FORMATO GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

CÓDIGO: VERSIÓN: FECHA: PÁGINA:

FO-A-APL-02-02 1 2018-03-20 1 de 4

PRÁCTICA N° 1

Título de la Práctica: Desarrollo de un método espectrofotométrico

Asignatura: Análisis instrumental. Semestre: V

1. OBJETIVOS.

1.1 General:

1.1.1. Implementar una metodología para la cuantificación de compuestos que

absorben la luz en la región visible.

1.2 Específicos

1.2.1. Familiarizar al estudiante con el uso del espectrofotómetro.

1.2.2. Obtener la longitud de onda máxima de absorción de un compuesto
1.2.3. Realizar una curva de calibración para realizar un análisis cuantitativo del
compuesto.

2. INFORMACIÓN BÁSICA PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO

En todos los laboratorios de química se requiere por necesidad el establecimiento de

ciertas reglas de conducta y normas de seguridad, de cuyo cumplimiento dependen el
orden en el trabajo, la comodidad y la seguridad de todos los estudiantes y docentes
dentro del laboratorio. La mesa, materiales y equipos utilizados deben quedar limpios y
en su lugar correspondiente antes de salir del laboratorio. Las llaves del gas y del agua
deben quedar debidamente cerradas.

A continuación, se enuncian algunas reglas generales que se deben leer

cuidadosamente:

 Previamente para cualquier práctica de leer las instrucciones dentro de esta

guía de laboratorio y experimento antes de ir al laboratorio.
 Utilizar los implementos para su seguridad definidos en esta práctica de
laboratorio.
 No toque nunca los compuestos químicos con las manos a menos que se le
autorice.
 Para la manipulación de compuestos químicos, utilizar espátulas, pinzas, etc.
 Lavarse las manos antes de salir del laboratorio.
 Deje pasar suficiente tiempo para que se enfríen el vidrio y los objetos calientes
antes de manipularlos.
 Todos los sólidos y papeles que sean desechados se deben arrojar a un
recipiente adecuado para desechos contenedores y caneca de color rojo.
 No arroje al sifón cerillas, papel de filtro o sólidos poco solubles.
 Compruebe cuidadosamente los rótulos de los frascos de reactivos antes de
usarlos.
 FORMATO GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

CÓDIGO: VERSIÓN: FECHA: PÁGINA:

FO-A-APL-02-02 1 2018-03-20 2 de 4

 No devuelva nunca a los frascos de origen los sobrantes de compuestos

utilizados, a menos que se le indique.

3. FUNDAMENTO TEÓRICO

Los usos analíticos de la espectrofotometría en la zona visible ultravioleta son muchos

y muy variados. Cuando un compuesto o un ion es capaz de absorber luz, es colocado
en una celda en el espectrofotómetro, por la cual, cierta cantidad de luz monocromática
será absorbida por dicho compuesto y el resto saldrá de la celda para ir a incidir sobre
el fototubo que la detectará. Este comportamiento es aprovechado para determinar la
concentración de un analito.

La ley de Beer, establece que a una determinada longitud de onda dada, la absorbancia es
proporcional a la concentración de la especie absorbente en la solución, como lo indica la
ecuación 1, por lo que ser usada para realizar análisis cuantitativos por espectrometría UV-
Vis:
Aλ= ελbC (1)

Aλ = Absorbancia a una longitud de onda λ = -log transmitancia

ελ = Absortividad Molar
b = Longitud de la celda en cm.
C = concentración en moles/litros.

4. TRABAJO PREVIO

4.1: ¿Qué información se puede obtener de un espectro de absorción UV-vis?.

4.2. ¿Qué es una curva de calibración?
4.3: ¿Cómo se construye una curva de calibración?

