PRACTICA N° 02

RECONOCIMIENTO DE MATERIALES Y EQUIPOS DE

LABORATORIO-ESTERILIZACION
INTRODUCCIÓN:

Es importante que el estudiante se familiarice con diferentes materiales y equipos del laboratorio e identifique
el uso correcto del material a utilizarse en el desarrollo de las diferentes prácticas.
Esterilización es el procedimiento físico químico mediante el cual el material determinado queda exento de
microorganismos sean o no patógenos que se encuentran en el interior o en la superficie de objetos y
superficies.

I. OBJETIVOS:
1. Conocer los distintos materiales y equipos utilizados en el laboratorio de microbiología y describirlos
cada uno.
2. Conocer los distintos métodos de esterilización físicos y químicos
3. Descripción y uso correcto de los materiales: limpieza y esterilización.
4. Esterilizar todo material usado en microbiología

II. FUNDAMENTO TEÓRICO:

Los procesos de esterilización se clasifican en: Métodos físicos y métodos químicos.

Métodos físicos

1. Esterilización por el calor

2. Esterilización por filtración
3. Esterilización por radiación
4. Esterilización por centrifugación

Métodos químicos

1. Esterilización por agentes químicos

MÉTODOS DE ESTERILIZACION FÍSICOS

1. Esterilización por el calor seco

En calor actúa desnaturalizando y coagulando las proteínas.La acción esterilizante del calor depende
más que nada de las condiciones en que actúa: intensidad, tiempo, humedad y sobre todo susceptibilidad
especial de cada microorganismo.

Esterilización por la llama directa: produce la carbonización de

los microorganismos, se le usa para esterilizar el asa del platino (asa
de kolle), boca de tubos, matraces, pipetas, etc., utilizando la llama
de gas producida por un mechero.
Esterilización Esterilización por aire caliente: (estufa de esterilización). El calor
por calor actúa como aire caliente a la temperatura de 165 – 170ºC por el
seco tiempo de media hora. Sirve para esterilizar objetos por el tiempo de
media hora sirve para esterilizar objetos resistentes y sólidos como
cristalería, porcelana, instrumentos etc., Aplicando la conocida
estufa de esterilización; cuyo esquema se encuentra se encuentra a
continuación
 Esterilización por ebullición: utilizando agua en ebullición. No
elimina las esporas. Se coloca el material a esterilizar en agua
hirviendo (100ºC) por
15 – 35 minutos.
Esterilización por vapor fluente: Thyndalización) consiste en un
calentamiento por vapor de agua discontinuo a 80 – 100ºC,
refrigerado después, por tres veces con intervalos de 24 hs. Elimina
gérmenes y esporas sirve para esterilizar medios que se
descomponen por el calor a a 80 – 100ºC, como carbohidratos,
gelatina, leche, suero, etc., suprime la hidrólisis por calentamiento.
Esterilización Esterilización por vapor de agua a presión: (Autoclave) es el
por calor método ideal para el campo bacteriológico. Se basa en el que el vapor
húmedo de agua a presión es más caliente que el agua en ebullición o el vapor
libre. Cuanta más alta es la presión del vapor mayor es la temperatura
resultante. El vapor penetra por ósmosis provocando la coagulación
del protoplasma en las bacterias y esporas.
Las condiciones de esterilización son: 121ºC a 15 lb., de presión por
pulgada cuadrada por el tiempo de 15 min. , utilizando el aparato
llamado “Autoclave” cuyo esquema se encuentra a continuación. En
el se esteriliza objetos y sustancias que resisten temperaturas
mayores a 100ºC, tales como: medios de cultivo en general, solución
salina, agua destilada. Sirve también para esterilizar material
desechable como: Cultivos usados, medios contaminados, etc.

2. Esterilización por filtración: Consiste en hacer pasar las sustancias liquidas o gaseosas a esterilizar
a través de membranas porosas que retienen a los microorganismos. Sirve para la esterilización de
sustancias termolábiles.
La filtración bacteriológica se efectúa en aparatos llamados “filtros” cuya parte principal es un
elemento poroso (porcelana, tierra de infusorios, asbestos, etc.) Los líquidos filtrados deben de
atravesar por presión o aspiración porosidades de diverso diámetro. Al tratar de pasar los gérmenes
son retenidos por adsorción.
Los filtros usados son aquellos cuyo elemento poroso tiene la forma de bujía de disco: Bujías de
Chamberland, Bekerfield, Mandler y discos filtros de Seitz.

