AKTIVITAS DAYA HAMBAT EKSTRAK BATANG PASAK BUMI (Eurycoma

longifolia Jack) TERHADAP Escherichia coli IN VITRO

Ayudhia Giovanny Halim1, Lia Yulia Budiarti2, Hendra Wana Nur’amin3

1
Program Studi Pendidikan Dokter, Fakultas Kedokteran Universitas Lambung Mangkurat
Banjarmasin
2
Bagian Mikrobiologi Fakultas Kedokteran, Universitas Lambung Mangkurat Banjarmasin
3
Bagian Farmakologi Fakultas Kedokteran, Universitas Lambung Mangkurat Banjarmasin

Email Korespondensi: gheagio@gmail.com

Abstract: Pasak bumi (Eurycoma longifolia Jack) is one of many plants found in South
Kalimantan and has been used as a herbal remedy. The stem of Eurycoma longifolia contains
active substances such as flavonoids, alkaloids, and terpenoids that act as antibacterial
agents. This study aimed to measure the optimal concentration of ethanol extract of
Eurycoma longifolia stem on Eurycoma longifolia. This study was a true experiment using
post test-only with control group design, consisted of 7 treatments of ethanol extract of
Eurycoma longifolia stem with five repetitions, ciprofloxacin as positive control and aquadest
as negative control. Data analysis was performed by One-way ANOVA test (p<0,05) and
Post-hoc LSD test (α=0,05). The results showed significant differences in conecentration
20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, and 80% whose inhibitory zones were 11,18 mm; 14,19
mm; 17,01 mm; 21,15 mm; 24,10 mm; 26,18 mm; 28,04 mm; and ciprofloxacin’s inhibitory
zone was 26,28 mm. The conclusion were there were significant differences in all 7
treatments and the optimal concentration of ethanol extract of Eurycoma longifolia stem on
Escherichia coli was 70%.
Keywords: Escherichia coli, Eurycoma longifolia Jack stem extract, inhibitory activity.

