UNIVERSIDAD DE PAMPLONA

FACULTAD CIENCIAS BASICAS

DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA

GUIA DE LABORATORIO

DE BIOLOGIA CELULAR

ESPERANZA BARCO CARDENAS. MSc.

PAMPLONA
2019

1
 TABLA DE CONTENIDO

-Normas generales para el uso en nuestro laboratorio

-Programa de biología celular
-Contenidos del programa de biología celular y Prácticas de laboratorio
Practica 1. Introducción al estudio de la célula; “Siguiendo la teoría celular”
Practica 2. Célula procariota
Practica 3. Célula eucariota

NORMA GENERALES PARA EL USO EN NUESTRO LABORATORIO.

1. No se permite: fumar, comer, beber, almacenar comida.

2. Se requiere del uso de bata de laboratorio de manga larga, con calzado cerrado.
3. El lugar de trabajo debe tiene que estar limpio y libre de productos químicos, indeseados,
especialmente biológicos y radios.
4. Las botellas de reactivos vacíos no deben dejarse en el piso.
5. Las salidas y los pasadizos tienen que estar libres en todo momento.
6. Lave las manos al final de cada practica.
7. Quítese los elementos protectores (bata, guantes etc.) cuando deje el laboratorio para salir a
comer.
8. El cabello largo debe estar atado detrás o inmovilizado de otra manera cuando se va trabajar
con productos químicos, o bio-peligrosos.
9. Nunca pipetee con la boca.
10. Camine no corra ni grite en el laboratorio y en lo posible trabaje en el sitio asignado.
11. Trabaje solamente con material cuando usted conoce su inflamabilidad, reactividad y
toxicidad
13. Los objetos agudos (agujas de jeringas, vidrios quebrados, cuchillas etc.) deberán ser
depositados e un recipiente rígido y marcado apropiadamente para su posterior eliminación
14. Los materiales que va a desechar deben ir de forma separada a una caneca que se les
indicara.
15. Realice un chequeo de seguridad al final de cada experimento. Asegúrese de que el gas,
agua y electricidad se han cerrado o apagado.

2
FACULTAD: CIENCIAS BASICAS
DEPARTAMENTO DE: BIOLOGÍA -QUIMICA
ASIGNATURA
BIOLOGÍA CELULAR CODIGO: 156111
:

AREA: BIOLOGIA

REQUISITOS: BIOLOGÍA GENERAL CORREQUISITO:

CREDITOS: 6 TIPO DE ASIGNATURA: TEORICO PRÁCTICA

DOCENTE: ESPERANZA BARCO CARDENAS. MsC

JUSTIFICACION:
La biología moderna se basa en el conocimiento de las moléculas internas de la célula y
de las interacciones entre las células que permiten construir multicelulares. Cuanto
mayor es el conocimiento de la estructura, la función y el desarrollo de los distintos
organismos, más se comprende que todos los procesos biológicos vitales notándose que
exhiben notables similitudes.

Objetivos
*Comprender la dinámica del sistema biológico, desde sus componentes y funciones y las
interrelaciones que ocurren.

Identificar las herramientas de investigación científica que le permite la comprensión de la

estructura celular y procesos biológicos que ocurren en ella,

Competencias
Utilizará diferentes técnicas de laboratorio que conlleven a la identificación de células y
organismos.
Desarrollará capacidad para la interpretación de manuales, guías y procedimientos

Resolverá situaciones biológicas de acuerdo a los conceptos teórico y la práctica,

utilizando metodología de investigación científica propuesto.

SISTEMA DE EVALUACIÓN:
De forma escrita: Parciales, examen final, quices, resúmenes, informe de
laboratorio.
Y en forma oral: Exposiciones, intervenciones.
.
Primer corte primer parcial teórico practico 20%_____________
Quices + informes de laboratorio 15%
Segundo corte: Segundo parcial:20%_____________
Quices + informes de laboratorio 15%
Tercer corte: Tercer parcial:
5% teoría + 5% examen de laboratorio y el 10% exposiciones
informes

3
BIBLIOGRAFIA BASICA:
1. . Lodish H, etal. 2006. Biología celular y molecular. Edit
Panamerica. quinta edición . Madrid. Pp 972
1. Lodish H, etal.2002- Biología celular y molecular. Edit
Panamerica. Cuarta edición . Madrid. Pp1080.
2. Cooper. Geoffrey.2004. La célula. Edit Marbán. Segunda
edic.Mardrid. pp 677 .
3. Gerald Karp. 2003. Edit McGraw-hill Interamerica.Mexico.pp742.
4. Curtis, Helena. Et al. Biología Médica Panamericana CG 1993.
574C978b

DIRECCIONES ELECTRONICAS DE APOYO AL CURSO. 2008

- http://es.wikipedia.org/wiki/Portada
.htp:/www.alipso.com/monografias
.htp://Biologia.arizona.edu
http://biblioteca.uam.es/paginas/Biologicas/enl_revi.html
www.arrakis.es
http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n030305.html

BIBLIOGRAFIA COMPLEMENTARIA

-ARANA OSNAYA, Esther.Prácticas de Biología Limusa CG 1963. 574A71pp.