5. ELEMENTOS NECESARIOS PARA LA PRÁCTICA

5.1 Materiales y Equipos

Espectrofotómetro UV-vis 1 Vidrio reloj

Celdas para el espectrofotómetro 1 mortero
3 matraces aforados de 100ml 1 agitador de vidrio
5 matraces aforados de 25 ml Balanza analítica
3 vasos precipitados de 100ml Espátula
3 pipetas graduadas de 5ml Papel indicador de pH

5.2 Reactivos

(NH4)2Fe(SO4)2*12H2O
H2SO4 concentrado
1,10-fenantrolina
Acetato de sodio anhidrido
 FORMATO GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

CÓDIGO: VERSIÓN: FECHA: PÁGINA:

FO-A-APL-02-02 1 2018-03-20 3 de 4

Pasta de sulfato ferroso (la deben traer los estudiantes).

5.3 Elementos de Protección Personal

Guantes Bata
Gafas

6. DESARROLLO EXPERIMENTAL

6.1. Encontrar la longitud de onda de máxima absorbancia del complejo hierro-

fenantrolina, haciendo un barrido en la región del espectro de 400-620nm.

Preparación de las soluciones:

 Solución estándar de hierro (III): preparar 100 ml de solución 1,8*10 -3M de

(NH4)2Fe(SO4)2*12H2O en H2SO4 0,1N
 Solución de 1,10-fenantrolina al 0,1% p/p en agua, preparar 100ml.
 Acetato de sodio 2M, preparar 100ml

Procedimiento:
Coloque 5 ml de la solución estándar de Fe (III) en un matraz volumétrico de 100ml,
adicione 10ml de la solución de acetato de sodio para mantener el pH en 3 y 5,
verifique con papel indicador, adicione 10ml de 1,10-fenantrolina y complete con agua
destilada, agite y deje reaccionar durante 10minutos hasta el desarrollo de color rojo
anaranjado.
Por último, mida la absorbancia en intervalos de 10nm en un rango de 400 a 620nm,
use como blanco una solución que contenga acetato de sodio y 1,10-fenantrolina.

6.2. preparación de curva de calibración

Prepare en matraces volumétricos de 25 ml una serie de soluciones que contengan 1,

2, 3, 4 y 5 ml de la solución estándar de Fe (III), adicione 10 ml de la solución de
acetato de sodio, 10 ml de 1,10-fenantrolina y complete con agua destilada, agite y
mida la absorbancia a la longitud de onda determinada en el punto 6.1.

6.3. concentración de muestra problema

Preparación de la muestra
Pese una pastilla de sulfato ferroso, tritúrela, adicione 20 ml de agua destilada y realice
la extracción. Filtre la solución, y lave el mortero con agua destilada, lleve a un balón
aforado de 100ml y complete.
De la solución anterior tome 1 ml en un balón de 25 ml, adicione 10 ml de acetato de
sodio, 10 ml de 1,10-fenantrolina y complete con agua destilada, agite, deje reposar
por 15 minutos y mida la absorbancia a la longitud de onda determinada en el punto
6.1.

7. RESULTADOS
 FORMATO GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO

CÓDIGO: VERSIÓN: FECHA: PÁGINA:

FO-A-APL-02-02 1 2018-03-20 4 de 4

7.1. Con los resultados del punto 6.1, construya una gráfica de la longitud de onda en
función de la absorbancia, determine la longitud de onda de máxima absorción y
compare con literatura.
7.2. Construya una gráfica de la absorbancia en función de la concentración.
7.3. Determine la concentración de la muestra problema y reportar en M y ppm.
7.4. Calcule el coeficiente de absortibidad molar del complejo

8. BIBLIOGRAFÍA

H.F. Walton y J. Reyes. Análisis Químico e Instrumental moderno. Reverté. 1978

Encyclopedia of Industrial Chemical Analysis. Vol. 6. F.D. Snell y C.L. Hilton (eds.).
Interscience Publishers.
H.H. Willard, L.L. Merritt,jr, J.A. Dean. Métodos Instrumentales de Análisis. Compañía
Editorial Continental SA. 1974.