3. Esterilización por radiación: los rayos ultravioletas del espectro de una longitud de onda
comprendida entre 200 y 254 nm. Poseen un alto poder germicida, sin embargo escaso poder de
penetración; su acción se ejerce sobre la superficie de los cuerpos expuestos a la radiación, por ello
se usan poco en la esterilización de laboratorio. Su empleo es mayor en el campo de la medicina e
higiene para esterilizar instrumental, aire, suelo, paredes, etc. Destrucción de gérmenes y virus en
las gotitas de Flungge, etc.

4. Esterilización por centrifugación: Este método separa los gérmenes del líquido en que se
encuentran suspendidos, no es seguro y solo se le emplea como procedimiento previo de
clarificación en la esterilización y la ultracentrifugación para purificación y concentración de virus.

Métodos químicos
I. Esterilización por agentes químicos.- en este procedimiento la muerte de los gérmenes se consigue
por substancias químicas que actúan coagulando el protoplasma o interfiriendo el metabolismo
bacteriano
Algunos desinfectantes y antisepticos de mayor uso: desde el punto vista práctico se les agrupa en:

 Halógenos y compuestos halogenados: F,Cl,Br,I.

 Sales de metales pesados: nitrato de plata, bicloruro de mercurio, sulfato de cobre.
 Fenol y derivados.
 Alcoholes.
 Colorantes: violeta de genciana, azul de metileno, verde de malaquita.
 Compuestos amónicos cuaternarios.
 Gases microbicidas.
 EQUIPOS Y MATERIALES USADOS EN MICROBIOLOGIA:

 Autoclave a vapor saturado a presión:

Es un aparato que sirve para esterilizar material y medios de cultivo, utilizan vapor de agua a presión.
El auto clavado se realiza a121º C o 200º F y a una presión de 151lbs / pul2 que es igual a 775 mm
Hg durante 15 min.

 Horno o esterilizador:
Son aparatos metálicos en forma de cajones o cubos rectangulares con doble puerta. Sus paredes
pueden ser de doble o triple capa con o sin asbesto. Posee resistencia para emitir el calor, equipo de
reóstato para graduar la temperatura deseada, sistema de llaves y relojería para graduar el tiempo que
serán esterilizados los materiales de vidrio o metal. El tiempo depende del tamaño del equipo una a
dos horas y la temperatura de 150º C a 200º C es importante resaltar el tipo de esterilización a calor
seco.

 Estufa bacteriológica:
Aparato que se utiliza para realizar el crecimiento bacteriano, posee un sistema de graduación de
temperatura y de tiempo.

 Microscopio:
Constituye un instrumento esencial en microbiología, existen diversos tipos de microscopios y
nosotros utilizaremos microscopía óptica de campo claro o brillante mediante la cual examinaremos
muestras y cultivos en preparaciones húmedas o teñidas. Las preparaciones húmedas se emplean para
demostrar células sanguíneas y microorganismos en muestras líquidas como orina, heces, líquido
cefalorraquídeo, hongos en la piel, protozoarios de sangre y tejidos. Es posible detectar la movilidad
de algunos organismos vivos.

 Baño maría:
 Centrífuga:
 Refrigerador :
 Balanza:

EQUIPOS MENORES.

 Mechero Bunsen ( a gas propano):

Sirve para esterilizar asas de siembra que se coloca en posición casi vertical, haciendo que se ponga
casi al rojo vivo desde la punta hacia la base y luego se retira de inmediato impidiendo rocen con
algún objeto si se desea tomar alguna muestra.

 Asas de siembra: o asa de Kolle:

Se utiliza para la siembra ó inoculación de microorganismos consiste en alambre de de Nichrone o
platino que van insertado a un mango cilíndrico para un uso sencillo. Existen dos tipos:
a) asa cerrada.- Presenta un arco bastante cerrado en su extremo, es utilizada para la inoculación por
estrías en medios sólidos muchas de ellas son calibradas correspondiendo a un volumen determinado
de siembra.
b) Asa en Punta.- Son similares a los anteriores con la diferencia que no presentan aros en su extremo,
son rectas. Se utiliza para la siembra por picadura en medios líquidos.

