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Manual Veterinario

de Toma y Envío
de Muestras

2017
Manual Veterinario
de Toma y Envío
de Muestras

2017
Está permitida la reproducción parcial o total de este material, Créditos
siempre y cuando se cite la fuente. El autor asume la Coordinación
responsabilidad por los derechos de los textos e imágenes.
Guilherme Henrique Figueiredo Marques - DSA/SDA/MAPA
Júlio César Augusto Pompei – OPS/PANAFTOSA
1ª Edición: Año 2010 Mônica Martini - OPS/PANAFTOSA
Impreso en Brasil / Printed in Brazil Revisión Técnica
Júlio César Augusto Pompei – OPS/PANAFTOSA
Distribución e información Mônica Martini - OPS/PANAFTOSA
MINISTERIO DE AGRICULTURA, GANADERÍA Y ABASTECIMIENTO Gilfredo Darsie - OPS/PANAFTOSA
Departamento de Salud Animal Guilherme Henrique Figueiredo Marques – DSA/SDA/MAPA
Coordinación General de Lucha contra Enfermedades
Ana Cristina Gonçalves Pinto da Rocha – CGAL/SDA/MAPA
Esplanada dos Ministérios, Bloco D, Anexo - A,
3º andar, Sala 301 Elaboración: Grupo Técnico
Brasília/DF – CEP: 70.043-900 – 0800 704 1995 Edviges Maristela Pituco – IB/SP
http://www.agricultura.gov.br/ Josete Garcia Bersano – IB/SP
Claudia Del Fava – IB/SP
Este Manual es una traducción de la primera edición hecha
en 2010, en portugués, y fue realizado en el ámbito del Claudia Pestana Ribeiro – IB/SP
Termino de Cooperación Técnica (TCT) con el Ministerio de Simone Miyashiro – IB/SP
Agricultura, Ganadería y Abastecimiento (MAPA) y el Centro Ricardo Spacagna Jordão – IB/SP
Panamericano de Fiebre Aftosa (PANAFTOSA) de la Orga- Adriana Hellmeister de Campos Nogueira – IB/SP
nización Panamericana de la Salud (OPS) / Organización Antonio Guilherme Machado de Castro – CAPTAA/SP
Mundial de la Salud (OMS). Renato Luís Luciano – CAPTAA/SP
Ana Maria Iba Kanashiro – CAPTAA/SP
Manual veterinario de toma y envío de muestras: Ana Lúcia S. P. Cardoso – CAPTAA/SP
manual técnico. Cooperación Técnica MAPA/OPS/PANAFTOSA Eliana Neire Castiglioni Tessari – CAPTAA/SP
para el Fortalecimiento de los Programas de Salud Animal de Érica Weinstein Teixeira – APTA/SP
Brasil. Rio de Janeiro: PANAFTOSA - OPS/OMS, 2017. Dejair Message – UFV/MG

218p.: il. Color.; 15 cm. (Serie de Manuales Técnicos, 13) Revisión Bibliográfica
Astrid Rocha Pimentel
ISSN 0101-6970 Colaboración
IB/SP: Alessandra Figueiredo de Castro Nassar, Elenice
1. Toma de muestras - manuales. 2. Enfermedades Sequetin Cunha, Eliana De Stefano, Eliana Roxo,
de los animales - diagnóstico. I. Centro Panamericano Eliana Scarcelli Pinheiro, Liria Hiromi Okude, Margareth
de Fiebre Aftosa - OPS/OMS. II. Ministerio de Agricultura,
Élide Genovez y Wilter Ricardo Russiano Vicente.
Ganadería y Abastecimiento. III. Título. IV. Series.
MAPA: José Carlos de Souza
CDA/SP: Armando Salvador da Silva (In memoriam)
Departamentos de Clínica Veterinaria y Reproducción
Animal de la FMVZ/ USP
Presentación

La Cooperación Técnica entre De esta manera, el manual tie-


el Centro Panamericano de Fiebre ne como objetivo mejorar la calidad
Aftosa y el Ministerio de Agricultura, de las muestras colectadas y asegu-
Ganadería y Abastecimiento hizo po- rar su correcta conservación y envío,
sible acciones efectivas para el forta- facilitando a la red de laboratorios la
lecimiento de los Programas de Sa- realización de diagnósticos rápidos
lud Animal de Brasil, principalmente y concluyentes dentro del ámbito de
mediante inversiones para mejorar los Programas Nacionales de Sani-
las acciones técnicas y valorizar a los dad Animal.
profesionales involucrados en man- Es nuestro deseo que además
tener el patrimonio representado por de ser utilizado en el campo por los
la Sanidad Animal. profesionales de medicina veteri-
Este “Manual Veterinario de naria, este manual sea también un
Toma y Envío de Muestras” fue ela- valioso instrumento de capacitación,
borado para llenar el vacío en la bi- uso y referencia para los Servicios de
bliografía especializada y tiene como Sanidad Animal.
propósito servir como guía de consul-
Jamil Gomes de Souza Ottorino Cosivi
ta rápida y objetiva para veterinarios Departamento de Salud Centro Panamericano de
de campo del sector oficial o privado. Animal – Director Fiebre Aftosa – Director
Prefacio

El Manual Veterinario de Toma y Envío El Manual no pretende agotar todos los


de Muestras fue elaborado de forma sim- temas que aborda sino que abre la posibili-
ple, práctica y con una visión actualizada de dad a una discusión focalizada y actualiza-
los aspectos más importantes de la toma da y brinda una oportunidad para futuras
de muestras para el diagnóstico de las contribuciones, revisiones e informaciones
principales enfermedades de los animales. complementarias. Se espera que los usua-
Los autores hicieron especial hincapié en rios del Manual lo apliquen en sus activida-
aquellos puntos que, según su experiencia, des diarias, aclarando dudas y promoviendo
consideran de mayor interés, particular- cambios que den como resultado una mejor
mente para los Programas de Salud Animal atención veterinaria.
de Brasil.
En sus capítulos, divididos de acuerdo
con los aspectos de bioseguridad y con la
toma de muestras para el diagnóstico de en-
fermedades en rumiantes, equinos, porcinos,
aves y abejas Apis mellifera, el manual ofrece
apoyo a los médicos veterinarios de campo
Agradecimientos
con respecto de la correcta toma de material
de la especie afectada y el sistema compro- Expresamos nuestro sincero agradeci-
metido, para que las muestras seleccionadas miento al Ministerio de Agricultura, Ganadería
no consideren solo la enfermedad sospecha- y Abastecimiento (MAPA) por el apoyo recibido
da durante el examen clínico, lo que imposi- para la elaboración de este Manual, y al equipo
bilitaría los diagnósticos diferenciales. de autores por el excelente trabajo realizado.
6 7
Índice

Capítulo 1
Tabla de medidas de las agujas................................. 46
Bioseguridad.............................................. 15 Tubos para extracción de sangre................................ 47
1. Equipos de protección personal (EPP)....................... 16
2. Equipos para la contención de los animales.......... 18 Piel y mucosas............................................................ 48
3. Identificación del animal y de la muestra.............. 20 Material para la toma de muestras para el diagnóstico
de enfermedades de piel y mucosas................................. 50
4. Descarte de material................................................ 22
Muestras para el diagnóstico de enfermedades
5. Acondicionamiento para el envío de de piel y mucosas.............................................................. 52
muestras para diagnóstico...................................... 24
Líquido y tejido epitelial vesicular................................ 52
6. Solicitud de análisis.................................................. 28
Líquido esofágico-faríngeo (LEF).................................. 54
Exudado (secreciones).................................................. 56

Capítulo 2 Biopsia de piel y mucosas........................................... 58


Raspado de la piel........................................................ 60
Sangre............................................................................ 62
Rumiantes, Equinos y Porcinos................... 35

Sistema respiratorio................................................... 64
Sangre........................................................................ 36
Material para la toma de muestras para el diagnóstico
Sangre............................................................................ 38 de enfermedades del sistema respiratorio........................ 66
Extracción de sangre con sistema de vacío............... 40 Muestras para el diagnóstico de enfermedades
del sistema respiratorio..................................................... 68
Extracción de sangre con seringa y aguja................. 42
Pulmón y linfonodos..................................................... 68
Buenas prácticas de extracción para prevenir
hemólisis........................................................................ 44 Secreciones.................................................................... 70
Buenas prácticas después de la extracción para Sangre............................................................................ 72
prevenir hemólisis......................................................... 45
Sistema gastrointestinal............................................. 74 Sistemas circulatorio y linfático................................. 108
Material para la toma de muestras para el diagnóstico Material para la toma de muestras para el diagnóstico
de enfermedades del sistema gastrointestinal.................. 76 de enfermedades de los sistemas circulatorio y linfático... 110
Muestras para el diagnóstico de enfermedades del Muestras para el diagnóstico de enfermedades
sistema gastrointestinal..................................................... 78 de los sistemas circulatorio y linfático.............................. 112

Contenido ruminal........................................................ 78 Órganos – sistema nervioso central, hígado, bazo,


pulmón, riñón, corazón, linfonodos
Heces............................................................................ 80 e intestino delgado y grueso...................... 112
Alimentos para nutrición animal................................. 82 Sangre capilar y venosa............................................... 116

Sangre ............................................................................ 84 Sangre............................................................................ 118

Sistema osteoarticular............................................. 120


Sistema reproductor y urinario.................................. 86 Material para la toma de muestras para el diagnóstico
Material para la toma de muestras para el diagnóstico de enfermedades del sistema osteoarticular.................... 122
de enfermedades del sistema reproductor y urinario....... 88 Muestras para el diagnóstico de enfermedades del
Muestras para el diagnóstico de enfermedades del sistema osteoarticular...................................................... 124
sistema reproductor y urinario......................................... 90 Líquido sinovial............................................................. 124
Fetos de hasta 2kg........................................................ 90 Sangre........................................................................... 126
Feto y mortinato con más de 2 Kg.............................. 92
Sistema nervioso central (SNC)................................. 128
Placenta......................................................................... 94
Material para la toma de muestras para el diagnóstico
Semen............................................................................ 96 de enfermedades del sistema nervioso central (SNC)....... 130
Esmegma prepucial – técnica del hisopo.................. 98 Muestras para el diagnóstico de enfermedades
del sistema nervioso central (SNC).................................. 132
Esmegma prepucial – técnica del lavado prepucial.... 100
SNC completo............................................................... 132
Moco cervicovaginal.................................................... 102 Partes del sistema nervioso central (SNC)................. 134
Orina.............................................................................. 104 Otros órganos – hígado, bazo, pulmón, riñón,
Sangre........................................................................... 106 corazón, linfonodos, intestino
delgado y grueso.............................. 138
Sangre........................................................................... 142
Capítulo 3 Capítulo 4

Aves.......................................................... 145 Abejas – Apis mellifera.................................... 175


Principales enfermedades que afectan a las aves....... 146 Material para la toma de muestras para el diagnóstico
de enfermedades de las abejas - Apis mellifera ..............176
Material para la toma de muestras para el diagnóstico
de enfermedades de las aves.......................................... 148 Garantizar la seguridad ...................................................178

Muestras para el diagnóstico de enfermedades Reconocimiento de las partes de una colmena ............179
de las aves......................................................................... 150 Identificación de los individuos de la colonia, celdas
de obreras, celdas de zánganos y celda de reina........ 180
Sangre (para obtención de suero).............................. 150
Apertura e inspección de una colmena .........................182
Órganos........................................................................ 154
Fases de desarrollo de las abejas ..................................186
Hisopo traqueal............................................................ 158
Diferentes anomalías en la fase de cría .........................188
Hisopo cloacal.............................................................. 160
Principales enfermedades, intoxicaciones y parasitosis
Hisopo de arrastre – a) gasa o esponja que afectan Crías de Abejas – Apis mellifera ...................190
y b) cubre calzado........................................................ 162
Muestras para el diagnóstico de
Fondo de caja............................................................... 164 las principales enfermedades que
afectan Crías de Abejas – Apis mellifera ..................... 194
Papel o viruta – que reviste la caja
de transporte de aves de 1 día................................... 166 Muestra 1...................................................................... 194
Muestra 2 ..................................................................... 196
Heces frescas .............................................................. 168
Muestra 3 ..................................................................... 198
Meconio........................................................................ 170 Muestra 4 .................................................................... 200
Huevos picados............................................................ 172 Principales enfermedades, intoxicaciones y parasitosis
que afectan Abejas Adultas – Apis mellifera................... 202
Muestras para el diagnóstico
de las principales enfermedades
que afectan Abejas Adultas – Apis mellifera............... 204
Muestra 1 .................................................................... 204
Muestra 2 .................................................................... 206
Muestra 3 .................................................................... 208
Muestra 4 ..................................................................... 210
Muestra 5 ..................................................................... 212

Bibliografia............................................... 214
Capítulo 1

BIOSEGURIDAD

Autores
Edviges Maristela Pituco
Ricardo Spacagna Jordão
Adriana Hellmeister de Campos Nogueira

Centro de I & D en Sanidad Animal


Instituto Biológico (APTA/SAA-SP)

14 15
La bioseguridad consiste en un conjunto de
procedimientos destinados a prevenir, controlar, Gafas
Guantes
reducir o eliminar los riesgos inherentes a las con malla
actividades susceptibles de comprometer la de acero
salud humana, animal y el ambiente
Máscara
Cofia
1 - Equipos de protección personal (EPP)
Utilizar vestimenta de protección apropiada de
acuerdo con el riesgo, tales como overol, delantal Guantes
o pantalón y chaqueta impermeables. de látex
Guantes
de nitrilo–
Neoprex

Guantes tejidos
moteados

Botas

Delantal
impermeable Delantal Overol

16 17
2 - Equipos para la contención de los animales
Verifique con anticipación si las instalaciones
y los equipos están disponibles, limpios y en
Se puede lograr una buena contención
buenas condiciones de uso. Utilice equipos y
usando una argolla nasal
materiales de buena calidad.

Abreboca Inmovilizador
nasal

Acial

Con el fin de prevenir accidentes y hacer una


recolección adecuada de muestras para
diagnóstico es muy importante que el animal esté
bien inmovilizado. Preferentemente, esto debe
hacerse en el brete de contención.

Muchas veces es necesario utilizar


trabas, principalmente cuando
hay riesgo de accidentes (coces) o
cuando los animales están inquietos.

18 19
3 - Identificación del animal y de la muestra La identificación de la muestra
NOTA
Los métodos más comunes de identificación de los comienza con la identificación
animales son: tatuaje, arete (visual o electrónico) y del animal. Esa etapa es Registrar la id
entificación
marcación a fuego. crucial para garantizar la del animal en
el
rastreabilidad al final del recipiente de
Aretes recolección,
proceso. En el momento de la preferentemen
te con
toma de la muestra de cada bolígrafo, sobr
Aretes: aplique el arete e una
animal se deberá verificar el etiqueta adhe
en la parte central de siva. Para
número del animal y anotarlo sustituir esa fo
la oreja y entre las dos rma de
en el rótulo del frasco y en identificación
nervaduras principales. , es necesario
el formulario de recolección. evaluar previa
mente
Si no es posible obtener la la opción alte
El alicate de aplicación rnativa que
identificación del animal, se empleará.
debe estar en posición
identificar el lote o grupo,
vertical (parado), evite
la colmena, etc.
la posición horizontal
(“acostada”).
Aplicador
de aretes

Animal con arete


bien colocado

20 21
4 - Descarte de material Otros materiales
Jeringas, guantes,
Material cofia, máscara,
cortopunzante delantal u overol
Las agujas, las desechables;
hojas de bisturí, gasas, algodón y
los tubos rotos, otros materiales
los tubos de vidrio potencialmente
con líquidos, infecciosos deben
etc., se deben descartarse
descartar en cajas en bolsas de
recolectoras aptas color blanco,
para material debidamente
cortopunzante. identificadas
Si no se dispone para sustancias
de estas cajas, infecciosas.
utilizar recipientes
de paredes rígidas
con tapas (latas
de leche en polvo
o similares).

