UNIVERSIDAD COLEGIO MAYOR DE CUNDINAMARCA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
INFORME N° 14
CONTROL MICROBIOLÓGICO DE MEDICAMENTOS ESTÉRILES
Y NO ESTÉRILES
GRUPO D
PRESENTA: LAURA TORRES Y JEIMY LIZETH UBAQUE

RESUMEN
Con el fin de obtener productos con una calidad higiénica aceptable, con niveles
bajos de microorganismos indicadores y ausencia de microorganismos patógenos,
es imprescindible el control microbiológico de todas las materias primas y del agua
usada para fabricación y como ingrediente también debe ser controlada. La correcta
limpieza de áreas y equipos, las buenas prácticas higiénicas del personal un diseño
correcto de la formulación y del proceso de fabricación minimizan el riesgo de
contaminación microbiana.
Los productos farmacéuticos no estériles permiten un máximo de carga microbiana,
pero debe haber ausencia total de patógenos; estos productos pueden ser
comprimidos (tabletas, grageas), no comprimidos (polvos), homogéneos (soluciones
orales, nasales, tópicas...) y heterogéneos (Aerosoles, emulsiones, supositorios,
geles...). La diversidad y el número de microorganismos presentes en estos
productos van a estar influenciados por distintos factores intrinsecos y extrinsecos;
los intrínsecos corresponden a drogas activas con acción antimicrobiana,
conservadores, pH, contenido de nutrientes, actividad acuosa, presión osmótica,
potencial de óxido-reducción y calidad higiénica de las materias primas empleadas,
en especial las de origen natural. Mientras que los factores extrínsecos a
condiciones higiénicas durante la manufactura; contenido microbiano del material de
empaque. El análisis microbiológico realizado a estos medicamentos involucra
recuentos microbianos (total de microorganismos aerobios, mohos y levaduras) e
investigación de microorganismos específicos. Por otro lado, si se habla de
medicamentos estériles, a estos se les debe realizar un ensayo de esterilidad y se
debe realizar en condicones asépticas; el objetivo de este ensayo es proporcionar
un control independiente para comprobar que un producto cumple con las
exigencias descritas en la Farmacopea Europea. Los métodos descritos en la
farmacopea incluyen filtración por membrana e inoculación directa, estos se relizan
empleando fluído tioglicolato para bacterias anaerobias y aerobias (14 dias a 32+/-
2°C) y fluído tripticasa de soja para hongos y bacterias aerobias (14 dias a
22+/-2°C).
PALABRAS CLAVES
Microorganismos, indicadores, patógenos, control, contaminación, esterilidad, carga,
recuento, aerobios, asepsia, farmacopea, filtración, inoculación.
ABSTRACT
In order to obtain products with an acceptable hygienic quality, with low levels of
indicator microorganisms and absence of pathogenic microorganisms,
microbiological control of all raw materials and water used for their use is essential.
The correct cleaning of areas and equipment, good hygienic practices, personnel,
design, correct function and manufacturing process minimize the risk of microbial
contamination.
Pharmaceutical products are not allowed in a maximum of microbial load, but there
should not be any total amount of pathogens; These products can be tablets (tablets,
dragees), uncompressed (powders), homogeneous (oral, nasal, topical solutions ...)
and heterogeneous (aerosols, emulsions, suppositories, gels ...). The diversity and
the number of microorganisms present in these products will be influenced by
different intrinsic and extrinsic factors; The intrinsic relationship of active drugs with
antimicrobial action, preservatives, pH, nutrient content, atmospheric activity,
osmotic pressure, oxidation reduction potential and hygienic quality of the raw
materials used, especially of natural origin While extrinsic factors to hygienic
conditions during manufacturing; Microbial content of packaging material. The
microbiological analysis carried out through these drugs involves microbes (total of
aerobic microorganisms, molds and yeasts) and investigation of specific
microorganisms. On the other hand, if sterile drugs are discussed, a sterility test
must also be carried out and must be performed in aseptic conditions; The objective
of this test is to provide independent control for a product to meet the requirements
described in the European Pharmacopoeia. The methods included in the
pharmacopoeia were included in the membrane and in direct inoculation, and were
analyzed using the fluid for anaerobic and aerobic bacteria (14 days at 32 +/- 2 ° C)
and the trypticase soy fluids for the fungi and aerobic bacteria (14 days at 22 +/- 2 °
C).
KEYWORDS
Microorganisms, indicators, pathogens, control, contamination, sterility, loading,
counting, aerobic, asepsis, pharmacopoeia, filtration, inoculation.