 Materiales de vidrio:
Utilizaremos placas Petri, pipetas graduadas, matraz de Erlenmeyer, tubos de ensayo simple o con
tapa rosca , probetas graduadas, láminas portaobjetos, láminas cubreobjetos.

IV: PARTE EXPERIMENTAL:

1.- PREPARACIÓN DEL MATERIAL DE VIDRIO PARA SU ESTERILIZACIÓN:

Este paso se refiere a la preparación del material lavado y secado para su esterilización ya sea en
autoclave o en horno.

 Los tubos de prueba:

Primero se deben preparar tapones de algodón adecuado, con dobleces al interior para que no se
abran, no deben de ser apretados ni flojos, ni cortos ni largos, así los tubos taponados de tamaños
 iguales con empaquetados con papel Kraft y armados con hilo pabilo, luego anótese sobre
el papel el tamaño de los tubos y la fecha de esterilización.

 Las placas Petri:

Se colocan los dos juegos de placas homólogas sobre un papel tamaño carta, se empaqueta
como si se tratara de paquetito de regalo con dobleces hacia el centro, y los dos extremos
se doblan en triángulo y todo se envuelve hacia atrás.

 Erlemayer y otros frascos:

Se les coloca tapones de algodón protegidos con gasa, amarrada en parte de la cabeza y se
protege con papel kraft el cual se amarra firmemente con pabilo.
La esterilización en horno se realiza entre 150º a 200º C por espacio de una a dos
horas.

V RESULTADOS
Se observaron videos en donde se mostraban los diferentes materiales y equipos de laboratorio asi
como el autoclave para esterilización de los diferentes materiales que se utilizan para el cultivo de
microorganismos.
Los equipos de laboratorio mostrados en los videos se compararon con los que se encuentran en el
laboratorio de microbiología en el cual se realizaran las siguientes practicas se cuenta con una
centrifuga; cámara de Anaerobiosis; incubadora; refrigerador; baño Maria y todo lo necesario para el
cultivo de microorganismos; así mismo para su posterior conteo. Ya que es el Laboratorio típico del
nivel de bioseguridad básico.
DISCUSIONES
El trabajo de laboratorio en microbiología requiere siempre ciertos mecanismos de control de las
poblaciones microbianas. La esterilización es uno de los mecanismos más utilizados y las técnicas de
esterilización aplicables dependen directamente de las características del material de trabajo o de los
medios que se vayan a tratar.(Pérez , 2011) La esterilización es un mecanismo por el que se consigue
la muerte o eliminación de todos los microorganismos vivos de una muestra, medio, superficie o
material de trabajo (LEAHY et al., 1999)
CONCLUSIONES
o Se reconoció los materiales presentes en el laboratorio de microbiología; también sus
funciones y utilidad.
o Se resalto la importancia de la limpieza que se tiene que dar al espacio de trabajo; el manejo
de materiales después de haber pasado por el autoclave.
o Materiales como el papel craft , tampones de algodón y el alumino son importantes para que
no exista oportunidad de contaminación es decir, que sirvan como barreras contra la
contaminación.
REFERENCIAS:
Leahy, T.J.; Kerry, L.R. y Christopher, M.R. 1999. Microbiology of sterilization processes. En:
Validation of pharmaceutical processes: sterile product. Carleton, F.J. y Agalloco, J.P. Ed. Pp: 353-
380.
Pérez-Uz, B., de Silóniz, M. I., Torralba, B., & Vázquez, C. (2011). Metodología de
esterilización en el laboratorio microbiológico. Reduca (Biología), 3(5)
Esquematizar y mencionar la función de cada uno de ellos:

 Balanza Analítica
es un instrumento que sirve principalmente
para medir pequeñas masas. Las balanzas
analíticas modernas, que pueden ofrecer
valores de precisión de lectura de 0,1 µg a 0,1
mg, están bastante desarrolladas de manera
que no es necesaria la utilización de especiales
para la medida del peso.
 Balanza
permite medir la masa de un cuerpo o
sustancia química, por medio de la comparación de fuerza que ejerce la gravedad que
actúa sobre un determinado cuerpo.