-AUDESIRK,Teresa Biología la vida en la tierra Prentice-Hall R 1996. 574 A899b
-BAKER, Jeffrey J.W. Biología e investigación científica Fondo educativo Int CG.1970.574B167b
-BERNSTEIN, Ruth Biología McGraw-Hill R 1998. 574B535b
-COLE, H.H. Curso de zootecnia, biología Acribia R 1980. 636C683c
-CURTIS, Helena Biología Editorial Medica Panamericana R2001.574C978b
-EFALCO, Pedro E. Manual de laboratorio de Biología general UIS CG. 1975. 574.02 F181m
-GOMEZ O., Humberto Curso de biología Norma CG 1968.574G633c
-HANAUER, Ethel R. Biología simplificada Compañía General de ediciones CG. 1964. 574H233b
-HARDIN, Garret Biología: sus principios e implicaciones Centro Regional de Ayuda Técnica CG.
1969. 574H261b
-KIMBALL, JOHN W. Biología. Fondo Educativo Interamericano CG 1971. 574K49b
-KIMBALL, John. Biología. Fondo Educativo Interamericano R 1976. 574K49b
-LEGORBURU. Biología: curso preuniversitario Ediciones S.M. CG 1970. 574L33
-LESLIE.P et al. 2004.Texto Atlas de histología. Edit . Mc Graw Hill. Imp DVINI in Colombia.
Pp538
-MADIGAN, Michael T.Brock Biología de los microorganismos Prentice-Hall R1997. 576M178b
-NELSON, Gideon E. Conceptos fundamentales de biología. Limusa CG. 1987. 574N426c
-OVERMIRE, Thomas G. biología. Limusa. CG. 1992. 574096b.
-REYES CASTAÑEDA, Pedro Diseño de experimentos aplicados: agronomía, biología, química,
industria, ciencia sociales, ciencias de la salud Trillas. CG1990.001.434R456d
-TELLEZ, Gonzalo. Biología aplicada. McGraw-Hill. CG. 1999. 574T275b
-VILLEE, CLAUDE A. Biología. Interamericana. CG. 1974. 574V728b
-VILLEE, Claude A. Biología. McGraw-Hill R. 1996. 574V728b
-W., Harold. Introducción a la biología forestal. John Wiley. CG 1984. 634.95W111i
-WADDINGTON, C. H. Biología hoi. Teide CG1962.574 W117b.