MARCO TEÓRICO
PRE-LABORATORIO
1. Defina limite microbiano y valoración biológica
Límite microbiano: ​Son las pruebas por medio de las cuales se estima un
número de microorganismos aerobios, mohos y levaduras presentes en
especialidades farmacéuticas y determinar si dichas especialidades estan
libres de ciertos microorganismos patógenos, estas especialidades incluyen:
materia prima, producto en proceso y producto terminado.
Está prueba permite darle protección al consumidor, ya que asegura la
calidad microbiológica del producto.
 Valoración biológica: ​Se entiende por valoración, la medición de la potencia
de los fármacos determinando la concentración o cantidad de los principios
activos que contienen y que deben de ser administrados a los pacientes en
forma de dosis.
2. Grafique el proceso de elaboración de por lo menos dos formas
farmaceuticas
Aspirina:

Paracetamol:
 3. Según la categoría de los medicamentos ¿Que requerimientos a nivel
microbiano existen?
Categoría Descripción Bacterias Hongos y levadura

1 Inyectables, otros A los 7 días, una reducción Ningún incremento a los 7,

parenterales incluyendo logarítmica de no menos de 14 y 28 días respecto del
emulsiones, productos 1,0 desde el recuento recuento inicial.
nasales estériles y calculado en el inicio; a los
productos oftálmicos 14 días, una reducción
preparados con bases o logarítmica de no menos de
vehículos acuosos. 3,0 del recuento inicial; y a
los 28 días ningún
incremento del recuento de
los 14 días.

2 Productos empleados A los 14 días, una reducción Ningún incremento a los 14

de manera tópica logarítmica de no menos de y 28 días respecto del
preparados con bases o 2,0 desde el recuento inicial; recuento inicial.
vehículos acuosos, y a los 28 días ningún
productos nasales no incremento del recuento de
estériles y emulsiones, los 14 días.
incluyendo aquellos que
se aplican a membranas
mucosas.

3 Productos orales a A los 14 días, una reducción Ningún incremento a los 14

excepción de logarítmica de no menos de y 28 días respecto del
antiácidos, preparados 1,0 del recuento inicial; y a recuento inicial.
con bases o vehículos los 28 días ningún
acuosos. incremento del recuento de
 los 14 días.

4 Antiácidos preparados Ningún incremento a los 14

con una base acuosa. y 28 días respecto del
recuento inicial.

4. Qué sugerencias daría ud. a la industria productora de medicamentos

para evitar la contaminación de los productos?
● Realizar un control en periodos regulares para los empleados que
tienen contacto directo con los fármacos en produccion y ademas de
eso a la materia prima necesaria para la producción
● Realizar capacitaciones seguidas a cada uno de los empleados y
además, certificarlos con la área de su responsabilidad
OBJETIVOS
● Aplicar y experimentar la metodología básica para las pruebas de promoción
de crecimiento de los métodos de recuento microbiano.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

Se le debe atribuir mucha relevancia a los procesos de análisis microbiológico en la
producción de productos farmacéuticos, de esta forma se garantizará la calidad el
producto, efecto terapéutico y eficacia de acción. Los productos contaminados con
microorganismos (que puede darse por contaminación de materias primas y
deficiencia higiénica en los procedimientos de producción, envase y factores
ambientales) pueden acarrear daños a la industria económicamente hablando
debido a que los microorganismos pueden degradar el principio activo alterando la
composición del medicamento conllevando a procesos legales si es que no se
realizan los adecuados análisis y estos productos salen a la venta y generar
desconfianza en el consumidor.