 Autoclave
Una autoclave de laboratorio es un dispositivo que sirve para
esterilizar material de laboratorio, utilizando vapor de agua a alta
presión y temperatura, evitando con las altas presiones que el agua
llegue a ebullir a pesar de su alta temperatura. El fundamento del
autoclave es que coagula las proteínas de los microorganismos
debido a la presión y temperatura, aunque recientemente se ha
llegado a saber de algunas formas acelulares, tal como los priones,
que pueden soportar las temperaturas de autoclave.

 Vortex
Es un dispositivo simple que se usa comúnmente en
los laboratorios para agitar pequeños tubos o frascos
de líquido Son apropiados para experimentos de
mezclas, reacciones y para disolución rápida de
muestras líquidas. La velocidad se puede variar
mediante un conmutador, según las necesidades de
cada experiencia.

 PH-metro
El medidor de pH mide la diferencia de potencial eléctrico
entre un electrodo de pH y un electrodo de referencia. Esta
diferencia de potencial eléctrico se relaciona con la acidez
o el pH de la solución. El medidor de pH se utiliza en
muchas aplicaciones que van desde la experimentación de
laboratorio hasta control de calidad.
 Destilador
Es un aparato usado para destilar mezclas de líquidos
con distinto punto de ebullición haciendo que hiervan
y luego enfriando para condensar el vapor. Un
destilador utiliza los mismos conceptos que un equipo
de destilación básico, pero en una escala mucho
mayor.

 Cámara de Anaerobiosis
Requiere equipamiento complejo, es lento y se usa
para estudios de flora normal y en laboratorios
altamente especializados. La atmosfera de la
cámara circula a través de un condensador
controlado luego a través de un catalizador, el cual
remueve cualquier traza de oxígeno. El alto nivel de humedad relativa se mantiene
mientras la humedad condensada es removida sin los innecesarios disecantes, los
cuales pueden deshidratar medios y muestras. Cada unidad contiene una bomba de
vacío integrada para asegurar la evacuación rápida de aire desde el módulo de sellado
de aire para ser reemplazado por una mezcla de gas inerte
.
 Incubadora
Sirve para mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares, regulando factores
de crecimiento viables como por ejemplo la temperatura,
la humedad y la ventilación.

 Cromatógrafo con integrador

Equipo que permite separar las diversas sustancias
que están presentes en una muestra. Esta separación
permite identificarlas y cuantificarlas con un solo
análisis. El equipo dispone de un detector de índices
de refracción, un detector de fluorescencia y un
detector de ultraviolado y visible. El equipo se
aplica habitualmente en el ámbito de las moléculas
orgánicas de todo tipo.

 Horno
Comúnmente usado para deshidratar reactivos de laboratorio o secar instrumentos. El
horno aumenta su temperatura gradualmente conforme pase el tiempo, así como
también sea su programación, cuando la temperatura sea la óptima y se estabilice, el
térmico mantendrá la temperatura; si esta desciende volverá a activar las resistencias
para obtener la temperatura programada; posee un tablero de control que muestra el
punto de regulación y la temperatura real dentro del horno.

 Refrigeradora
Su función consiste en mantener, en un ambiente
controlado (espacio refrigerado) diversos fluidos y
sustancias, para que los mismos se conserven en buenas
condiciones (mientras mas baja sea la temperatura, menor
actividad química y biológica).

 Cuenta Colonias
Es un instrumento utilizado para contar colonias de bacterias o de otros
microorganismos que crecen en una placa de agar. Los contadores más
recientes intentan contar las colonias por vía electrónica, mediante la
identificación de áreas individuales de oscuridad y luz, de acuerdo a los
umbrales definidos por el usuario, contando los puntos en los que se aprecia
contraste, o de modo automático mediante registro electrónico tras presionar
con cualquier tipo de marcador.

