LAS RAZONES DE (LN-/hiN) PARA LAS SOLUCIONES 2 AL 6 6

CALCULAR LA MOLARIDAD DE LAS SOLUCIONES PREPARADAS. 9

CONCLUSIONES: ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

RECOMENDACIONES ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

BIBLIOGRAFIA: ERROR! BOOKMARK NOT DEFINED.

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 INTRODUCCIÓN

En este experimento, la espectrofotometría se utiliza para medir el pKa de un indicador ácido-base

conocido como azul de bromotimol. Este indicador (Hln) es un ácido monoprótico y podemos representar
su disociación como sigue:

Hln  H+ + ln-

La expresión de equilibrio para esta disociación se puede escribir como:

PH= pKa – log (Hln)/ (ln)

Esto se puede arreglar para dar:

Log (ln-)/ (Hln) = pH – pKa

Esto está en la ordenada al origen de una ecuación para una línea recta.

Y = mx + b

En donde y es log (ln-)/ (Hln), m = 1 y b = -pKa, por lo tanto, si el término log se grafica contra pH, la pendiente
es 1, la ordenada en el origen es –pKa y la línea debe atravesar el eje del pH en donde pH = pKa

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 DETERMINACIÓN DEL PKa DE UN INDICADOR ÁCIDO-BASE POR ESPECTRO FOTOMETRÍA

OBJETIVOS

 Observar la secuencia de operaciones que se sigue en la determinación de una constante de

equilibrio.
 Elaborar los espectros de absorción del indicador a pH bajo y alto y determinar la longitud de onda
adecuada para las lecturas de absorbancia a diferentes pH del indicador.
 Determinar la constante de ionización del azul de bromotimol.

FUNDAMENTO TEÓRICO

El indicador HIn es un ácido monoprótico que se puede representar como sigue:

HIn H+ + In- ; cuyo pKa está en la siguiente ecuación: = pH – pKa

Esto está en la ordenada al origen de una ecuación para una línea recta y = mx + b
En donde y es log (In-)/ (HIn), m = 1 y b = -pKa. Por lo tanto, si el término log se grafica contra pH, la
pendiente es 1, la ordenada en el origen es –pKa y la línea debe atravesar el eje del pH en donde pH =
pKa. En el último punto (In-) = (HIn) y, por tanto, el log de la razón de estos términos es cero y pH = pKa.
La razón (ln-/HIn) se puede determinar por espectrofometría a longitudes de onda de máxima
absorción de una solución ácida (pH bajo) en la cual el indicador se encuentra en la forma HIn y de
una solución alcalina (pH elevado), donde el indicador se encuentra en la forma In-. Luego se
preparan soluciones buffer de pH alrededor del pKa del indicador y se miden las absorbancias. Estas
soluciones contienen la misma concentración total del indicador (HIn + In-); pero las proporciones
varían con el pH. Graficando A Vs pH se determinan la relación (ln-/HIn).
Este indicador (HIn) es un ácido monoprótico y podemos representar su disociación como sigue:
HIn H+ + In-, donde

[H + ]⌊In− ⌋
Ka =
⌊HIn⌋
Despejando la [H + ] de la ecuacion anterior tenemos que:
[HIn]
[H + ] = Ka −
[In ]
[In]
pK a = pH − log
[HIn− ]
[In]
−log pK a = pK a − Ph
[HIn− ]

Descripción del Experimento

Primero deben verificar la λmax de la forma con mayor absorbencia del indicador, usualmente la
forma básica, en el espectrofotómetro. Luego, ajustan el pH de cinco alícuotas de una solución buffer-
indicadora a valores centrados alrededor del pKa del indicador y entonces miden las absorbencias, A,
de las soluciones resultantes. Llevan estas soluciones a pH bajos para generar la forma ácida pura del
indicador, HIn, y miden su absorbencia, AHIn. Toman otra solución a un pH elevado para generar la
forma básica pura, In-, y determinan su absorbencia, AIn-. Usando la ecuación pKa = pH + log10 [(A -
AIn-) /(AHIn – A)], calculan los pKa’s de las soluciones, o equivalentemente, grafican los datos de la
función logarítmica vs. PH para encontrar la intercepción en x, la cual es el valor del pKa.