NOTA NOTA
contienen
Los recipientes que propiedad, todos los
cialm ente infecciosos Antes de salir de la ,
residu os poten s para la recolección
co mo “Infeccioso” materiales utilizado agujas
deben rotularse inm ov ilizad ores,
mo res iduos tales como sondas,
y desech arse co berán desinfectarse
uivale nte, metálicas y botas, de
hospitalarios o eq ímicos o físicos,
norm as nacionales con desinfectantes qu
respetan do las
tiemp o de contacto y las
en tad as a respetando el
e internacionales ori da situación. Los otr
os
rie sg os am bie nta les, indicaciones para ca berán
minimizar los ov ero les, de
ale s. materiales, como
sanitarios y ocupacion plásticas para su
colocarse en bolsas
ció n y lavado.
posterior desinfec

22 23
5 - Acondicionamiento para el envío
de muestras para diagnóstico 3º Paso
Acondicionar dentro de otro recipiente resistente
El sistema de embalaje, incluso para transporte (embalaje secundario). Como alternativa de embalaje
terrestre, debe ser triple: un recipiente primario, secundario se puede utilizar, por ejemplo, una lata de
un embalaje secundario y un embalaje externo leche en polvo o chocolatata, por ejemplo.
necesariamente rígido (embalaje terciario).

1º Paso
Acondicionar el
recipiente que
contiene la muestra
(recipiente primario),
identificado de forma
clara y legible, en
una bolsa plástica
herméticamente
cerrada.

NOTA
2º Paso
Envolver este conjunto Si se colocan
varios
en material absorbente recipientes pr
imarios frágile
para prevenir posibles en un mismo s
embalaje
derrames. secundario, se
los
envolver individ debe
ualmente,
o separarlos,
para evitar el
contacto entre
ellos.
Importante: Se debe realizar una desinfección externa en
todas las etapas del proceso de acondicionamiento de la
muestra, desde el recipiente primario con la muestra, la bolsa
plástica y el envase secundario, hasta la caja isotérmica.

24 25
4º Paso 5º Paso
Acomodar el recipiente en la caja isotérmica (embalaje En la parte externa de la
intermedio) que, a su vez, deberá colocarse en el tapa de la caja isotérmica,
embalaje terciario (externo). Utilizar hielo reciclable adherir la solicitud de
en una cantidad examen, debidamente
compatible con el completada y colocada en
tamaño de la muestra un folio plástico transparente.
y el tiempo hasta la Cerrar bien la caja isotérmica
llegada al laboratorio y colocarla dentro del envase
(como alternativa, terciario, que deberá
utilizar una botella rotularse de acuerdo con
plástica bien cerrada las normas nacionales
con agua congelada). e internacionales. En los
Llenar el espacio vacío lados opuestos, colocar la
con rellenos blandos orientación del embalaje:
(copos de poliestireno “Este lado hacia arriba”.
expandido, diario,
papel absorbente).
Usar cajas isotérmicas resistentes
y en buenas condiciones. NOTA
Para el transpo
rte, los embalajes
NOTA material biológ
ico relacionado
de
especímenes pa con
El transporte de muestras con mínima probabilidad ra diagnóstico de
identificados co ben ser
de contener sustancias infecciosas, como suero n los siguientes
Nombre, direcc elementos:
y sangre para estudios seroepidemiológicos o ión y teléfono de
remitente y del l
en las cuales los agentes patógenos se hayan destinatario.
Teléfono para em
neutralizado o inactivado de manera tal que ya no ergencias.
La etiqueta “UN
representen riesgo para la salud, no está sujeto a 3373”, colocada
en la superficie
esta regulación, y solo debe garantizarse que el externa del em
terciario, deberá balaje
embalaje primario sea hermético y a prueba de ser fácil de ver
leer. La designa y de
agua. El embalaje secundario puede ser una bolsa ción oficial de tra
“Substancia Biol nsporte,
plástica hermética y la indicación externa solo debe ógica, categoría
figurar al lado de B”, deberá
contener la expresión: “Muestra Animal Libre de la etiqueta
Agentes Infecciosos”.

26 27
6 - Solicitud de análisis

Puntos importantes al completar


la Solicitud de Exámenes
1 - Localización de la propiedad
1.1 Nombre completo (sin abreviaturas) y dirección del propietario del
animal sospechoso.
1.2 Nombre completo de la propiedad o establecimiento donde se
recolectó la muestra.
1.3 Localización que facilite el acceso a la propiedad citada
2 – Identificación del remitente de la muestra
2.1 Nombre completo (sin abreviaturas) y dirección del responsable del
envío de la muestra. Se deberá incluir un número de teléfono para casos
de emergencia.
2.2 El responsable de completar el formulario y enviar la muestra deberá
ser un profesional debidamente habilitado para trabajar con materiales
de riesgo biológico.
3 – Descripción del animal sospechoso, del rebaño y de la muestra
3.1 Informar la fecha de recolección, el nombre o número del animal
sospechoso, la edad, el sexo, la raza o especie.
3.2 Completar la finalidad del examen (ej. confirmación de
diagnóstico, movilización, monitoreo). En caso de confirmación de
diagnóstico, describir cuáles son los síntomas clínicos que presenta el
animal, y la fecha probable de comienzo de la enfermedad y, en caso de
autopsia, describir los hallazgos más significativos.
Para la confirmación del diagnóstico se debe completar una solicitud
de exámenes para cada animal
3.3 Informar el número de animales existentes en la propiedad, cuántos
animales presentaron signos clínicos semejantes y cuántos murieron
(informar vacunación, desparasitación).
3.4 Informar qué muestras se enviaron y el conservante utilizado.
4 - Información complementaria
Este espacio se reserva para cualquier otra información que el técnico
considere pertinente (ante la sospecha de zoonosis informar si hay
personas involucradas, etc.)

28 29
Algunos puntos importantes al completar
la Solicitud de Exámenes para Síndrome Neurológico

A - Identificación del remitente de la muestra:


Nombre completo del responsable de la recolección y/o envío de la
muestra con Nº de registro profesional, si es un veterinario oficial, o
número de matrícula y nombre de la institución.
B – Localización de la propiedad donde se recolectó la muestra:
Nombre completo del propietario del animal y de la propiedad o
establecimiento donde se recolectó la muestra. Si es posible, registrar
las coordenadas de la propiedad y localización que facilite el acceso.
C – Descripción del animal sospechoso y del rebaño en que se
encontraba:
Marcar la especie animal y en caso de animal silvestre, especificar
el nombre vulgar. Marcar MH (murciélago hematófago) y MNH
(murciélago no hematófago). Rumiante: colocar el lugar de origen de
la muestra en el ítem 2 y completar el ítem 5, referente a la ingesta de
proteínas, concentrados, pienso y suplemento mineral proteico. Informar
el rebaño existente, N° de animales con síntomas clínicos y muertos; no
considerar esta información para animales domésticos o silvestres.
D – Acciones en la propiedad sospechosa y signos clínicos
presentados.
Colocar el origen de la notificación, fecha de la 1ª visita y fecha
probable de comienzo de la enfermedad.
E - Información sobre la recolección, acondicionamiento y
conservación de la muestra
Se puede marcar más de un casillero siempre que las muestras
pertenezcan al mismo animal. Especificar las muestras enviadas
siempre que se marque “vísceras/otros“.
F – Observaciones.
Completar cualquier otra información pertinente, incluyendo
información sobre agresión a personas, en caso de que haya ocurrido.

30 31
Puntos importantes al completar
la Solicitud de Exámenes
1 - Localización de la propiedad
1.1 Nombre de la propiedad o establecimiento donde se recolectó la
muestra.
1.2 Dirección de la propiedad o establecimiento donde se recolectó
la muestra (incluir localización que facilite el acceso a la propiedad
citada).
1.3 Nombre completo (sin abreviaturas) y dirección y teléfono del
propietario del colmenar.
2 – Identificación del remitente de la muestra
2.1 Nombre completo (sin abreviaturas), dirección y teléfono del
responsable del envío de la muestra.
3 - Datos de las Muestras
3.1 Completar un formulario por colmena.
3.2 Informar todos los tipos de muestras recogidas en cada
colmena, con las observaciones pertinentes.
No olvidar indicar el lugar del interior de la colmena del cual se
recogió el fragmento de panal de miel.
4 - Información de la colmena
4.1 Si el apicultor no utiliza marcación permanente de las colmenas,
hacer una marcación en cada una de las colmenas de las que se
recogieron las muestras.
5 - Información complementaria
5.1 Detallar el manejo de la alimentación suplementaria adoptado
por el apicultor (incluyendo época en que se suministró a las abejas).
5.2 Si el apicultor practica apicultura migratoria, indicar los lugares a
donde se desplaza a las colmenas en cada época del año.
5.3 Informar si otros apicultores tienen colmenas en la misma
propiedad.
5.4 Utilizar el reverso del formulario para otras observaciones que
se consideren importantes y no estén contempladas en los ítems
mencionados (ej.: historial del problema etc.)
32 33
Capítulo 2

RUMIANTES,
EQUINOS Y
PORCINOS

Autores
Edviges Maristela Pituco
Claudia Del Fava
Claudia Pestana Ribeiro
Josete Garcia Bersano
Simone Miyashiro

Centro de I & D en Sanidad Animal


Instituto Biológico (APTA/SAA-SP)

34 35
Sangre
La sangre representa cerca del 8% del peso corporal de un
animal. Los análisis de sangre son un importante
apoyo para el diagnóstico clínico. Puede extraerse con
jeringa y aguja y transferirse a recipientes de diferentes
capacidades, con o sin anticoagulante, o recolectarse
en tubos de vacío que, al ser herméticos, garantizan la
esterilidad de la muestra, lo que es deseable en toda
punción venosa. Para que sean representativas, se debe
mantener la composición y la integridad de las muestras
de sangre durante las fases preanalíticas de recolección,
manipulación, transporte y eventual almacenamiento.
Antes de la recolección de sangre para análisis de
laboratorio, es importante conocer, controlar y, si es
posible, evitar algunas variables que pueden interferir en
la exactitud de los resultados. En general, estas variables
están relacionadas con condiciones preanalíticas como
modificaciones en la dieta y uso de medicamentos. Otros
aspectos, como el uso de gel separador, anticoagulantes y
conservantes y la hemólisis también pueden provocar una
variación de los resultados.

36 37
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). (alrededor de 6 veces)
cava craneal Si se utiliza tubo con
gel separador,

3. Cómo recolectar
será necesario
centrifugar la
sangre como
Utilizar sistema de
mínimo 30
vacío o jeringa y aguja
minutos
y como
máximo 2
horas después
de la extracción, y enviar el
suero en el mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación de anticuerpos b) Identificación
directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

38 39
a
Extracción de sangre con
Sistema de Vacío
Paso a paso

1. Enroscar la aguja en el adaptador. Retirar b


el capuchón protector de la aguja recién en el
momento de la punción; (figuras a y b)

2. Desinfectar el lugar elegido para la punción;


pasar un algodón embebido en alcohol al 70%, c
en la dirección del pelo;

3. Retirar el capuchón de la aguja y d


realizar el torniquete;

4. Punzar la vena; (figura c)

5. Introducir el tubo en el adaptador,


presionándolo hasta el límite; (figuras d y e)

6. Esperar que la sangre deje de fluir dentro del


tubo, y recién ahí retirar el tubo, asegurando la
proporción adecuada de sangre/anticoagulante; e
(figura f)
f
7. Soltar el torniquete y recién después
retirar el tubo y luego la aguja;

8. Separar la aguja del adaptador y desecharla


en recipiente para material cortopunzante.

40 41
Extracción de sangre a
con Jeringa y Aguja
Paso a paso
1. Colocar la aguja en la jeringa, sin retirar el capuchón
protector. Asegurarse de que la aguja esté bien ajustada;
(figura a)

2. Mover el émbolo de la jeringa (hacia adelante y hacia


b
atrás) para retirar el aire; (figura b) c

3. Desinfectar el lugar elegido para la punción; pasar un


algodón embebido en alcohol al 70%, en la dirección del pelo;

4. Retirar el capuchón de la aguja y realizar el torniquete;

5. Introducir la aguja en la vena y tirar del émbolo de la


jeringa lentamente, para que la sangre pueda fluir; (figura c)

6. Extraer aproximadamente 10 mL de sangre;


d
7. Soltar el torniquete luego de la venopunción;
e
8. Separar la aguja de la jeringa. Desechar la aguja en
recipiente para material cortopunzante (figura d).
Recuerde: Nunca volver a colocar el capuchón en las agujas.

9. Transferir la sangre de la jeringa a un tubo de ensayo


con o sin anticoagulante. Para evitar hemólisis, la sangre
debe fluir lentamente por la pared del tubo; (figura e)

10. Desechar la jeringa,, en una bolsa de plástico adecuada,


en el mismo recipiente en que se desechó la aguja.

42 43
BUENAS PRÁCTICAS DE EXTRACCIÓN BUENAS PRÁCTICAS DESPUÉS DE LA
PARA PREVENIR HEMÓLISIS EXTRACCIÓN PARA PREVENIR HEMÓLISIS

• Antes de iniciar la punción, dejar que se seque el • La sangre extraída no debe exponerse a
alcohol que se utilizó para desinfectar. temperaturas muy elevadas ni a la luz directa para
• Evitar usar agujas de menor calibre. evitar hemólisis y/o degradación.
• No extraer sangre de un área con hematoma o • Homogeneizar la muestra de sangre con
equimosis. anticoagulante suavemente invirtiéndola de 5 a 10
• En extracciones de sangre al vacío, punzar la vena veces; no agitar el tubo.
del animal con el bisel hacia arriba. Punzar la vena • Nunca debe congelarse la sangre entera; en
con la aguja en un ángulo de inserción oblicuo de por caso de que sea necesario almacenar, mantener la
lo menos 30 grados. Ese procedimiento sirve para sangre refrigerada, recordando que deberá llegar al
prevenir el choque directo de la sangre en la pared del laboratorio dentro de las 48 horas.
tubo, lo que puede hemolizar la muestra, y también • El suero puede congelarse a - 20°C, hasta por un
para evitar el reflujo de la sangre del tubo a la vena mes. Nunca congelar el suero con coágulo en el tubo
del animal. Esperar que la sangre deje de fluir hacia sin gel separador.
el interior del tubo, antes de cambiar el tubo por otro, • No dejar la sangre en contacto directo con hielo.
asegurando la proporción adecuada de sangre/ • No centrifugar la muestra de sangre en el tubo para
anticoagulante. obtención de suero antes de la retracción completa del
• Los tubos con cantidad insuficiente de anticoagulante coágulo, ya que la formación del coágulo todavía no
o con exceso de sangre alteran la correcta proporción está completa, lo que puede provocar ruptura celular.
de sangre/aditivo, pudiendo producir hemólisis y • Cuando se utilice un tubo primario con gel
resultados incorrectos. separador, la separación (centrifugación) del suero
• Cuando se extrae con jeringa, verificar si la aguja debe realizarse dentro de un mínimo de 30 minutos y
está bien ajustada para evitar que se forme espuma; un máximo de 2 horas después de la extracción.
no tirar del émbolo de la jeringa con mucha fuerza. • No se pueden centrifugar los tubos con gel
Desechar la aguja, pasar la sangre, haciéndola separador a baja temperatura, ya que las propiedades
deslizar cuidadosamente por la pared del tubo de flujo del gel están relacionadas con la temperatura.
y procurando que el extremo de la jeringa no se Si el tubo se enfría antes o durante la centrifugación se
contamine con el anticoagulante o el activador del puede comprometer la formación de la barrera de gel.
coágulo que contiene el tubo. Para optimizar el flujo y evitar el calentamiento, ajustar
• No clavar la aguja en la tapa del tubo para transferir las centrífugas refrigeradas a 25º C.
la sangre de la jeringa al tubo porque puede • No usar el freno de la centrífuga para interrumpir
producirse una presión positiva que provoca, además súbitamente la centrifugación de los tubos pues la
de hemólisis, el desplazamiento del tapón del tubo. interrupción brusca puede provocar hemólisis.