 Plancha de calentamiento y agitación

Las placas de calentamiento son utilizadas por lo general
para cubrir varios procesos de calentamiento en el
laboratorio. Además, poseen un mecanismo magnético
capaz de agitar líquidos. El cual puede usarse de manera
simultanea o por separado con el sistema de calentamiento.
De este modo amplía sus funcionalidades y se puede adaptar
fácilmente a múltiples procesos de calentamiento y agitación de uso frecuente en el
laboratorio.

 Baño María
Se utiliza para incubar muestras en agua a una
temperatura constante durante un largo período de
tiempo. Las aplicaciones incluyen calentamiento de
reactivos, fusión de sustratos o incubación de
cultivos celulares. También se utiliza para permitir
que ciertas reacciones químicas se produzcan a altas temperaturas.

 Gradilla.
Su principal función es facilitar el soporte y el manejo de
los tubos de ensayo. Las gradillas se fabrican en madera,
plástico o metal; las más comunes son las de plástico.
Gracias a las gradillas, se consigue una mayor comodidad al
trabajar en el laboratorio, ya que sin ellas no se tendría
dónde apoyar los tubos de ensayo, lo que podría provocar quemaduras, por ejemplo,
en el laboratorio.

 Pinzas para crisol.

son una herramienta utilizada para evitar el contacto directo del
cuerpo con diversos objetos utilizados en los laboratorios
químicos. Están elaborados en acero inoxidable y poseen una
hendidura o curvatura en sus puntas para poder tomar mejor algún
objeto o recipiente del proceso químico en el que se trabaja.
 Pinzas para tubo de ensayo.
Están diseñadas de manera que en sus extremos hay
una curvatura o modeladas de forma de resorte que
tiene la función de sostener los tubos de ensayo al
momento de calentarlos o moverlos a otro lugar,
esto para evitar quemaduras o accidentes. Así como
también el manejo de productos químicos altamente peligrosos.
 Agitador de vidrio.
El agitador básicamente es un es un mezclador con esta herramienta
se pueden realizar las mezclas de líquidos entre sí o con algunos polvos
para generar disoluciones y suspensiones.
 Asa de siembras
Las asas de siembra se utilizan normalmente
para trasvasar muestras de microorganismos en suspensión.
Ideales para uso en condiciones que requieren esterilidad y
no es posible flamear el asa. Su superficie libre de
rugosidades asegura un suave deslizamiento sin peligro de
dañar la superficie del medio de cultivo.

 Tapones caucho
Es una pieza utilizada para sellar un contenedor A
diferencia de una tapa que no desplaza el volumen
interno, los tapones se insertan (al menos en parte)
dentro del contenedor en el acto de sellado.

 Pipeteador
Es un instrumento de laboratorio que se utiliza junto con
la pipeta para traspasar líquidos de un recipiente a otro
evitando succionar con la boca líquidos nocivos, tóxicos,
corrosivos, con olores muy fuertes o que emitan vapores.
  Jeringas
Son utilizadas para introducir pequeñas cantidades de gases o
líquidos en áreas inaccesibles o para tomar muestras de los
componentes de dichos lugares. Normalmente se la llena
introduciendo la aguja en el líquido y tirando del émbolo.

 Cubetas para tinción

Cubetas en vidrio para tinciones especiales. Resisten a
cualquier colorante o solvente, no tienen que ser
utilizadas con las microondas.

 Pipetas Pasteur
Se utilizan para transferir pequeños volúmenes que no requieren ser medidos. Las
pipetas de vidrio pueden tener más o menos
pico en el extremo inferior y, para su uso, se
conectan a un chupón de goma. Las de plástico
llevan una ampolla de este material, lo que
permite cargarlas y descargarlas. Estas pipetas
son muy prácticas y se utilizan con frecuencia.
 Portaobjetos
Es una lámina rectangular de vidrio transparente sobre la
cual se coloca la muestra que deberá ser observada con el
microscopio.
 Cubreobjetos
Es una fina hoja de material transparente. Se coloca sobre
un objeto que va a ser observado bajo microscopio, el cual
se suele encontrar sobre un portaobjetos,

 Cajas de petri
Se utiliza en los laboratorios principalmente para el cultivo de
bacterias, mohos y otros microorganismos, soliéndose cubrir el
fondo con distintos medios de cultivo (por ejemplo, agar) según
él microorganismo que se quiera cultivar.