Abstrak: Pasak bumi (Eurycoma longifolia Jack) merupakan salah satu tanaman yang
banyak ditemukan di Kalimantan Selatan dan telah banyak sebagai obat herbal. Bagian
batang pasak bumi mengandung zat-zat aktif seperti flavonoid, alkaloid, dan terpenoid yang
berperan sebagai antibakteri. Penelitian ini bertujuan untuk mengukur daya hambat optimum
ekstrak etanol batang pasak bumi pada Escherichia coli secara in vitro. Penelitian ini
merupakan penelitian eksperimental murni menggunakan rancangan post test-only with
control group design, yang terdiri dari 7 perlakuan konsentrasi ekstrak etanol batang pasak
bumi dengan pengulangan sebanyak 5 kali, siprofloksasin sebagai kontrol positif, dan
aquadest sebagai kontrol negatif. Analisis data dilakukan dengan uji One-way ANOVA
(p<0,05) dan uji Post-hoc LSD (α=0,05). Hasil penelitian menunjukkan bahwa konsentrasi
20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, dan 80%, berbeda bermakna dengan zona hambat secara
berurutan, yaitu: 11,18 mm; 14,19 mm; 17,01 mm; 21,15 mm; 24,10 mm; 26,18 mm; 28,04
mm; dan siprofloksasin sebesar 26,28 mm. Kesimpulannya adalah terdapat perbedaan
aktivitas daya hambat secara berurutan dari tujuh perlakuan tersebut dan konsentrasi ekstrak
etanol batang pasak bumi 70% merupakan konsentrasi optimum terhadap Escherichia coli.
Kata kunci: daya hambat, ekstrak etanol batang pasak bumi, Escherichia coli.
PENDAHULUAN
Escherichia coli adalah bakteri Gram
negatif yang normalnya hidup sebagai
flora normal di sistem pencernaan manusia
dan merupakan penyebab utama diare,
meningitis, serta sepsis.1,2 Salah satu jenis
antibiotik yang sering digunakan untuk
mengatasi infeksi akibat Escherichia coli
termasuk di RSUD Ulin Banjarmasin
adalah antibiotik golongan kuinolon, yakni
siprofloksasin yang bersifat bakteriosidal.
Efektivitas terapi antibiotik terhadap
Escherichia coli saat ini sudah banyak
dilaporkan menurun, hal tersebut
ditunjukkan dengan tingginya angka
resistensi Escherichia coli terhadap obat
golongan kuinolon.3
Selain menggunakan antibiotik,
WHO melaporkan hampir sekitar 4 miliar
orang telah menggunakan obat herbal
sebagai bagian dari pengobatan penyakit
infeksi. Peningkatan penggunaan bahan
alam berhubungan dengan adanya isu back
to nature dan bahan alam juga banyak
digunakan masyarakat menengah ke
bawah terutama dalam hal preventif,
promotif dan rehabilitatif. Selain itu,
banyak masyarakat beranggapan bahwa
penggunaan tanaman obat relatif lebih
aman dibandingkan obat sintesis dan dapat
mengurangi efek samping yang timbul
akibat obat kimia.4,5,6
Salah satu tanaman khas Kalimantan
yang telah lama dikenal dan digunakan
sebagai obat untuk mengatasi infeksi
adalah pasak bumi. Pasak bumi digunakan
untuk pengobatan anti malaria,
perdarahan, demam, sariawan, penyakit
gatal, sakit kepala serta infeksi saluran
pencernaan seperti diare dan disentri.6
Hasil penelitian Farouk A et al (2007),
menyebutkan bahwa ekstrak alkohol dan
ekstrak aseton dari bagian batang dan
bagian daun pasak bumi memiliki daya
antibakteri terhadap Escherichia coli dan
Salmonella typhi, karena mengandung zat
aktif berupa alkaloid, flavonoid dan
terpenoid.7 Hasil penelitian Khanam Z et
al (2015), menyebutkan bahwa ekstrak
metanol batang pasak bumi sudah dapat
menghambat Escherichia coli pada
konsentrasi 20%.8 Hasil penelitian Faisal
G et al (2015), menyebutkan bahwa