44 45
TABLA DE MEDIDAS DE LAS AGUJAS
TUBOS SIN
Métrico Gauge (Calibre) Color del Conector TUBOS CON ANTICOAGULANTE ANTICOAGULANTE
El color del conector define
(mm) / Polegadas el diámetro de la aguja
EDTA K2 EDTA K2 HEPARINA TUBO TUBO
DIPOTÁSICO DIPOTÁSICO SILICONADO SILICONADO

BlANCO
CON GEL CON GEL
1,60 X 40 16G 1 1/2 SEPARADOR SEPARADOR

Tapa lila

Tapa blanca

Tapa verde

Tapa roja

Tapa amarilla
ROSA
1,20 X 25 18G 1
1,20 X 40 18G 1 1/2

tubos
TUBOS PARA EXTRACCIÓN DE SANGRE
BEIGE
1,00 X 25 19G 1
1,00 X 30 19G 1 1/4

30 minutos y máximo 2 horas


(1500-2000g/10min), mínimo
Máximo hasta 2 horas
después de extracción

Reposo 30 a 60 min.

después de extracción
0,80 X 25 21G 1

Centrifugación
VERDE

PREPARACIÓN

Centrifugado

Centrifugado

Centrifugado
0,80 X 30 21G 1 1/4
0,80 X 40 21G 1 1/2

negro
0,70 X 25 22G 1
0,70 X 30 22G 1 1/4

Suero separado por Gel


Anillo de leucocitos

Anillo de leucocitos
producto final
VIOLETA

Sangre total

Sangre total

Sangre total
0,55 X 20 24G 3/4

Coágulo

Coágulo
Plasma

Plasma

Plasma

Suero
MARRÓN

0,45 X 13 26G 1/2

Exámenes Bioquímicos
Biología Molecular

Biología Molecular

Identificación de

Identificación de
y toxicológicos
Aislamiento

Aislamiento

anticuerpos

anticuerpos
EXÁMENES
GRIS

0,38 X 13 27 5G 1/2

Indicaciones de uso
Punción venosa: Blanca – bovinos y búfalos; Rosa – bovinos, equinos, porcinos y
pequeños rumiantes; Beige – pequeños rumiantes; Verde – pequeños rumiantes
Punción articular: verde, violeta, marrón y gris; Aves – negro y verde
46 47
Piel y mucosas
La etiología de las enfermedades que afectan la piel es
muy variada e incluye, entre otras, causas parasitarias,
bacterianas, fúngicas, virales, neoplásicas, Principales enfermedades de piel
nutricionales, tóxicas, físicas, congénitas y genéticas.
y mucosas y especies afectadas
El diagnóstico no es sencillo, ya que la piel está
ESPECIES AFECTADAS
expuesta a factores externos (contaminación y efectos
ENFERMEDADES
del sol) que modifican sustancialmente el aspecto y
la evolución de las lesiones. De las enfermedades
que atacan las mucosas, la principal es la estomatitis,
Fiebre aftosa X X X X -
que abarca el complejo de enfermedades vesiculares Estomatitis vesicular X X X X X
tales como la fiebre aftosa, la estomatitis vesicular y
la viruela bovina, que tienen en común la propiedad Lengua azul X - X X -
de provocar la formación de vesículas que contienen Viruela/Vacuna
X X X X X
un líquido incoloro o ligeramente sanguinolento, típico (orthopoxvirus)
de esas enfermedades, en las especies afectadas. Pseudoviruela X - - - -
El diagnóstico se realiza en función de datos clínicos,
Ectima contagioso - - X X -
epidemiológicas y de laboratorio. El diagnóstico
siempre debe tener un carácter diferencial. Los Rinotraqueitis
materiales de elección para el diagnóstico son infecciosa bovina/
X - - - -
fragmentos de epitelio y de mucosas y exudado vulvovaginitis
pustular infecciosa
(líquido vesicular) provenientes de lesiones de la
lengua, la boca, las pezuñas y las ubres. Además, Diarrea viral bovina X - - - -
para la identificación directa del agente en posibles
Enfermedad
portadores del virus de la fiebre aftosa se utiliza - X - - -
vesicular porcina
material esofágico-faríngeo. Se ha utilizado la
Exantema Vesicular
identificación de anticuerpos en suero para demostrar - X - - -
porcino
ausencia de infección, determinar la prevalencia en
estudios seroepidemiológicos, evaluar la respuesta
humoral después de vacunación y desafío para
los programas de erradicación y vigilancia. En
raras ocasiones la serología puede utilizarse como
herramienta de diagnóstico definitivo.
48 49
Material para la toma de
muestras para el diagnóstico de
enfermedades de piel y mucosas
Tubos (Tipo Falcon) con Colector
medio conservante universal
con medio
conservante

Portaláminas Hisopos y medios


conservantes para
transporte
Sacabocado
para biopsia

Hoja de bisturí
Guantes
Papel absorbente Hoja de bisturí
Tubo tipo KMA
(tapa de rosca) Pinza

Microtubos tipo
Mango de bisturí
“Eppendorf”
Colector universal
Tubos con Tesoura cirúrgica
tapa de
rosca
Aguja para recolección
de sangre en vacío Lâmina para
microscopia
Colector de raspado
Tubos de vacío para esofágico-faríngeo
recolección de sangre, (“Probang”)
con gel separador, con y Sistema para extracción
sin anticoagulante de sangre en vacío Jeringa y agujas

50 51
3. Cantidad
Muestras para el diagnóstico de
a) Todo el contenido b) Cerca de 2 g de
enfermedades de Piel y Mucosas de la vesícula epitelio (1 a 2 cm2)

1. Material 4. Medio
Líquido y tejido a) Ninguno b) Liquido de Vallée con pH 7,4 a 7,8; o
epitelial vesicular Medio Eagle 2X concentrado, con
2. Como recolectar
antibiótico y pH 7,2-7,6

a) Líquido Vesicular.
5. Recipiente
Extracción del líqu a
Si las vesículas están ido vesicular de un
bovino afectado po
r fiebre aftosa
íntegras (no desgarradas),
a) Tubo de ensayo b) Tubo de ensayo estéril
extraer el líquido vesicular,
estéril con tapa de con el medio apropiado en
con ayuda de jeringa y
rosca (5 mL) cantidad suficiente para que las
aguja estéril
muestras queden sumergidas
b) Tejido Epitelial Vesicular. b
Recolectar, con tijera o bisturí
y pinza estéril, fragmentos de 6. Temperatura de la muestra para transporte
epitelio vesicular, incluyendo
los contornos de las lesiones Refrigerada (+2°C a +8°C)
de las regiones oral, nasal,
Lesión extensa de la boca en un
podal y de la glándula
mamaria
bovino afectado por fiebre aftosa 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
NOTA Hasta 48 horas
Antes de la recolección se deben lavar las patas y las Importante
ubres con agua limpia, para eliminar suciedad (no
utilizar ningún tipo de jabón o antiséptico) Ante la sospecha de enferme
dad
8. Exámenes
vesicular se deberá notificar
inmediatamente a los servicio
s oficiales.
Las muestras deben ser reco Identificación
lectadas
solo por profesionales de serv directa del agente
icios
oficiales y enviadas en condici
ones
de seguridad a los laborato
rios
autorizados para prevenir la
Lesiones en
el espacio
la tetilla de un diseminación de la enferme
Lesiones en o
provocadas
por el virus
a vaca, dad.
de un bovin viruela bovin de la
interdigital a
52 53
1. Material s
4. Cantidad
ectrice
Líquido esofágico - NOTA c o n las dir
lu d Volumen de moco
uerdo e sa
faríngeo (LEF) De ac rogramas d de (ideal: 15 mL, mínimo:
lo s p c c ió n
de cole eo 5 mL) diluido en igual
l, la re faríng
2. Dónde recolectar Introducción del colector en
la boca del animal anima l esofágico- da por
ia za
volumen del medio
mater rá ser reali Oficial.
Mucosa de la región faríngea od io
solo p io Veterinar
y anterior del esófago ic
5. Medio
el S e r v

3. Como recolectar Earle 2X concentrado,


con antibiótico
• Antes de la recolección, los
y pH 7,4-7,6
animales deberán permanecer en
ayunas, si es posible, por un período
de 12 horas;
• Una hora antes de la recolección, Realización de los
movimientos 6. Recipiente
la recolección del LEF
administrar agua para eliminar para
Frasco de boca
eventuales restos de alimentos; ancha, con tapa de
• Recolectar las muestras de LEF por medio de rosca, esterilizado
colectores (Probang) previamente esterilizados,
utilizando uno para cada animal. Se no se
dispone de un número suficiente de colectores,
realizar el lavado en agua limpia y desinfectar 7. Temperatura de la muestra para transporte
en agua hirviendo antes de recolectar la
Foto: Luís Días

muestra de otro animal y así sucesivamente. Refrigerada (+2°C a +8°C); o Congelada (-20ºC)
• Introducir el colector sobre la lengua del
animal presionándolo levemente en la glotis
8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Transferir el
hasta que el animal trague el vaso (asegurar que el contenido del
colector no esté en la tráquea, situación que hará vaso colector al
frasco de boca
NOTA Hasta 48 horas
toser al animal y tratar de expeler el objeto); ancha
• Realizar el raspado de la mucosa esofágico- Las muestras para ensayos
faríngea, haciendo suaves movimientos con el colector (hasta con fines legales deben
5 veces) y retirarlo con cuidado para no derramar el contenido; estar lacradas o selladas 9. Exámenes
• Transferir el material LEF a un frasco de boca ancha y agregar para que solo se pueda
una cantidad igual de Medio Earle 2X; acceder a ellas rompiendo Identificación directa del
• Cerrar el frasco, agitar y realizar la desinfección externa. el lacre o el sello. agente (Fiebre Aftosa)

54 55
1. Material
NOTA 4. Exámenes
rio
Solicitar al laborato
Exudado (secreciones) el medio ap ro pia do . a) Identificación de virus b) Identificación de bacterias

5. Medio
2. Dónde recolectar
a) Eagle 2X b) Tioglicolato de
Mucosa oral, nasal u concentrado, con sodiode sódio
otro tejido afectado por Medios antibiótico y 10% Suero
un proceso inflamatorio conservantes
para transporte
Fetal Bovino (pH 7,4-7,6)
de la muestra
(Tioglicolato de sodio,

3. Cómo recolectar BHI y de Eagle)


6. Recipiente
Recolectar con hisopo estéril, Tubo de ensayo esterilizado
frotando enérgicamente el local

Colocación del

7. Temperatura de la muestra
hisopo en medio
de Tioglicolato
de sodio para transporte
Refrigerada (+2°C a +8°C)

NOTA
8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Utilizar un hisopo para
cada muestra. Hasta 48 horas

56 57
a
1. Material 5. Cantidad
Biopsia de piel y mucosa a y b) Fragmentos de 0,5 cm de diámetro
por 0,3 cm de espesor como mínimo

2. Dónde recolectar
6. Medio
Preferentemente en el área
de transición con y sin lesión a) 3 mL de Eagle b) Formol tamponado al 10%
o solución salina (Volumen de formol, por lo
b
fisiológica - (NaCl menos 10 veces mayor que el
3. Cómo recolectar 0,9%) estéril volumen de tejido que se fijará)

Con sacabocado, tijera,


pinza y bisturí
7. Recipiente
c a) Tubo de ensayo esterilizado, b) Frasco, capacidad
capacidad de acuerdo con el de acuerdo con el
tamaño del fragmento tamaño del fragmento

8. Temperatura de la muestra para transporte


Realizar tricotomia y antisepsia;
a. Introducir el sacabocado, hacerlo
a) Refrigerada b) Ambiente o Refrigerada
girar y retirar el fragmento;
b. Con ayuda de una pinza y tijeras, (+2°C a +8°C) (+2°C a +8°C). Nunca congelar
cortar el fragmento para la biopsia;
c. Fragmento extraído;

9. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


d. Sumergir un fragmento d
en el medio de Eagle
(o en solución salina); y
e. Otro fragmento en formol al 10%. e a) Hasta b) Enviar en el mismo tiempo que las
48 horas muestras refrigeradas. Los fragmentos
4. Exámenes en solución de formol al 10%, aunque
no estén totalmente fijados, pueden
a) Identificación directa del agente b) Histopatológico enviarse al laboratorio.

58 59
1. Material 5. Medio
Raspado de la piel Ninguno

6. Recipiente
Colector universal

2. Dónde recolectar
En la periferia de las
áreas lesionadas

Nonononon
nonon non
7. Temperatura de la
3. Cómo recolectar muestra para transporte

Hacer el raspado Refrigerada


profundo con (+2°C a +8°C)
hoja de bisturí

8. Tiempo crítico
para llegar al
laboratorio
4. Cantidad Hasta 48 horas
Cerca de 1 g

9. Exámenes
Identificación
directa del agente

60 61
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular;; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). (alrededor de 6 veces)
cava craneal Si se utiliza tubo con gel
separador, será necesario
3. Cómo recolectar
centrifugar la sangre
como mínimo
Utilizar sistema de 30 minutos y
vacío o jeringa y aguja como máximo
2 horas
después de
la extracción,
y enviar el
suero en el
mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación b) Identificación
de anticuerpos directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL.
Hasta 48 horas

62 63
Sistema respiratorio Principales enfermedades del sistema
respiratorio y especies afectadas
Las enfermedades respiratorias son multifactoriales ESPECIES AFECTADAS
y causan mortalidad, especialmente en animales ENFERMEDADES
jóvenes. Los cambios climáticos, el manejo zootécnico
y las instalaciones inadecuadas estresan y debilitan Tuberculosis
a los animales, predisponiéndolos a infecciones. (Mycobacterium
X X X X X
El diagnóstico debe basarse en el conjunto de bovis) y otras
datos, tanto clínicos como epidemiológicos y en la micobacteriosis
confirmación de laboratorio. El material clínico de Linfadenitis caseosa - - X X -
elección para el diagnóstico diferencial debe incluir
Pleuroneumonía
tejido pulmonar y ganglios linfáticos regionales, contagiosa
y secreciones respiratorias y oculares. El suero X X X X X
(Micoplasmosis,
sanguíneo puede ayudar al diagnóstico. Actinobacilosis)
Neumonía
causada por X X X X X
agentes piogénicos
Enfermedad de
- X - - -
Aujeszky
Rinitis atrófica
(Bordetella
bronchiseptica - X - - -
y Pasteurella
multocida)
Influenza X X X X X
Virus Sincitial
X - - - -
Respiratorio
Muermo - - - - X
Rinoneumonitis
- - - - X
equina
Arteritis viral equina - - - - X
Maedi-Visna - - X - -

64 65
Material para la toma de muestras
para el diagnóstico de enfermedades Colector universal estéril
Tabla para corte
del sistema respiratorio de órganos

Tijera
para
separar
Piedra
huesos
para afilar
cuchillos
Tubos de vacío para Cuchillos
Medios para transporte de
muestras (BHI, A3XB, Eagle) extracción de sangre,
con gel separador,
sin y con anticoagulante Tijeras quirúrgicas

Microtubos tipo
“Eppendorf”
Tubos
con tapa
de rosca

Hisopo estéril (Comercial)

Tubo tipo
Aguja para extracción KMA (tapa Pinza diente
de sangre en vacío de rosca) de ratón
Mango de bisturí

Sistema para extracción Hoja de bisturí


de sangre en vacío Cary Blair

66 67
Muestras para el diagnóstico de 5. Cantidad
enfermedades del sistema respiratorio a) Fragmentos de 20 g y, por lo b) Fragmentos de
menos, un linfonodo regional 3x1x1 cm de cada órgano

1. Material
Pulmón y 6. Medio
linfonodos
a) Ninguno b) Formol tamponado al 10% (volumen
de formol, por lo menos 10 veces el
volumen del tejido que se fijará)
2. Dónde recolectar
Órgano afectado y
linfonodos regionales
7. Recipiente
Lesiones caseosas del pulmón
a) Colector b) Frasco, capacidad de acuerdo
3. Cómo recolectar
de un animal con tuberculosis
universal estéril con el tamaño del fragmento

Con tijera y pinza


estéril, recoger
fragmentos de las
áreas con lesiones 8. Temperatura de la muestra para transporte
(caseosas, purulentas,
marmolada, otras) a) Refrigerada b) Ambiente o
(+2°C a +8°C) Refrigerada (+2°C a +8°C)
Nota
Un fragmento de la lesión
es el material de elección
para el diagnóstico de 9. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
tuberculosis.
a) b) Enviar en el mismo tiempo que la muestra
4. Exámenes Hasta
48 horas
refrigerada. Los fragmentos en solución de
formol al 10%, aunque no estén totalmente
a) Identificación directa del agente b) Histopatológico fijados, pueden enviarse al laboratorio

68 69
1. Material 5. Medio
Secreciones a) Sumergir el hisopo b) Sumergir el hisopo en 2 mL
en 2 mL de Eagle 2X, de: A3XB para Mycoplasma
con antibiótico spp, y Tioglicolato de sodio,
2. Dónde recolectar BHI o Cary Blair para otras
bacterias
Fosas nasales
a

