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RESUMEN
ACCIÓN DE LA ENZIMA CATALASA, ACCION DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL Y
SACARASA
1.- Hidrólisis enzimática del almidón por la saliva: Acción digestiva de la amilasa salivar.
Primero se hace un tubo patrón con 2 ml. de una disolución de almidón al 2 % y unas gotas de
disolución de yodo (lugol). Observar el resultado. Después se calienta suavemente el tubo hasta que
la mezcla pierda el color. Dejar enfriar el tubo bajo el agua del grifo y esperar unos minutos. Anotar
lo sucedido.Colocar en un segundo tubo 2 ml. de la disolución de almidón y una cierta cantidad de
saliva, mezclar bien la saliva con la disolución y calentar muy suavemente durante unos segundos.
Añadir unas gotas de lugol. Anotar los resultados y dar una explicación a lo ocurrido.
2.- Reconocimiento de la enzima catalasa
La catalasa se encuentra tanto en tejidos vegetales (patata, zanahoria, lechuga, etc.) como en tejidos
animales (carne, pescado, etc.) produciendo la siguiente reacción química:
H2O2 (agua oxigenada) ==== H2O + ½ O2 (gaseoso)
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amilasas, dado que existen varias) es una enzima hidrolasa que tiene la función de catalizar la reacción
de hidrólisis de los enlaces 1-4 entre las unidades de glucosa al digerir el glucógeno y el almidón para
formar fragmentos de glucosa (dextrinas, maltosa) y glucosa libre. En los animales se produce
principalmente en las glándulas salivales (sobre todo en las glándulas parótidas) y en el páncreas.
Tiene actividad enzimática a un pH de 7. Cuando una de estas glándulas se inflama, como en la
pancreatitis, aumenta la producción de amilasa y aparece elevado su nivel en sangre (amilasemia). El
pH óptimo de la amilasa salival es de 6.9. Prácticamente todos los seres vivos disponen de amilasas.
La sacarasa es una enzima específica de la sacarosa. La sacarasa, conocida también como invertasa,
es una enzima que convierte la sacarosa (azúcar común) en glucosa y fructosa. Está presente en el
intestino delgado, en el borde del cepillo de las vellosidades intestinales.
MARCO TEÓRICO
Enzimas:
- ¿Qué son?
Las enzimas son proteínas “especialistas” y controlan TODAS las reacciones químicas de nuestro
cuerpo. Hay enzimas en todo lo que está vivo. Se dice que son catalizadores, porque cada reacción
química necesita una enzima para que se realice, es decir, todo lo que se transforma lo hace gracias a
una enzima. Cada enzima actúa sobre una sustancia concreta, como una llave y una cerradura.
- ¿Cómo actúan?
Actúan como catalizadores en el metabolismo de los seres vivos. Con su acción, regulan la velocidad
de muchas reacciones químicas implicadas en este proceso.
- ¿Qué factores afectan a su actividad?
• Efecto del pH
• Temperatura
• Concentración de sustrato
-¿Qué es apoenzima?
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Es la parte proteica de una holoenzíma, es decir, una enzima que no puede llevar a cabo su acción
catalítica desprovista de los cofactores necesarios, ya sean iones metálicos (Fe, Cu, Mg, etc.) u
orgánicos, que a su vez puede ser una coenzima o un grupo prostético, dependiendo de la fuerza de
sus enlaces con la apoenzima. La apoenzima, es por tanto, catalíticamente inactiva, hasta que se le
une el cofactor adecuado.
-¿Que es holoenzíma?
Es una enzima que está formada por una apoenzima y un cofactor, que puede ser un ion o una molécula
orgánica compleja unida (grupo prostético) o no (una coenzima). En resumidas cuentas, es una enzima
completa y activada catalíticamente.
- ¿Qué es zimógeno?
Es un precursor enzimático inactivo, es decir, no cataliza ninguna reacción como hacen las enzimas.
Para activarse, necesita de un cambio bioquímico en su estructura que le lleve a conformar un centro
activo donde pueda realizar la catálisis. En ese momento, el zimógeno pasa a ser una enzima activa.
Enzima catalasa:
- ¿Qué reacción cataliza?
- ¿Dónde se encuentra?
Se encuentra en casi todos los organismos vivos en el planeta que están expuestos al oxígeno.
Porque puede cambiar 40 millones de moléculas de peróxido de hidrógeno en agua y oxígeno en sólo
un segundo.
Amilasa salival.
Cataliza la reacción de hidrólisis de los enlaces 1-4 entre las unidades de glucosa al digerir el
glucógeno y el almidón para formar fragmentos de glucosa (dextrinas, maltosa) y glucosa libre.
- ¿Dónde se encuentra?
Está presente en el intestino delgado, en el borde del cepillo de las vellosidades intestinales.
¿Cómo actúa?
Entre los sustratos sobre los que actúa, el más significativo es la sacarosa, de ahí que la enzima se
conozca también, como ya se ha señalado, con el nombre de sacarasa.
¿Cuáles son sus componentes?
Glucosa
Fructosa
¿Qué produce?
Productos de la reacción son conocidos como "azúcares invertidos"
¿Qué es especificidad enzimática?
Es tanto del tipo de reacción que catalizan, como del sustrato involucrado en la reacción.
Tipos de especificidad:
La Especificidad Óptica
La Especificidad del Grupo
¿Qué es Alosterismo?