ekstrak etanol bagian akar pasak bumi
pada konsentrasi 15% sudah dapat
menghambat pertumbuhan Staphylococus
aureus (bakteri Gram positif) dan pada
konsentrasi 5% sudah dapat menghambat
pertumbuhan Salmonella typhi, namun
pada konsentrasi 5-15% belum
memperlihatkan aktivitas daya hambatnya
terhadap Escherichia coli.9
Beberapa hasil penelitian di atas
dapat menggambarkan bahwa ekstrak
etanol batang pasak bumi dapat
menghambat pertumbuhan bakteri Gram
negatif seperti Escherichia coli, namun
belum banyak diinformasikan tentang daya
hambat optimumnya. Bagian batang pasak
bumi belum banyak diinformasikan
tentang khasiatnya sebagai pengobatan
infeksi dibandingkan bagian akarnya.
Penelitian ini dilakukan dengan tujuan
untuk mempelajari aktivitas daya hambat
dari beberapa perlakuan ekstrak etanol
batang pasak bumi terhadap Escherichia
coli ATCC 25922 secara in vitro
menggunakan metode difusi. Diharapkan
dari hasil penelitian ini diperoleh aktivitas
daya hambat optimum dari ekstrak etanol
batang pasak bumi dalam menghambat
pertumbuhan Escherichia coli.
METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian
eksperimental murni dengan metode
Posttest-Only With Control Group Design
dan menggunakan rancangan penelitian
acak kelompok yang terdiri dari perlakuan
ekstrak etanol batang pasak bumi pada
konsentrasi 20%, 30%, 40%, 50%, 60%,
70%, 80%, siprofloksasin sebagai kontrol
positif serta aquadest sebagai kontrol
negatif. Jumlah pengulangan untuk
masing-masing perlakuan adalah sebanyak
5 kali berdasarkan rumus Federer.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Penelitian ini menguji aktivitas
ekstrak etanol batang pasak bumi pada
berbagai konsentrasi dalam menghambat
pertumbuhan Escherichia coli ATCC
Gambar 1 Rerata Diameter Zona Hambat Berbagai Perlakuan Konsentrasi Ekstrak Etanol
Batang Pasak Bumi Terhadap Escherichia coli ATCC 25922
30
25
Zona Hambat
20
14.19 mm
15 11.18 mm
10
5
0
20% 30%
Gambar 1 menunjukkan adanya
peningkatan rerata diameter zona hambat
sebagai akibat dari peningkatan
konsentrasi perlakuan. Seluruh perlakuan
konsentrasi ekstrak etanol batang pasak
bumi memiliki aktivitas daya hambat
terhadap pertumbuhan Escherichia coli.
Aktivitas penghambatan ini ditunjukkan
dengan adanya besaran zona hambat pada
Penelitian ini menggunakan metode difusi
kertas cakram (paper disk) dengan
parameter besaran zona hambat dari tiap
perlakuan terhadap Escherichia coli.
Bahan penelitian ini adalah beberapa
batang pasak bumi yang diperoleh dari
lokasi kebun Dinas Kehutanan Banjarbaru.
Bahan Isolat bakteri Escherichia coli
ATCC 25922 merupakan isolat murni
yang masih baru dan diperoleh dari
Laboratorium Mikrobiologi FK
Universitas Lambung Mangkurat.
25922 secara in vitro. Hasil pengukuran
besaran zona hambat dari masing-masing
perlakuan terhadap Escherichia coli dapat
dilihat pada Gambar 1.
28.04 mm
26.18 mm 26.28 mm
24.10 mm
21.15 mm
17.01 mm
40% 50% 60% 70% 80% Kontrol
Positif
Perlakuan Ekstrak Etanol Batang Pasak Bumi
setiap perlakuan konsentrasi ekstrak. Hasil
penelitian ini mendapatkan adanya efek
pengaruh ekstrak etanol batang pasak bumi
pada berbagai konsentrasi, yaitu besaran
rerata zona hambat terkecil sebesar 11,18
mm yang didapat dari perlakuan 20% dan
zona hambat terbesar sebesar 28,04 mm
yang didapat dari perlakuan 80%.
Perlakuan kontrol positif (siprofloksasin)
memberikan efek besaran zona hambat efeknya dalam mengendalikan suatu