4
CONTENIDO PROGRAMATICO DE BIOLOGIA CELULAR

HORAS DE HORAS DE
CONTACT TRABAJO
O INDEPENDI
Unidades
DIRECTO ENTE DEL
ESTUDIAN
TE.
I- INTRODUCCIÓN: 3 6

I.PRESENTACIÓN PROGRAMA,
.
1.Qué estudia a la biología celular, áreas auxiliares: Bioquímica, genética, ,
citología, biología del desarrollo.
- Historia de la biología celular-: : teoría celular
-Introducción al estudio de la célula Métodos utilizado en biología celular:
microscopio, tinción,, centrifugación
-Las moléculas de la célula: micro y macromoléculas
Practica No1 3 6
Introducción al estudio de la célula
métodos de estudio utilizados en biología celular:
Microscopio óptico y tinción de células
2.LA VIDA COMIENZA CON LAS CÉLULAS 2
Origen de las células: procariotas, eucariotas: T endosimbiòtica, T.
evolución. Diversidad y concordancia de las células: reinos,
características morfológicas y celulares
El trabajo de las células: Degradan y construyen moléculas
-Se mueven, reciben información, crece, se dividen y mueren
-Los virus son los parásitos primarios. Priones, viroides.
Practica No 2 3 6
. Estructura de células eucariotas
II.SUPERFICIE CELULAR 1 6
1. Pared celular de plantas hongos y bacterias. matriz extracelular:
De las laminas epiteliales, estructura química y función, señalización
Practica No 3. 3 6
Estructura de células procariotas:
I. BIOMEMBRANAS Y ARQUITECTURA DE LA CÈLULA 6 12
Membranas celulares de eucariotas y procariotas: Componentes lipidicos,
proteicos, carbohidratos. Función, - Estructura química de las membranas
plasmática, membranas del eritrocito,-.
MECANISMOS DE TRANSPORTE CÉLULA
Transporte de iones y de moléculas a través de las membranas celulares.:
difusión pasiva, activa, ; bombas impulsadas por ATP y el ambiente iónico
intracelulares, canales iónicos regulados por voltaje y no regulados, potencial
de membrana en reposo, cootransporte, presión osmótica, mecanismo de
controlar el volumen del agua en las células
Practica No 4. 3 6
Permeabilidad de la membrana del eritrocito y levaduras. :
III.ORGANULOS DE LA CELULA EUCARIOTA 3 16
1. Estructura y función retículo endoplasmático, aparato de golgi, lisosomas
vacuolas vegetales, y vesículas.
Transporte vesicular. Distribución y transporte de proteínas
Practica No 5.
Glucosilación de las membranas del eritrocitos
Identificación de grupos sanguíneos 3 6

5
2. Estructura y función de mitocondrias, cloroplastos peroxisomas. Energética 3 6
celular
IV.CITOESQUELETO Y MOVIMIENTO CELULAR: 3 6
Microfilamentos, microtúbulos, filamentos intermedios
Movimientos celulares impulsados miosoina, locomoción celular, movimientos
impulsados por cinesinas, y dineinas, dinámica de los microtubulos en la
mitosis.
Practica No 6. 3 6
Movimiento del citoesqueleto
Células musculares, cilios y flagelos
VI. ESTRUCTURA DEL NÚCLEO: 6 12
Organización y estructura del cromosoma eucariota, ADN de organulos,
cromatina, nucléolo. Transporte nuclear. Ciclo celular, mecanismo moleculares
para la regulación de la mitosis, control del ciclo celular en mamíferos, meiosis
tipo especial de división celular
Practica No 7 3 6
Estructura del núcleo de células sanguíneas
VII. FUNCIONES DEL NUCLEO: 6 12
Replicación, transcripción y traducción, en células eucariotas y procariotas ;
Practica No 8 3 6
Funciones del núcleo: mitosis

6
 Laboratorio No 1
INTRODUCCIÓN AL ESTUDIO DE LA CÉLULA
“El camino de la teoría celular “

OBJETIVO

. Identificar el proceso de elaboración del informe de la práctica de laboratorio partiendo del conocimiento
de los procesos que conllevaron a la teoría celular.

. Reconocer y utilizar los instrumentos y equipos de las prácticas de laboratorio de biología celular

. Comprobar los pasos que se siguieron para la formulación de la teoría celular, a partir de la
observación al microscopio de placas preparadas

MARCO TEORICO

Consultar previamente los científicos (que postularon los principios que rigen la teoría celular
(escribir fecha y el aporte)

¿Porque fue importante la invención del microscopio para el desarrollo de la biología celular?
Pegue una gráfica de un microscopio óptico y sus partes

7
MATERIALES.

 Microscopio óptico (1)

 Placas ya elaboradas de células animal, vegetal, bacterias, hongos

El estudiante debe llevar para la práctica los siguientes materiales:

 Un bisturí o lanceta (cortopunzante)

 Un corcho
 Agua de charco en un frasco pequeño, para observar microorganismos

REACTIVOS

 Aceite de inmersión
 Solución limpiadora

NIVEL DE RIESGO 1: Riesgo bajo (Bata de laboratorio manga larga, zapato cerrado, pantalón largo).

PROCEDIMIENTO Y RESULTADOS

1. Identificación de las partes y funcionamiento del microscopio óptico

Señale el sistema óptico del microscopio óptico,

8
2.1 Sistema óptico. Describa las características de cada uno. /aumento, campo visual, resolución

OCULAR

OBJETIVOS

CONDENSADOR

DIAFRAGMA:

9
2.2 Enfoque de placas asignadas

Se les asignara placas o micro preparados a los grupos de trabajo. Para que identifique el mejor enfoque
en el que pueden diferenciar las células por su morfología.

Con cada una de ellas realice los siguientes pasos de enfoque:

Una vez que se haga el enfoque de cada uno de los objetivos describa lo observado en la tabla abajo
señalada

1. - Coloque el micropreparado o placa asignada sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas.-
. Inicie la observación con el objetivo de 4x

2 Acerque al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo micrométrico. Esto debe
hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo
en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos.