3. Cómo recolectar
Meio Eagle

b Meio BHI
Limpiar la zona con gasa
estéril humedecida en solución
fisiológica, retirando costras, si las
hubiera. Recolectar con hisopo
estéril, frotando enérgicamente la 6. Recipiente
zona, utilizando un hisopo para
cada fosa nasal. Tubo de ensayo
Sumergir el hisopo en el medio estéril con el
para transporte indicado. medio apropiado

7. Temperatura de la
muestra para transporte

Refrigerada
(+2°C a +8°C)
Nota
El suero sanguíneo puede
ayudar al diagnóstico de algu
enfermedades respiratorias;
nas
por
8. Tiempo crítico
para llegar al
4. Exámenes
ese motivo, enviar el suero junt
o
con el material para identifica laboratorio
ción
directa del agente.
a) Identificación de virus b) Identificación de bacterias Hasta 48 horas

70 71
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). (alrededor de 6 veces)
cava craneal Si se utiliza tubo con
gel separador,

3. Cómo recolectar
será necesario
centrifugar la
sangre como
Utilizar sistema de
mínimo 30
vacío o jeringa y aguja
minutos
y como
máximo 2
horas después
de la extracción, y enviar el
suero en el mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación de anticuerpos b) Identificación
directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

72 73
Sistema gastrointestinal
Dada la importancia de la alimentación en los Principales enfermedades del sistema
animales de producción, y la elevada incidencia de
gastrointestinal y especies afectadas
problemas que se relacionan con ella, es necesario
ESPECIES AFECTADAS
evaluar el manejo y las instalaciones, así como
ENFERMEDADES
realizar una inspección de los alimentos, depósitos
y áreas de pastoreo. Las características de la TGE Gastroenteritis
alimentación y su manejo pueden ser el origen de - X - - -
Transmisible
muchos problemas, principalmente digestivos y
Enteritis bacterianas
metabólicos. Para investigar la causa del trastorno, (Colibacilosis,
además del examen clínico general, son muy X X X X X
salmonelosis,
importantes los exámenes complementarios de campilobacteriosis)
muestras del alimento, líquido ruminal, sangre y/o Disentería porcina
heces para el reconocimiento y la diferenciación de (Brachyspira - X - - -
las enfermedades de los órganos digestivos. hyodysenteriae)
Enterotoxemia
(Clostridium X X X X X
perfringens)
Isosporosis
- X - - -
(Isospora suis)
Verminosis
X X X X X
o Helmintiasis
Rotavirosis en
X X X X X
animales jóvenes
Diarrea Viral Bovina X - - - -
Fiebre Catarral
X - - - -
Maligna
Intoxicaciones X X X X X

74 75
Material para la toma de muestras Bolsa plástica
para el diagnóstico de enfermedades estéril

del sistema gastrointestinal

Tubo tipo
KMA (tapa
Tubos de vacío con de rosca)
Guantes para rosca para extracción
palpación de sangre, con gel
separador, con y sin
anticoagulante (EDTA Tubo con
y heparina) tapa de
rosca
Colector Adaptadores
universal para extracción
estéril de sangre en
vacío

Guantes Aguja para extracción de sangre en vacío


de látex

Sistema para extracción


de sangre en vacío
Microtubos tipo
Sonda “Eppendorf”
gástrica

Jeringa y agujas esterilizadas

76 77
Muestras para el diagnóstico 3. Cantidad
de enfermedades del sistema Alrededor de 10 mL

gastrointestinal
4. Medio
1. Material
Ninguno
Contenido ruminal

2. Cómo recolectar
Por sonda gástrica o rumenocentesis
5. Recipiente
Introducir la sonda gástrica por vía oral y retirar el líquido Frasco estéril
ruminal, creando vacío mediante un sistema manual o bomba
eléctrica. En el caso de la rumenocentesis, se debe realizar
la punción en el abdomen izquierdo del animal, en el punto 6. Temperatura
medio entre la última costilla y la articulación fémoro-tibio- de la muestra
rotuliana. Realizar tricotomía y antisepsia en un área de 5cm para transporte
x 5cm. Aplicar de 2 a 3 mL de lidocaína subcutánea, al 2%.
Introducir la cánula ventrocraneal y aspirar el contenido con Refrigerada (+2°C a +8°C)
una jeringa de 20 mL. Si se produjera una obstrucción de la o Congelada (-20°C)
aguja, inyectar aire con otra jeringa. Obtener de 3 a 10 mL de
líquido ruminal. Antes de retirar la aguja, introducir 5 mL de
Nota
7. Tiempo crítico
solución fisiológica estéril, para evitar adherencia. Finalmente,
retirar la jeringa y la aguja, de forma suave y conjunta. Enfriar o congelar lo má
s para llegar al
rápido posible despué
s de laboratorio
la recolección y hacer lleg
ar
la muestra al laboratori Hasta 48 horas
o en
esas condiciones.

8. Exámenes
Toxicológicos

78 79
1. Material 3. Cantidad
Heces 20 g de heces por animal. En el caso de
rebaños, recolectar 10 a 15 muestras de cada
franja etaria. Utilizar un frasco por animal.

2. Cómo recolectar
Directamente del recto
(utilizando guantes)
4. Medio
o de la porción Ninguno
central del bolo fecal
(utilizando espátula),
inmediatamente
después de la
defecación
5. Recipiente
Colector universal estéril

6. Temperatura de la muestra para transporte


nota
En el caso de material de nec Refrigerada (+2°C a +8°C)
ropsia,
enviar un fragmento de las asa
s
intestinales con el contenido feca
l,
atando los extremos con cord
7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
el.
Además de eso, enviar fragmen
tos
del hígado y del riñón, una par
te Hasta 48 horas
refrigerada para exámenes
toxicológicos y otra parte en form
ol al
10% para exámenes histopato
lógicos.
8. Exámenes
La identificación de la sustanc
ia tóxica
en estos órganos puede ayudar
al
diagnóstico de la causa de mue Identificación directa del agente
rte.

80 81
1. Material 4. Cantidad
Alimentos para nutrición animal a) 1 kg para b) 2 kg para alimentos voluminosos, como
pienso, granos ensilado, heno, y para alimentos que tienden
y concentrados, a separarse como pienso y concentrados
2. Qué recolectar entre otros
alimentos.
que contienen urea, harina de semillas de
algodón, entre otros productos.
Pienso comercial, granos, forraje fresco y conservado
(ensilado y heno), restos de cultivos, paja y suplementos
NOTA
Realizar las recolecciones
en
ente
5. Recipiente
varios puntos, principalm
3. Cómo recolectar para productos que no
Bolsas plásticas
resistentes para
Retirar muestras parciales de cada alimento que se presentan una perfecta
den productos sólidos
analizará, recolectadas en distintos puntos del lugar de homogeneidad o que tien
a la sep ara ció n.
interés: campo, depósitos, sacos, comederos, silos etc. Frascos de polietileno
Después de la homogeneización, retirar de esa muestra para productos líquidos
media una muestra única, que debe ser representativa de (melaza, grasa)
la media del material que se analizará.

NOTA
de un único
Nunca retirar la muestra
ser á representativa y 6. Temperatura de la muestra para transporte
punto, ya que no
ion es en cuanto a la
no per mitirá conclus a) Ambiente (material seco) b) Refrigerada
calidad del producto. (+2°C a +8°C) para
material verde o húmedo

7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


Hasta 48 horas

8. Exámenes
Análisis química e identificación del agente
(toxinas y bacterias, entre otros)

82 83
1. Material a) Obtención de suero b y c) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se (EDTAk2).
a) Vena yugular; retraiga el coágulo, y exude el Homogeneizar
b) Vena coccígea; suero (30 a 60 min). Transferir suavemente,
c) Vena mamaria; y el suero a otro tubo (tapón invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena de rosca o tipo “Eppendorf”). (alrededor de
cava craneal Si se utiliza tubo con gel 6 veces)
separador, será necesario

3. Cómo recolectar
centrifugar la sangre
como mínimo
30 minutos y
Utilizar sistema de
como máximo
vacío o jeringa y aguja
2 horas
después de
la extracción, EDTA Heparina
y enviar el
suero en el
mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación b) Identificación c) Toxicológicos
4. Recipiente y cantidad de anticuerpos directa del agente y bioquímicos

a) TTubo de b) Tubo de c) Tubo de 6. Temperatura de la muestra para transporte


ensayo sin ensayo con ensayo con
anticoagulante: EDTA K2: heparina: a, b y c) Refrigerada (+2°C a +8°C)
capacidad 10 mL. capacidad capacidad

7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


5 mL. 5 a 10 mL.

Hasta 48 horas

84 85
Principales enfermedades del sistema
Sistema reproductor y urinario reproductor y urinario y especies afectadas
ESPECIES AFECTADAS
ENFERMEDADES
Los problemas reproductivos están asociados con
repetición del celo, infertilidad, descarte prematuro Brucelosis X X X X X
de reproductores, aborto, momificación del feto,
nacimiento de becerros con malformaciones y Leptospirosis X X X X X
débiles, entre otros factores. La etiología de las Campilobacteriosis
enfermedades reproductivas es multifactorial, Genital X - - - -
y la causa puede ser infecciosa o no infecciosa Micoplasmosis X X X X X
y requerir diagnóstico diferencial para la
identificación del agente. Por ese motivo, se Neosporosis X - X X X
deben examinar prioritariamente muestras de Toxoplasmosis X X X X X
(raro)
tejidos fetales refrigerados y fijados en formol,
secreciones cervicovaginales y prepuciales. Tricomoniasis
Genital Bovina X - - - -
La identificación de anticuerpos en el suero
sanguíneo puede ayudar al diagnóstico. Rinotraqueitis
infecciosa bovina/
X - - - -
Vulvovaginitis
pustular infecciosa
Diarrea viral bovina X - - - -
Parvovirosis - X - - -
Enfermedad
- X - - -
de Aujeszky
Peste porcina clásica - X - - -
Síndrome reproducti-
vo y respiratorio - X - - -
porcino (SRRP)
Circovirosis - X - - -
Clamidiosis X - X - -
Arteritis viral equina - - - - X
Aborto por herpesvi-
- - - - X
rus equino
86 87
Material para la toma de muestras
Colector
para el diagnóstico de enfermedades universal estéril
del sistema reproductor y urinario Bolsa plástica

Tabla para corte


de órganos

Hisopo estéril

Hisopo estéril
Pipeta de
inseminación artificial Tijera para
Hisopo acoplado separar
Piedra para
a la pipeta de huesos
afilar cuchillos
inseminación artificial
Cuchillos
Aguja para recolección Tubo con
de sangre en vacío tapa de
rosca Microtubos tipo
“Eppendorf”
Sistema para recolección
de sangre en vacío

Papel
absorbente
Tubo tipo
Medios para el transporte KMA (tapa
de secreciones (BHI, Tubos de vacío para recolección de rosca) Pajillas
A3XB, Eagle y Lactopep) de sangre, con gel separador,
de semen
con y sin anticoagulante Gasa

88 89
Muestras para el diagnóstico 3. Recipiente
de enfermedades del sistema Bolsa plástica
reproductor y urinario (como mínimo
3 bolsas para
cada feto)
1. Material
Fetos de hasta 2Kg

2. Qué recolectar Feto bovino 4. Temperatura


de la muestra
Feto completo
para transporte

Refrigerada (+2°C a +8°C)

Feto ovino
5. Tiempo crítico
para llegar al
Feto caprino laboratorio

Hasta 48 horas

nota
No congelar

6. Exámenes
El laboratorio hará la autopsia y
extraerá las muestras para los distintos
exámenes.
Identificación directa
Extraer suero sanguíneo de la e indirecta del
hembra que abortó. agente y examen
Fetos porcinos histopatológico

90 91
1. Material 5. Cantidad
a1) Fragmentos de cada b) Un fragmento
Feto y mortinato órgano, aproximadamente 20 g de cada órgano de
con más de 2 Kg a2) 3 mL de cada fluido aproximadamente
3x3x1 cm

2. Qué recolectar
6. Medio
a) Ninguno b) Órganos fijados con formol
Hígado, pulmón, bazo,
tamponado 10% (volumen de formol,
sistema nervioso central,
por lo menos 10 veces el volumen del
corazón, riñón, timo
tejido que se fijará).
y líquidos corporales
(líquido torácico y
abdominal o pericárdico
y contenido gástrico)
7. Recipiente
a1) Órganos: bolsa plástica o b) Frasco; capacidad
Recolección de colector universal. de acuerdo con el
3. Cómo recolectar contenido gástrico a2) Fluido: tubo de ensayo tamaño del fragmento
esterilizado o colector universal
Realizar la autopsia y recolectar los fragmentos de
los órganos con pinza y tijera esterilizadas. Elegir una
porción del órgano con lesión, y si no hubiera lesión, 8. Temperatura de la muestra para transporte
recolectar aleatoriamente. Extraer los fluidos corporales
con jeringa y aguja esterilizadas a) Refrigerada b) Ambiente o
(+2°C a +8°C) Refrigerada (+2°C a +8°C).
Nunca congelar
4. Exámenes
a1) Identificación directa del agente
a2) Anticuerpos
b) Histopatológico 9. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
a) Hasta b) Enviar en el mismo tiempo que la muestra
48 horas refrigerada. Los fragmentos en solución de
formol 10%, aunque no estén totalmente
Fluido
torácico/ fijados, pueden enviarse al laboratorio
abdominal

92 93
1. Material 4. Cantidad
Placenta a) 20 g b) Fragmento de 3x3x1 cm

2. Cómo recolectar
Elegir siempre áreas de transición del tejido con y sin 5. Medio
lesión. En los rumiantes, recolectar algunas carúnculas
a) Ninguno b) Formol tamponado 10% (volumen
de formol, por lo menos 10 veces el
volumen del tejido que se fijará)

6. Recipiente
a) Bolsa plástica o b) Frasco; capacidad de
colector universal acuerdo con el tamaño
del fragmento

7. Temperatura de la muestra para transporte


3. Exámenes
a) Refrigerada b) Ambiente o
a) Identificación directa del agente b) Examen histopatológico (+2°C a +8°C) Refrigerada (+2°C a +8°C).
Nunca congelar

b
a 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
a) Hasta b) Enviar en el mismo tiempo que la muestra
48 horas refrigerada. Los fragmentos en solución de
formol 10%, aunque no estén totalmente
fijados, pueden enviarse al laboratorio

94 95
1. Material 3. Cantidad
Semen Semen in natura: 0,5 mL
Semen industrializado:
10 pajillas de 0,5 mL

2. Cómo recolectar
Excitar al toro con 4. Recipiente
una hembra o con
electroeyaculador. Pajilla o tubo de
Recolectar el ensayo esterilizado
semen, utilizando
una vagina artificial

5. Temperatura de la
Foto: CRVlagoa

muestra para transporte

Refrigerada (+2°C a +8°C)


oa
Foto: CRVlag

nota
El volumen de se
men que se 6. Tiempo crítico
deberá enviar al
laboratorio depe
nde
para llegar al
de los análisis a
realizar; en caso
de laboratório
dudas, consultar
al laboratorio
Identificar las m Hasta 48 horas
uestras en forma
individual.

7. Exámenes
Identificación directa del agente

96 97
nota
5. Medio
,
Antes de la recolección
1. Material mantene r al toro en rep oso
07 días.
Esmegma prepucial sexual como mínimo a) Sumergir el b) Sumergir el c) Sumergir el
n del hisopo en 2 mL hisopo en 2 mL de: hisopo en 10 mL
Evitar la contaminació
con la ori na. de Eagle 2X, Tioglicolato de sodio de Lactopep (0,5
esmegma
concentrado, o BHI (Campylobacter g de Lactopep
realizar
Cuando corresponda,
2. Dónde recolectar primero el hisopad o prepucial y
con antibiótico spp), A3xB
Mycoplasma spp)
para 10 mL de
solución salina
er al lavad o.
Cavidad prepucial luego proced y Cary Blair (otras 0,85%)
los bacterias)
Solicitar al laboratorio
me dio s ad ecu ad os.
c
a

3. Cómo recolectar
Técnica del hisopo:
Realizar tricotomía en el orificio b
prepucial y lavar externamente
el prepucio, solo con agua, y
secar con papel absorbente.
Recolectar el esmegma
introduciendo un hisopo estéril 6. Recipiente
acoplado a una pipeta de
inseminación artificial en el fondo Tubo de ensayo
de saco prepucial. Frotar el
hisopo en la mucosa prepucial
y peneana. Retirar el hisopo y 7. Temperatura de la muestra para transporte
sumergirlo en el medio para el
transporte adecuado. Utilizar un a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C) c) Ambiente
hisopo para cada muestra.

