Analisis de Biomoleculas

Universidad de Rosario
Escuela de Medicina y Ciencias de la Salud

Unidad de Bioquímica
Programa de Ingeniería Biomédica
Química General y Orgánica
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GUÍA PRÁCTICA 9
ANÁLISIS DE BIOMOLÉCULAS
a. Guía inicial
Los componentes básicos de todo organismo vivo se resumen en seis elementos naturales:
carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno, azufre y fósforo. Estos elementos se unen y
combinan entre sí para formar estructuras más complejas y sistemas macromoleculares, que
de acuerdo con sus propiedades físicas y químicas pueden ser identificadas y clasificadas así:
-Carbohidratos: Su función puede ser bien de reserva energética o de carácter

estructural.
-Lípidos: Si bien son componentes básicos de la membrana celular, sus funciones
son variadas; van desde moléculas de carácter energético hasta moléculas de
señalización celular.
-Proteínas: macromoléculas diversas y dinámicas, responsables de múltiples
funciones dentro y fuera de la célula.
-Ácidos nucleicos: macromoléculas responsables de guardar la información
genética, constituidas por unidades sencillas conocidas como nucleótidos.
Las siguientes preguntas lo llevaran a entender los conceptos básicos del fundamento para el
desarrollo experimental que usted realizara.
1. Describa la composición química de las macromoléculas a estudiar, presente la estructura

básica de cada macromolécula.
2. Identifique y explique las propiedades físicas de cada macromolécula.
3. Investigue sobre cada prueba a realizar; como se identifica si es positiva o negativa y las
reacciones que se llevan a cabo.
4. ¿Qué se requiere para que un carbohidrato tenga poder reductor? y ¿Por qué la prueba de
Benedict es negativa para la sacarosa?
5. ¿Qué moléculas dan positivo para la prueba de ninhidrina? ¿Por qué?
6. En la prueba de fosfatos, ¿por qué es necesario adicionar el ácido molíbdico antes del
ácido ascórbico?, ¿qué función cumple el ácido ascórbico en esta reacción?
b. Taller experimental
Cada grupo de estudiantes contará con 6 tubos rotulados como M1, M2, M3, M4, M5 y
M6 con los cuales realizará las siguientes pruebas:
1 . Identificación de Carbohidratos
- Prueba de Lugol: Tome 0,5 mL de la muestra rotulada como M1 y agregue

0,5 mL de reactivo de Lugol, agite el tubo. Que se observa?
- Prueba de Benedict: Tome 0,5 mL de la muestra M2 y adicione 1 mL de

reactivo de Benedict, coloque al baño maría durante 15 minutos. Qué se observa?
2. Identificación de Lípidos
- Determinación enzimática (colesterol): Tome 0,5 mL de la muestra M3,

agregue 10 gotas de reactivo (*) y mezcle. Incube 5 minutos al baño maría,
observe y tome nota de los cambios observados. El reactivo (*) contiene las
enzimas ester de colesterol hidrolasa, colesterol oxidasa y peroxidasa.
- Prueba de fosfatos (fosfolípidos): Tome 0,5 mL de la muestra M4 agregue

10 gotas de ácido molíbdico, mezcle y deje reposar por 5 minutos. Adicione 10
gotas de solución de ácido ascórbico y observe la coloración formada; si no se
observa coloración caliente el tubo en baño maría por 5 minutos.
3. Identificación de Proteínas
- Prueba de Biuret: Tome 0,5 mL de la muestra M5 y adicione 1,0 mL de

reactivo de Biuret, caliente al baño maría por 10 minutos y tome nota de lo
observado.
- Prueba de Ninhidrina: Tome 0,5 mL de la muestra M6, adicione 1,0 mL

de solución de ninhidrina 0,2% y caliente por 5 minutos al baño maría. Observe
y tome nota de los cambios observados.
4. Identificación de Ácidos Nucleicos
Consulte y reporte en su informe como están constituidos los ácidos nucleicos y

teniendo en cuenta esta información indique cual o cuales pruebas de las
propuestas en la presente actividad practica seleccionaría para la identificación
de DNA y de RNA. Esquematice su propuesta usando un diagrama de flujo.
Bibliografía
- Martínez J. C., Guía de Análisis Orgánico. Universidad Nacional de Colombia,

1996.
- Shriner R. L. Fuson R. C., Identificación sistemática de compuestos orgánicos,

Limusa Noriega Editores, 1995.
- Vogel´s A., Textbook of practical Organic Chemistry, 1978.
- Durst H. D., Gokel G. W., Química Orgánica Experimental, Ed. Reverté, 1985.
Tabla de resultados
Identificación de Carbohidratos
Observaciones
Conclusión
Lugol
Benedict
Identificación
de Lípidos.
Enzimática
Fosfatos
Identificación de
Proteínas
Biuret
Ninhidrina
Identificación de Ácidos Nucleicos

DIAGRAMA DE FLUJO

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Universidad de Rosario

Escuela de Medicina y Ciencias de la Salud

-Carbohidratos: Su función puede ser bien de reserva energética o de carácter

1. Describa la composición química de las macromoléculas a estudiar, presente la estructura

2. Identifique y explique las propiedades físicas de cada macromolécula.

5. ¿Qué moléculas dan positivo para la prueba de ninhidrina? ¿Por qué?

- Prueba de Lugol: Tome 0,5 mL de la muestra rotulada como M1 y agregue

- Prueba de Benedict: Tome 0,5 mL de la muestra M2 y adicione 1 mL de

- Determinación enzimática (colesterol): Tome 0,5 mL de la muestra M3,

- Prueba de fosfatos (fosfolípidos): Tome 0,5 mL de la muestra M4 agregue

- Prueba de Biuret: Tome 0,5 mL de la muestra M5 y adicione 1,0 mL de

- Prueba de Ninhidrina: Tome 0,5 mL de la muestra M6, adicione 1,0 mL

4. Identificación de Ácidos Nucleicos

Consulte y reporte en su informe como están constituidos los ácidos nucleicos y

- Martínez J. C., Guía de Análisis Orgánico. Universidad Nacional de Colombia,

- Shriner R. L. Fuson R. C., Identificación sistemática de compuestos orgánicos,

- Vogel´s A., Textbook of practical Organic Chemistry, 1978.

Identificación de Ácidos Nucleicos

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