1.

Procesos bioctenologicos con clostridios:

Obtencon de acido butririco ,acetona,butanol e isopropanol

1.1los microorganismos bacterias anaerobicasformadoras de esporas del genero Clostridium

los clostridium son bacilos que persisten como en esporas de pared gruesa resistentes al calor en
el suelo o en la materia vegetal igual que las especies de bacillus para resistir el calor .Poseen una
pared gran-positiva y semueven gracias a los cilios quese disponen en todo toda su
superficie(peritricos).la mayoría de las veces las esporas tienen un diámetro mayor, de manera
que las células madre de las mismas aparecen hinchadas su filosofiase caracteriza por una parte
por un fuerte metabolismo fermentativo que tendrá como sustrato a los hidratos de carbono
,aminoácidos y proteinas ,etanol,acetato CO2 ,H2 o acido uricodependiendo de la especie y por
otra por una gran sensibilidad frente al oxigeno .Forman peróxido de hidrogeno (H2O)partiendo de
oxigeno y de hidrogeno que actúa como sustrato y a partir del peróxido el radical superóxido
(O2)muy reactivo y toxico , no siendo capaces de degradarlo con la ayuda de las enzimas catalasa y
superóxido dismutasa respectivamente:

2H2O2-------------------------------------------------------------------------2H2O + O2

2O2 + H--------------------------------------------> O2+ H2O2

Los anaeróbicos estrictos como es el caso de a mayoría de los clostridios , carecen de estas dos
enzimas desintoxicantes aerotolerantesentre las que se incluyen algunos clostridios tiene
superóxido-dismutasa pero no catalisa.las especies Clastridium butyricum ,C .Aceto-butylicum y
C.butilicum formadoras de acido butílico o butanol y acetona o butanol e isopropanol, fermentan
la glucosa y se engloban por ella,junto con algunas especies mas , dentro del grupo de los
clostridios “sacaroliticos”feermentadores del azúcar.

2.bioquimicade la formación de acido butírico,butanol , acetona ,isopropanol

Los clostridios, como la levadura del vino , degradan la glucosa por la ruta de la fructosa bisfosfato
asta acido pirúvico.

El hidroffeno desprendido a partir de las triotas-fosfatos es transferido a acidos organicos que se

sintetizan a partir de acido acetico activado (acetil-CoA),Este se forma a partir del acido pirúvico
gracias a la “escisión fosforoclastica”que tiene lugar con la ayuda de fosfato y ferredoxina,una
enzima aceptadora y transportadora de hidrogeno a potenciales redox muy bajos(Eo= -400 mV)

Mediante u a ferredoxin-hidrogenasa se libera hidrogeno molecular de la ferredoxina reducida , de

manera que los dos productos finales gaseosos de rigor proceden del piruvato:
El acidobutirico se forma por condensación de 2acetil CoA con la ayuda de la enzima tiolasa en el
caso de las tres especies citadas .Con ello se forma primero aceto acetil-CoA y,por adicion de 2H al
doble enlace ,el β-hidroxibutiril-COA.Por elimanacion de agua con la ayuda de la crotonasa se
forma el crotonil-COA que por adicion de otros 2H al doble enlace se reduce a butiril-COA para
hidrolizarse después a acido butírico.El H adicionado se obtiene lugar en la ruta de la FBP

Mientras que el C. butyricum forma acido butírico como producto principal de la

fermentación, además el CO2, H2 y algo de acido acético, cesando pronto su crecimiento
debido al descenso de pH que ello provoca. C. butylicum y C. acetobutylicum puede formar
productos de fermentación neutros por reducción del ácido butírico a butanol o por
transformación del ácido acetoacetico en acetona, evitando así una fuerte acidificación del
medio de cultivo. Sin embargo, también en este caso es condición previa la formación
inicial de ácido pirúvico y ascenso del pH para la obtención de los productos finales
neutros.
Pero si se precipita el ácido butírico como butirato cálcico insoluble por adición de agua de
cal, en estas especies acaba por formarse únicamente acido butírico. La síntesis dela acido
conduce a la inducción de la enzima acetoaldehido-descarboxilasa que descarboxila al
acido acetoacetico a acetona, que hace las veces de aceptor del hidrogeno de fermentacion,
reduciéndose asi a isopropanol. Puesto que como consecuencia de esta descarboxilacion
puede desviarse poca cantidad del correspondiente hidrogeno de lka fermentacion hacia la
sistesis del acido butirico, de aquí en adelante se empleara dicho hidrogeno en la sistesis de
β- butanol. Otros productos secundarios de la fermentación que aparecen en este grupo de
ciostridios sacaroliticos son el ácido acético y en menor cantidad también etanol y acetoina.
La siguiente clasificación aclara la composición especifica de especie de los productos de
fermentación de las tres especies principales empleadas en biotecnología. Muestra como en
las fermentaciones de butanol-isopropanol se ve reprimida la síntesis del acido butírico en
favor de la de alcoholes fuertemente reducidos y que la cantidad de hidrógeno liberado
disminuye proporcionalmente.
Únicamente las esporas termo resistentes, es decir, las que están rodeadas por una cubierta
bien desarrollada, dan lugar a cultivos con una buena capacidad fermentativa. Para
conseguir un inoculo con el que obtener buenos rendimientos, se hacen crecer y esporular
repetidamente los cultivos, pasteurizando cada vez durante 5-10 minutos a 100 oC con el
objetivo de seleccionar las esporas bien desarrolladas. Repitiendo hasta cien veces este
proceso se obtienen cultivos de capacidad probada. Las esporas formadas son resistentes al
oxígeno y a la sequedad y se pueden conservar durante mucho tiempo en tierra seca y
estéril.