4. Exámenes 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a) Identificación b) Identificación c) Identificación de
de virus de bacterias Tritrichomonas foetus a y b) Hasta 48 horas c) hasta 6 días

98 99
r al
antene
ión, m 0 días.
nota ole c c
ec e 07 a
1
1. Material de la r
Antes oso sexual d
p
4. Cantidad
re l
toro en ción de
Esmegma prepucial la co ntamina . 40 mL de solución
Evitar ina
n la or nes
ma co oleccio salina al 0,85%
esmeg e a liza r 3 rec e 7 días,
r d
esario n intervalos
Es nec
2. Dónde recolectar como
m ínim o, co
el repo
s o se x ual.

mante
niendo 5. Medio
Cavidad prepucial
Lactopep (proporción: 2 g/40
mL de solución salina)

3. Cómo recolectar
Técnica de lavado prepucial:
Realizar tricotomía en el orificio
6. Recipiente
prepucial y lavar externamente el Tubo cónico
prepucio solo con agua. Secar con
papel absorbente. Lavar la cavidad
prepucial, utilizando una pipeta de
inseminación artificial acoplada a
un tubo flexible conectado a una
7. Temperatura
de la muestra para
jeringa con 40 mL de solución salina
transporte
estéril al 0,85%. Introducir la pipeta
hasta el fondo de saco prepucial e Ambiente
inyectar el volumen total de solución
salina. Retirar la pipeta y obturar
el orificio prepucial con una de las
manos y, con la otra, masajear 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
vigorosamente el prepucio durante
Hasta 06 dias
un minuto. Liberar el orificio prepucial
y recoger el líquido en el frasco que
contiene el medio Lactopep (en
polvo). Homogeneizar y completar el 9. Examen
volumen con solución salina, hasta
obtener 40 mL Identificación de Tritrichomonas foetus

100 101
nota
1. Material El período ideal pa
ra la
recolección de m
oco vaginal es
Moco cervicovaginal durante los días
posteriores al ce
(evitar la recolecció lo
n inmediatamen
después de la co te
pulación).
2. Dónde recolectar Es esencial utilizar
un espéculo
para obtener un
Cavidad vaginal a muestra de moc
cervicovaginal de o
buena calidad.
cervicovaginal de
boa qualidade.
3. Cómo recolectar
Lavar la región vulvar solo con agua y secar con papel
absorbente. Adaptar el hisopo a una pipeta de inseminación
artificial y, con ayuda de un espéculo, introducir el hisopo en
la vulva hasta el cuello uterino. Friccionar la mucosa, retirar el
hisopo y sumergirlo en un tubo de ensayo que contenga el
medio de transporte. Utilizar un hisopo para cada muestra.
6. Recipiente
4. Exámenes Tubo de ensayo
esterilizado que
a) Identificación b) Identificación c) Identificación de contenga el medio
de virus de bacterias Tritrichomonas foetus adecuado

5. Medio 7. Temperatura de la muestra para transporte


a) Sumergir el b) Sumergir el c) Sumergir el a y b) Refrigerada c) Ambiente
hisopo en 2 mL hisopo en 2 mL hisopo en 10 mL (+2°C a +8°C)
de Eagle 2X, de: Tioglicolato de Lactopep (0,5
concentrado de sodio o BHI g de Lactopep
con antibiótico (Campylobacter spp),
A3xB (Mycoplasma
para 10 mL de
solución salina
8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
spp) y Cary Blair 0,85%)
a y b) Hasta 48 horas c) Hasta 6 dias
(otras bacterias)

102 103
1. Material 5. Medio y cantidad
Orina a) Medio de Fletcher. b) BHI. Colocar c) Ninguno.
Colocar 1 mL de orina 1 mL de la Enviar el
en 9 mL de solución orina en 3 mL resto de
2. Dónde recolectar
salina tamponada, en un tubo la orina,
pH 7,2 e inocular 2 que contenga alrededor de
mL de la dilución en el medio de 20 mL.
Se puede obtener una muestra de orina de la micción
un tubo con medio transporte (BHI).
espontánea, de la micción inducida, por punción vesical
de Fletcher.
o mediante cateterismo uretral en hembras.

3. Cómo recolectar 6. Recipiente


Antes de la recolección, higienizar la región de la vulva a y b) Tubo de ensayo que c) Colector universal estéril
o prepucio con agua y jabón, enjuagar y secar con contenga el medio adecuado
papel absorbente.
Recolectar el chorro medio de la orina con colector
universal estéril.
Existen varios procedimientos para inducir la micción:
- Obstruir los ojos y la boca de pequeños rumiantes, nota
durante unos segundos, tanto en hembras como en El laboratorio
machos, estimula la eliminación de orina. proporciona
- Se induce la micción en toros mediante un masaje los medios
suave y rítmico del orificio prepucial y, en las vacas, específicos.
mediante un masaje de la vulva. Advertimos que estos
métodos solo funcionan cuando la vejiga está llena.

7. Temperatura de la muestra para transporte


- El uso de furosemida (diurético) por vía intravenosa
favorece la micción dentro de los 10 a 15 minutos,
pero no se debe utilizar en animales con sospecha de
Refrigerada (+2°C a +8°C)
urolitiasis.

4. Exámenes
8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
a) Identificación b) Identificación c) Técnicas de
de Leptospira spp. de Brucella spp. biología molecular Hasta 48 horas

104 105
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). (alrededor de 6 veces)
cava craneal Si se utiliza tubo con
gel separador,
3. Cómo recolectar
será necesario
centrifugar la
Utilizar sistema de sangre como
vacío o jeringa y aguja mínimo 30
minutos
y como
máximo 2
horas después
de la extracción,
y enviar el suero en el
mismo tubo.
5. Exámenes
a) Identificación b) Identificación
de anticuerpos directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

106 107
Sistemas circulatorio y linfático Principales enfermedades de los sistemas
circulatorio y linfático y especies afectadas
Las enfermedades del sistema circulatorio y linfático ESPECIES AFECTADAS
producen signos clínicos diversos, tales como edema ENFERMEDADES
subcutáneo, coloración anormal de las mucosas
(palidez, cianosis, congestión e ictericia), hemorragias Peste Porcina Clásica - X - - -
(petequias y sufusiones) en la piel y en los órganos
Peste Porcina
internos, edema de órganos, principalmente - X - - -
Africana
pulmonar y cerebral. Esos signos son causados
por la acción de algunos patógenos que lesionan Circovirosis - X - - -
el endotelio y pueden causar dificultad respiratoria, Diarrea viral bovina X - - - -
cansancio, anorexia, apatía y postración en el animal.
Carbunco
El diagnóstico diferencial utiliza fragmentos de X X X X X
Hemático (Antrax)
órganos refrigerados y fijados en formol, sangre con
Hemoglobinuria
anticoagulante y suero sanguíneo. X - X X -
bacilar
Leptospirosis X X X X X
Erisipela - X - - -
Enfermedad del
- X - - -
Edema
Babesiosis
(protozoarios X X X X X
sanguíneos)
Anaplasmosis X - X X -
Púrpura
X X - - X
hemorrágica
Anemia
- - - - X
infecciosa equina

108 109
Material para la toma de muestras Potes de plástico, de boca
ancha y tapa de rosca,
para el diagnóstico de enfermedades con capacidad
para diferentes
de los sistemas circulatorio y linfático volúmenes

Tubos de vacío para extracción de


sangre, con gel separador, con y
sin anticoagulante

Tubo
con
tapa
de Frasco de formol
Jeringa y aguja
rosca Portaobjetos al 35-40% (para
estériles Bolsa plástica
Agujas para para láminas utilizar, diluir
extracción de una parte de
sangre en vacío formol en 9
Sistema para extracción partes de agua)
de sangre en vacío
Tubo tipo Sierra de arco
KMA (tapa
de rosca)

Tabla para Microtubos tipo


corte de “Eppendorf”
órganos Cizalla

Portaobjetos
Cincel

Tijera para
separar
Gancho
huesos
Piedra para Martillo
afilar cuchillos
Cuchillo
Cuchillos Hacha
110 111
Muestras para el diagnóstico de 3. Exámenes
enfermedades de los sistemas a Identificación directa del agente

circulatorio y linfático Pulmón


Riñón Corazón

1. Material
Órganos - sistema nervioso central, hígado, bazo,
pulmón, riñón, corazón, linfonodos e intestino
delgado y grueso
Hígado Bazo

2. Cómo recolectar
Realizar la autopsia y extraer los fragmentos con tijera Linfonodo
o bisturí y pinza esterilizados, evitando dañar el tejido al
hacerlo. Elegir una porción del órgano con lesión, y si no Fragmentos de
órganos que
hubiera lesión, recolectar aleatoriamente. Seleccionar la se enviarán
porción del intestino delgado con contenido, ligar y cortar. Asa
intestinal al laboratorio,
Extraer los linfonodos linfáticos regionales. ligada refrigerados.

Uno de los
hemisferios
cerebrales

cerebelo Corte del


Médula tálamo
cervical

112 113
b Examen histopatológico
Pulmón
5. Medio
Bazo
Riñón
a) Ninguno b) Formol tamponado 10% (volumen de
Intestino formol, por lo menos 10 veces el volumen
delgado del tejido que se fijará)
Hígado

6. Recipiente
a) Bolsa plástica o b) Frasco; capacidad de de acuerdo
Corazón linfonodos colector universal con el tamaño del fragmento
Íleon terminal

Atención
no
Fragmentos de Colocar cada órga
Otro hemisferio cerebral
va ses ind ividuales
órganos que se en en
ac ión de
enviarán al laboratorio, para identific
fijados en formol agentes
a Fragmentos de SNC y b Tejidos
otros órganos, en bolsas fijados en
plásticas esterilizadas formol
Tronco (refrigerados)
encefálico
7. Temperatura de la muestra para transporte
Mitad del cerebelo

a) Refrigerada b) Ambiente o Refrigerada


(+2°C a +8°C) (+2°C a +8°C)

4. Cantidad 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a1) Fragmentos de 20 g b1) Fragmentos de 3x1x1cm
de cada órgano de cada órgano a) Hasta b) Enviar en el mismo tiempo que la muestra
a2) 10 a 30 cm de b2) 10 cm de órgano tubular 48 horas refrigerada. Los fragmentos en solución de
intestino delgado (asa (íleon con placas de Peyer) formol 10%, aunque no estén totalmente
ligada) fijados, pueden enviarse al laboratorio

114 115
1. Material Preparación de un frotis sanguíneo 4. Cantidad
en campo, inmediatamente después
Sangre capilar y venosa de la recolección de la muestra. Tres láminas por animal

a
2. Dónde recolectar
Preferentemente sangre 5. Medio
periférica mediante
punción de capilares en la Ninguno
punta de la oreja

3. Como realizar el frotis de sangre b 6. Recipiente


1. Mantener la lámina portaobjeto en forma horizontal entre Transportar en cajas o frascos
el pulgar y el índice. de paredes rígidas y con
2. Colocar una pequeña gota de sangre sin anticoagulante ranuras adecuadas para la
en un extremo de la lámina. (figura a) fijación de los portaobjetos
3. Colocar una segunda lámina (extensora) contra la
superficie de la lámina, adelante de la gota de sangre,
formando un ángulo de 45º.
4. Desplazar la lámina hacia atrás, como para que entre en
c 7. Temperatura
de la muestra
contacto con la gota de sangre, presionándola hasta que la
gota se expanda por todo el borde de la lámina. (figura b)
para transporte
5. Deslizar la lámina, manteniendo siempre el mismo Ambiente
ángulo, en un solo movimiento firme y uniforme, sin separar
una lámina de la otra. Se forma así una delgada capa de
sangre. (figura c)
6. Secar rápidamente al aire e identificar con lápiz. 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
7. Fijar por dos minutos en alcohol metílico, retirar y secar.
Hasta 48 horas
8. Enviar al laboratorio en portaobjetos.

NOTA
Se puede incrementar la sensibilidad de la técnica
realizando los frotis sanguíneos mediante punción
9. Exámenes
de los capilares de la punta de la oreja. Identificación de hemoparásitos

116 117
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). Si se (alrededor de 6 veces)
cava craneal utiliza tubo con gel separador,
será necesario

3. Cómo recolectar
centrifugar la
sangre como
mínimo 30
Utilizar sistema de
minutos
vacío o jeringa y aguja
y como
máximo
2 horas
después de
la extracción,
y enviar el suero en el
mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación b) Identificación
de anticuerpos directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

118 119
Sistema osteoarticular
La evaluación de problemas osteoarticulares
debe considerar la posibilidad de alteraciones del
encéfalo y del aparato locomotor, teniendo presente
que los signos clínicos pueden originarse debido a
anomalías de un sistema o del otro. Al realizar el
Principales enfermedades del sistema
diagnóstico diferencial, se debe considerar osteoarticular y especies afectadas
artrosis y artritis séptica, malformaciones de las ESPECIES AFECTADAS
extremidades, traumatismos en el parto o causados ENFERMEDADES
por accidentes. El material clínico de elección para
CAE (artritis-
la identificación de agentes infecciosos es el líquido - - - X -
encefalitis caprina)
sinovial. El suero sanguíneo puede ayudar al
diagnóstico. Maedi-Visna - - X - -
Brucelosis X X X X X
Clamidiosis
(Chlamydophila - - X X -
psittaci y pecorum)
Tuberculosis X X X X X
Micoplasmosis X X X X X
Erisipela porcina - X - - -
Artritis causadas por
bacterias
X X X X X
piógenas y entero-
bacterias

120 121
Material para la toma de muestras
para el diagnóstico de enfermedades Algodón
del sistema osteoarticular

Productos para Material para


antisepsia tricotomía
Jeringa y agujas

Aguja para extracción


de sangre en vacío
Tubos de vacío para
extracción de sangre,
Sistema para con gel separador, con
extracción de y sin anticoagulante
sangre en vacío

Tubo tipo
KMA (tapa
de rosca)
Microtubos tipo
“Eppendorf”

Hisopo estéril

Hisopo estéril

122 123
Muestra para el diagnóstico
de enfermedades del
sistema osteoarticular Nota 4. Cantidad
El suero sanguíneo
1. Material puede ayudar al
Mínimo 1,5 mL
Líquido sinovial diagnóstico de algunas
enfermedades
osteoarticulares.
2. Dónde recolectar 5. Recipiente
Articulaciones afectadas Tubo estéril
- escapulohumeral,
coxofemoral y articulaciones
del carpo y del tarso
El líquido sinovial

3. Cómo recolectar
normal es incoloro 6. Temperatura
de la muestra
y muy viscoso

1º Sedar al animal; para transporte


2º Realizar tricotomía y
desinfección en la región Refrigerada
de la punción; (+2°C a +8°C)
3ª Contener al animal Líquido sinovial
para evitar movimientos Punción de la articulación del de aspecto
carpo en un ovino con artritis sanguinolento en
bruscos;
un caso de artritis
4º Punzar la articulación
afectada, utilizando jeringas con agujas de 0,8 mm
7. Tiempo crítico
de diámetro y 40 mm de largo para las articulaciones para llegar al
escapulohumeral y coxofemoral y con agujas más nota laboratorio
cortas para articulaciones del carpo y del tarso; Si la lesión supura
, recolectar el Hasta 48 horas
5º Posteriormente, dividir la muestra entre un tubo exudado con his
opo, utilizando
con anticoagulante, para el estudio citológico, y otro los medios espe
cíficos para
tubo sin anticoagulante, para la identificación directa cada situación.
del agente; 8. Exámenes
6º Retirar la aguja y aplicar un vendaje en el lugar de
la punción. Identificación directa del agente y citológico

124 125
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). Si se (alrededor de 6 veces)
cava craneal utiliza tubo con gel separador,
será necesario

3. Cómo recolectar
centrifugar la
sangre como
mínimo 30
Utilizar sistema de
minutos
vacío o jeringa y aguja
y como
máximo
2 horas
después de
la extracción,
y enviar el suero en el
mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación b) Identificación
de anticuerpos directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

