1.

EL MICROSCOPIO

El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado

pequeños como para ser vistos por la vista del ser humano. El término microscopio es la
conjunción de dos conceptos, por un lado “micro” que es equivalente a “pequeño” y “scopio” que
significa “observar”, en suma, se refiere a la observación pequeña, o en menor grado. Este, tiene
la capacidad de observación a niveles de acercamiento tal que hasta hace posible el análisis
de partículas.

Este instrumento fue inventado por Zacharias Janssen en el año 1590. El descubrimiento de este
instrumento fue importantísimo, principalmente por sus aportes en la investigación médica. En
1665 apareció la investigación realizada por William Harvey sobre la circulación sanguínea, al
analizar los capilares sanguíneos. En 1667, Marcello Malpighi, biólogo italiano, fue el primer
investigador en estudiar tejidos vivos gracias a la observación a través del microscopio.

El holandés Anton van Leeuwenhoek, utilizó microscopios para describir por primera vez diversos
organismos, protozoos, bacterias, espermatozoides y glóbulos rojos. Se lo puede considerar como
el fundador de la ciencia que estudia el comportamiento de las bacterias, dio origen a la
bacteriología.

1.1. Partes del microscopio

Las diferentes partes que componen un microscopio comúnmente, son:

Lente ocular: Es donde coloca el ojo de la persona observadora. Esta lente puede aumentar la
imagen entre 10 a 15 veces su tamaño.

Cañón: Se trata básicamente de un tubo alargado de metal cuyo interior es negro, sirve como
sostén al lente ocular y al lente objetivo.

Lentes objetivos: Es un grupo de 2 o3 lentes ubicados en el revólver.

Revólver: Es un sistema que en su interior contiene a los lentes objetivos, puede tener un sistema
de giro que permite el intercambio de estos lentes.

El tornillo macrométrico: Es una perilla que al girarla actúa acercando o alejando al objeto que se
está observando.

El tornillo micrométrico: Es lo que permite afinar y enfocar correctamente la imagen. Haciéndola

más clara.
La platina: Se trata de una plataforma de pinzas, es donde se coloca al objeto o a la preparación
que se desea observar.

El diafragma: Sirve para regular la cantidad de luz que pasa a través del objeto en observación.

El condensador: Sirve para concentra el haz luminoso en la preparación u objeto.

Fuente luminosa artificial: dirige luz hacia la platina.

1.2. Tipos de microscopios

Existen diversos tipos de microscopios que fueron utilizados a través de la historia, y también
existen actualmente microscopios diseñados con un propósito en especial, algunos de estos son:

 Microscopio electrónico de barrido

 Microscopio óptico
 Microscopio simple
 Microscopio compuesto
 Microscopio de luz ultravioleta
 Microscopio de fluorescencia
 Microscopio petrográfico
 Microscopio en campo oscuro
 Microscopio de contraste de fase
 Microscopio de luz polarizada
 Microscopio confocal
 Microscopio electrónico
 Microscopio electrónico de transmisión
 Microscopio de iones en campo
 Microscopio de sonda de barrido
 Microscopio de efecto túnel
 Microscopio de fuerza atómica
 Microscopio virtual

A continuación, se describirá el microscopio óptico y electrónico

1.2.1. Microscopio Óptico: Esencialmente se puede definir como un instrumento

que permite observar en un tamaño aumentado elementos que son
imperceptibles a simple vista.
Es un microscopio basado en lentes ópticos. También se le conoce como
microscopio de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de campo claro.
Aumenta el tamaño de los objetos que son realmente muy pequeños y que
no se pueden ver a simple vista, a su vez puede ser monocular, binocular entre
otros.
Técnicas microscópicas
Es cierto que la observación de microorganismos más pequeños como bacterias,
determinadas estructuras de protistas o la propia organización del flóculo, que
pueden ser dificultosas en campo claro, son más fácilmente observables con otras
técnicas microscópicas, como es el contraste de fases. Normalmente, el
equipamiento microscópico en un laboratorio de aguas residuales, tan sólo cuenta
con la óptica de contraste de fases, además de la de campo claro.
 El campo claro. - Es la iluminación “normal”. Los componentes de la muestra
se visualizan gracias a las diferencias de contraste que existen entre ellos y
el medio que los rodea. Las diferencias de contraste se producen porque las
células o elementos más grandes, como los flóculos de fango activo,
absorben o dispersan la luz en diferentes grados. Por esta razón, esta
iluminación se emplea con tinciones o muestras en las que los
microorganismos son pigmentados, ya que el contraste se incrementará
debido al color. El contraste de la preparación también puede controlarse
en campo claro con el diafragma del condensador (diafragma de apertura).
 El contraste de fases. - Es una técnica que se utiliza para estudiar
preparaciones de densidades homogéneas, en las que la baja capacidad de
absorción de la luz de sus elementos (las células y el medio), hace que la
imagen obtenida no presente diferencias de luminosidad entre ellos. El
contraste de fases permite la visualización de células sin necesidad de
tinción. Este tipo de óptica se basa en el hecho de que las células poseen
índices de refracción distintos al medio y por lo tanto producen un desvío
en los rayos de luz que las atraviesan, que son retardados. Este efecto es
amplificado por un anillo especial que posee el objetivo de los microscopios
de contraste de fases, lo que da lugar a la formación de una imagen oscura
con un fondo brillante.
1.2.2. Microscopio Electrónico: Son los que utilizan un haz de electrones para
generar las imágenes.
En el microscopio electrónico la muestra no es iluminada con luz, sino que se
utilizan electrones. Los electrones impactan contra la muestra dentro de una
cámara de vacío. Existen diferentes tipos de microscopio electrónico pero su
principio de funcionamiento se basa siempre en capturar los electrones
dispersados u omitidos por la muestra y así poder reconstruir una imagen.
La ventaja principal de este tipo de microscopio es que puede obtenerse un
nivel de aumento muy superior al del resto de microscopios. Sin embargo, es
necesario preparar la muestra y colocarla en una cámara de vacío de modo
que no es posible observar muestras biológicas vivas.
Los dos tipos de microscopio electrónicos principales son:
 Microscopio electrónico de transmisión: un microscopio electrónico
de transmisión está formado por tres componentes principales que son:
una columna óptica electrónica, un sistema de vacío y el sistema electrónico
de control y registro. Este es muy similar al microscopio óptico. Ambos
tienen lentes y condensadores para concentrar la iluminación sobre la
muestra. Los rayos de iluminación atraviesan la muestra y son enfocados
por las lentes del objetivo y de proyección para formar una imagen
aumentada sobre una pantalla fluorescente.
 Microscopio electrónico de barrido: El microscopio electrónico de
barrido, conocido por sus siglas inglesas SEM, utiliza electrones en lugar de
luz para formar una imagen. Para lograrlo, el equipo cuenta con un
dispositivo (filamento) que genera un haz de electrones para iluminar la
muestra y con diferentes detectores se recogen después los electrones
generados de la interacción con la superficie de la misma para crear una
imagen que refleja las características superficiales de la misma, pudiendo
proporcionar información de las formas, texturas y composición química de
sus constituyentes. A diferencia de un microscopio óptico que utiliza
fotones del espectro visible, la imagen entregada por el SEM se genera por
la interacción de un haz de electrones que "barre" un área determinada
sobre la superficie de la muestra.