Es un modo de regulación de las enzimas por el que la unión de una molécula en una ubicación (sitio
alostérico) modifica las condiciones de unión de otra molécula, en otra ubicación (sitio catalítico) de
la enzima, distante de la primera.
NO INHALAR
CUIDADO AL MANIPULAR
SE PUEDE QUEBRAR
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PROCESO DE LA SACARASA
1. Poner en una gradilla cuatro tubos de ensayo, numerados del 1 al 4.
2. Añadir una pisca de azucar en la tara y pesar en la balanza 2gr .
3. A los tubos 3 y 4 añadir una pequeña cantidad de solución de amilasa salival.
Para la solución salival: Se miden 20 ml de agua destilada se embucha por 5 minutos y colectar en
erlen meyer de 50 ml. Para ayudar y formar más saliva pensar en un limón o en algo que apetezca
mucho comer. Es preferible que el donante, esté en ayunas... Así se favorece que forme más saliva.
4. Antes de la acción de la amilasa salival se harán las siguientes determinaciones:
- En el tubo 1, se realiza la Reacción de Fehling. Para comprobar la presencia de azúcares libres
(reductores).
- En el tubo 2, se realiza la Reacción de Lugol. Para comprobar la presencia de almidón.
- Los tubos 3 y 4 que contienen el almidón, al que le hemos echado la saliva, ponerlos en un
vaso de precipitados al baño María, controlando la temperatura del agua para que no hierva, ya que
lo que intentamos, es que la enzima de la saliva trabaje a unos 37° C. Dejarlo unos 15 minutos.
5. A continuación realizar las siguientes reacciones:
En el tubo número 3, realizar la Reacción de Fehling.
En el tubo número 4, realizar la Prueba del Lugol.
Sobre la sacarasa
Preparamos una solución de levadura (Shaccharomyces cereviceae) con 20ml de agua + 2.5g de
levadura + 0,1g de sulfato de amonio (se puede prescindir).
Dejar reposar por 15 minutos
Filtra el contenido (extracto de levadura)
Prepara los siguientes tubos:
Tubo 1
Preparar 1 cucharadita de sacarosa en 2 ml de agua destilada
Agitar
Tubo 2
Preparar 1 cucharadita de sacarosa en 2 ml de agua destilada + 2ml de extracto de levadura
Agitar
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RESULTADOS Y OBSERVACIONES
Observación de la reacciones de la
sacarasa, levadura y uva.
oxidación, por lo que deben ser recicladas antes de volver a efectuar una nueva reacción catalítica.
Ejemplos: deshidrogenasas, peroxidasas.
¿Qué grupos químicos participan en el sitio activo de las enzimas?
El sitio activo de una enzima, también llamado centro activo, es la zona de la enzima a al cual se une
el sustrato, para que la reacción se produzca. Las enzimas son proteínas, Los enzimas poseen grupos
químicos ionizables (carboxilos -COOH; amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas
laterales de sus aminoácidos. Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga eléctrica
positiva, negativa o neutra. Como la conformación de las proteínas depende, en parte, de sus cargas
eléctricas, habrá un pH en el cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica
¿Por qué se los identifica a las enzimas como catalizadores?
Las enzimas son proteínas que catalizan reacciones químicas en los seres vivos. Las enzimas son
catalizadores, es decir, sustancias que, sin consumirse en una reacción, aumentan notablemente su
velocidad. ... La sustancia sobre la que actúa la enzima se llama sustrato.
¿Pueden las enzimas actuar en diferentes tipos de sustratos?- ¿Por qué?
Si porque Cada enzima está hecha para una función específica. Las moléculas por sobre las cuales
trabaja una enzima se denominan sustratos y cada uno está ligado a una región del enzima, llamado
sitio activo. Existen dos formas o modelos en que puede actuar una enzima y la velocidad de la
reacción depende de ello. Si la zona activa de la enzima tiene la forma exacta para unirse a cierto
sustrato, la reacción es veloz.
Qué significa alta especificidad o especificidad absoluta y especificidad de grupo?
Cuando la enzima solo puede actuar sobre un tipo de substrato, se dice que la enzima muestra
especificidad absoluta para el substrato. Ese es el caso de la deshidrogenasa succinica, que es
específica para el succinato, o la L-glutamico deshidrogenasa, específica para el glutamato.
Si la enzima puede actuar sobre substratos con estructuras muy similares, se dice que la enzima
muestra especificidad relativa para el substrato. La L-aminoacido oxidasa, por ejemplo, puede
catalizar la oxidacion de diferentes aminoacidos de la serie L.
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CONCLUSIONES
ENZIMA CATALASA
• La actividad de la catalasa puede medirse por diversos procedimientos, sin embargo hay que
procurar operar con la menor concentración posible de sustrato, agua oxigenada, para evitar la
inactivación de la enzima por el sustrato.
• La catalasa se encuentra en todas las células que tienen metabolismo aerobio
• La determinación de la magnitud de la actividad catalítica presentes en las diferentes
fracciones proteicas obtenidas de la célula o tejidos: permite purificar las enzimas y obtenerlos al
final en forma homogénea.
• Entre los vegetales estudiados, la papa es la que contiene mayor cantidad de catalasa.
• La enzima es un producto delicado, por lo tanto la agitación excesiva desnaturaliza la
enzima.
• Se demostró la naturaleza proteica de la enzima catalasa en los vegetales.
• Montaño, L.M. et al. 2015. Desarrollo de un detector para medir concentraciones de sustancias
biológicas.
FIRMAS DE RESPONSABILIDAD
Estudiante (s) Laboratorísta Docente
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