126 127
Principales enfermedades del sistema
Sistema nervioso central (SNC) nervioso central y especies afectadas
ESPECIES AFECTADAS
ENFERMEDADES
La importancia de las enfermedades del sistema
nervioso central (SNC) se acrecentó luego de la aparición
Rabia X X X X X
de la encefalopatía espongiforme bovina (EEB), por
tratarse de una zoonosis. A partir de ese momento Encefalopatía Espon-
X - - - -
aumentaron exponencialmente los conocimientos sobre giforme Bovina (EEB)
ese tipo de enfermedades. La patología del sistema Scrapie - - X - -
nervioso es compleja debido a la gran variabilidad
Encefalitis
anatómica de sus estructuras: encéfalo (cerebro, tronco X - - - -
Herpética Bovina
encefálico y cerebelo) y médula espinal, que actúan
de forma integrada para controlar las funciones del Fiebre Catarral
X - - - -
organismo. Las bacterias, los virus, los parásitos y Maligna
los priones, los tumores, las sustancias tóxicas, o los Enfermedad
traumatismos, pueden afectar directa o indirectamente de Aujeszky X X - - -
el SNC y producir signos clínicos que permiten identificar (Pseudorabia)
una disfunción neurológica y, en algunos casos, la Listeriosis X - X X X
localización de la lesión. El compromiso del SNC se
Botulismo X X X X X
manifiesta por alteraciones de las funciones sensitivas,
motoras, reflejas, sensoriales y conductuales. Para Intoxicaciones (arsé-
confirmar la causa de la enfermedad neurológica es nico, plomo,
organofosforados, X X X X X
necesario realizar el diagnóstico diferencial. Se deben
carbamatos y
extraer estructuras del encéfalo y de otros órganos plantas tóxicas)
para identificación directa del agente y se las debe
Encefalitis
mantener refrigeradas hasta que lleguen al laboratorio; - - - - X
herpética equina
para el examen histopatológico, se las debe fijar en
formol al 10%. La identificación de anticuerpos en el Encefalomielitis
suero sanguíneo puede ayudar al diagnóstico. equina del
- - - - X
este, del oeste y
venezolana
Polioencefaloma-
X - X X -
lacia
Leucoencefalomala-
- - - - X
cia equina
128 129
Material para la toma de muestras Potes de plástico,
de boca ancha
para el diagnóstico de enfermedades y tapa de rosca,
con capacidad
del sistema nervioso central (SNC) para diferentes
volúmenes Frasco de
formol al
35- 40%
Tubos de (para su
Agujas vacío para utilización,
para extracción de diluir una
extracción sangre, con parte de
de sangre gel separador, formol en
en vacío con y sin 9 partes de
anticoagulante agua)
Jeringa y aguja
Bolsa plástica
estériles

Sistema para extracción


de sangre en vacío

Microtubos Sierra
tipo de arco
“Eppendorf”
Colector Tubo tipo
universal estéril KMA (tapa
Tabla para corte de rosca)
Cizalla
de órganos

Cincel

Gancho
Tijera para Martillo
Piedra para separar
afilar cuchillos huesos Hacha
Cuchillo
Cuchillos
130 131
Muestras para el diagnóstico nota 3. Medio
Nunca congelar, ya que el
de enfermedades del sistema laboratorio dividirá las porcion
es
Ninguno

nervioso central (SNC) para los diferentes exámenes


inclusive, fijará una parte en
e,
formol.

1. Material 4. Recipiente
SNC completo Bolsa plástica o
frasco; capacidad
de acuerdo con el
2. Cómo recolectar tamaño del órgano

1º paso: ccon un cuchillo y la ayuda


de un gancho, retirar la piel y los
5. Temperatura
músculos de la calota craneal
2º paso: cortar el hueso con hacha,
sierra o cincel y martillo de la muestra
3º paso: seccionar con tijera la para transporte
duramadre y retirar el encéfalo
cortando los nervios craneales Refrigerada (+2°C a +8°C)
4º paso: enviar el encéfalo completo
con la médula espinal cervical y el
conjunto hipófisis, ganglios del nervio
trigémino y rete mirabile carotídea 6. Tiempo crítico
(capilares que rodean la hipófisis) para llegar al
laboratorio

Hasta 48 horas

7. Exámenes
Identificación directa del agente y examen histopatológico

132 133
1. Material 4. Paso a Paso para separar el SNC
Separación del cerebelo
Estructuras del sistema nervioso central (SNC)
Seccionar los
2. Cómo recolectar
pedúnculos
cerebelosos,
uno a cada vez,
Disecar la piel y los músculos de la cabeza. Cortar la
introduciendo
calota craneal, utilizando sierra, hacha o cincel y martillo.
una hoja afilada
Con tijera y pinza, seccionar la duramadre y los nervios
y haciendo un
craneales. Retirar el encéfalo y la médula espinal cervical.
corte rostral y
Separar las estructuras para los análisis de laboratorio.
horizontal entre el
tronco encefálico y
3. Estructuras anatómicas del SNC el cerebelo

Encéfalo y médula
espinal cervical
a - hemisferios Separación del tronco encefálico
cerebrales; Encéfalo Separar el tronco encefálico del
b - cerebelo; resto del encéfalo, a la altura del
c - tronco tálamo, de ambos lados
encefálico; a
d - médula
espinal
cervical a

d
Médula espinhal cervical
134 135
5. Exámenes
a Estructuras del SNC para b Estructuras del SNC para examen histopatológico
identificación directa del agente
1

2 2
1
4

3
3
5
Separar en:
1 - hemisferio cerebral;
4 Separar en:
2 – mitad del cerebelo;
1 - hemisferio cerebral; 2 - mitad del cerebelo;
3 - médula espinal cervical;
3 - conjunto de hipófisis, rete mirabile carotídea
4 - tálamo
y ganglio del nervio trigémino; 4 - tronco
encefálico; 5 - médula espinal cervical

8. Temperatura de la muestra para transporte


6. Medio
a) Refrigerada b) Ambiente o
a) Ninguno b) Formol tamponado 10% (volumen (+2°C a +8°C) Refrigerada (+2°C a +8°C)
de formol, por lo menos 10 veces el
volumen del tejido que se fijará).

9. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


7. Recipiente
a) Hasta b) Enviar en el mismo tiempo que la muestra
a) Bolsa plástica o b) Frasco de boca ancha con tapa 48 horas refrigerada. Los fragmentos en solución de
colector universal de rosca; capacidad de acuerdo formol 10%, aunque no estén totalmente
con el tamaño del fragmento fijados, pueden enviarse al laboratorio

136 137
Pulmón
1. Material
Otros órganos -
Nota
hígado, bazo, pulmón,
riñón, corazón, En casos de muerte súbita y
crepitación muscular, recolecta
linfonodos, intestino r
también fragmentos del
delgado y grueso
músculo afectado.

2. Cómo recolectar
Extraer los fragmentos con tijera o bisturí y pinza Riñón
esterilizados, evitando dañar el tejido durante la
extracción. Elegir una parte del órgano con lesión; si
no hay lesión, extraer aleatoriamente. Para el intestino
delgado, seleccionar una porción con contenido, ligar y
cortar. Extraer los ganglios linfáticos regionales. Nota
Enviar al laboratorio por
lo menos un fragmento de
cada órgano refrigerado y
uno en formol.
Hígado
Bazo

Corazón

138 139
Porción del
Asa intestinal ligada intestino
delgado 5. Medio
a) Ninguno b) Formol tamponado 10% (volumen de
formol, por lo menos 10 veces el volumen
del tejido que se fijará).

6. Recipiente
a) Bolsa plástica o b) Frasco; capacidad de acuerdo
colector universal con el tamaño del fragmento.

Íleon terminal nota


(placas de Peyer) Enviar cada órgano en
envases individuales para
linfonodos identificación de agentes

3. Exámenes Fragmentos de SNC


y otros órganos Tejidos fijados en formol
a) Identificación b) Examen
directa del agente histopatológico 7. Temperatura de la muestra para transporte
a) Refrigerada b) Ambiente o Refrigerada
(+2°C a +8°C) (+2°C a +8°C)
4. Cantidad
a1) Fragmentos de b1) Fragmentos de 3x1x1cm 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
20 g de cada órgano de cada órgano
a2) 10 a 30 cm de b2) 10 cm de órgano a) Hasta b) Enviar en el mismo tiempo que la muestra
intestino delgado tubular (duodeno, yeyuno y 48 horas refrigerada. Los fragmentos en solución de
(asa ligada). porción terminal del íleon) formol 10%, aunque no estén totalmente
fijados, pueden enviarse al laboratorio

140 141
1. Material a) Obtención de suero b) Sangre total

Sangre Extraer la sangre en un tubo sin La sangre se debe


anticoagulante; mantener el tubo extraer y enviar
inclinado a temperatura en un tubo con
2. Dónde recolectar ambiente hasta que se anticoagulante
coagule la sangre, se retraiga (EDTAk2).
a) Vena yugular; el coágulo, y exude el suero Homogeneizar
b) Vena coccígea; (30 a 60 min). Transferir el suavemente,
c) Vena mamaria; y suero a otro tubo (tapón de invirtiendo el tubo
d) en porcinos, vena rosca o tipo “Eppendorf”). Si se (alrededor de 6 veces)
cava craneal utiliza tubo con gel separador,
será necesario

3. Cómo recolectar
centrifugar la
sangre como
mínimo 30
Utilizar sistema de
minutos
vacío o jeringa y aguja
y como
máximo
2 horas
después de
la extracción,
y enviar el suero en el
mismo tubo.

5. Exámenes
a) Identificación b) Identificación
de anticuerpos directa del agente

4. Recipiente y cantidad 6. Temperatura de la muestra para transporte


b) Tubo de ensayo a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)
a) Tubo de ensayo
con EDTA K2:
sin anticoagulante:
capacidad 5 mL.
capacidad 10 mL. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

142 143
Capítulo 3

AVES

Autores
Antonio Guilherme Machado de Castro
Renato Luís Luciano
Ana Maria Iba Kanashiro
Ana Lúcia S. P. Cardoso
Eliana Neire Castiglioni Tessari

Centro Avanzado de Investigación Tecnológica del


Agronegocio Avícola (CAPTAA)
Instituto Biológico, Descalvado, SP (APTA/SAA-SP)

144 145
Principales enfermedades Las principales enfermedades
que afectan a las aves que afectan a las aves son:
Salmonelosis
Micoplasmosis
La avicultura industrial se caracteriza por tener un Influenza Aviar
sistema de cría intensivo que aloja a las aves en Enfermedad de Newcastle
galpones para obtener el máximo de productividad. Bronquitis Infecciosa
Esa particularidad hace necesario adoptar medidas de Laringotraqueítis
bioseguridad con el objetivo de elevar los índices de Enfermedad de Gumboro
producción y además prevenir enfermedades. Por esta Anemia Infecciosa
razón, es imprescindible el diagnóstico y el monitoreo Colibacilosis
frecuente del estado sanitario de los planteles avícolas. Coccidiosis
Clostridiosis

La mayor parte de estas enfermedades no ocurren


aisladamente, habiendo una interacción entre
diversos patógenos, con la posibilidad de que ocurran
asociaciones simultáneas de varias enfermedades
dentro de un mismo lote, lo que acarrea elevadas
pérdidas económicas.

importante

En casos de sospecha de
Enfermedad de Newcastle
e Influenza Aviar de alta
patogenicidad, se deberá
notificar inmediatamente
al Servicio Veterinario
Oficial, ya que es el único
autorizado para recolectar
las muestras.

146
Material para toma de
muestras para el diagnóstico de Frasco para envío de muestras histopatológicas

enfermedades de las aves Tijera para Tijera


trinchar

Frasco con agua Pinza


peptonada

Plástico
Bolsa de muestras Frasco recolector
con agua peptonada

Guantes

Hisopos

Gasa Gasa para


hisopos de arrastre
Bolígrafo
Palillos
esterilizados
Jeringa
y aguja
Frascos para
recolección de sangre

Bolsa plástica
para recolección Microtubos tipo
Cubre calzado Pipeta Pasteur “Eppendorf”

149
Muestras para el diagnóstico 3. Cómo recolectar sangre para la
obtención de suero
de enfermedades de las aves
Aves adultas
1. Material Vena cubital (ala): Colocar al ave en decúbito lateral
para realizar la extracción en la vena cubital (vena del
Sangre ala). Extraer la sangre utilizando una jeringa desechable
(para obtención de suero) de 5 mL mediante punción venosa; transferir a frascos
de vidrio o tubo de ensayo de 10 mL, limpios y
secos, sin anticoagulante.
2. Dónde recolectar AVES DE 1 DÍA
Decapitación: Después de insensibilizar al animal, con
Aves adultas:
ayuda de una tijera, proceder a la técnica de seccionar
punción cardíaca o vena
la primera vértebra cervical (decapitación). Recolectar la
cubital (ala)
sangre en un frasco de vidrio o tubo de ensayo (10 mL),
Aves de 1 día:
limpio y seco, sin anticoagulante.
punción cardíaca o vena
yugular (decapitación) AVES ADULTAS Y AVES DE 1 DÍA
Punción cardíaca: Realizar la contención del ave
inmovilizando las patas y las alas con una de las manos
y punzar en el medio de la “región de la quilla” (base del
esternón), donde hay un “vacío”, cuidando de no alcanzar
el pulmón. Introducir la jeringa con la aguja en el pecho
del ave de forma perpendicular al punto de entrada y
paralelo a la columna vertebral, hasta alcanzar el corazón.
Tirar lentamente del émbolo hasta obtener la cantidad
deseada. Transferir a frascos de vidrio o a un tubo
deensayo de 10 mL, limpios y secos, sin anticoagulante.
Después de la extracción de la sangre del ave por
punción cardíaca, venosa u otros métodos de práctica,
mantener el frasco o el tubo inclinado a temperatura
ambiente para que la sangre coagule y libere el suero;
transferir la muestra de suero a un microtubo tipo
“Eppendorf” o a otro frasco de vidrio.

