Universidad del Sinú Elias Bechara Zainum.

Técnicas bacteriológicas básicas

y obtención de cultivos puros.

Payares.

María José Mena.

25-08-2019.

Montería - Córdoba.
 INTRODUCCION.
Las técnicas bacteriológicas básicas trae consigo la inoculación de los medios de
cultivo y a manipulación de cultivos microbianos en el laboratorio de microbiología.
Y son procedimientos que deben realizarse siguiendo una serie de pasos para
evitar la contaminación del material con que estamos trabajando, ya sea con el
ambiente o con el operador
 OBJETIVOS
GENERAL
● Manejar las técnicas bacteriológicas básicas

ESPECIFICOS
 Realizar siembras en medios líquidos, sólidos y semisólidos
 Obtener resultados de los cultivos puros
 MATERIALES
 2 cajas con medios de cultivo (Agar sangre,Mc conkey, Agar Nutritivo)
 1 tubo medio inclinado
 1 tubo con medio liquido
 Caja con cultivo bacteriano
 Tubo con cultivo bacteriano
 Láminas de portaobjetos
 Guantes, bata, encendedor

PROCEDIMIENTOS DE LAS TECNICAS BATERIOLOGICAS BASICAS

 Se mantienen los tubos con caldo en la gradilla

 Luego, se rotulan el tubo con el nombre
 Se flamea el asa en el mechero hasta que este rojo y luego dejar enfriar el
asa uno segundos
 Se toma una colonia con el asa de la caja Petri
 Retiramos la tapa del tubo de ensayo
 Volvemos a flamear la boca del tubo para eliminar cualquier microrganismo
 Mantenemos los tubos de forma inclinada
 Sembramos en el tubo estéril que contiene el medio de cultivo un poco
inóculo
 Y por último se flamea de nuevo la boca del tubo y se tapa
 CUESTIONARIO

 ¿Cuál es la finalidad de la siembra por agotamiento?

Con este procedimiento se pueden conseguir una buena separación de las
colonias y aislarlas fácilmente. Para ello se funde el medio de cultivo, se
vuelca en caja de Petri y se deja solidificar.

 ¿Diga cuál es la finalidad de la siembra masiva?

Cuando se desea realizar una siembra masiva se pude utilizar la espátula,
en este caso la gota de muestra liquida se esparce por la espátula y por
toda la superficie del medio de cultivo.

 ¿Cuál es la utilidad de la siembra en un medio semisólido?

Se utilizan tubos de ensayo sin inclinar. Se siembran por picaduras a
punción, utilizando un hilo. Este tipo de siembra sirve también como otro
método de conservación de microorganismos anaerobios facultativos

DEFINA LOS SIGUIENTES TERMINOS

Cultivo puro: Aquel que contiene solo una clase de microorganismo. La obtención
de este se da a través de una técnica de aislamiento
Cultivo mixto: Consiste en plantar distintas variedades en estrecha vecindad,
basándose en el concepto de planta compañeras, permiten que las cualidades
naturales de las diferentes especies se complementen
Inoculo: Es un término colectivo para referirse a los microorganismos o sus partes
(esporas, fragmentos) capaces de provocar infección o simbiosis cuando se
transmiten a un huésped.
Pase bacteriano: También llamados resiembra, es el proceso donde separa una
colonia de alguna bacteria que haya crecido en algún medio a otro, la caja Petri
que contenga ya sea lo mismo que el medio en que creció anteriormente, esto se
hará para continuar se producción con nuevos elementos
Colonia bacteriana: Población de células que puede observarse
microscópicamente y crecen en un medio solidos procedente de una célula.
PROCEDIMIENTO DE INOCULACION EN TUBOS

 Transferir de medio líquido a medio líquido: Se transfiere de forma

aséptica con el asa de siembra una pequeña muestra del micoorgamismo,
desde el tubo que contiene el material. Luego sumérgenos el asa en el
líquido y agitamos para desprender y diluir la muestra.

 Transferir de medio solido a medio solido (agar inclinado): Con el asa

de siembra estéril tomamos los microorganismos de la muestra e
introducimos el asa hasta la mitad del tubo realizando movimientos de Zig-
Zag en la superficie. Esto se inicia desde el fondo y se avanza hacia la
parte superior del área inclinada.

 Transferir de medio solido a medio semisólido (siembra vertical o por

picadura): en este medio, se contiene una menor proporción de agar que
en los medios sólidos, este procedimiento se lleva a cabo con un asa de
siembra recta y esterilizada, con el cual tomamos un par de colonias del
aislamiento. Este medio queda inoculado cuando introducimos el asa en
profundidad de manera vertical sin tocar su fondo