lebih rendah dibandingkan dengan mikroorganisme.15 Dengan kata lain,
perlakuan ekstrak etanol batang pasak konsentrasi mempengaruhi kecepatan
bumi 80% dengan zona hambat sebesar difusi dari zat antibakteri; semakin besar
26,28 mm. konsentrasi ekstrak maka semakin cepat
Pembentukan zona hambat di sekitar difusi, sehingga semakin besar daya
pertumbuhan bakteri uji tersebut antibakteri dan semakin luas diameter zona
menunjukkan bahwa ekstrak etanol batang hambat yang terbentuk.16
pasak bumi (Eurycoma longifolia Jack) Hasil uji kontrol positif
mengandung senyawa aktif yang bersifat (siprofloksasin) pada penelitian ini
antibakteri, yakni sebagai senyawa memberikan efek rerata zona hambat
metabolit sekunder. Senyawa metabolit sebesar 26,28 mm; hasil ini bila dilihat
sekunder merupakan senyawa metabolit berdasarkan standar CLSI (2013)
yang tidak esensial bagi pertumbuhan menunjukkan bahwa Escherichia coli
organisme dan berguna untuk sensitif (susceptible) terhadap
17
mempertahankan diri dari kondisi siprofloksasin yang diuji. Siprofloksasin
lingkungan yang kurang merupakan antibiotik golongan Kuinolon
10
menguntungkan. Kandungan senyawa yang bersifat bakterisid, terutama aktif
metabolit sekunder yang terdapat di dalam terhadap bakteri gram negatif, seperti
tanaman pasak bumi antara lain alkaloid, Escherichia coli.18
flavonoid dan terpenoid.8 Siprofloksasin memiliki mekanisme
Alkaloid dapat menyebabkan sel lisis antibakteri yang mirip dengan flavonoid
dan mengubah morfologi dari Escherichia yang terkandung dalam ekstrak batang
coli. Pada beberapa penelitian, alkaloid pasak bumi. Siprofloksasin menghambat
disimpulkan memiliki aktivitas sintesis asam nukleat yakni dengan
11
antimikroba. Flavonoid merusak menghambat kerja DNA tirase
19
permeabilitas dinding sel bakteri, (topoisomerase II).
mikrosom, dan lisosom sebagai hasil Selanjutnya untuk mengetahui
interaksi antara flavonoid dengan DNA sebaran dari data penelitian ini, dilakukan
bakteri, serta menghambat motilitas analisis uji normalitas data mengunakan
bakteri.12 Mekanisme kerja terpenoid uji Shapiro-Wilk dan uji homogenitas data
melibatkan pemecahan membran oleh mengunakan uji Levene’s Test. Hasil uji
komponen-komponen lipofilik.13 normalitas didapatkan nilai p > 0,05, yang
Gambar 1 juga menunjukkan bahwa berarti distribusi data penelitian ini
efek rerata diameter zona hambat dapat normal. Hasil uji homogenitas pada data
meningkat seiring dengan meningkatnya penelitian ini didapatkan nilai p = 0,053 (p
perlakuan konsentrasi ekstrak etanol > 0,05), yang berarti sebaran data dari
batang pasak bumi (Eurycoma longifolia penelitian ini adalah homogen.
Jack). Karena adanya peranaan dari suatu Selanjutnya untuk melihat apakah
bahan antimikroba yang terkandung pada terdapat perbedaan bermakna di antara
konsentrasi tertentu dalam menghambat perlakuan yang diuji, maka dilakukan uji
suatu mikroorganisme hidup.14 One-way ANOVA. Hasil uji One-way
Peningkatan konsentrasi zat antimikroba ANOVA didapatkan nilai p = 0,000, yang
yang digunakandapat meningkatkan berarti terdapat perbedaan bermakna di
antara perlakuan yang diuji secara statistik. menggunakan uji Post-hoc LSD pada
Selanjutnya untuk mengetahui perlakuan tingkat kepercayaan 95%. Data hasil uji
mana saja yang memberikan efek berbeda Post-hoc LSD dapat dilihat pada tabel 1.
bermakna, dilakukan uji lanjut