150 151
NÚMERO DE MUESTRAS
4. Cantidad ELISA: promedio 25 sueros/lote
R):
Sangre para Seroaglutinación Rápida (SA
sma
obtención de suero: 100 sueros/lote para Mycopla
) y Salm one lla pullorum
4,0 mL por ave synoviae (MS
a
Suero: 1 mL por ave (SP) y 150 o 300 sueros/lote par
gallisep ticu m (MG ).
Mycoplasma
Con sultar la legi slación vige nte
control oficial
5. Recipiente
NOTA
Tubo de ensayo o
Para obtener un suero sin
frasco de vidrio (para
hemólisis, se debe transferir la
sangre); y microtubo
sangre de la jeringa al tubo
tipo “Eppendorf”
cuidadosamente, dejando que
(para sangre o suero) la
sangre escurra por la pared late
ral del 6. Exámenes
tubo. Nunca se debe vaciar la
sangre Serológico para identificación de anticuerpos
de forma brusca ni en el fondo
del
tubo. Evitar agitar los frascos o
tubos a) Seroaglutinación b) Prueba de inhibición de
mientras se deja que la sangre
repose rápida (SAR) hemaglutinación (HI), ELISA,
para separar el suero.
Seroneutralización,
Seroaglutinación lenta e
Inmunodifusión en Gel de Agar

7. Temperatura de la muestra para transporte


a) Refrigerada b1) Refrigerada b2) Congelada
(+ 2ºC a + 8ºC). o
(+ 2ºC a + 8ºC); (- 20ºC)
Nunca congelar

8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a) Hasta b1) Hasta o b2) Hasta
24 horas 24 horas; 48 horas

152 153
1. Material
Órganos

2. Qué recolectar
Tráquea, pulmón, orofaringe, corazón, hígado, bazo, riñón, hígado
bursa, cerebro, cerebelo, nervio ciático, proventrículo,
molleja, páncreas, tonsilas cecales, duodeno y ciego.
bazo
corazón
3. Cómo recolectar
Utilizar guantes. Con la ayuda de tijera para trinchar
aves, abrir la cavidad abdominal y torácica de un ave
molleja pulmón
recién sacrificada. Extraer cuidadosamente los órganos
o fragmentos elegidos utilizando tijeras y pinzas proventrículo
esterilizadas; testículo
Cortar fragmentos, de 2,0 cm de espesor como
duodeno
máximo, de los tejidos afectados;
Evitar el contacto de las manos con los órganos, riñón
inclusive con guantes, para evitar contaminación.
Agrupar los órganos en 4 grupos y colocarlos en
recipientes separados, de la siguiente manera: tonsilas
ciego
1. Tráquea, pulmón y orofaringe; cecales
2. Corazón, hígado, bazo y riñones;
3. Cerebro, cerebelo y nervio ciático; y
páncreas bursa
4. Proventrículo, molleja, bursa,
duodeno, páncreas, tonsilas nota
antener
cecales y ciego. 1. Se debe m
íntegra.
la tráquea
Para el examen histopatológico, 2. En aves adultas
xual), la
extraer fragmentos de todos los (madurez se
órganos antes descritos en un su fre un a atrofia
bursa nervio ciático
qu e es más
único frasco con formol al 10%. fisiológica, lo jóvenes.
en aves
Incluir el nervio ciático. evidente
154 155
4. Cantidad Solamente para médicos
veterinarios del Servicio Oficial
Órganos de por lo menos 5 aves/lote, 3 aves Para el diagnóstico de la
con síntomas y 2 aves aparentemente sanas Enfermedad de Newcastle e
Influenza Aviar, se deben recolectar
los órganos por separado y
5. Exámenes envasar cada órgano de cada ave
en un recipiente único.
a) Bacteriológico
b) Aislamiento viral y biología molecular
c) Histopatológico nota
El volumen ideal de formol para
7. Recipiente
6. Medio cada recipiente es alrededor de a y b) Frasco recolector o tubos tipo Falcon, agrupados
10 veces el volumen del material según se describió en el ítem 3.
a) Ninguno
b) MEM (Medio Esencial Mínimo) con 10% de suero
8. Temperatura de la muestra para transporte
bovino (o 10% de suero fetal bovino) con solución de
antibióticos (0,5X); BHI con solución de antibióticos
(0,5X); Caldo Triptosa Fosfato Tamponado (TPB) con
solución de antibióticos (0,5X) a y b) Refrigerada (+ 2ºC a + 8ºC);

c) Solución de formol al 10% (100 mL de c) Ambiente. Nunca congelar


formaldehido al 37% y 900 mL de agua v/v)

9. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a) Hasta 24 horas;
b) hasta 48 horas;
c) Enviar en el mismo tiempo que las otras muestras.
Las muestras en solución de formol al 10%, aunque
no estén completamente fijadas, pueden enviarse
al laboratorio.

156 157
nota
Al pasar el hisopo por la tráquea,
1. Material se debe tener cuidado de verificar si 3. Exámenes
se lo está introduciendo en el lugar
Hisopo traqueal a) Aislamiento viral b) Aislamiento bacteriológico
correcto. Muchas veces se puede
o técnica de biología
confundir la tráquea con el esófago. La
molecular para Micoplasma
tráquea se ubica en la parte VENTRAL. Lo
2. Cómo recolectar aconsejable es tirar un poco la lengua
del ave, de modo que la tráquea se
Abrir el pico del ave, proyecte en dirección a la cavidad bucal, 4. Cantidad
bajar la lengua, introducir y así se la podrá visualizar. a) Hisopos de 30 aves/ b) Hisopos de 20
el hisopo esterilizado en lote, agrupando 10 hisopos aves/lote, agrupados
la tráquea y frotar en toda la en cada recipiente en un recipiente
circunferencia, evitando que el hisopo
toque las mucosas de la boca, para
5. Medio
prevenir la contaminación;
Pasar un hisopo por ave y luego
cortar de inmediato la extremidad a) Solución salina adicionada b) Caldo Frey
del hisopo que estaba en contacto con antimicrobianos específicos
con la mano y sumergir el resto
en el frasco que contiene el medio
para transporte.
Atención: en el momento de la
esófago
6. Recipiente
recolección, usar siempre guantes tráqueia a y b) Bolsa para muestras o frasco con tapa de rosca
desechables y abrir el envase de los
hisopos por el lado de los cabos,
evitando tocar el algodón 7. Temperatura de la muestra para transporte
a) Refrigerada b1) Refrigerada (+ 2ºC a + 8ºC); o
(+ 2ºC a + 8ºC)
b2) Congelada (- 20ºC)

8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a) Hasta b1) Hasta 24 horas; o
24 horas
b2) si demora más de 24 horas

158 159
1. Material 3. Exámenes
a) Bacteriológico b) Aislamiento viral, técnica
Hisopo cloacal
para salmonella de biología molecular

2. Cómo recolectar 4. Cantidad


Recolectar la muestra con hisopo estéril, realizando a) 50 hisopos, un hisopo b) 30 hisopos, un hisopo
movimientos circulares en el orificio de la cloaca. Pasar el por cada 2 aves, con un por ave, con un total de 30
hisopo por el ave y luego cortar de inmediato el extremo total de 100 aves por aves por grupo. Agrupar
del hisopo que estaba en contacto con la mano y grupo. Todos los hisopos cada 10 hisopos en un
sumergir el resto en el frasco que contiene el medio para agrupados en un mismo mismo recipiente (3
transporte. recipiente recipientes/grupo)
Atención: en el momento de la recolección, usar siempre
guantes desechables y abrir el envase de los hisopos por nota
legislación
el lado de los cabos, evitando tocar el algodón Consultar la ol oficial
so de contr
vigente en ca 5. Medio
a) Agua peptonada b) Solución salina adicionada
tamponada esterilizada con antimicrobianos específicos

6. Recipiente
Bolsa para muestras o frasco esterilizado

7. Temperatura de la muestra para transporte


a) Refrigerada b1) Refrigerada (+ 2ºC a + 8ºC); o
(+ 2ºC a + 8ºC)
b2) Congelada (- 20ºC)

8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a) Hasta b1) hasta 24 horas; o
24 horas
b2) si demora más de 24 horas

160 161
1. Material 4. Cantidad
Hisopo de arrastre 2 hisopos por galpón del grupo
a) Gasa o esponja
esterilizada
nota
b) Cubre calzado
Si el laboratorio provee un
esterilizado a
palillo estéril, utilizarlo par
den tro
2. Dónde recolectar colocar los hisopo s
del recipiente.
5. Medio
Gasa o esponja
Galpón esterilizada

Agua peptonada
3. Cómo recolectar tamponada esterilizada
a) Usando guantes
desechables, abrir el Cubre calzado
envase del hisopo de esterilizado 6. Recipiente
arrastre dentro del
galpón donde se hará Bolsa para muestras
el muestreo. Sostener el o frasco esterilizado
hisopo por el cordón y caminar
por el galpón, arrastrándolo
sobre la cama, principalmente 7. Temperatura de la muestra para transporte
entre los comederos y
bebederos. Colocar el hisopo Refrigerada (+2°C a +8°C)
dentro del recipiente con
el medio para transporte,
cortando el cordón.
8. Tiempo crítico
para llegar al
b) Colocarse el cubre calzado
laboratorio
sobre la bota y caminar por el
galpón, principalmente entre los
Hasta 24 horas
comederos y bebederos. Retirar
el cubre calzado utilizando
guantes desechables y colocarlo 9. Examen
dentro del recipiente con
el medio para conservación. Bacteriológico para Salmonella

162 163
1. Material 4. Cantidad
Fondo de caja a) 1 hisopo/2 cajas. Mínimo b) Fondos de por
de 4 cajas analizadas/ lo menos 4 cajas,
lote, agrupando todos los agrupados por lote en
2. Dónde recolectar hisopos del lote en un mismo
recipiente
un mismo recipiente

Caja de transporte de aves de 1 día


nota
legislación
Consultar la l oficial
so de contro
3. Cómo recolectar vigente en ca

a) Hisopos: usando b) Fondo de la caja:


5. Medio
guantes desechables, Usando guantes a) Agua peptonada b) Ninguno
frotar una gasa esterilizada desechables, doblar el tamponada esterilizada
por toda la superficie fondo de las cajas de modo
interna de la caja, que el lado manchado con
preferentemente sobre las heces quede hacia adentro 6. Recipiente
heces, y luego colocarla en y luego colocarlo en un
un recipiente adecuado. recipiente adecuado.
a) Bolsa para b) Bolsas
muestras plásticas
o frasco resistentes
esterilizado b
a

7. Temperatura de la muestra para transporte


a) Refrigerada b ) Ambiente
(+ 2°C a + 8°C)

8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a b
a y b) Hasta 24 horas

9. Exámenes
Bacteriológico y Micológico

164 165
1. Material 5. Medio
Papel o viruta – Ninguno
que reviste la caja de
transporte de aves de 1 día
6. Recipiente
2. Dónde recolectar Bolsas plásticas resistentes
Caja de transporte de aves de 1 día

3. Cómo recolectar
Usando guantes desechables,
transferir el material que reviste la
caja a bolsas plásticas resistentes

4. Cantidad
Revestimiento de la caja de
transporte de por lo menos nota
4 cajas, agrupados por lote Consultar la legislación
en un mismo recipiente vigente en caso de control oficial 7. Temperatura de la
muestra para transporte
Ambiente

8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


Hasta 24 horas

9. Exámenes
Bacteriológico y Micológico

166 167
1. Material 4. Exámenes
a) Bacteriológico b) Aislamiento viral, técnica
Heces frescas
de biología molecular

2. Dónde recolectar
En el galpón
5. Cantidad
a) 1 “pool” de 100 muestras/grupo, b) 50 a 100g/lote
colocadas en un mismo recipiente

3. Cómo recolectar nota


Consultar la legislación
Usando guantes desechables
vigente en caso de control oficial
y con la ayuda de una
espátula esterilizada, 6. Medio
recolectar las muestras de
heces frescas de diversos a) Ninguno b) Solución salina adicionada con
puntos del galpón, colocarlas antimicrobianos específicos
en un mismo envase por lote

7. Recipiente
a) Bolsas plásticas b) Bolsa para muestras o
resistentes frasco esterilizado

8. Temperatura de la muestra para transporte


a y b) Refrigerada (+2°C a +8°C)

9. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a y b) Hasta 24 horas

168 169
1. Material 4. Cantidad
50 mL/grupo de reproductoras no vacunadas contra
Meconio Salmonella enteritidis

2. Dónde recolectar
Meconio de 200 pollitos/ grupo de reproductoras
vacunadas contra Salmonella enteritidis,
solo en el primer nacimiento
En la sala de
incubación nota
Consultar la legislación 5. Medio
vigente en caso de control oficial
3. Cómo recolectar Ninguno

Usando guantes
6. Recipiente
desechables,
recoger el meconio
directamente Bolsa para muestras o
en un recipiente frasco esterilizado
apropiado después
de que el ave lo
excrete ejerciendo 7. Temperatura de la
una leve presión
muestra para transporte
Refrigerada (+2°C a +8°C)

8. Tiempo crítico
para llegar al
laboratorio
Hasta 24 horas

9. Examen
Bacteriológico para Salmonella

170 171
1. Material 4. Cantidad
Huevos picados 20 huevos/grupo de reproductoras no vacunadas contra
Salmonella enteritidis

150 huevos del primer nacimiento/grupo de


2. Dónde recolectar reproductoras vacunadas contra Salmonella enteritidis

En la sala de incubación

5. Medio
3. Cómo recolectar Ninguno
Usando guantes
desechables, retirar de
la nacedora los huevos 6. Recipiente
picados no nacidos
Envases plásticos
resistentes

7. Temperatura de la muestra para transporte


a1) Refrigerada o a2) Congelada (-20°C)
(+2°C a +8°C);

8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


a1) Hasta o a2) Más de 24 horas, hasta
24 horas; la entrega en el laboratorio

9. Exámenes
Bacteriológico

172 173
Capítulo 4

abejas
Apis mellifera

Autores
Érica Weinstein Teixeira
Agencia Paulista de Tecnología del Agronegocio
(APTA, SAA-SP)

Dejair Message
Universidad Federal de Viçosa (UFV)

174 175
Material para la toma de
muestras para el diagnóstico
de enfermedades que afectan Bolsa de plástico
Caja isotérmica
a las Abejas Apis mellifera con hielo reciclable

importante Pinza
ra
ar espátula pa Lápiz y bolígrafo
“Siempre utiliz y pi nzas
ch illo s
apicultor, cu
desinfectados
debidamente ”
Kit EPP – Equipo de
co lm en as y colmenares
protección personal entre ja bón, realizar
n ag ua y
(lavar co ués
ánico y desp
fregado mec l al 70 %)
alco ho
sumergir en Guantes de látex

Papel de diario
Pincel/brocha

Micro tubos tipo


Etiquetas Sobre de papel
Ahumador “Eppendorf”

Espuma de colchón

Papel

Espátula para Apicultor

Cuchillo Recipiente de Recipiente de plástico Recipiente de


Bolígrafo marcador indeleble plástico universal universal perforado plástico de 500 mL

176 177
Garantizar la seguridad Reconocimiento de las
Antes de dirigirse al colmenar, el profesional
partes de una colmena
deberá vestirse adecuadamente con el equipo
de protección personal (EPP), encender el Tapa o techo
ahumador y tomar la espátula de apicultor.

JA S Sombrero Máscara/
EN PARE Alza de miel
TRABAJAR Tela
recolecc ión siempre o melaria
El trabajo de jas:
re a liz arse en pare Buzo Rejilla
deberá nt ro la rá las
co
una persona migador y la otra excluidora
el fu de reinas
abejas con stras
so na re co gerá las mue
per

Cámara de Alimentador
cría o nido

Base
(fondo)

Guantes
de goma
Protector
Espátula contra
para hormigas
Ahumador Apicultor Piquera (entrada
Caballete de la colmena)
Es imprescindible usar el Botas
o soporte
ahumador ya que el humo, Guantes
en la cantidad adecuada, de algodón
permite controlar la defensa (opcional, para Colmena Langstroth o padrón, despoblada,
usar debajo sobre un caballete de madera
de las abejas. de los guantes
de goma)
178 179
Identificación de los individuos Celda de zángano
Celda de zángano
operculada

de la colonia, celdas de desoperculada

obreras, celdas de zánganos


y celda de reina
Celda de
Obrera
obrera
operculada

Celda de
reina abierta

Zángano
Celda de obrera
desoperculada
Obreras haciendo
Reina
la corte a la reina
Celda de
reina cerrada

180 181
Apertura e inspección
de una colmena
1º Paso
Apertura de la colmena y control del Certificar que
comportamiento defensivo de las abejas la reina no está
en la tapa
Echar humo en la piquera;
Levantar la tapa;
Echar humo en forma
paralela a la superficie
de los cuadros;
Cerrar la colmena
por 1 minuto;
Mantener el ahumador
cerca de 15 cm
de la colmena

Abrir la tapa
nuevamente y
echar humo en
forma paralela a
la superficie de Apoyar la tapa en el piso con la parte interna hacia
los panales. arriba, colocando sobre ella la(s) alza(s) de miel o
cualquier otro elemento utilizado por el apicultor (Ej.:
Alimentador superior, recolector de polen, recolector
de propóleos, rejilla excluidora, etc.).

182 183
2º Paso - Inspeccionando el área de cría;

Realizar la inspección de
los panales del área de cría.
Certificar que la reina no se
Nota encuentre en ese panal y,
si estuviera allí, transferirla
Localización
cuidadosamente hacia otro
más probable
ía. panal o permitir que lo haga
del área de cr
espontáneamente.

Nido o alza
de cría

Con la ayuda
de la espátula
para apicultor,
despegar los
panales del nido
(debido a la
propolización);
retirar un panal Para facilitar la visualización
del área de cría. de las crías, si es necesario, sacudir suavemente
el panal dentro de la colmena o utilizar una rama
pequeña de una planta para alejar a las abejas
adultas que cubren el área de cría.

184 185
Pupa
Fases de desarrollo
de las abejas Fase de pupa

m. elias-neto, ffclRP/ usp


Durante su ciclo de vida, las abejas pasan por cuatro fases
diferentes: huevo, larva, pupa e insecto adulto

DIFERENTES FASES DEL DESARROLLO Diferentes estadios de la fase de pupa (pupa de ojos
DE LAS ABEJAS – CRÍAS NORMALES blancos, pupa de ojos rosados, pupa de ojos rosado oscuro
y pupa de ojos marrones con pigmentación leve a fuerte).