 Cámara de Neubauer.
Para realizar el recuento de esporas y células en un medio
líquido, que puede ser; un cultivo celular, sangre, orina,
líquido cefalorraquídeo, líquido sinovial, etc.

 Crisol
Es uno de los instrumentos de laboratorio que está
diseñado para para calentar, fundir, quemar, y calcinar
sustancias a altas temperaturas (llegando incluso a los
1500°C). Este instrumento está hecho de grafito con
cierto contenido de arcilla.
 Embudo de polietileno.
El embudo es un instrumento empleado para canalizar líquidos y
materiales sólidos granulares en recipientes con bocas angostas.
Es decir, es utilizado para evitar el derrame del líquido al moverlo
de un envase a otro.

 Espátula
Se utiliza para tomar pequeñas cantidades de compuestos que son,
básicamente, polvo. Se suele clasificar dentro del material de
metal y es común encontrar en recetas técnicas el término punta
de espátula para referirse a esa cantidad aproximadamente.

 Mechero bunsen
es un instrumento utilizado en los laboratorios científicos para
calentar, esterilizar o proceder a la combustión de muestras o
reactivos químicos

 Mortero de porcelana con

pistilo o mano.
Es un utensilio que consta de una vasija y un garrote,
normalmente utilizado para aplastar o triturar ciertos
ingredientes hasta convertirlos en una especie de polvo o en
pedazos mucho más pequeños.

 Termómetro
Es un instrumento que se emplea para medir la temperatura
exacta de sustancias. Este instrumento está fabricado para
calcular tanto temperaturas bajas como altas.

 Malla de asbesto
Es la encargada de repartir la temperatura de manera
uniforme cuando se calienta con un mechero, evitando
que entre en contacto directo con la llama y que el envase
de vidrio se rompa por los cambios bruscos de
temperatura.
 Escobillas O Churruscos
La escobilla está diseñada para la limpieza de superficies
que se encuentran en el interior de piezas de pequeñas
dimensiones o de difícil acceso. Con la escobilla podemos
conseguir tocar las paredes interiores, así como los fondos
más inaccesibles

 Balon aforado
Se emplea para medir un volumen exacto de líquido con base a
la capacidad del propio matraz, que aparece indicada.
  Pipetas.
La pipeta es un instrumento volumétrico de laboratorio que
permite medir la alícuota de un líquido con mucha precisión.
Suelen ser de vidrio o plástico.

 Probeta.
E s un instrumento volumétrico que consiste en un cilindro
graduado de vidrio borosilicatado que permite contener líquidos
y sirve para medir volúmenes de forma exacta

 Frasco gotero.
Su función principal es traspasar pequeñas cantidades de
líquidos (gota a gota) de un recipiente a otro. Si lo que
necesitas es medir volúmenes exactos, éste instrumento
no se recomienda

 Frascos reactivos.
Permite: guardar sustancias para almacenarlas los hay ámbar y
transparentes los de color ámbar se utilizan para guardar
sustancias que son alteradas por la acción de la luz del sol, los
de color transparente se utilizan para guardar sustancias que no
son afectadas por la luz solar

 Vasos de precipitado
E s un recipiente cilíndrico de vidrio borosilicatado fino que se utiliza
muy comúnmente en el laboratorio, sobre todo, para preparar o
calentar sustancias, medir o traspasar líquidos.

 Matraces
Recipiente de cristal donde se mezclan las soluciones químicas,
generalmente de forma esférica y con un cuello recto y estrecho,
que se usa para contener líquidos; se usa en los laboratorios.

 Matraz Erlenmeyer
Se utiliza para el armado de aparatos de destilación o para
hacer reaccionar sustancias que necesitan un largo
calentamiento. También sirve para contener líquidos que
deben ser conservados durante mucho tiempo o que no se ven
afectados directamente por la luz del sol

 Frasco lavador
Su función básica es de limpieza, en su interior generalmente
contiene algún solvente (agua destilada o desmineralizada,
etanol, metanol, hexano, etc..). Se emplea para dar el último
enjuague al material de vidrio después de lavado, y en la
preparación de disoluciones.
  Tubos de ensayo
El tubo de ensayo se utiliza para contener líquidos y sólidos, los
cuales se mezclan para preparar soluciones o se someten a
diferentes pruebas como a variaciones de temperatura.

