Transferencia de células adoptiva como inmunoterapia personalizada para el cáncer humano

Terapia de células adoptivas (ACT, por sus siglas en inglés) es una terapia contra el cáncer
altamente personalizada que involucra la administración de células inmunes con actividad
anticancerígena directa al portador del cáncer.

Se pueden cultivar in vitro los linfocitos antitumorales y seleccionarlos. La activación in vitro

permite que tales células se liberen de los factores inhibidores que existen in vivo.

Un factor importante que limita el uso exitoso de ACT en humanos es la identificación de

células que pueden dirigirse a antígenos expresados selectivamente en el cáncer y no en
tejidos normales esenciales.

ACT ha utilizado:

 células hospedadoras naturales que exhiben reactividad antitumoral

 células hospedadoras que se han modificado genéticamente con receptores de células
T antitumorales (TCR) o receptores de antígenos quiméricos (CAR).

La terapia celular adoptiva con TIL autólogas (autólogo: donante y receptor son la misma
persona) es el enfoque más eficaz para inducir regresiones duraderas completas en pacientes
con melanoma metastásico.

Fig. 1. Esquema general para utilizar la transferencia de células adoptivas de TIL autólogos de
origen natural. La muestra de melanoma resecada se digiere en una suspensión de células
individuales o se divide en múltiples fragmentos tumorales que se cultivan individualmente en
IL-2. El crecimiento excesivo de linfocitos destruye los tumores 2 a 3 semanas, y generan
cultivos puros de linfocitos que pueden analizarse para determinar su reactividad en ensayos
de cocultivo. Los cultivos individuales se expanden rápidamente en presencia de un exceso de
linfocitos alimentadores irradiados, OKT3 e IL-2. Aproximadamente de 5 a 6 semanas después
de resecar el tumor, se pueden obtener hasta 1011 linfocitos para infusión en los pacientes.
Fig. 3. Un "anteproyecto" para el tratamiento de pacientes con células T que reconocen
mutaciones específicas de tumores. Las secuencias de ADN exómico de células tumorales y
células normales del mismo paciente se comparan para identificar mutaciones específicas de
tumores. El conocimiento de estas mutaciones se puede usar para sintetizar minigenes o
polipéptidos que codifican cada aminoácido mutado flanqueado por 10 a 12 aminoácidos.
Estos péptidos o minigenes pueden expresarse mediante APC autólogas de un paciente, donde
se procesan y se presentan en el contexto del MHC de un paciente. El cocultivo de las células T
del paciente con estas APC se puede usar para identificar todas las mutaciones procesadas y
presentadas en el contexto de todas las moléculas MHC clase I y clase II de un paciente. La
identificación de mutaciones individuales responsables del reconocimiento de tumores es
posible porque las células T expresan marcadores de activación, como 41BB (células T CD8 +) y
OX40 (células T CD4 +), cuando reconocen su antígeno diana afín. A continuación, las células T
que expresan el marcador de activación pueden purificarse usando citometría de flujo antes de
su expansión y reinfusión en el paciente portador del tumor.

TILs de 21 pacientes con melanoma que respondieron a ACT identficaron 45 mutaciones

presentadas en una variedad de moléculas MHC de clase 1 y clase 2. Hasta ahora, cada
mutación reconocida por TIL era distinta, es decir, cada una de una proteína expresada
diferente. Estos hallazgos proporcionan evidencia sugestiva de que los TIL de melanoma
capaces de mediar respuestas antitumorales estaban reconociendo mutaciones somáticas al
azar en el cáncer. En muchos casos, múltiples mutaciones fueron reconocidas por una
población TIL individual. El concepto de que las regresiones del cáncer después de la
inmunoterapia son el resultado de mutaciones dirigidas explica por qué los pacientes pueden
experimentar una regresión tumoral sin secuelas autoinmunes. Por el contrario, también se
puede explicar la ineficacia del gran número de vacunas terapéuticas contra el cáncer que se
dirigen a autoproteínas no mutadas (41, 42). Mientras que la fuerte reactividad a los
autoantígenos causa toxicidad autoinmune, las vacunas contra los autoantígenos
desencadenan la expansión de los TCR de baja afinidad contra las autoproteínas que
escaparon a la selección negativa en el timo. Esto plantea la posibilidad de que las vacunas
dirigidas a epítopos inmunogénicos mutados puedan ser mucho más eficaces.
Gran parte del trabajo existente en la inmunoterapia del cáncer se ha centrado en las células T
CD8 +. Sin embargo, las células T CD4 + también pueden promover eficazmente el rechazo
tumoral. Las células T CD4 + no solo mejoran la función de las células T CD8 +, sino que
también desempeñan un papel más directo en la eliminación del tumor. Esta noción ha sido
validada recientemente en humanos (44). Los papeles que desempeñan las células T CD4 + en
la respuesta inmune antitumoral dependen crucialmente de su polarización, que está
determinada por su expresión de factores clave de transcripción. Las células CD4 + pueden
destruir las células tumorales, y la evidencia reciente sugiere que las células T auxiliares 17
transferidas de forma adoptiva pueden promover la inmunidad antitumoral de larga duración
(55).

Fig. 4. Modificación génica de linfocitos de sangre periférica. En un intento por ampliar el

alcance de ACT a otros cánceres, se están desarrollando técnicas para introducir receptores
antitumorales en células T normales que podrían usarse para la terapia. El panel superior
muestra la inserción de un TCR convencional en los linfocitos T de un paciente, seguido de la
expansión y la infusión de nuevo en el paciente. El panel inferior muestra la inserción de un
CAR en la célula T de un paciente, seguido de la expansión de estas células y su reinfusión. Los
TCR y los CAR son fundamentalmente diferentes en sus estructuras y en las estructuras que
reconocen. Los TCR se componen de una cadena a y una cadena b, y reconocen antígenos
que han sido procesados y presentados por una de las moléculas del MHC del paciente. Los
CAR son receptores artificiales que pueden construirse uniendo las regiones variables de las
cadenas pesada y ligera del anticuerpo a cadenas de señalización intracelulares (tales como
CD3-zeta, CD28, 41BB) solos o en combinación con otros restos de señalización. Las CAR
reconocen antígenos que no necesitan ser restringidos por MHC, pero deben presentarse en
la superficie de la célula tumoral.