MATERIALES, EQUIPOS Y REACTIVOS

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MATERIALES:
 Fiolas de 50 mL (07)
 Fiolas de 500 mL
 Luna de reloj
 Probeta graduada

REACTIVOS
 Azul de bromotimol
 Fosfato dihidrogenado de sodio NaH2PO4 .2H2O
 Fosfato dihidrogenado dipotasico K2H2PO4
 Hidróxido de sodio NaOH
 Etanol(C2H60H)

EQUIPOS:
 Espectrofotómetro
 Balanza analítica
 pH metro

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:

REACTIVOS

 Azul de bromotimol: Disolver 0.05g de reactivo en 50 mL de etanol al 40%.

 Fosfato dihidrógeno de sodio: Disolver 1.2g de NaH2PO4 en agua destilada y diluir a 50 mL.
 Fosfato hidrógeno dipotásico: Disolver 1.7g de K2HPO4 en agua y diluir a 50 mL.
 Hidróxido de sodio: Disolver 1.2g de NaOH en agua y diluir a 10 mL.

PREPARACIÓN DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS

 Disponer siete fiolas limpias de 50mL y colocar en cada una 1 mL de solución de azul de bromotimol
y luego agregar los siguientes volúmenes de soluciones de fosfato:

Fiola N° NaH2PO4 (mL) K2HPO4 (mL)

1 5 0
2 5 1
3 10 5
4 5 10
5 1 5
6 1 10
7 0 5

OBSERVACIONES:

 Se dispuso de fiolas limpias a las que a todas se le adiciono 1mL de solución de azul de bromotimol
y luego se añadió volúmenes de fosfato como se muestra en la tabla anterior.
 A la fiola 7 se le adicionó 2 gotas de Hidróxido de Sodio lo cual le hace más básico en
comparación con las otras fiolas.
 Se diluyo con agua hasta su aforo en cada fiola, se agitó vigorosamente para homogenizarla de
modo que esté lista para la lectura de su pH correspondiente.

GRUPO I GRUPO II
FIOLA PH
N° registrado

Página 4
 1 4.79
FIOLA PH
2 5.83 N° registrado
3 6.83
1 4.78
4 7.51
2 5.76
5 7.85
3 6.81
6 8.30
4 7.47
7 11.65
5 7.78
6 8.17
7 11.64

DETERMINACIÓN DE LAS LONGITUDES DE ONDA DE MÁXIMA ABS ORCIÓN

GRUPO I
 Para la fiola 1 se hizo la lectura de absorbancia al barrido desde 400 hasta 600 donde se observó
que en 429 y 443 nm da su máxima absorción obteniéndose 0,292 de absorbancia.
 Para la fiola 7 se hizo la lectura de absorbancia graduando la longitud de onda al barrido desde
400 hasta 600; se observó su máxima absorción a 616 nm de longitud de onda donde su
absorbancia fue 0.619
GRUPO II
 Para la fiola 1 se hizo la lectura de absorbancia al barrido desde 400 hasta 600 donde se observó
que en 429 y 443 nm da su máxima absorción obteniéndose 0,292 de absorbancia.
 Para la fiola 7 se hizo la lectura de absorbancia graduando la longitud de onda al barrido desde
400 hasta 600; se observó su máxima absorción a 616 nm de longitud de onda donde su
absorbancia fue 0.619

LECTURA DE ABSORBANC IAS A DIFERENTES PH

 Seleccionar dos longitudes de onda de manera que Hln e ln- presenten absorbancias muy
diferentes.
 Medir a estas longitudes de onda las absorbancias de las siete soluciones a 611nm y 431nm.
GRUPO I
Fiola N° pH registrado Absorbancia a 611 nm Absorbancia a 431 nm
1 4.79 0.009 0.227
2 5.83 0.030 0.247
3 6.83 0.123 0.202
4 7.51 0.302 0.159
5 7.85 0.417 0.100
6 8.30 0.504 0.084
7 11.65 0.590 0.040
GRUPO II
Fiola N° pH registrado Absorbancia a 611 nm Absorbancia a 431 nm
1 4.78 0.035 0.238
2 5.76 0.016 0.255
3 6.81 0.125 0.222
4 7.47 0.306 0.143
5 7.78 0.406 0.184
6 8.17 0.509 0.084
7 11.64 0.564 0.040

Página 5
CÁLCULOS:

ELABORA LA GRAFICA DE A VS PH PARA CADA LONGITUD DE ONDA SELECCIONADA.