Tabel 1 Aktivitas Zona Hambat dari Berbagai Perlakuan Konsentrasi Ekstrak Etanol
Batang Pasak Bumi Terhadap Escherichia coli ATCC 25922 Berdasarkan Uji
Post-hoc LSD (α = 0,05)

Kontrol
Perlakuan 20% 30% 40% 50% 60% 70% 80%
(+)
20%
30% BB
40% BB BB
50% BB BB BB
60% BB BB BB BB
70% BB BB BB BB BB
80% BB BB BB BB BB BB
Kontrol (+) BB BB BB BB BB TBB BB Kontrol (+)
Keterangan:BB = Berbeda Bermakna; TBB = Tidak Berbeda Bermakna; Kontrol (+) =
Kontrol Positif

Tabel 1 menjelaskan bahwa terdapat konsentrasi ekstrak etanol batang pasak

beberapa perbedaan bermakna dan tidak
bermakna dari perlakuan-perlakuan
ekstrak etanol batang pasak bumi dan
kontrol positif (siprofloksasin). Hasil
penelitian ini memperlihatkan bahwa di
antara perlakuan ekstrak etanol batang
pasak bumi konsentrasi 20%, 30%, 40%,
50%, 60% dan 80% mempunyai aktivitas
antibakteri yang berbeda terhadap
Escherichia coli. Di antara perlakuan-
perlakuan ekstrak etanol batang pasak
bumi yang diuji yaitu konsentrasi 20%,
30%, 40%, 50%, 60%, dan 80% satu sama
lainnya menunjukkan perbedaan
bermakna. Perlakuan yang tidak berbeda
bermakna yaitu perlakuan ekstrak etanol
batang pasak bumi 70% dengan perlakuan
siprofloksasin dengan nilai p = 0,805.
Hasil ini menunjukkan bahwa hipotesis
(H1) dari penelitian ini diterima, yaitu
bumi ≥ 20 % dapat menghambat
pertumbuhan Escherichia coli secara
optimum, dan perlakuan konsentrasi 70%
memiliki potensi menghambat
pertumbuhan bakteri Escherichia coli yang
sebanding dengan kontrol positif
(siprofloksasin).
Efek zona hambat terhadap
Escherichia coli yang didapat pada
penelitian ini berbeda-beda sesuai dengan
konsentrasi dari perlakuan-perlakuan yang
diujikan. Hasil penelitian ini didukung
berdasarkan hasil penelitian Faisal G et al
(2015), yang menyebutkan bahwa ekstrak
etanol bagian akar pasak bumi pada
konsentrasi 5-15% belum memperlihatkan
aktivitas daya hambatnya terhadap
Escherichia coli namun peningkatan
konsentrasi dapat meningkatkan efek daya
hambatnya.9 Hasil penelitian Khanam Z et
al (2015), menyebutkan bahwa sediaan
ekstrak etanol bagian akar pasak bumi
pada konsentrasi 12,5-10% juga belum
memperlihatkan aktivitas daya hambatnya
terhadap Escherichia coli, namun sediaan
ekstrak metanol batang pasak bumi sudah
dapat menghambat Escherichia coli pada
konsentrasi 20% dan menghasilkan zona
hambat sebesar 3.33 ± 5.77 mm.8 Pada
penelitian ini, seperti pada Gambar 1 dan
Tabel 1, didapatkan bahwa sediaan ekstrak
etanol batang pasak bumi konsentrasi 20%
sampai dengan 80% memiliki daya hambat
PENUTUP
Perlakuan ekstrak etanol batang
pasak bumi dalam berbagai konsentrasi
memberikan perbedaan bermakna terhadap
peningkatan diameter zona hambat antar-
DAFTAR PUSTAKA
1. Thielman N, Guerrant LM. Acute
infectious diarrhea. The New
England Journal of Medicine. 2005;
350(1): 38-47.
2. Jawetz E, Melnick JL, Adelberg EA.
Mikrobiologi Kedokteran, Edisi ke-
27. Jakarta: EGC; 2015.
3. Setiabudy R. Farmakologi dan
Terapi edisi 5. Jakarta: Departemen
Farmakologi dan Terapeutik FKUI;
2007.
4. Chevallier A. Encyclopedia of herbal
medicine. 3rd ed. New York: DK
Publishing; 2016.
5. Katno PS. Tingkat manfaat dan
keamanan tanaman obat dan obat
tradisional.Yogyakarta: UGM; 2002.
6. Sari LORK. Pemanfaatan obat
tradisional dengan pertimbangan
manfaat dan keamanannya. Majalah
Ilmu Kefarmasian. 2006; 3(1): 1-7.
sebesar 11,18 mm sampai dengan 28,04
mm dan di antara perlakuan-perlakuan
tersebut berbeda bermakna.
Beberapa keterbatasan pada
penelitian ini terdapat di antaranya yaitu
perlakuan konsentrasi ekstrak etanol
batang pasak bumi tidak diujikan sampai
konsentrasi 100% dan bahan herbal atau
sintetis harus diketahui tingkat
toksisitasnya agar dapat digunakan sebagai
obat dengan cara melakukan uji toksisitas
terhadap hewan coba.20
perlakuan. Ekstrak etanol batang pasak
bumi pada konsentrasi 70% dapat
menghambat pertumbuhan Escherichia
coli secara optimum.
7. Farouk A, Benafri A. Antibacterial
activity of Eurycoma longifolia Jack.
A Malaysian medicinal plant. Saudi
Medical Journal. 2007; 28(9): 1422-
44.
8. Khanam Z, Chew SW, Irshad U.
Phytochemical screening and
antimicrobial activity of root and
stem extracts of wild Eurycoma
longifolia Jack (Tongkat Ali).
Journal of King Saud University-
Science. 2015; 27(1): 23-30.
9. Faisal G, Zakaria S, Najmuldeen G.
In Vitro Antibacterial Activity of
Eurycoma Longifolia Jack (Tongkat
Ali) Root Extract. The International
Medical Journal Malaysia. 2015;
14(1): 77-81.
10. Fardiaz S. Mikrobiologi Pangan.
Jakarta: PT. Gramedia Pustaka
Utama; 2014.
11. Karou D, Savadago A, Canini A, et
al. Antibacterial activity of alkaloids
from Sida acuta. African Journal of
Biotechnology. 2006; 5(2):195-200.

12. Sabir A. In vitro antibacterial

activity of flavonoids Trigona sp
propolis against Streptococcus
mutans. Journal Dent. 2005;
38(3):135-141.

13. Bobbarala V. Antimicrobial Agents.

Croatia: Intech; 2012.

14. Bibiana. Analisis Mikroba di

Laboratorium. Jakarta: PT Raya
Grafindo Persada; 2010.

15. Pelczar. Dasar-Dasar Mikrobiologi.

Jakarta: Universitas Indonesia; 2008.

16. Lorian V. Antibiotics in Laboratory

Medicine. Baltimore: The William
and Wilkins Co.; 2005.

17. CLSI. M100-S23 Performance

Standards for Antimicrobial
Susceptibility Testing, Twenty-Third
Informational Supplement. Clinical
and Laboratory Standard Institute.
2013; 34 (1): 27-93.

18. Katzung BG. Farmakologi Dasar dan

Klinik. Palembang: Anwar Agoes;
2015.

19. Pelczar MJ. Dasar – Dasar

Mikrobiologi. Jakarta: UI Press;
2007.

20. Parasuraman S. Toxicological

screening. Journal of Pharmacology
and Pharmacotherapeutics. 2011;
2(2): 74-9.