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15.

Antes del desarrollo de la degradación de Edman, la estructura primaria


de las proteínas se estudiaba a través del uso de la hidrólisis ácida parcial.
Los oligopéptidos resultantes se separaban y se determinaba su composición
de aminoácidos.

Considere un polipéptido con la composición de aminoácidos (Ala2, Asp, Cys,


Leu, Lys, Phe, Pro, Ser2, Trp2). Su tratamiento con carboxipeptidasa A liberó
solo Leu. Por hidrólisis ácida parcial se obtuvo la siguiente composición de 13
oligopéptidos

¿Cuál es la secuencia de aminoácidos del polipéptido completo?

Trip-Ala-Ly-Asp-Phe-Trp-Ser-Ser-Ala-Pro-Cys-Leu

16. Un polipéptido es sometido a los dos tratamientos siguientes, resultando


fragmentos de polipéptidos, para cada tratamiento, con la secuencia de
aminoácidos indicada. ¿Cuál es la secuencia de aminoácidos del polipéptido
completo?

1. Tratamiento con bromuro de cianógeno

i. Asp-Ile-Lys-Gln-Met

ii. Lys

iii. Lys-Phe-Ala-Met

iv. Tyr-Arg-Gly-Met

2. Hidrólisis con Tripsina

i. Gln-Met-Lys

ii. Gly-Met-Asp-Ile-Lys
iii. Phe-Ala-Met-Lys

iv. Tyr-Arg

R= Try-Arg-Gly-Met-Asp-Ile-Lys-Gln-Met-Lys-phe-Ala-Mmet-Lys

17. El tratamiento de un polipéptido con ditiotreitol produjo dos polipépetidos


que tienen la siguiente secuencia de aminoácidos

1. Ala-Phe-Cys-Met-Tyr-Cys-Leu-Trp-Cys-Asn

2. Val-Cys-Trp-Val-Ile-Phe-Gly-Cys-Lys

La hidrólisis catalizada por quimotripsina del polipéptido intacto dio los


siguientes 5 fragmentos de aminoácidos cuya composición es la siguiente.

1. (Ala, Phe)

2. (Asn, Cys2,Met, Tyr)

3. (Cys, Gly, Lys)

4. (Cys2, Leu, Trp2, Val)

5. (Ile, Phe, Val)

Indique en el polipéptido original la posición de los puentes disulfuro

18. Los siete tratamientos siguientes a un polipéptido produjeron los


resultados mostrados.
a. Hidrólisis Alcalina:

(Arg, Asx, Cys2, Gly, Ile, Leu, Lys, Met, Phe, Pro, Ser)

b. Degradación de Edman (un ciclo)

(Leu)

(Ser)

c. Carboxipeptidasa A (Tiempo suficiente para remover un residuo por


cadena)

(Asp)

d. Ditiotreitol + ácido yodoacético + hidrólisis de Tripsina

(Arg, Ser)

(Asp, Met)

(Cys, Gly, Ile, Leu, Phe, Pro)

(Cys, Lys)

e. Ditiotreitol + 2-Bromoetilamina + hidrólisis de Tripsina

(Arg, Ser)

(Asp, Met)

(Cys)

(Cys, Gly, Leu)

(Ile, Phe, Pro)

(Lys)

f. Quimiotripsina

Sin fragmentos

g. Pepsina

(Arg, Asp, Cys2, Gly, Leu, Lys, Met, Ser)


(Ile, Phe, Pro)

¿Cuál es la estructura primaria del polipéptido?

19. Un polipéptido fue sometido al siguiente tratamiento con los resultados


indicados. ¿Cuál es la estructura primaria del polipéptido?

1. Hidrólisis ácida
(Ala, Arg, Cys, Glx, Gly, Lys, Leu, Met, Phe, Thr)
2. Aminopeptidasa M
No hay fragmentos
3. Carboxipeptidasa A + Carboxipeptidasa B
No hay fragmentos
4. Tripsina, seguida por la degradación de Edman de los productos por
separado
Cys-Gly-Leu-Phe-Arg
Thr-Ala-Met-Gln-Lys