 Tubo de centrifuga
Son empleados profusamente en biología molecular y bioquímica
no sólo para la centrifugación, sino que, dado su bajo costo, se
emplean a menudo como simples viales contenedores de
sustancias químicas.

 Frasco de rosca
Uso general de laboratorio incluyendo mezclar, almacenar o
transportar medios de cultivo, productos químicos o
disolventes. Autoclavables

CUESTIONARIO
1. Investigar sobre métodos de esterilización químicos: fundamentos.
 Con oxido de etileno:
Destruye todos los microorganismos incluso virus. Sirve para esterilizar material
termosensible como el descartable (goma, plastico, papel, etc.), equipos electrónicos,
bombas cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy peligroso por ser altamente
inflamable y explosivo, y además cancerigeno.

 Con aldehídos:
Son agentes alquilantes que actúan sobre las proteínas, provocando una modificación
irreversible en enzimas e inhiben la actividad enzimática. Estos compuestos
destruyen las esporas.

 Glutaraldehído:
Consiste en preparar una solución alcalina al 2% y sumergir el material a esterilizar
de 20 a 30 minutos, y luego un enjuague de 10 minutos.
Este método tiene la ventaja de ser rápido y ser el único esterilizante efectivo frío.
Puede esterilizar plástico, goma, vidrio, metal, etc.

 Formaldehído:
Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales pueden disponerse en el
fondo de una caja envueltas en gasa o algodón, que después pueden ser expuesta al
calor para un rápida esterilización (acción del gas formaldehído). También pueden
ser usadas en Estufas de Formol, que son cajas de doble fondo, en donde se colocan
las pastillas y se calienta hasta los 60° C y pueden esterilizar materiales de látex,
goma, plásticos, etc.
Las pastillas de formalina a temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.

 Esterilización por gas-plasma de Peróxido de Hidrógeno

Es proceso de esterilización a baja temperatura la cual consta en la transmisión de
peróxido de hidrógeno en fase plasma (estado entre líquido y gas), que ejerce la
acción biocida.
 2. Diferencia entre sustancias bactericidas y bacteriostáticas.
Bacteriostático Bactericida
Es aquel que, aunque no produce la muerte a
una bacteria, impide su reproducción; la
Es aquel que produce la muerte a una
bacteria envejece y muere sin dejar
bacteria. Un efecto bactericida está
descendencia. Un efecto bacteriostático está
producido por sustancias bactericidas. Estas
producido por sustancias bacteriostáticas.
sustancias son secretadas por los organismos
Estas sustancias son secretadas por los
como medios defensivos contra las bacterias.
organismos como medios defensivos contra
las bacterias.

3. Indicar el mecanismo de limpieza de las placas petri y tubos de ensayo que

contengan cultivos de microorganismos.
Mediante el autoclavado se pueden esterilizar una gran variedad de objetos Aquellos
materiales que no se encuentren dentro de algún recipiente que los proteja de la
recontaminación al sacarlos de la autoclave, deberán ser envueltos con una doble capa
de papel, de manera de formar pequeños paquetes; entre estos objetos se encuentran
guantes, ropa, placas de Petri, pipetas, tubos de ensayo, etc. Se debe de tener cuidado
de no sobrecargar la autoclave, de manera tal que los paquetes y frascos impidan el flujo
libre del vapor

4. Compare la resistencia al calor de las célalas vegetativas con esporas

bacterianas. Y explique a que se debe tal diferencia.
Todas las bacterias pueden existir como bacterias vegetativas, pero algunas tienen la
capacidad de transformarse en Espora. Las bacterias vegetativas se eliminan mediante
cocción adecuada o ebullición, son menos resistentes a las sustancias químicas y
también resisten la deshidratación y congelación. Las esporas son mas resistentes al
calor, porque estan recubiertas por paredes especiales (es decir que forman una coraza
de protección dentro de la cual esta la bacteria dormida) que les vuelve mas resistentes
a agentes tales como el calor, la radiacion uv, pH extremos, etc.