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INDICE
Índice de cuadros 2
Índice de figuras 2
Introducción. 3
Revisión de literatura 4
Materiales y métodos 6
Resultados y discusión 7
Conclusiones 11
Bibliografía. 11
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Índice de cuadros
Cuadro 1. Resultados del experimento en los tubos de ensayo……………… 9
Cuadro 2. Inversos de la concentración y Velocidad inicial de los tubos de
ensayo……………… …………………………………………………………….10
Cuadro 3. Velocidades y concentraciones de los tubos de ensayo con su Km y
Vmax……………… ………………………………………………………………10
Índice de figuras.
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INTRODUCCION
Las enzimas catalizan reacciones específicas, las enzimas poseen energía libre de
activación lo que ocasiona que la velocidad de una reacción aumente. Las
reacciones ocurren cuando la enzima se une a la molécula que va a ser
transformada llamada sustrato (S), a través de interacciones no covalentes,
formándose un complejo enzima-sustrato [ES], el que en una etapa posterior se
descompone en el producto [P].
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una reacción, las enzimas sólo rebajan la energía de activación, pero no cambian la
diferencia de energía entre los reactivos y los productos
REVISIÓN DE LITERATURA
Las enzimas presentan una serie de características notables como las siguientes:
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durante la reacción; las enzimas proveen una vía alterna, energéticamente favorable que
es diferente de la reacción no catalizada. La segunda describe cómo el sitio activo facilita
químicamente la catálisis de la enzima.
Virtualmente todas las reacciones químicas tienen una barrera energética que separa a los
reactivos, reactantes o substratos de los productos. Esta barrera se denomina energía libre
de activación que es la diferencia en energía que existe entre los reactivos y los productos.
El lugar donde la energía libre de activación es máxima, se denomina estado de transición.
En la siguiente figura se ejemplifica la transformación del reactivo A en el producto B a
través del estado de transición T*:
A D T* D B
Una molécula de enzima no tiene por qué actuar siempre a la misma velocidad. Su actividad
puede estar modulada por:
Tiempo
Temperatura
Concentración de enzimas
Concentracion de sustrato
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Ph
Algunos enzimas no se sintetizan como tales, sino como proteínas precursoras sin actividad
enzimática. Estas proteínas se llaman proenzimas o zimógenos. Para activarse, los
zimógenos sufren un ataque hidrolítico que origina la liberación de uno o varios péptidos.
El resto de la molécula proteica adopta la conformación y las propiedades del enzima activo
Algunos enzimas no se sintetizan como tales, sino como proteínas precursoras sin actividad
enzimática. Estas proteínas se llaman proenzimas o zimógenos. Para activarse, los
zimógenos sufren un ataque hidrolítico que origina la liberación de uno o varios péptidos.
El resto de la molécula proteica adopta la conformación y las propiedades del enzima activo.
MATERIALES Y MÉTODOS.
OBTENCIÓN DE UREASA. Se pesaron 10
gramos de harina de soya integral y se colocaron
en un vaso de 100 cm3. Se agregaron 50 cm3 de
acetona al 32% y se mezclaron perfectamente
con un agitador. Se coloco en baño María a 37
°C por 10 minutos. Se estuvo agitando y
posteriormente se filtro con ayuda de un embudo
y una gasa doble.
Para la segunda parte de la práctica “ESTUDIO
DEL EFECTO DE LA VARIACIÓN DE [S]
SOBRE LA VELOCIDAD DE REACCIÓN”.
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Se prepararon 8 tubos de ensayo, el
primero se tomó como blanco de
reactivos. A los otro siete se les
colocaron Urea, buffer, H2O (excepto al
blanco de reactivos), después de 5 min
de pre-incubación se agregó ureasa y
por último posterior a una incubación de
30 minutos a 50 °C se agregó HgCl2
(gotas) (excepto blanco de reactivos).
Se tomaron muestras de 5 cm3 de la
harina de soya y se agregaron a los
tubos además de, una gota de indicador
de pH y se tituló con HCl 0.1 molar hasta
"el vire" del indicador, (de verde a rosa-
grisáceo). Figura 3. A la izquierda matraces ya titulados, a la
derecha matraces sin titular.
CÁLCULOS Y RESULTADOS
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𝑇𝐶 (50 𝑚𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑐𝑚3 )1.1
𝑉0 =
30 𝑚𝑖𝑛
8
(1.0)(250 𝑚𝑖𝑐𝑟𝑜𝑚𝑜𝑙𝑒𝑠 𝑐𝑚3
Tubo #2: (𝑆) = = 22.72
11 𝑐𝑚3
Reactivo Tubo
Blanco 1 2 3 4 5 6 7
de
Reactivo
s
Urea 0.25 M (cm3 ) 9.0 0.5 1.0 2.0 5.0 7.5 8.0 9.0
Buffer (gotas) 1 1 1 1 1 1 1 1
H2O (cm3 ) 0.0 8.5 8.0 7.0 4.0 1.5 1.0 0.0
HgCl2 (gotas) 4 0 0 0 0 0 0 0
Ureasa (cm3 ) 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
HgCl2 (gotas) 0 4 4 4 4 4 4 4
Vmax 59.5238095
9
Km 11.4345238
1/Vo 1/(S)
0.54644809 0.08802817
0.32154341 0.04401408
0.17605634 0.0220022
0.13315579 0.00880049
0.12987013 0.00586682
0.11135857 0.00550025
0.12690355 0.00488902
Cuadro 2. Inversos de la concentración y Velocidad inicial de los tubos de ensayo
con su Km y Vmax.
1/(S)
0.1
0.09 y = 0.1921x - 0.0168
0.08
0.07
0.06
0.05
0.04
0.03
0.02
0.01
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6
Vo (S)
1.83 11.36
3.11 22.72 Vmax 0.01675322
5.68 45.45 km 0.45830122
7.51 113.63
7.7 170.45
8.98 181.81
7.88 204.54
Cuadro 3. Velocidades y concentraciones de los tubos de ensayo con su Km y
Vmax.
10
(S)
250
200 y = 27.356x - 59.697
150
100
50
0
0 2 4 6 8 10
-50
CONCLUSIONES.
BIBLÍOGRAFIA.
Juan Manuel Gonzalez Mañas. (10 Octubre del 2000). cursos de biomoleculas .
06 de Mayo del 2018, de de apartamento de Bioquímica Sitio web:
http://www.ehu.eus/biomoleculas/index.htm
Alejandro Porton Andion. (05 Enero de 2001). Enzimas. 06 de Mayo del 2018,
de DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA Sitio web:
http://www.bionova.org.es/biocast/tema14.htm
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