3. Mire a través de los oculares, aleje lentamente el objetivo de la preparación con el micrométrico y cuando
se observe algo nítida la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino. Describa su
observación en la tabla 2.

4. Pase al siguiente objetivo (10X). La imagen debe estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover
un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino. Si al cambiar de objetivo se perdió por completo la
imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior .
Describa los observado en la tabla con el objetivo 10X

4. Pase al siguiente objetivo (40X). La imagen debe estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover
un poco el micrométrico para lograr el enfoque fino Repetir la operación desde el paso 3.

Algunas células solo se observan con el objetivo de 100X para esto debe emplear el objetivo de inmersión:
(100x):

1. Baje totalmente la platina.

2. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va
a visualizar y donde habrá que echar el aceite.

3. Gire el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y el de x40.

4. Coloque una gota mínima de aceite de inmersión sobre el círculo de luz.

5. Termine de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión.

6. Mire directamente al objetivo, suba la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En
ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente.

7. Enfoque cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y

la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande.

8. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el
objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay
que bajar la platina y repetir la operación desde el paso 3.

10
9. Finalizada la observación de la preparación baje la platina y coloque el objetivo de menor aumento
girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca retírela
muestra con el objetivo de inmersión en posición de observación.

10. Limpie el objetivo de inmersión (100X) con cuidado empleando un papel especial para óptica.
Compruebe también que el objetivo 40x está perfectamente limpio.

Complete el siguiente cuadro para cada uno de las placas entregadas.

Y describa la morfología de la célula en cada uno de los enfoques (forma, tamaño, cantidad, color)

Tipo de célula
Describa la morfología

AT4X= AT10X : AT40X : AT100X

Objetivo x ocular

DCV 4X= DCV 10X = DCV40X= DCV100ZX=

Campo visual del ocular
/aumento del objetivo

*AT= aumento total; *DCV= diámetro del campo visual

Tipo de célula

Describa la morfología

AT4X= AT10X : AT40X : AT100X

Objetivo x ocular

DCV 4X= DCV 10X = DCV40X= DCV100X=

Campo visual del ocular
/aumento del objetivo

11
 Tipo de célula

Describa la morfología

AT4X= AT10X : AT40X : AT100X

Objetivo x ocular

DCV 4X= DCV 10X = DCV40X= DCV100X=

Campo visual del ocular
/aumento del objetivo

*AT= aumento total; *DCV= diámetro del campo visual

Tipo de célula

Morfología

AT4X= AT10X : AT40X :

Objetivo x ocular

Conclusiones

¿De acuerdo al fundamento de la teoría celular porque que se comprobó en esta práctica?

¿Que nos indica (para que sirve) la cifra de aumento total y diámetro del campo?
¿Qué inconvenientes encontró para seguir las indicaciones del enfoque?

12
 Practica No 2.
CELULA PROCARIOTA.
Tinción de Gram

OBJETIVOS/COMPETENCIAS
Escriba los objetivos que se desarrollara en esta práctica (esto se elaboraran en clase).

MARCO TEORICO

Consulte previene antes del laboratorio en que consiste y cuáles son los fundamentos de la
tinción de Gram/
Describa la composición química de la pared celular de las bacterias

MATERIALES Y EQUIPOS
Materiales que debe traer el estudiante

 Portaobjeto y cubreobjeto + de 4 a
 Guantes, cofia, tapabocas
 Papel absorbente o toalla, trapo..
 Esmalte transparente para sellar placas
 Jabón y fosforos, marcador

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EQUIPOS VIDRIERIA
 Microscopio óptico
 Mechero
 Caja de petri
 Pipeta de 1 o 2 ml
 Asa bacteriana

REACTIVOS
Cantidad por practica
 Cultivo bacteriano Lab. Microbiología.
 Reactivos de Gram
 Solución de cristal violeta 20 ml
 Solución de lugol. 20 ml
 Solución de safranina o 20 ml
fucsina
 Solución 1:alcohol 1: 50 ml
Acetona
 Azul de metileno 100 ml
 Agua destilada 20 ml
 Aceite de inmersión 10 ml

NIVEL DE RIESGO 2: Riesgo medio bajo (Bata de laboratorio manga larga, guantes, tapaboca,
zapato cerrado bajo, pantalón largo).