Huevo

h.m.takada, prdta-vp/apta, saa, SP


El primer día se
encuentra en posición
vertical; el segundo día
inclinado, y el tercer
día se coloca en
posición horizontal
Prepupa y pupa en diferentes estadios,
Larva desoperculadas, para permitir la visualización.
Fase larvaria Prepupa Las crías sanas por lo general son vigorosas en la
m. elias-neto, ffclRP/ usp

fase larvaria se encuentran en el fondo de las celdas,


en forma de “C” (desoperculadas). Después de 5 a 6
días, esas larvas son operculadas con cera, y cambian
constantemente de posición hasta quedar rectas en las
Diferentes subestadios del desarrollo larvario, celdas, con la parte posterior del cuerpo en la pared
incluyendo prepupa lateral de las celdas (prepupa).
En esa fase, la larva deja de moverse y sufre
modificaciones, transformándose en pupa. Desde el
huevo, pasando por todos los estadios de larva, hasta el
estadio inicial de pupa, la cría presenta una coloración
Diferentes estadios blanco-perla en todo el cuerpo. Durante la fase pupal
de la fase larvaria. ocurren cambios graduales en la pigmentación de los
Crías desoperculadas ojos y de los segmentos del cuerpo.
y operculadas

186 187
Diferentes anomalías Ejemplos de posibles alteraciones
en la fase de cría en el aspecto de las crías
Para reconocer los síntomas de las enfermedades es

bart smith, brl/ars/usda


importante estar familiarizado con las características de las
diferentes fases de desarrollo de las crías y con el aspecto
de un panal con crías saludables.
Cría momificada

Cría con alteraciones


del color y/o yesificada
Cuadro con área
de cría normal

Cría torcida contra la


pared de la celda con
alteración del color y
reseca

Cría en el fondo de la
celda con alteración del
Cuadro con área color y reseca
de cría salteada

Cría con alteración de


la consistencia (acuosa)

188 189
Principales enfermedades, intoxicaciones Cría encalada o cría yesificada
y parasitosis que afectan
Agente causante
CRÍAS DE ABEJAS - Apis mellifera Hongo Ascosphaera apis
Fase de desarrollo de la cría afectada
Crías ya operculadas, prepupa y pupa
Loque americana (quedan momificadas)

Bart Smith, BRL/ARS/USDA


Bart Smith, BRL/ARS/USDA
Agente causante
Bacteria Paenibacillus larvae

Fase de desarrollo de la cría afectada


Prepupa y pupa

Virginia Williams, BRL/ARS/USDA


Bart Smith, BRL/ARS/USDA

Cría Ensacada
Loque europea
Agente causante
Agente causante
Virus SBV (Sac Brood Virus)
Bacteria Melissococcus plutonius
Fase de desarrollo de la
Fase de desarrollo de la cría afectada
cría afectada
Generalmente larva desoperculada en fase de
Prepupa (no logra llegar
alimentación; en ocasiones cría operculada
a estadio de pupa)

190 191
Cría Ensacada Brasilera Crías Anómalas
Agente causante Agente causante
Polen de la planta barba timón (Stryphnodendron spp) Causa indeterminada
Fase de desarrollo de la cría afectada Fase de desarrollo de la cría afectada
Prepupa (no logra llegar a estadio de pupa Pupa

Cría con alas deformadas Varroasis


Agente causante Agente causante
Virus DWV (Deformed Wing Virus), o, eventualmente, Ácaro ectoparásito Varroa destructor
Varroa (por acción física) (en la fase de reproducción)

Fase de desarrollo de la cría afectada Fase de desarrollo


Pupa, cerca de la aparición o nacimiento de la cría afectada
(cuando el síntoma es evidente) Cría ya operculada

192 193
Muestras para el diagnóstico de las 4. Cantidad
principales enfermedades que afectan
CRÍAS DE ABEJAS - Apis mellifera Fragmentos de panal con
el máximo posible de crías
anormales – 3 a 5 fragmentos
Antes de iniciar la recolección de la muestra, observe
de panal de aproximadamente
minuciosamente los panales del área de cría.
3x3 cm a 3x10 cm,
En los cuadros que presenten defectos (de acuerdo
preferentemente entre los
con lo expuesto en la página 188), intente detectar la
alambres del cuadro. También
presencia de crías con alteración del color (cambio de
puede ser el panal completo
blanco-perla a marrón claro a oscuro); mustia, retorcida
en las paredes de las celdas o momificadas.

Recolección de crías para análisis 5. Recipiente


Envolver las muestras de panal en papel de
Para diagnosticar la enfermedad, recolectar
diario u otro tipo de papel no encerado.
4 muestras diferentes
Atención: Nunca envolver en plástico o papel
NOTA aluminio, ni colocar en frasco cerrado
Muestra 1 Realizar las recolecci
ones
utiliza ndo
de las muestras
s de
6. Temperatura de la muestra para transporte
guan tes de secha ble
1. Dónde recolectar látex sobre los guan
tes de
y desca rtarlo s, entre
En el nido goma Ambiente
en bolsa
una colmena y otra,
la
para residuos, y cerrar
2. Qué recolectar inmediatamente. 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas
Panales incompletos y con crías anormales, sin miel

3. Cómo recolectar 8. Exámenes


Con el cuchillo, entre los alambres Aislamiento/identificación
del cuadro, cortar fragmentos de
panal en una zona que contenga Análisis microscópico y/o molecular, si el
crías sospechosas material está bien conservado

194 195
Muestra 2 5. Recipiente
Envolver los fragmentos
de panal en papel de
1. Dónde recolectar diario u otro tipo de
papel no encerado.
En el nido Atención: nunca envolver
en plástico o papel de
aluminio o frasco cerrado

2. Qué recolectar
Panales con crías
operculadas
(preferentemente sin
miel y con pupas más
viejas, de ojos oscuros)

3. Cómo recolectar
Con un cuchillo, cortar
un fragmento de panal
con crías
6. Temperatura de la muestra para transporte
Ambiente

4. Cantidad
7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Fragmento de panal
de aproximadamente Hasta 48 horas
3x10 cm (con 100 crías

8. Exámenes
operculadas como
mínimo)
Evaluación de la tasa de infestación de las crías por
Varroa destructor (varroasis)

196 197
Muestra 3 b) Papel oficio común
- aplastar la muestra
al doblar el papel
1. Dónde recolectar
(colocar el papel dentro
de un sobre)
En el nido

2. Qué recolectar
Crías anormales

3. Cómo recolectar
Recolectar crías
anormales con una
pinza, individualmente.
6. Temperatura de la muestra para transporte
a) Congelada (-20°C). Congelar b) Ambiente
4. Cantidad inmediatamente las muestras y
Efectuar la recolección individual de aproximadamente mantener el material en freezer
20 crías o todas, si fueran menos de 20 hasta el envío al laboratorio

5. Recipiente
Dividir las muestras 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
en 2 partes iguales Hasta 48 horas
y colocar en:
a) Tubos tipo “Eppendorf”
de 1,5 o 2,0 mL - colocar
una cría sospechosa
8. Exámenes
por tubo Análisis microscópico, microbiológico y/o molecular

198 199
Muestra 4
Detalle del panal con
miel operculada y
1. Dónde recolectar polen almacenado
en la celda (también
En el nido llamado “pan de
abejas”)

Polen almacenado Miel operculada


2. Qué recolectar
Fragmento de panal 5. Recipiente
con miel operculada (en
la parte superior de los Colocar las muestras en frascos de
panales de cría – si no se plástico de 500 g a 1 kg. Cerrar bien,
encuentra, recolectar miel colocando inmediatamente cada frasco
desoperculada) en una bolsa de plástico

3. Cómo recolectar 6. Temperatura de la muestra para transporte


Con un cuchillo, cortar Ambiente
la parte superior
del panal con miel
(entre el alambre y la
madera del cuadro) 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
Hasta 48 horas

4. Cantidad
Cuatro fragmentos
de aproximadamente 8. Exámenes
3X7 cm (la muestra
Análisis para esporas de P. larvae y
puede contener polen)
presencia de polen de barba timón

200 201
Principales enfermedades, intoxicaciones Virosis
y parasitosis que afectan Agente causante
ABEjaS ADULTAS - Apis mellifera Alrededor de 18 virus diferentes pueden infectar
a las abejas, entre los cuales se pueden citar
los siguientes: Black Queen Cell Virus (BQCV) -
Nosemosis Filamentous Virus (FV) - Deformed Wing Virus (DWV)
- Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV) - Acute Bee
Agente causante Paralysis Virus (ABPV) - Israeli Acute Paralysis Virus
Microsporidios, Nosema apis y/o Nosema ceranae (IAPV) y Cloud Wing Virus (CWV)
Síntomas clínicos Síntomas clínicos
Diarrea, cuando la causa es el N. apis; Síntoma Inespecíficos, aunque algunos síntomas se han
inespecífico, cuando la causa es el N. ceranae asociado a virosis, tales como: abejas con alas
deformadas dentro y en
Acariosis el frente de la colmena,
abejas sin pelos y con
Agente causante

Yanping Chen, BRL/ARS/USDA


aspecto brilloso, abejas
Ácaros endoparásitos, Acarapis woodi, con alas opacas y
entre otras especies abejas con temblores
Síntomas clínicos
Inespecíficos

Varroasis Intoxicaciones por agrotóxicos


Agente causante Agente causante
Ácaro endoparásito, Varroa destructor Componentes químicos
de insecticidas y otros
Constatación visual agroquímicos

Osmar Malaspina, CEIS/UNESP


de la presencia del
ácaro sobre las abejas Síntomas clínicos
Gran cantidad de abejas
muertas fuera y/o dentro
de la colmena

202
Muestras para el diagnóstico de las 2. Qué recolectar
principales enfermedades que afectan Abejas adultas aún vivas y
abejas adultas - Apis mellifera moribundas (arrastrándose
y que no pueden volar)
En general, las abejas adultas no presentan síntomas
característicos de cada enfermedad. Lo que se observa 3. Cómo recolectar
comúnmente es la presencia de algunas abejas
Con la ayuda de una
adultas moribundas en la entrada de la colmena
pinza, recolectar las
(piquera) o en el suelo, arrastrándose hasta morir.
NOTA abejas moribundas
Cuando la mortalidad se produce por algún tipo de de la
insecticida, se observa una mayor cantidad de abejas Si posible, un día antes
ar/ lim piar
4. Cantidad
cosecha, desb roz
muertas en el piso frente a la colmena y, en ocasiones, fre nte a
de 2 a 3 me tros en
en el fondo de la colmena. ra facilitar
cada colmena , pa Aproximadamente
Eventualmente, algunas virosis y ciertos parásitos las ab eja s
la visua lizació n de 30 abejas o más
pueden producir síntomas específicos (alas o
que están murie nd por colmena
deformadas, ausencia de pelos, entre otros)

5. Recipiente
Recolección de abejas Frascos de plástico tipo universal
perforados en la tapa y en los laterales
adultas para el análisis
Para diagnosticar enfermedades e intoxicaciones 6. Temperatura de la muestra
de las abejas adultas, recolectar 5 muestras diferentes para transporte
Ambiente

Muestra 1 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


Hasta 48 horas

1. Dónde recolectar 8. Exámenes


Frente a la colmena (en el suelo) Detección de esporas de Nosema spp., ácaros
y en la entrada de la colmena (piquera) endoparásitos y protozoarios

204 205
Muestra 2 4. Cantidad
Alrededor de 30
abejas o más,
1. Dónde recolectar por colmena
En la entrada de la colmena (piquera)
5. Medio
2. Qué recolectar Alcohol al 70%.
En el frasco,
Abejas adultas de campo que están llegando dejar 5mm de
alcohol sobre
las muestras de
3. Cómo recolectar abejas

6. Recipiente
Cerrar la entrada de
la colmena (piquera)
con una tira de
Frasco de plástico tipo universal (con alcohol al 70%)
espuma común y
Atención: cerrar bien el frasco, colocando cada frasco
recolectar las abejas
en una bolsa de plástico. Inmediatamente, colocar en una
que están llegando
caja de cartón con divisiones entre los frascos
dentro de un frasco de
plástico tipo universal
que contenga alcohol 7. Temperatura de la muestra para transporte
al 70%
NOTA Ambiente
Para la recolección de
abejas en la piquera, se las 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
puede aspirar, utilizando un
aspirador de enjambres de Hasta 72 horas
abejas o, alternativamente,
barrerlas con un pincel/
brocha común (de pintura) 9. Exámenes
de 4 a 5 cm de ancho Detección de esporas de Nosema spp., ácaros
endoparásitos y protozoarios

206 207
Muestra 3 4. Cantidad
Aproximadamente
10 abejas por colmena
1. Dónde recolectar
Dentro de la colmena
5. Recipiente

2. Qué recolectar
Frasco de plástico
tipo universal
Abejas adultas que cubren el área de cría

6. Temperatura
3. Cómo recolectar de la muestra
para transporte
Sostener un panal de cría. Con la ayuda de un frasco
de plástico tipo universal, colocado en posición Congelada (-20°C).
oblicua, arrastrarlo de abajo hacia arriba Congelar inmediatamente
y recolectar las abejas en el frasco las muestras,
manteniendo el material
en el freezer hasta
el envío al laboratorio

7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio


Hasta 24 horas

8. Exámenes
Análisis molecular

208 209
Muestra 4 4. Cantidad
Alrededor de 200 a 300 abejas por colmena

1. Dónde recolectar
5. Medio
Dentro de la
colmena Alcohol al 70%. En el frasco, dejar 5mm de
alcohol sobre las muestras de abejas.

6. Recipiente
2. Qué recolectar Frasco de plástico de
500 mL (con alcohol al 70%)
Abejas adultas
Atención: cerrar bien el
que están
frasco, colocando cada frasco
cubriendo el
en una bolsa de plástico.
área de cría
Inmediatamente, colocar en
caja de cartón con divisiones
entre los frascos

3. Cómo recolectar 7. Temperatura de la


muestra para transporte
Sostener un panal
de cría. Con la Ambiente
ayuda de un frasco
de plástico de 500
mL con 250 mL de 8. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
alcohol al 70%, en
posición oblicua, hasta 72 horas
arrastrarlo de abajo
hacia arriba y
recolectar las abejas
9. Exámenes
en el frasco Determinación de la tasa de
infestación de ácaros ectoparásitos

210 211
Muestra 5 4. Cantidad
Alrededor de 300
a 500 abejas en
1. Dónde recolectar las proximidades
de cada colmena
En el frente y/o
en el fondo de
cada colmena

.
Osmar Malaspina, CEIS/UNESP
2. Qué recolectar
Abejas adultas
5. Recipiente
moribundas y/o Frasco de plástico con capacidad de 1 kg
muertas
Importante:

6. Temperatura de la muestra para transporte


Recolectar
abejas muertas
solo si la muerte
Congelada (-20°C). Congelar
ocurrió un día antes
Osmar Malaspina, CEIS/UNESP.

inmediatamente las muestras, y


de la recolección
mantener el material en el freezer
hasta el envío al laboratorio

3. Cómo recolectar
Con la ayuda de una 7. Tiempo crítico para llegar al laboratorio
pinza o con la propia Hasta 24 horas
mano utilizando
guantes desechables,
recolectar las
abejas moribundas 8. Exámenes
y/o recientemente
muertas Detección de insecticida y otros agroquímicos

212 213
Bibliografia

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214 215
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Producción

Diagramação e produção gráfica


Editora Horizonte
Av. Arruda Botelho, 684, 5º andar, CEP: 05466-000
- São Paulo-SP www.edhorizonte.com.br
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Ministerio de Agricultura, Ganadería y
Abastecimiento - MAPA
Departamento de Salud Animal
Esplanada dos Ministérios, Bloco D, Anexo - A,
Sala 301
70043-900 - Brasília/DF – Brasil
Tel.: 00 55 61 3218-270 Fax: 00 55 61 3226-3446
http://www.agricultura.gov.br/
0800- 7041995

Organización Panamericana de la Salud - OPS/OMS


Salud Pública Veterinaria
Centro Panamericano de Fiebre Aftosa -
PANAFTOSA
Av. Governador Leonel de Moura Brizola, 7778 –
CEP: 25045-002
Duque de Caxias, Rio de Janeiro – Brasil
Tel.: 00 55 3661-9003 Fax: 55 21 3661-9001
http://www.paho.org/panaftosa

Ministerio de
Secretaría de Agricultura, Ganadería
Defensa Agropecuaria y Abastecimiento

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