GRUPO I
y = 0.0052x3 - 0.1238x2 + 0.8954x - 1.7917
ABSORBANCIA Vs PH
1 R² = 0.9869

0.8

0.6 absorbancia vs ph
ABSORBANCIA

0.4
absorbancia vs ph
0.2

0
0 2 4 6 8 10 12 14
-0.2
y = -0.0135x3 + 0.3185x2 - 2.2473x + 4.9631
PH R² = 0.9925

GRUPO II
y = -0.0162x3 + 0.3813x2 - 2.7172x + 6.0889
ABSORBANCIA Vs PH
R² = 0.9952
0.9
0.8
0.7
0.6
ABSORBANCIA

0.5 Series1
0.4 Series2
0.3
Poly. (Series1)
0.2
0.1 Poly. (Series2)
0
-0.1 0 2 4 6 8 10 12 14
PH y = 0.005x3 - 0.1197x2 + 0.8712x - 1.7371
R² = 0.9236

DETERMINAR LAS RAZON ES DE (LN-/HIN) PARA LAS SOLUCIONES 2 AL 6

[In− ] [A − Aa ]
=
[HIn] [Ab − A]
Aa = absorbancia de HIn
Ab = absorbancia de In−
A = absorbancia de la mezcla

GRUPO I
 Considerando datos experimentales a la longitud de onda 431nm
N° fiola A 𝐈𝐧− = 𝐀 − 𝐀𝐚 𝐇𝐈𝐧 = 𝐀𝐛 − 𝐀 [𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] 𝑳𝒐𝒈[𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] PH
2 0.247 0.247-0.227=0.02 0.040-0.247=-0.207 -0.0966 ERROR 5.83
3 0.202 0.202-0.227=-0.025 0.040-0.202=-0.162 0.15432 -0.8115 6.83
4 0.159 0.159-0.227=-0.068 0.040-0.159=-0.119 0.5714 -0.2433 7.51
5 0.100 0.100-0.227=-0.127 0.040-0.100=-0.06 2.1166 0.3256 7.85
6 0.084 0.084-0.227=-0.143 0.040-0.084=-0.044 3.2500 0.51188 8.30

Página 6
 𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn] Vs PH
0.8
0.6 Series1
0.4 Linear (Series1)
𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn]

0.2
0
-0.2 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

-0.4
-0.6 y = 0.9478x - 7.2789
R² = 0.9631
-0.8
-1
PH
y = 0.9478x - 7.2789
El corte que da en el eje x es 7.68
Cálculo de pKa:
PKa=7.68
Ka =antilog (-pKa)=antilog (-7.68)
𝐾𝑎 = 2.0893𝑥 10−8

 Considerando datos experimentales a la longitud de onda 611nm

N° fiola A 𝐈𝐧− = 𝐀 − 𝐀𝐚 𝐇𝐈𝐧 = 𝐀𝐛 − 𝐀 [𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] 𝑳𝒐𝒈[𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] PH
2 0.030 0.030-0.009=0.021 0.590-0.030=0.56 0.0375 -1.42596 5.83
3 0.123 0.123-0.009=0.114 0.590-0.123=0.467 0.2441 -0.6124 6.83
4 0.302 0.302-0.009=0.293 0.590-0.302=0.288 1.01736 0.0074746 7.51
5 0.417 0.417-0.009=0.408 0.590-0.417=0.173 2.35838 0.37261 7.85
6 0.504 0.504-0.009=0.495 0.590-0.504=0.086 5.7558 0.76010 8.30

𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn] Vs PH
1

0.5 Series1
Linear (Series1)
𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn]

0
0 2 4 6 8 10
-0.5

-1
y = 0.8915x - 6.6558
-1.5 R² = 0.9982

-2
PH

y = 0.8915x - 6.6558
El corte que da en el eje x es 7.47
Cálculo de pKa:
PKa=7.47
Ka =antilog (-pKa)=antilog (-7.47)
𝐾𝑎 = 3.3884𝑥 10−8

Página 7
GRUPO II
 Considerando datos experimentales a la longitud de onda 431nm
N° fiola A 𝐈𝐧− = 𝐀 − 𝐀𝐚 𝐇𝐈𝐧 = 𝐀𝐛 − 𝐀 [𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] 𝑳𝒐𝒈[𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] PH
2 0.255 0.255-0.238=0.017 0.040-0.255=-0.215 -0.0791 ERROR 5.83
3 0.222 0.222-0.238=-0.016 0.040-0.222=-0.182 0.0879 -1.0560 6.83
4 0.143 0.143-0.238=-0.095 0.040-0.143=-0.103 0.9223 -0.0351 7.51
5 0.184 0.184-0.238=-0.054 0.040-0.184=-0.144 0.3750 -0.4260 7.85
6 0.084 0.084-0.238=-0.154 0.040-0.084=-0.044 3.5000 0.5441 8.30

1
𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn] Vs PH Series1

0.5
𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn]

0
0 2 4 6 8 10
-0.5

-1

y = 0.9662x - 7.608
-1.5
PH R² = 0.792
y = 0.9662x - 7.608
El corte que da en el eje x es 7.87
Cálculo de pKa:
PKa=7.87
Ka =antilog (-pKa)=antilog (-7.87)
𝐾𝑎 = 1.3490𝑥 10−8

 Considerando datos experimentales a la longitud de onda 611nm

N° fiola A 𝐈𝐧− = 𝐀 − 𝐀𝐚 𝐇𝐈𝐧 = 𝐀𝐛 − 𝐀 [𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] 𝑳𝒐𝒈[𝐈𝐧− ]/[𝐇𝐈𝐧] PH
2 0.016 0.016-0.035=-0.019 0.564-0.016=0.548 -0.0347 ERROR 5.83
3 0.125 0.125-0.035=0.090 0.564-0.125=0.439 0.2050 -0.6882 6.83
4 0.306 0.306-0.035=0.271 0.564-0.306=0.258 1.0504 0.0214 7.51
5 0.406 0.406-0.035=0.371 0.564-0.406=0.158 2.3481 0.3707 7.85
6 0.509 0.509-0.035=0.474 0.564-0.509=0.055 8.6182 0.0.9354 8.30

𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn] Vs PH y = 0.5448x - 4.2268

0.6 R² = 0.5797
0.4

0.2
𝐿𝑜𝑔[In− ]/[HIn]

0
0 2 4 6 8 10
-0.2

-0.4 Series1

-0.6 Linear
(Series1)
-0.8
PH

Página 8
y = 0.5448x - 4.2268
El corte que da en el eje x es 7.75
Cálculo de pKa:
PKa=7.75
Ka =antilog (-pKa)=antilog (-7.75)
𝐾𝑎 = 1.7783𝑥 10−8

CALCULAR LA MOLARIDAD DE LAS SOL UCIONES PREPARADAS.

 HALLANDO LA CONCENTRACIONES DE NaH2PO4. 2H2O

Masa pesada: 1,1204g

PM: 137,99g/mol
%p=99
𝑚
𝐶=
𝑀 ∗ 𝑉 ∗ %𝑃
1,1204𝑔
𝐶=
𝑔 99
137,99 𝑥 0,05𝐿 ∗
𝑚𝑜𝑙 100
𝐶NaH2PO4.2H2O = 0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿

 HALLANDO LA CONCENTRACIONES DE K2H2PO4

Masa pesada: 1,3798g

PM: 174,18g/mol
%p=100
𝑚
𝐶=
𝑀 ∗ 𝑉 ∗ %𝑃
1,3798𝑔
𝐶=
𝑔 100
174,18 𝑥 0,05𝐿 ∗
𝑚𝑜𝑙 100
𝐶𝐊𝟐𝐇𝟐𝐏𝐎𝟒 = 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿

Se tiene la siguiente formula:

𝑉1 𝐶1 + 𝑉2 𝐶2 = 𝑉𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿

A continuación se muestra el cuadro de volúmenes que se adicionó:

FIOLA nº K2H2PO4 NaH2PO4

1 5 0
2 5 1
3 10 5
4 5 10
5 1 5
6 1 10
7 0 5

Fiola 1:
0,005𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0𝐿 𝑥 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿
𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,0164𝑚𝑜𝑙/𝐿
Fiola 2:
0,005𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0,001𝐿 𝑥 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿
𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,01957𝑚𝑜𝑙/𝐿
Fiola 3:
0,01𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0,005𝐿 𝑥 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿

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𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,0486𝑚𝑜𝑙/𝐿
Fiola 4:
0,005𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0,01𝐿 𝑥 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿
𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,0481𝑚𝑜𝑙/𝐿
Fiola 5:
0,001𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0,005𝐿 𝑥 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿
𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,0191𝑚𝑜𝑙/𝐿
Fiola 6:
0,001𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0,01𝐿 𝑥0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿
𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,0349𝑚𝑜𝑙/𝐿
Fiola 7:
0,0𝐿𝑥0,1640𝑚𝑜𝑙/𝐿 + 0,005𝐿 𝑥 0,1584𝑚𝑜𝑙/𝐿 = 0,05𝐿𝑥 𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿
𝐶𝐹𝐼𝑁𝐴𝐿 = 0,0158𝑚𝑜𝑙/𝐿

DETERMINAR ANALÍTICAMENTE LOS PH DE LAS SOLUCIONES BUFFER PREPARADAS.

Se tiene la siguiente formula

𝑀2 𝑥 𝑉2
𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + log [ ]
𝑀1𝑥 𝑉1

Tomando como pKa = 7,47 este valor se calcula de la gráfica a 611 nm. Se calculara el pH de las fiolas
2 al 6 porque en el 1 y 7 no se han combinado la dos soluciones por lo que solo serán igual al pKa.
Calculo de pH:

Fiola nº 2:
0,1584𝑥 1
𝑝𝐻 = 7,47 + log [ ]
0,1640𝑥 5
𝑝𝐻 = 6,76
Fiola nº 3:
0,1584𝑥 5
𝑝𝐻 = 7,47 + log [ ]
0,1640𝑥 10
𝑝𝐻 = 7.15
Fiola nº 4:
0,1584𝑥 10
𝑝𝐻 = 7,47 + log [ ]
0,1640𝑥 5
𝑝𝐻 = 7,76
Fiola nº 5:
0,1584𝑥 5
𝑝𝐻 = 7,47 + log [ ]
0,1640𝑥 1
𝑝𝐻 = 8.15
Fiola nº 6:
0,1584𝑥 10
𝑝𝐻 = 7,47 + log [ ]
0,1640𝑥 1
𝑝𝐻 = 8,46

CONCLUSIONES

 Se pudo preparar soluciones amortiguadoras de pH bajo y pH alto.

 Se determinaron las longitudes de onda máxima de absorción para las fiolas 1 y 7. Para al fiola 1 la
longitud de onda de máxima absorción fue 429nm y para la solución de la fiola 7 la longitud de
onda de máxima absorción fue de 616nm.
 Le logro observar la lectura de absorbancia a diferentes pH
 Se logró la determinación de la constante de ionización del azul de bromotimol

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RECOMENDACIONES

 Se debe tener cuidado al momento de pesar los reactivos.

 Lavar los materiales de trabajo de modo que no afecte en sus concentraciones.
 Estar atento a la ejecución de la práctica, anotar los datos que se obtienen en la práctica.

BIBLIOGRAFÍA

 Snell, F. D. y Snell C. T. “Colorimetric Methodes of Análisis” 3era edición, Vol. II, D Van Nostrand
Company, 1941
 Skoog, D. A.; West, D. M.; Holler, F. J. Crouch “Química Analítica” 7ma edición, Cap. 27, McGraw-
Hill, Mexico, 2001.

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