PROCEDIMIENTO

IDENTIFICACIÓN DE BACTERIAS A PARTIR LA PARED CELULAR UTILIZANDO LA

TINCION DE GRAM
De acuerdo a la consulta de la técnica o pasos de la tinción de Gram su técnica o pasos,
grafique en forma de cuadro sinóptico el procedimiento a realizar .

14
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
Célula bacteriana/ grafica Morfología

Coloración:

Célula bacteriana/ grafica Morfología

Coloración:

CONCLUSIONES GENERALES:
-Indique si los objetivos se cumplieron y como.
-.

BIBLIOGRAFÍA:
-Curtis Helena, Barnes S, Schnek A, y Flores G.2000. Biología, sexta edición , Edit. Panamericana,
España, Cap. 27,
-Mandigan T M et al. 2006. Brock. Biología de los microorganismos, Edit. Prince Hall, Edición 10a.
Cap. 9, pg. 23, 81, 91.

Anexos
Clasificación de las bacterias por su forma y agrupamiento
http://www.dialogica.com.ar/medline/bacterias.bmp

15
 Escherichia coli.
http://educasitios.educ.ar/

http://usuarios.lycos.es/ieshipolitounanue/hpbimg/BACTERIAS

Pegue las placas elaboradas, marcadas con la clase de bacteria

16
 Practica No 3.
LA CELULA EUCARIOTA
HONGOS

-
OBJETIVO/COMPETENCIAS

MARCO TEORICO
Previamente consulte las características celulares, reproducción de los hongos,

genero Aspergillus, Penicillus, Rizopus

Peniciullm sp

Conidias, conidioforo esterigma, metula

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SACCAROMYCES CEREVISAE

Levadura, membrana, núcleo, vacuolas

RHIZOPUS Rhizopus stolinifere

Esporangioforo, hifa,esporas, rizoide

ASPERGILLUS Conidióforo, fiàlides,mètula

,vesicula, conidias

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MATERIALES Y EQUIPO

Materiales que debe traer el estudiante.

* Portaobjeto y cubreobjeto + 6
*Guantes,tapabocas,cofia
*Cinta transparente
* Tijeras y fósforos:
*
PRIVIAMENTE 7 DIAS ANTES DEL
LABORATORIO
Dejar en una bolsa negra una frutas o verdura en
oscuridad, para el crecimiento de hongos

Equipos y vidriería.
Cantidad por practica
Microscopio óptico 1 x grupo
Mechero 3 x practica
Caja de petri 1 x grupo
Pipeta de 1 o 2 ml 1 x grupo
Gotero 1 x grupo
Bisturí

REACTIVOS:
Cantidad por practica
Cultivo de hongos, genero 3 cajas de Petri.
Rhizopus,Aspergillus,
Peniclillus
Azul de metileno 20 ml
Azul de lactofenol 10 ml
Aceite de inmersión 10 ml

NIVEL DE RIESGO 2: Riesgo bajo (Bata de laboratorio manga larga, guantes, zapato cerrado
bajo, pantalón largo).

PROCEDIMIENTO

FUNGI: HONGOS:
-Consulte 2 formas o procedimientos de tomar una muestra de un cultivo de hongos.
Escriba la secuencia de cada una
,

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RESULTADOS:
- Grafique y señales las estructuras celulares de los hongos observados
- Compare el hongo observado con las gráficas dadas en los anexos e identifíquelo por su género
como: Aspergillus, Penicillum o Rhizhopus

BIBLIOGRAFIA
- Cooper Geoffrey M. 2004. La célula. Segunda edición, Edit. Marbán, España. pg. 4- 8.
-Curtis Helena, et al .2000. Biología, sexta edición, Edit. Panamericana, España, cap 27, cap 28, cap. 29
y cap. 36.
-Mandigan T M et al. 2006. Brock Biología de los microorganismos, Edit. Prince Hall, Edición 10a.
Pg. 861-862. Pg. 34- 35

Pegue con cinta las placas elaboradas por el grupo

20
ACTIVIDAD FINAL DEL PRIMER CORTE

Cada grupo debe elaborar un informe final y exponerlo de acuerdo a los resultados
obtenidos en los tres laboratorios; microscopia, procariotas y eucariotas.

Tener en cuenta;
-Tomar fotos del proceso en el laboratorio y microscopio
-Presentación en power point .
-presentar: objetivos, procedimiento, resultados y conclusiones generales
Tiempo de exposición máximo 15 minutos.

La nota corresponde al 10% del 20% final

El 15% corresponde a los informes entregados, y placas

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