HIPÓTESIS
El análisis microbiológico que se le debe realizar a los productos se fundamentan en
los mismos principios tanto para material estéril como no estéril.
PROCEDIMIENTO
MEDICAMENTOS NO ESTÉRILES
1. Tabletas y grageas debieron ser pulverizadas en mortero estéril e inocular 1
gramo de polvo en medio líquido. Observar el resultado macroscópico de
este primer paso, si se muestra contaminación se hace recuento.
2. RECUENTO TOTAL: Hacer una dilución 10-1 (1g pruducto+9ml de agua
peptonada) y preparar diluciones 10-2 y 10-3 a partir de esta dilución inicial.
3. Sembrar por duplicado en agar tripticasa soya 0,1 ml de las diluciones
correspondientes en cada una de las 6 cajas, posteriormente adicionar el
medio fundido sobre el inóculo y dejar secar.
4. Incubar a 35+/- 1 °C durante 48 horas
5. RECUENTO DE MOHOS Y LEVADURAS: igual que el paso anterior, con
base a las 3 diluciones preparadas sembrar por duplicado en agar sabouraud
1 ml e incubar de 20 a 28°C por 8 días.
6. SULFITO REDUCTORES: Añadir 3 ml del agar Sulfito-hierro-polimixina
licuado a un tubo que contendrá 1 ml de la dilución más concentrada y dejar
enfriar el medio. Finalmente aforar a 100 mm agregando más medio. Incubar
35°C durante 7 días.
7. ANAEROBIOS TOTALES: sembrar 0.1 ml a partir del caldo tioglicolato en
agar sangre e incubar en anaerobiosis a 35°C por 24 a 48 horas.
8. SALMONELLA: adicionar 0,1 ml de la muestra a un tubo de caldo lactosado
con 9 ml preparando de esta manera la dilución inicial, incubar a 35°C 24
horas. Tomar posteriormente 1 ml de está dilucion y sembrar en caldo
selenito y tetrationato, incubar igualmente a 35°C 24 horas. Para finalizar
sembrar de los tubos anteriores en agar Salmonella shigella, EN y XLD.
Incubar 35°C durante 24 horas.
9. ENTEROBACTERIAS. Tomar del caldo lactosado sembrado con anterioridad
0,1 ml y sembrar en agar EMB que será incubado 35°C 24 horas.
10. PSEUDOMONAS Y S. AUREUS: A partir del caldo tioglicolato incubado en le
paso anterior sembrar 0,1 ml en agar Cetrimide e incubar 35°C las
respectivas 24 horas. Si se observa crecimiento se deben realizar las
pruebas bioquímicas correspondientes para confirmar la presencia de
pseudomonas. De ese mismo caldo tomar otros 0,1 ml para sembrar en agar
Baird-parker y se incuba a la misma temperatura la misma duración de
tiempo. Igualmente, se haber crecimiento hacer las bioquímicas respectivas
para identificación de S, aureus.

MEDICAMENTOS ESTÉRILES:
1. El material empleado para la siguiente práctica de la mesa número 5 fue
Gentamicina inyectable de 80 mg/2ml para la cual se realizaron diluciones
usando como patrón base la escala de Mc farland.
2. Se estipularon concentraciones de 0,03 mg/ ml, 0,06 mg/,ml y 0,12 mg /ml
que fueron sembradas por duplicado para posteriormente añadir el medio
líquido y dejar secar
3. Se hicieron pequeños pozos alrededor de las respectivas cajas en los cuales
se inoculó en su totalidad la muestra del medicamento (para un total de 6
pozos) y central a ellos se colocó el respectivo sensidisco para que se llevara
a cabo correctamente el antibiograma y evaluar la potencia del medicamento.
RESULTADOS
MEDICAMENTOS NO ESTÉRILES
GRUPO MUESTRA RCTO RCTO SULFITO ANAEROBI
TOTAL MOHOS Y REDUCTO OS
LEVADUR RES
AS

1 Tabletas 20 UFC/g 35 UFC/g Negativo Negativo

Verapamilo

2 Tabletas <10 UFC/g 588 UFC/g Negativo Negativo

Ciprofloxaci
 no

3 Tabletas <10 UFC/g 5 UFC/g Negativo Negativo

Acetaminof
én

ENTEROBACTER S. AERUGINOSA SALMONELLA S. AUREUS

IAS

Negativo Negativo Negativo Negativo

Negativo Negativo Negativo Negativo

Negativo Negativo Negativo Negativo

MEDICAMENTOS ESTÉRILES

GENTAMICINA 80 MG/2ML MK

C1 C2 C3 ST

1 12 mm 20 mm 17 mm 17 mm
15 mm

2 12 mm 18 mm 19 mm 20 mm
11mm

3 12 mm 18 mm 18 mm 30 mm
15 mm

4 14 mm 20 mm 20 mm N/C
15 mm

5 13 mm 20 mm 19 mm 21 mm
17mm

6 13 mm 21 mm 19 mm N/C
16 mm

X 13,75 19,5 18,6 22

62 88,6 84,0

GOTAS ÓTICAS M2: 0,003 g/ml

C1 C2 C3 ST
1 10 mm 20 mm 20 mm 15 mm
7 mm 5 mm 10 mm

2 10 mm 22 mm 9 mm 17 mm
7 mm 3 mm 10 mm

3 15 mm N/C 11 mm 14 mm
14 mm N/C 10 mm

4 7 mm N/C 10 mm 16 mm
10 mm N/C 4 mm

5-6 N/C N/C N/C ---------------

6,7 4,16 7,3 10,3

65% 40,38% 70,8%

Para la tercera y última muestra no se observó crecimiento de ningún halo

para ninguno de los 6 antibiogramas realizados
160 mg/2ml

C1 C2 C3

N/C N/C N/C

N/C N/C N/C

ANÁLISIS DE RESULTADOS Y POST LABORATORIO

● Se observó crecimiento de unidades formadoras de colonias de mohos y
levaduras y en recuento total, podemos deducir que muy probablemente
existió algún tipo de error humano mínimo o en cuanto a técnicas durante los
procedimientos de siembra puesto que estos medicamentos tuvieron que ser
procesados, empacados y distribuidos con condiciones sanitarias estrictas.
Sin embargo, el recuento total fue muy mínimo así como el recuento de
mohos y levaduras para las tabletas de acetaminofén. Cabe destacar que no
hubo crecimiento para los microorganismos sulfito reductores, anaerobios,
enterobacterias, S. aeruginosa, Salmonella y S. aureus. En general las
condiciones microbiológicas de los productos analizados son de calidad
aceptables​ debido a que los microorganismos indicadores de contaminación
y malas prácticas de manufactura dieron en su totalidad resultados negativos
que era lo que se esperaba.
● En cuanto a los resultados obtenidos para los medicamentos estériles se
puede decir que el único antibiograma con resultados concluyentes y
 aceptables fue el realizado a la gentamicina inyectable 80 mg/2ml de MK
puesto que todos los halos tuvieron un crecimiento medible para obtener los
resultados adecuados a partir de ellos y realizar una correcta evaluación de la
potencia del medicamento la cual fue completamente comprobada. En cuanto
a los demás procedimientos, para las gotas óticas se intuyeron la mayoría de
los resultados puesto que tampoco hubo un resultado medible en ninguna de
las cajas y para la ultima muestra evaluada no se lograron obtener resultados
de ningún tipo. Esto último puede deberse a errores técnicos de los
bacteriólogos, ausencia de inóculo (mala siembra), o preparación de la
turbidez con base a la escala de Mcfarland mal realizada desde un inicio.
● Se podría sugerir a la industria farmacéutica con el fin de evitar la
contaminación de los productos que se lleven a cabo buenas prácticas de
manufactura, esto incluyendo la capacitación adecuada del personal, el uso
de insumos y espacios que se encuentren en total condición de asepsia e
higiene a la hora de manipular y procesar los medicamentos , adicional a esto
llevar un registro oportuno de control microbiológico de cierto porcentaje
sugerido por la farmacopea a cada lote de productos con el fin de prevenir la
salida de productos por fuera de los límites microbianos permitidos y evitar
que estos lleguen a contaminar otros lotes que se encuentren en producción.
● La utilización de conservadores en la formulación de medicamentos resulta
imprescindible,esto debido a las propiedades antimicrobianas y antifúngicas
que presentan, puesto que los factores que influyen en el crecimiento
microbiano son diversos. Estos pueden ser fenoles, parabenos, alcoholes,
propilenglicol, compuestos de amonio cuaternario, entre otros.
CONCLUSIONES
● Los productos farmacéuticos no estériles permiten un máximo de carga
microbiana, pero debe haber ausencia total de patógenos, tal y como se
observó en los resultados obtenidos durante la práctica. La cantidad y tipo de
microorganismos permitidos se especifica en normas de calidad provenientes
de farmacopeas extranjeras. En este tipo de productos no es requisito la
pirogenicidad.
● Los productos farmacéuticos no estériles están propensos a contaminarse
con microorganismos por una mala utilización de las BPM, o por una
capacitación deficiente del personal. Estos productos se contaminan a
menudo con bacterias, mohos y levaduras durante el transcurso de su
proceso de manufactura: por ejemplo en el pesaje, fabricación, llenado,
almacenamiento y durante su uso.
● Se utilizan microorganismos indicadores con el fin de indicar si los
medicamentos estuvieron expuestos a prácticas de higiene inadecuadas, en
cuanto a manipulación, que según el caso suponen un peligro potencial para
el usuario. Estos microorganismos suelen ser de los siguientes géneros:
 bacterias aerobias mesófilas, E. coli y coliformes, Salmonella typhi, Shigella
spp, Vibrio spp, entamoeba spp, S. aureus y Pseudomonas aeruginosa
BIBLIOGRAFÍAS
http://www.aam.org.ar/descarga-archivos/manual-microbiologia-aplicada.pdf
https://es.scribd.com/doc/315082014/Control-Microbiologico-de-los-Medicame
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https://ppqujap.files.wordpress.com/2016/05/proceso-aspirina-105i1.pdf
http://environmentclearance.nic.in/writereaddata/Online/TOR/0_0_25_Feb_2016
_1108554031AnnexureManufacturing&EffluentTreatmentProcess.pdf